蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)在探析抑郁癥潛在生物標(biāo)志物的研究進(jìn)展

樊帥，金紅，高美云，高敏香，齊泰煜，梁瑩，錢(qián)家坤，謝雨虹，李光英，張敏

（1.長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)針灸推拿學(xué)院，長(zhǎng)春 130117；2.長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)學(xué)院，長(zhǎng)春 130117；3.長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院腦病中心，長(zhǎng)春 130117；4.長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院針灸臨床中心，長(zhǎng)春 130021）

抑郁癥作為一種常見(jiàn)的神經(jīng)精神障礙疾病，受此病影響的人數(shù)約占世界人口的10%，并呈現(xiàn)日益增長(zhǎng)的趨勢(shì)[1]，除其可致殘、致死之外，因抑郁癥并發(fā)癥導(dǎo)致患者過(guò)早死亡的風(fēng)險(xiǎn)亦有增加[2]。因患者的個(gè)體差異、病情的強(qiáng)隱匿性及致病因素的多樣性導(dǎo)致臨床誤診漏診率高，加之現(xiàn)有診療手段單一，缺乏統(tǒng)一的客觀標(biāo)準(zhǔn)，且藥物治療效果差強(qiáng)人意，不良反應(yīng)多，復(fù)發(fā)率高，因此，抑郁癥的診療手段亟待提高。此病發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制目前仍不明，現(xiàn)有多種假說(shuō)指出其病因可能是由環(huán)境、基因、機(jī)體異質(zhì)等多種具有重疊的因果途徑相互作用產(chǎn)生，相關(guān)研究亦表明[3]此病發(fā)生發(fā)展可能與機(jī)體的神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)、炎癥因子、生物代謝密切相關(guān)。近些年，現(xiàn)代科學(xué)指導(dǎo)下的蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)平臺(tái)的搭建為進(jìn)一步認(rèn)識(shí)此疾病提供了新切入點(diǎn)，生物標(biāo)志物的研究作為區(qū)別于傳統(tǒng)行為學(xué)的生物學(xué)研究方法，可以針對(duì)蛋白質(zhì)、基因和腦部組織等進(jìn)行標(biāo)定測(cè)量，為抑郁癥的診斷提供明確的客觀依據(jù)[4]。因此，生物標(biāo)志物的選取對(duì)于抑郁癥發(fā)病的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、病種分類(lèi)、病情診斷、用藥指導(dǎo)及預(yù)后康復(fù)顯得非常重要[5]。本文對(duì)蛋白質(zhì)組學(xué)在不同樣本中篩選抑郁癥生物標(biāo)志物的研究情況作簡(jiǎn)要論述。

1 腦組織

1.1 腦脊液 腦脊液（CSF）與脊神經(jīng)和顱神經(jīng)的腦膜鞘相接[6-7]，可作為潛在生物標(biāo)記物的候選來(lái)源。時(shí)寶林等[8]選取8 例抑郁癥患者與正常組對(duì)照，提取試驗(yàn)對(duì)象的腦脊液分析，結(jié)果提示試驗(yàn)組與對(duì)照組相比，抑郁癥患者腦脊液中Apo D 和血漿視黃醇結(jié)合蛋白種蛋白表達(dá)下調(diào)，poAI 蛋白表達(dá)上調(diào)。李惠珍等[9]通過(guò)大鼠腦脊液對(duì)藥物抗遲發(fā)性抑郁癥神經(jīng)發(fā)生障礙的機(jī)制進(jìn)行探究，分析發(fā)現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)大鼠中共檢測(cè)出蛋白2 620 個(gè)，對(duì)照組與遲發(fā)性抑郁癥與實(shí)驗(yàn)組比較，共有差異蛋白176 個(gè)；其中GhR、GDF11、NrCAM、NTRK2 與神經(jīng)密切相關(guān)。

實(shí)驗(yàn)研究指出腦脊液（CSF）中蛋白有望成為抑郁癥的候選生物標(biāo)志物[10]，目前在腦脊液中的蛋白質(zhì)組學(xué)研究中已經(jīng)明確有1 個(gè)以上被鑒定出有效差異蛋白的生物標(biāo)記物已有42 個(gè)，這些蛋白生物標(biāo)記物的診斷潛力以及其與指向的抑郁癥病理學(xué)有直接的關(guān)聯(lián)性[11]。在未來(lái)使用生物信號(hào)檢測(cè)手段可能是一個(gè)對(duì)抑郁癥進(jìn)行確診或者區(qū)分抑郁癥與其他神經(jīng)精神障礙疾病較好的策略，但由于抑郁癥患者的異質(zhì)性，迄今為止，抑郁癥患者腦脊液提取物中蛋白變化的直接證據(jù)和報(bào)道甚少，在不同實(shí)驗(yàn)對(duì)照中亦體現(xiàn)出一些相互矛盾的結(jié)果[12]，所以人體腦脊液的提取手段及蛋白篩選方式值得關(guān)注。

1.2 海馬組織 海馬體是腦邊緣系統(tǒng)中的一部分，位于丘腦與內(nèi)側(cè)顳葉之間，側(cè)腦室下角的下壁和側(cè)壁上，與情緒相關(guān)的大腦區(qū)域（如前額葉皮層）的神經(jīng)纖維相連接[13]。海馬神經(jīng)元的凋亡或衰退可造成學(xué)習(xí)記憶、情緒調(diào)節(jié)功能的損傷。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，對(duì)大白鼠和猴子長(zhǎng)期慢性應(yīng)激后，可觀察到其海馬神經(jīng)元樹(shù)突萎縮凋亡[14-15]，神經(jīng)影像學(xué)亦提示，抑郁癥患者和造模成功的動(dòng)物模型的海馬體積均有出現(xiàn)縮小的現(xiàn)象[16]。胡永波[17]在有效提取2 組抑郁癥大鼠的海馬突觸蛋白后，采用凝膠電泳和質(zhì)譜檢測(cè)手段對(duì)差異蛋白質(zhì)組學(xué)進(jìn)行分析。試驗(yàn)組得到表達(dá)中上調(diào)的蛋白質(zhì)共6 個(gè)，下調(diào)的蛋白共10 個(gè)，經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)這些蛋白質(zhì)在遞質(zhì)釋放、能量代謝、物質(zhì)代謝、囊泡調(diào)節(jié)、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中發(fā)揮著重要作用。胡永波[18]在此基礎(chǔ)上對(duì)后續(xù)與抑郁癥相關(guān)蛋白功能進(jìn)行預(yù)測(cè)，發(fā)現(xiàn)了6 個(gè)與突觸傳導(dǎo)功能障礙可能相關(guān)的蛋白質(zhì)：網(wǎng)格蛋白輕鏈A、網(wǎng)格蛋白輕鏈B、發(fā)動(dòng)蛋白1、突觸素2 及囊泡融合ATP 酶、囊泡ATP 合酶亞單位E1；2 個(gè)興趣蛋白：網(wǎng)格蛋白輕鏈A、網(wǎng)格蛋白輕鏈B。經(jīng)驗(yàn)證，本研究同之前雙向電泳試驗(yàn)結(jié)果基本相同。曹莉莎等[19]運(yùn)用絕對(duì)定量（iTRAQ）蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)結(jié)合LC-MS/MS 分析抑郁癥大鼠的海馬組織內(nèi)差異蛋白質(zhì)，共發(fā)現(xiàn)33 個(gè)差異蛋白，其中表達(dá)上調(diào)蛋白8 個(gè)，表達(dá)下調(diào)蛋白25個(gè)。高耀等[20]亦使用此技術(shù)對(duì)抑郁癥造模成功的大鼠海馬組織蛋白進(jìn)行功能富集分析后采用Western blot探究大鼠海馬體的蛋白表達(dá)，共鑒別出下調(diào)的蛋白11個(gè)：Pmm2、RGD1311899、Ndufs6、Cplx1、Krt10、Ndufab1、Fkbp8、Pafah1b3、Sh3bgrl3、Tbca、Fth1。廖偉[21]使用iTRAQ 和平行反應(yīng)監(jiān)測(cè)（PRM）技術(shù)檢測(cè)海馬突觸受損后前額葉皮層的蛋白變化，共鑒別出差異蛋白212 個(gè)，其中PRM 鑒定到Gfap、Grm2、Spred1、Ppp1r1a、Uqcrh、Tubb6、Ppp1r1b、Gnai2、Urod、Cul1、Gpcpd1、Acadl、Mtor、Lsm8、Cplx2、Rhog、Tsta3 具有顯著差異，對(duì)海馬體神經(jīng)的關(guān)聯(lián)性進(jìn)行了驗(yàn)證。

總的來(lái)說(shuō)，目前已收集了大量抑郁癥海馬體應(yīng)激相關(guān)的差異蛋白并構(gòu)建了基礎(chǔ)框架，為探索抑郁或焦慮的抵抗性、敏感性分子潛在生物標(biāo)志物提供了參考[22]。盡管iTRAQ 技術(shù)與LC-MS/MS 技術(shù)作為目前主流的組學(xué)蛋白檢測(cè)手段為探究抑郁癥的生理病理分子機(jī)制提供了有力支持[23]。但因動(dòng)物與人體差異巨大，人體活體海馬取材條件苛刻，抑郁癥個(gè)體異質(zhì)性強(qiáng)的特點(diǎn)等限制，很難通過(guò)一個(gè)單一的、不分層次的對(duì)海馬體整體的研究來(lái)清晰的闡述抑郁癥與海馬體之間的關(guān)聯(lián)性。若從抑郁癥核心癥狀的病理角度出發(fā)，將不同癥狀的病理機(jī)制整合后對(duì)其個(gè)體化、類(lèi)別化，將有利于篩選典型生物標(biāo)志物和闡明海馬組織病變與抑郁癥的關(guān)系。

1.3 下丘腦 下丘腦是調(diào)控機(jī)體應(yīng)激反應(yīng)的核心腦區(qū)和調(diào)節(jié)內(nèi)分泌系統(tǒng)與神經(jīng)系統(tǒng)的關(guān)鍵樞紐，臨床及動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)抑郁癥發(fā)病時(shí)常累及此區(qū)域[24]。饒承龍[25]選取抑郁模型組與對(duì)照組小鼠各15 只。行為學(xué)評(píng)價(jià)后對(duì)其中9 只小鼠的下丘腦進(jìn)行差異蛋白鑒定，共獲得37 個(gè)差異蛋白，其中表達(dá)上調(diào)蛋白13 個(gè)，表達(dá)下調(diào)蛋白24 個(gè)，分析提示這37 個(gè)差異蛋白主要與氨基酸代謝、糖代謝及谷氨酸能神經(jīng)突觸的異常相關(guān)。另有研究[26]基于iTRAQ 和氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）技術(shù)對(duì)脂多糖（LPS）誘導(dǎo)下的模型小鼠的下丘腦蛋白質(zhì)進(jìn)行分析。共篩選出具有差異表達(dá)的蛋白質(zhì)187種、代謝物27 種，發(fā)現(xiàn)腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子（BDNF）、下丘腦突觸后密度蛋白-95（PSD-95）、p-AKT 可能與突觸可塑性的調(diào)節(jié)相關(guān)；EPHB2 蛋白可能與谷氨酸能傳遞功能障礙具有一定關(guān)聯(lián)性。

下丘腦病變可導(dǎo)致神經(jīng)突觸功能異常，可能是炎癥型抑郁癥患病的重要因素，但在目前的抑郁癥發(fā)病病理機(jī)制研究中，下丘腦的生物標(biāo)志物挖掘少有報(bào)道。所以闡明抑郁癥患者下丘腦結(jié)構(gòu)功能的改變，挖掘潛在生物標(biāo)志物可能為揭示其與蛋白表達(dá)譜聯(lián)動(dòng)的關(guān)系提供新的理論依據(jù)。

2 體液

2.1 外周血 徐紅波[27]選取抑郁癥患者與健康對(duì)照組各21 例，抽取抑郁癥患者外周循環(huán)血液后使用凝膠電泳和iTRAQ 技術(shù)對(duì)血漿進(jìn)行檢測(cè)分析，試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)差異蛋白9個(gè)，其中5個(gè)表達(dá)上調(diào)的蛋白：α白蛋白（AFM），載脂蛋白D（Apo D），α1B 糖蛋白（A1BG），載脂蛋白B100（Apo B100），維生素D 結(jié)合蛋白（VDP）。4 個(gè)表達(dá)下調(diào)的蛋白：信號(hào)素3F（S3F），富含組氨酸的糖蛋白（HRG），銅藍(lán)蛋白（Cp），以及α2 巨球蛋白（A2M），ApoB100 和A2M 兩個(gè)蛋白表現(xiàn)出的高特異性值得我們進(jìn)一步挖掘。詹遠(yuǎn)[28]選取卒中后抑郁癥患者及健康者對(duì)照組各15 例，去除高豐度蛋白后對(duì)3 組受試者的血液樣本進(jìn)行分析，篩選出表達(dá)顯著下調(diào)蛋白3 個(gè)：LRG、ApoC-IICRP、haptoglobin。表達(dá)上調(diào)蛋白1 個(gè)：gelsolin。提示gelsolin 蛋白表達(dá)量上調(diào)與haptoglobin 蛋白表達(dá)量下調(diào)可能會(huì)是診斷卒中抑郁癥患者潛在的生物標(biāo)志物。詹遠(yuǎn)等[29]在前期研究基礎(chǔ)上再次對(duì)載脂蛋白A-IV（ApoA-IV）和富含亮氨酸的α-2-糖蛋白（LRG）、載脂蛋白C-II（ApoC-II）、C-反應(yīng)蛋白（CRP）、凝溶膠蛋白、觸珠蛋白進(jìn)行蛋白檢驗(yàn)分析。發(fā)現(xiàn)與中風(fēng)受試者相比，卒中后抑郁患者ApoA-IV 蛋白表達(dá)上調(diào)；卒中后抑郁患者和健康受試者血漿中ApoC-II、CRP 和LRG 蛋白表達(dá)下調(diào)，表明免疫調(diào)節(jié)和脂質(zhì)代謝的紊亂可能是導(dǎo)致卒中后抑郁癥發(fā)病的重要因素。有研究[30]選取7 名抑郁癥患者和7 名健康者，采用生物信息學(xué)結(jié)合機(jī)器學(xué)習(xí)方法篩選出高特異性蛋白ITIH4 蛋白和VDB 蛋白，認(rèn)為其可作為抑郁癥患者血液中潛在的生物標(biāo)志物。Ryan等[31]基于電休克療法（ECT）對(duì)抑郁癥患者與抑郁癥造模成功的大鼠外周血蛋白質(zhì)組變化的分子機(jī)制進(jìn)行探究，質(zhì)譜鑒定出顯著改變的蛋白質(zhì)36 個(gè)，其中PEDF 蛋白表達(dá)顯著上調(diào)，評(píng)估大鼠腦和血液中mRNA 蛋白水平發(fā)現(xiàn)PEDF 蛋白亦有變化，提示PEDF 蛋白可作為評(píng)估抑郁癥病情變化的生物標(biāo)志物。有研究[32]利用微陣列技術(shù)在抑郁癥患者外周血中探索lncRNA 與mRNA的共表達(dá)模式，篩選出具有差異表達(dá)的lncRNA 蛋白2 007 個(gè)、mRNA 蛋白1 667 個(gè)，發(fā)現(xiàn)mRNA 與基本代謝、神經(jīng)發(fā)育密切相關(guān)。通過(guò)使用質(zhì)譜分析抑郁癥患者血清后篩選出2個(gè)下調(diào)蛋白：鋅-α-2-糖蛋白（ZA2G）和角蛋白II 型細(xì)胞骨架1（K2C1），發(fā)現(xiàn)其與色氨酸代謝相關(guān)，色氨酸代謝作為激肽釋放酶系統(tǒng)中合成血清素的重要途徑，K2C1 參與其中，該系統(tǒng)可產(chǎn)生緩激肽抗炎介質(zhì)，而MDD 與炎癥因子高度相關(guān)，提示ZA2G、K2C1 可作為外周血潛在生物標(biāo)志物進(jìn)行探究[33]。有研究[34]對(duì)血清中凝血酶進(jìn)行探究時(shí)發(fā)現(xiàn)抑郁癥患者血清中的蛋白酶原受體受到凝血酶的激活后進(jìn)一步誘導(dǎo)血小板的過(guò)度激活，而活化的血小板分泌出與抑郁癥相關(guān)的腦源性親神經(jīng)因子和血清素，這也驗(yàn)證了外周血可作為炎癥因子的介導(dǎo)物質(zhì)參與抑郁癥分子機(jī)制的理論。通過(guò)采集99 例帕金森病抑郁癥患者空腹血漿樣品后對(duì)其進(jìn)行鑒定，篩選出17個(gè)差異蛋白，富集了12 個(gè)與葡萄糖代謝相關(guān)的途徑，其中強(qiáng)特異性NOTCH2 蛋白的變化與抑郁癥發(fā)病輕重為正相關(guān)，提示其可能是的抑郁癥患者潛在血液生物標(biāo)志物[35]。

外周血的采集成本低，痛苦小，可重復(fù)性高，且其中蘊(yùn)含大量蛋白信息，涉及到蛋白酶、炎癥因子，神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子、血清素等多個(gè)抑郁癥相關(guān)生物標(biāo)志物熱點(diǎn)領(lǐng)域[36]，但因其信息的重疊性和復(fù)雜性，目前尚不能清晰的對(duì)其分子機(jī)制進(jìn)行完整地闡釋?zhuān)恍┳髡咴噲D建立針對(duì)血液的整體網(wǎng)絡(luò)架構(gòu)，從多角度檢測(cè)血漿中蛋白變化對(duì)抑郁癥生物體的影響和干擾，這為縮小篩選血漿中潛在生物標(biāo)志物范圍提供了方向。

2.2 尿液 彭?yè)P(yáng)[37]采集了試驗(yàn)組和對(duì)照組各30 例的尿液樣品。解離分析后選取興趣蛋白進(jìn)行Western blotting 驗(yàn)證。共得到差異蛋白35 個(gè)，其中表達(dá)上調(diào)蛋白22 個(gè)，表達(dá)下調(diào)蛋白13 個(gè)。經(jīng)質(zhì)譜分析篩選出蛋白29個(gè)，對(duì)其中5個(gè)興趣蛋白：α-烯醇化酶（ENO1）、選取精氨酸琥珀酸合酶（ASS1）、絲氨酸蛋白酶抑制劑B3（SERPINB3）、多配體聚糖結(jié)合蛋白亞型2（SDCBP）、神經(jīng)節(jié)苷脂GM2 激活物（GM2A）進(jìn)行進(jìn)一步驗(yàn)證后，結(jié)果均提示存在顯著差異，可作為候選生物標(biāo)志物。研究[38]通過(guò)采集首發(fā)抑郁癥患者和對(duì)照組的尿液樣本，篩選出27 個(gè)差異蛋白，分析后得出了與研究[37]相同結(jié)論。有研究[39]基于核磁共振波譜對(duì)44名首發(fā)抑郁受試者和52名健康者進(jìn)行對(duì)照試驗(yàn)，篩選出3 種尿液代謝標(biāo)志物：丙氨酸甲酸鹽、羥苯乙酸鹽丙二酸鹽、n-甲基煙酰胺。經(jīng)特征曲線（AUC）尿蛋白驗(yàn)證后證明可作為是診斷MDD的潛在標(biāo)志物。

尿液樣本相對(duì)提取其他生物標(biāo)志物來(lái)說(shuō)取樣簡(jiǎn)便快捷、成本低、無(wú)痛苦，試驗(yàn)[40]表明抑郁癥患者的尿液中去甲腎上腺素指標(biāo)與腦脊液、血液變化為正相關(guān)。因此尿液可作為潛在生物標(biāo)記物挖掘點(diǎn)對(duì)抑郁癥病理機(jī)制進(jìn)行闡釋。

2.3 腸道菌群 諸多試驗(yàn)結(jié)果表明，腸道菌群與抑郁癥生理病理機(jī)制具有一定相關(guān)性[41]，腦腸軸中的蛋白質(zhì)改變亦與生物的代謝及炎癥反應(yīng)密切相關(guān)，腸道中的能量代謝可能是導(dǎo)致蛋白質(zhì)網(wǎng)絡(luò)發(fā)生改變的重要因素。通過(guò)將抑郁癥患者的腸道菌群轉(zhuǎn)移到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物小鼠體內(nèi)，對(duì)造模成功的小鼠進(jìn)行蛋白組學(xué)分析后發(fā)現(xiàn)，腸道微生物可導(dǎo)致腦腸軸中多個(gè)組織的蛋白表達(dá)發(fā)生改變[42]。選取129 名活動(dòng)期潰瘍性結(jié)腸炎患者、49 例抑郁焦慮患者與62 例健康人進(jìn)行對(duì)比觀察，并對(duì)受試者腸道菌群進(jìn)行蛋白組學(xué)測(cè)序分析后發(fā)現(xiàn)，伴有抑郁或焦慮的潰瘍性結(jié)腸炎患者比不伴抑郁或焦慮的潰瘍性結(jié)腸炎患者糞便內(nèi)微生物菌群豐富度和多樣性降低，血清中免疫球蛋白亦有減少，提示腸道內(nèi)菌群、代謝產(chǎn)物與蛋白質(zhì)的改變密切相關(guān)[43]。

腸道菌群失調(diào)和代謝功能紊亂在行為學(xué)上已被證實(shí)是抑郁癥病理表現(xiàn)和發(fā)病誘因之一，近期的生物學(xué)研究亦表明抑郁癥患者腦腸軸中相關(guān)蛋白發(fā)生了聯(lián)動(dòng)式改變[44]，雖然其對(duì)應(yīng)關(guān)系在分子機(jī)制角度目前并沒(méi)有被清晰地闡明，但此發(fā)現(xiàn)為使用蛋白組學(xué)技術(shù)從腦腸軸中挖掘潛在生物標(biāo)志物提供了思路。

3 小結(jié)與展望

本研究通過(guò)使用蛋白質(zhì)組學(xué)方法對(duì)生物組織中潛在標(biāo)志物進(jìn)行探析，此技術(shù)能夠更加直觀、準(zhǔn)確的觀察抑郁癥患者各組織中的相關(guān)蛋白變化，以便對(duì)臨床上單一診斷手段進(jìn)行革新與補(bǔ)充。生物的腦組織、尿液、血液、糞便中攜有大量的蛋白信息，使用蛋白組學(xué)技術(shù)可對(duì)其中的糖代謝、氨基酸代謝、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)、活血酶、炎癥因子等生物標(biāo)志物的結(jié)構(gòu)功能和聯(lián)動(dòng)關(guān)系進(jìn)行探析歸類(lèi)，豐富了蛋白組學(xué)領(lǐng)域的研究成果，同時(shí)也提高了抑郁癥確診工作的準(zhǔn)確性，對(duì)抑郁癥患者病情進(jìn)展的監(jiān)控、個(gè)體化用藥指導(dǎo)、研制新抗抑郁藥物等提供了生物學(xué)方向。

蛋白質(zhì)組學(xué)檢測(cè)平臺(tái)的搭建及檢測(cè)理論的日益完善，為挖掘和闡明單個(gè)興趣蛋白的作用機(jī)制提供了基礎(chǔ)。酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法、放射免疫測(cè)定法、基質(zhì)輔助激光解吸電離技術(shù)等已被證明可對(duì)生物標(biāo)志物進(jìn)行快速篩選的手段，已被廣泛應(yīng)用于差異蛋白的遴選工作中。與此同時(shí)，基因組學(xué)、神經(jīng)生理學(xué)、神經(jīng)成像學(xué)、代謝組學(xué)等技術(shù)與蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)相互驗(yàn)證配合，在生物標(biāo)志物探究領(lǐng)域取得了一定成果。多種手段相結(jié)合對(duì)蛋白進(jìn)行篩選及驗(yàn)證日益成為篩選興趣蛋白的主流思想。但因目前蛋白組學(xué)技術(shù)在抑郁癥臨床及實(shí)驗(yàn)領(lǐng)域應(yīng)用尚不廣泛，故篩選具有特異性興趣蛋白時(shí)，受影響于樣本數(shù)量、工具精度、實(shí)驗(yàn)人員技術(shù)等無(wú)關(guān)變量，導(dǎo)致測(cè)定結(jié)果波動(dòng)較大，且介于實(shí)驗(yàn)方式、研究角度、臨床入組樣本量參差不齊，獲得的生物標(biāo)志物之間功能結(jié)構(gòu)分歧頗多，甚至一些結(jié)論相互矛盾，給不同生物標(biāo)志物間功能的相互印證制造了一定困難，雖然技術(shù)的發(fā)展為其提供了更好的探索環(huán)境，但這種外界環(huán)境的提升并沒(méi)有高效率地轉(zhuǎn)化為實(shí)驗(yàn)和臨床成果，所以臨床工作者不僅需要根據(jù)患者的癥狀、體征，結(jié)合量表及生化等相關(guān)輔助檢查，對(duì)患者盡早診斷治療，減少抑郁癥給患者及家庭帶來(lái)的痛苦與損失，更應(yīng)從多角度對(duì)抑郁癥狀與差異蛋白的相關(guān)性并詳細(xì)記錄，以期能夠從中獲得更具有代表性的相關(guān)標(biāo)記物，為抑郁癥及相關(guān)精神類(lèi)疾病的診斷和治療開(kāi)辟新思路、新方法。值得肯定的是，從大量的臨床與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中篩查出的特異性蛋白證據(jù)看來(lái)，抑郁癥的發(fā)生發(fā)展確與腦組織、腦脊液、海馬組織、下丘腦、外周血、尿液、腸道菌群等生物組織結(jié)構(gòu)的蛋白升降存在密切相關(guān)性。因此，整合性的構(gòu)建生物標(biāo)記物網(wǎng)絡(luò)架構(gòu)，而不是單獨(dú)的關(guān)注某一差異蛋白的功能結(jié)構(gòu)，并采用多種方法聯(lián)合，探析差異蛋白及蛋白間的相關(guān)性，可能是未來(lái)探索人體潛在生物標(biāo)志物更好的突破點(diǎn)。