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      戰(zhàn)骨黃酮碳苷類化合物的大孔樹脂富集工藝研究

      2022-03-16 23:48:10黨驕陽陳月圓顏小捷盧鳳來李霞李典鵬
      廣西植物 2022年2期
      關(guān)鍵詞:正交試驗(yàn)

      黨驕陽 陳月圓 顏小捷 盧鳳來 李霞 李典鵬

      摘 要:? 黃酮碳苷,作為戰(zhàn)骨植物中的有效成分之一,具有抗骨關(guān)節(jié)炎的功效。為優(yōu)化植物戰(zhàn)骨莖中總黃酮碳苷的富集純化工藝,該研究以戰(zhàn)骨中5個(gè)黃酮碳苷為考察指標(biāo),通過對(duì)13種大孔樹脂的靜態(tài)吸附與解吸實(shí)驗(yàn),優(yōu)選出合適的大孔樹脂,利用高效液相色譜對(duì)結(jié)果進(jìn)行檢測(cè),然后利用正交工藝優(yōu)化富集純化條件。結(jié)果表明:(1)XAD-16N型大孔樹脂對(duì)植物戰(zhàn)骨莖中黃酮碳苷具有較好的吸附和解吸效果,通過單因素篩選及正交工藝優(yōu)化,最終確定其最佳富集純化工藝為上樣濃度為原提取液稀釋2倍、上樣流速2 BV·h-1、洗脫液濃度60%乙醇。(2)總黃酮碳苷的含量由1.73%(原植物中含量)提高到14.50%,提高了7.38倍。以上結(jié)果表明,優(yōu)化的提取工藝穩(wěn)定可行,篩選的大孔樹脂富集純化效果良好,為植物戰(zhàn)骨莖的藥物開發(fā)提供數(shù)據(jù)參考。

      關(guān)鍵詞: 戰(zhàn)骨, 黃酮碳苷, 大孔樹脂, 正交試驗(yàn)

      中圖分類號(hào):? Q946

      文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:? A

      文章編號(hào):? 1000-3142(2022)02-0333-07

      Purification technology of total flavonoid-C-glycosides

      of Premna fulva by macroporous resin

      DANG Jiaoyang1,2, CHEN Yueyuan2, YAN Xiaojie2, LU Fenglai2, LI Xia1, LI Dianpeng2*

      ( 1. College of Chemistry and Bioengineering, Guilin University of Technology, Guilin 541006, Guangxi, China;? 2. Guangxi Key Laboratory of

      Functional Phytochemicals Research and Utilization, Guangxi Institute of Botany, Guangxi Zhuang Autonomous Region and Chinese Academy of Sciences, Guilin 541006, Guangxi, China )

      Abstract:? Flavonoid-C-glycosides, as one kind of the effective components in Premna fulva, have the effect of antigen-induced arthritis. In order to optimize the enrichment and purification process of? P. fulva stems, through static adsorption and desorption experiments on 13 kinds of macroporous resins with five flavonoid-C-glycosides in P. fulva stems as the index, a suitable macroporous resin was selected, and the results were tested by the HPLC, and then the orthogonal process was used to optimize the enrichment and purification conditions. The results were as follows: (1) XAD-16N macroporous resin has good adsorption and desorption effects on the five flavonoid -C-glycosides in P. fulva stems. Through single factor screening and orthogonal process optimization, the best enrichment and purification process was finally determined as that the loading concentration was two times the original extract diluted, the loading flow rate was 2 BV·h-1, and the eluent concentration was 60% ethanol. (2) The contents of five flavonoid-C-glycosides increased from 1.73% (in the original plant) to 14.50%, an increase of 7.38 times. All the results indicate that the selected extraction process is stable and feasible, and the selected macroporous resin has good separation and purification effects, which provides a reference for the drug development of P. fulva stems.

      Key words: Premna fulva, flavonoid-C-glycosides, macroporous resin, orthogonal test

      戰(zhàn)骨又名黃毛豆腐柴(Premna fulva),馬鞭草科豆腐柴屬植物,其根、莖、葉均可以入藥。分布于廣西南寧、龍州平果等地(戴春燕等,2007;史艷財(cái)?shù)龋?010)。具有祛風(fēng)止痛等功效,民間常用于治療腰腿疼痛、跌打扭傷、風(fēng)濕性和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等,是廣西的地道藥材(蔣才武等,2004)。戰(zhàn)骨作為廣西道地藥材,藥用歷史悠久。文獻(xiàn)調(diào)研發(fā)現(xiàn)對(duì)戰(zhàn)骨的研究主要集中在化學(xué)成分(潘洪平,2002;吳雪莉等,2016)、藥理(葉勇等,2018)及相關(guān)制劑的藥效、臨床研究(陳蒼海,2018)等方面。方剛(2018)明確戰(zhàn)骨的主要成分為柚皮素等黃酮類化合物,并對(duì)黃酮類成分研究進(jìn)行了提取工藝研究(李小燕等,2005)。最新研究發(fā)現(xiàn),以戰(zhàn)骨為原料的單方制劑產(chǎn)品健骨注射液的抗骨關(guān)節(jié)炎的功效成分主要為5個(gè)黃酮碳苷(Chen et al.,2019)。且梁玉婷等(2018)報(bào)道基于UFLC-Triple TOF-MS/MS技術(shù),從戰(zhàn)骨植物中指認(rèn)出18個(gè)黃酮碳苷類化合物異構(gòu)體,說明戰(zhàn)骨植物中含有豐富的碳苷黃酮。戰(zhàn)骨中黃酮碳苷的提取采用天然低共熔溶劑(NADESs)可高效提取黃酮碳苷(陳月圓等,2020),總黃酮碳苷實(shí)際得率為17.37 mg·g-1,顯著高于現(xiàn)有傳統(tǒng)有機(jī)溶劑提取工藝(13.70 mg·g-1),但是,該黃酮碳苷類提取物中仍普遍含有萜類、多糖、蛋白質(zhì)、木脂素等多種雜質(zhì),嚴(yán)重制約了黃酮碳苷類化合物的實(shí)際應(yīng)用。因此,非常有必要開發(fā)出一種有效的方法用以生產(chǎn)高純度的戰(zhàn)骨黃酮碳苷類化合物。本文建立了富集戰(zhàn)骨中黃酮碳苷類化合物的純化方法,黃酮碳苷類化合物作為戰(zhàn)骨植物中的主要功效成分,為了進(jìn)一步開發(fā)和利用戰(zhàn)骨中的黃酮碳苷類化合物,及現(xiàn)有產(chǎn)品制劑(如健骨注射液)的二次開發(fā)和利用。

      大孔樹脂作為一種有機(jī)高聚物吸附劑,具有吸附性好、選擇性強(qiáng)、吸附速度快、可重復(fù)利用的特點(diǎn),已廣泛應(yīng)用于黃酮類成分的分離純化以及化學(xué)醫(yī)藥等領(lǐng)域(汪洪武和劉艷清,2005;劉丹等,2016)。戰(zhàn)骨黃酮碳苷的NADESs提取液能否運(yùn)用大孔樹脂富集純化研究未見報(bào)道,故本文采用大孔樹脂法對(duì)戰(zhàn)骨植物中的5個(gè)黃酮碳苷的NADESs提取液進(jìn)行富集純化研究。通過比較13種大孔樹脂對(duì)戰(zhàn)骨植物中5個(gè)總黃酮碳苷的吸附效率,篩選出了一種對(duì)戰(zhàn)骨具有高吸附分離效率的樹脂,通過單因素實(shí)驗(yàn)及正交試驗(yàn)對(duì)該樹脂的工藝條件進(jìn)行了優(yōu)化。

      1 材料與方法

      1.1 材料和實(shí)驗(yàn)儀器

      戰(zhàn)骨購于廣西玉林藥材市場(chǎng),經(jīng)廣西植物研究所唐輝研究員鑒定為馬鞭草科豆腐柴屬植物黃毛豆腐柴(Premna fulva)的根莖。憑證樣品保存于廣西植物功能物質(zhì)研究與利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室。

      5個(gè)黃酮碳苷對(duì)照品(芹菜素-6,8-二-C-β-D-葡萄糖苷、芹菜素-6-C-β-D-木糖-8-C-β-D-葡萄糖苷、芹菜素-6-C-β-D-木糖-8-C-β-D-半乳糖苷、芹菜素-6-C-β-D-葡萄糖-8-C-β-D-木糖苷和芹菜素-6-C-β-D-半乳糖-8-C-β-D-木糖苷),實(shí)驗(yàn)室自制,純度大于95%;大孔樹脂HPD-750、HPD-BJQH、HPD-100、D296、LSA-700B、LX-T5、NKA、XAD-16N,賽普銳斯(北京)科技有限公司;FPA53,北京慧德易科技有限公司;LX-38、LX-T28、LX-60,西安藍(lán)曉科技新材料股份有限公司;D101,滄州寶恩吸附材料科技有限公司;氯化膽堿,鄭州超凡化工有限公司;1,3-丙二醇,山東綠健生物技術(shù)有限公司;甲醇為色譜純,安徽天地高純?nèi)軇┯邢薰?娃哈哈飲用純凈水,杭州娃哈哈集團(tuán)有限公司。

      島津LC-2030C型液相色譜儀,島津企業(yè)管理(中國)有限公司;JP-040型數(shù)控超聲波清洗器,深圳市潔盟清洗設(shè)備有限公司;LQ-A10002型電子天平,瑞安市安特稱重設(shè)備有限公司;N-1300旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,上海愛朗儀器有限公司。

      1.2 實(shí)驗(yàn)方法

      1.2.1 對(duì)照品的制備 將戰(zhàn)骨的莖磨成粉末,用40%乙醇浸泡兩周,將提取液濃縮后,經(jīng)大孔樹脂、C18、MCI等柱材料分離劃段,得到富含5個(gè)黃酮碳苷的部位,最后按照Chen等(2019)的方法,采用循環(huán)高速逆流色譜法成功得到5個(gè)黃酮碳苷對(duì)照品。

      1.2.2 戰(zhàn)骨NADESs提取液的制備 根據(jù)課題組前期優(yōu)化的戰(zhàn)骨綠色提取溶劑天然深共晶溶劑(NADESs)的提取工藝(陳月圓等,2020),取干燥的戰(zhàn)骨粉末適量過篩(80目),按照專利的方法提取戰(zhàn)骨莖總黃酮碳苷,收集上清液,備用。

      1.2.3 色譜條件及對(duì)照品溶液的配制 色譜條件:Agilent ZORBAX SB-C18色譜柱(250 mm × 4.6 mm,5 μm);柱溫為30 ℃;流動(dòng)相0.1%甲酸水溶液(A)-甲醇(B);梯度洗脫程序?yàn)?~20 min、10%~30%B,20~45 min、30%~40%B;流速為1.0 mL·min-1;檢測(cè)波長為280 nm;進(jìn)樣量為20 μL。

      標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置:分別精確稱取一定質(zhì)量的5個(gè)對(duì)照品7.6、5.1、7.2、5.7、2.8 mg,用無水乙醇在10 mL的容量瓶中定容,制成濃度為0.760、0.516、0.726、0.576、0.286 mg·mL-1的貯備液,分別將5個(gè)貯備液稀釋一定的倍數(shù),取5、10、15、20 μL進(jìn)行液相分析。

      1.2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立 采用外標(biāo)法定量,以色譜峰面積(Y)為縱坐標(biāo),對(duì)照品濃度(X,μg·mL-1)為橫坐標(biāo),進(jìn)行線性回歸分析,得到標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程。將最低濃度標(biāo)準(zhǔn)工作溶液重復(fù)進(jìn)樣 10 次,計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)偏差,分別以3倍和10倍標(biāo)準(zhǔn)偏差為方法的檢出限(LOD)和定量限(LOQ),結(jié)果見表1??梢钥闯?,方法的線性良好,且靈敏度較高。

      1.2.5 大孔樹脂的選擇

      1.2.5.1 大孔樹脂的預(yù)處理 分別稱取一定量HPD-750、HPD-BJQ、HPD-100、D296、LSA-700B、LX-T5、NKA、XAD-16N、FPA53、LX-38、LX-T28、LX-60和D101共13種大孔樹脂,用乙醇浸泡24 h,用蒸餾水反復(fù)清洗至無味,備用。

      1.2.5.2 靜態(tài)吸附性能 選擇上述預(yù)處理好的大孔樹脂各50 g,分別置于500 mL錐形瓶中,各加入250 mL的提取液,25 ℃下恒溫恒速振蕩吸附24 h,抽濾,每組做3個(gè)平行實(shí)驗(yàn),取濾液測(cè)定5個(gè)黃酮碳苷的總質(zhì)量。然后用去離子水清洗3次樹脂,用濾紙將樹脂表面的水分吸干,轉(zhuǎn)入500 mL錐形瓶中,加入80%的乙醇250 mL,于25 ℃下恒溫恒速振蕩解吸12 h,取上清液測(cè)定5個(gè)總黃酮的總質(zhì)量,按照下列公式計(jì)算吸附率與解吸率,比較靜態(tài)吸附性能,從13種樹脂中篩出吸附性能最佳的樹脂。

      吸附率(%)=(原液中5個(gè)黃酮碳苷總質(zhì)量-吸附后濾液中5個(gè)黃酮碳苷總質(zhì)量)/原液5個(gè)黃酮碳苷總質(zhì)量×100;

      解吸率(%)=解吸后溶液中5個(gè)黃酮碳苷的總質(zhì)量/樹脂吸附的5個(gè)黃酮碳苷總質(zhì)量×100。

      1.2.6 泄露曲線的繪制 根據(jù)1.2.5.2的篩選結(jié)果,將大孔樹脂預(yù)處理好后,濕法裝樣,取提取液原液上柱,每份60 mL,以固定的流速進(jìn)行動(dòng)態(tài)吸附,分別接出每一份流出液,測(cè)出流出液中5個(gè)黃酮碳苷的含量,繪制泄露曲線。

      1.2.7 單因素實(shí)驗(yàn)及正交優(yōu)化試驗(yàn) 按照1.2.2提取液的制備方法,制備提取液。以吸附率和解吸率作為綜合考查的指標(biāo),在其他因素相同的情況下,分別考查提取液上樣濃度[原提取液稀釋1倍、稀釋2倍、原液(0倍)]、上樣流速(1、2、3 BV·h-1)、洗脫液濃度(50%、60%、70%乙醇)、洗脫液用量(1、2、3 BV)對(duì)吸附率和解吸率的影響。

      根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)的篩選結(jié)果,從提取液上樣濃度、上樣速度、洗脫液濃度、洗脫液用量中篩選出上樣濃度、上樣流速、洗脫液濃度3個(gè)影響較大的因素為自變量,考察戰(zhàn)骨中5個(gè)主要活性黃酮碳苷在樹脂中的總解吸率及在洗脫液中的含量為指標(biāo),設(shè)計(jì)L9組(34)正交試驗(yàn),正交試驗(yàn)因素與水平見表2??偨馕始昂堪凑障率接?jì)算。

      解吸率(%)=洗脫液中5個(gè)活性黃酮碳苷的總質(zhì)量/原液中5個(gè)黃酮碳苷總質(zhì)量在樹脂中的總吸附質(zhì)量×100;

      含量(%)=洗脫液中總黃酮碳苷的質(zhì)量洗脫液總質(zhì)量×100。

      2 結(jié)果與分析

      2.1 樹脂靜態(tài)吸附性能比較

      靜態(tài)吸附結(jié)果(圖1)表明:戰(zhàn)骨5個(gè)黃酮碳苷的靜態(tài)吸附率較優(yōu)的樹脂為XAD-16N(86.65%)、LX-60(83.51%)、LX-T28(81.92%),樹脂間差異性不顯著(P>0.05)。D296和LSA-700B對(duì)戰(zhàn)骨5個(gè)黃酮碳苷的靜態(tài)吸附率也較好(81.71%,82.00%),但是兩者的解吸率只有1.44%、1.03%,其原因是這兩類樹脂為脫色型樹脂,其吸附量用酸和堿均無法將其洗脫。而LX-T5、FPA53兩個(gè)樹脂吸附性能和解吸性能相對(duì)都比較差,吸附率和解吸率都比較低。尤為重要的是,與現(xiàn)有戰(zhàn)骨制劑健骨注射液工業(yè)處理的樹脂D101相比(王靜宇和杜日建,2014),XAD-16N、LX-60、LX-T28三種樹脂吸附率均顯著優(yōu)于D101(74.30%),而4種樹脂在靜態(tài)解吸率上均無顯著差異。故又采用動(dòng)態(tài)吸附和解吸考察此4種樹脂的泄露曲線。

      2.2 吸附泄露曲線

      分別繪制XAD-16N、LX-T28、LX-60、D101大孔樹脂的泄露曲線,由圖2可知,隨著上樣量的增加,5個(gè)黃酮碳苷的泄漏量逐漸增加,當(dāng)份數(shù)增大到動(dòng)態(tài)飽和吸附時(shí),泄露量增加的趨勢(shì)明顯上升,即大孔樹脂達(dá)到動(dòng)態(tài)飽和吸附。不同樹脂對(duì)戰(zhàn)骨植物5個(gè)黃酮碳苷的吸附量有所差異,泄漏量也有所不同。其中,XAD-16N的泄漏量最少吸附量最多,其次是D101,接著是LX-T28,而LX-60樹脂的吸附量最低,因此選用XAD-16N做動(dòng)態(tài)吸附實(shí)驗(yàn)。

      2.3 戰(zhàn)骨黃酮碳苷優(yōu)化工藝

      2.3.1 提取液上樣濃度 上柱液濃度分別為原提取液稀釋1倍、稀釋2倍、原液(0倍),每份100 mL,分別以2 BV·h-1(每小時(shí)2倍柱體積)的流速通過XAD-16N型大孔樹脂,用純水洗脫至流出液為無色,收集過柱液,用70%乙醇洗脫3 BV,收集洗脫液。每組實(shí)驗(yàn)做3個(gè)平行,按2.2方法測(cè)定5個(gè)黃酮碳苷的總含量,計(jì)算5個(gè)黃酮碳苷的總吸附率和總解吸率。從表3可以看出,原液稀釋1倍與原液稀釋2倍兩者的吸附率都是100%,但使用原液上樣時(shí),吸附率卻只有67.32%;而解吸率原液和原液稀釋1倍差異性并不顯著,原液稀釋2倍最小,綜上考慮,故確定上樣濃度為原液稀釋1倍。

      2.3.2 上樣速度 根據(jù)2.3.1的篩選結(jié)果,固定上柱液濃度(原液稀釋1倍),如表4所示,不同的上樣流速對(duì)戰(zhàn)骨植物總黃酮在XAD-16N型大孔樹脂中吸附率和解吸率存在影響,上樣流速為1、2 BV·h-1時(shí)吸附率一樣,3 BV·h-1時(shí)吸附率顯著下降,而解吸率隨著上樣流速的增大逐漸變小,綜合考慮確定上樣流速為1 BV·h-1。

      2.3.3 洗脫液濃度 取濃度為原液稀釋1倍上柱液的4份,每份100 mL,以1 BV·h-1的流速通過XAD-16N型大孔樹脂,用純水洗脫至流出液為無色,收集過柱液,分別用50%、60%、70%、80%的乙醇洗脫3 BV,收集洗脫液,測(cè)定洗脫液中總黃酮的含量。從表5可以看出4個(gè)濃度下的吸附率都一樣,但解吸率隨著濃度的增加逐漸增大,當(dāng)洗脫液濃度為70%與80%時(shí),解吸率差異并不顯著。因此,從節(jié)約溶劑的角度考慮,最終確定洗脫液的濃度為70%。

      2.3.4 洗脫液用量 按照經(jīng)單因素考察后2.3.3的方法,飽和吸附后,用純水洗脫至流出液為無色,分別用70%的乙醇溶液洗脫1、2、3、4 BV,收集洗脫液。每組實(shí)驗(yàn)做3個(gè)平行,按1.2.7測(cè)定和計(jì)算5個(gè)黃酮碳苷的總含量,并計(jì)算5個(gè)黃酮碳苷的總吸附率和總解吸率。從表6可以看出,洗脫液用量為1 BV的時(shí)候解吸率最小,只有81.24%;隨著洗脫液體積的增大,解吸率逐漸增大,當(dāng)洗脫液用量為4 BV時(shí),解吸率達(dá)到最大,為98.61%。這說明少體積洗脫液并不能將黃酮碳苷全部洗脫,而洗脫液用量為3 BV時(shí)解吸率為95.92%,與4 BV相差不大,從節(jié)約溶劑的角度考慮,最終確定洗脫液用量為3 BV。

      2.3.5 正交試驗(yàn) 根據(jù)單因素實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,按照表2的正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),試驗(yàn)結(jié)果見表7。由極差分析結(jié)果可知,樹脂XAD-16N影響純化戰(zhàn)骨植物中5個(gè)黃酮碳苷的工藝因素依次為B > C >A, 即上樣流速>洗脫液濃度 >上樣濃度。由表8的方差分析結(jié)果可知,因素A、B、C均無顯著影響(P>0.05)。戰(zhàn)骨植物中5個(gè)黃酮碳苷提取理論最優(yōu)水平為A2、B2、C2,即上樣濃度為原液稀釋2倍、上樣流速2 BV·h-1、洗脫液濃度60%乙醇。

      2.4 驗(yàn)證試驗(yàn)

      采用2.3.5最優(yōu)工藝進(jìn)行3次驗(yàn)證試驗(yàn),結(jié)果見表9。由表9可知,5個(gè)總黃酮碳苷的含量為14.50%,而由原植物提取液中5個(gè)總黃酮碳苷的含量為1.73%,實(shí)驗(yàn)結(jié)果確證篩選得到的大孔樹脂XAD-16N富集純化效果良好。

      3 討論與結(jié)論

      大孔樹脂具有高交聯(lián)度和多永久性孔隙的特性,廣被用于黃酮類化合物的分離和提純。大孔樹脂能從植物提取物中分離黃酮類化合物的優(yōu)勢(shì)是由于黃酮類化合物本身的特性,因?yàn)樗鼈兊能赵嫌斜江h(huán)和幾個(gè)氫基,有助于具有適當(dāng)?shù)钠骄讖健O性和表面積的大孔吸附樹脂吸附這些化合物。結(jié)果表明,XAD-16N作為理想樹脂用于戰(zhàn)骨中黃酮碳苷提取液(天然深共晶溶劑作為提取媒介)的富集純化的吸附和解吸能力最強(qiáng),說明大孔樹脂的大孔徑(560~710 μm)、大比表面積(800 m2·g-1)和苯乙烯系基質(zhì)最適合于戰(zhàn)骨提取物中黃酮碳苷的吸附和釋放。故戰(zhàn)骨提取物大極性的黃酮碳苷與大極性樹脂之間的極性匹配主要?dú)w因于氫鍵和范德華相互作用。

      乙醇是一種有機(jī)溶劑,具有可回收、價(jià)格低廉、毒性低且對(duì)人類無安全威脅等優(yōu)點(diǎn)。因此,本研究選擇它作為脫附劑。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,黃酮碳苷類化合物的解吸率與乙醇濃度成正比,這意味著隨著解吸率的增加,乙醇濃度也會(huì)增加。達(dá)到峰值后,解吸率隨乙醇濃度的進(jìn)一步增加而趨于平緩。吸附在樹脂上的分子間作用力與溶解在溶劑中的分子間相互作用對(duì)黃酮碳苷類化合物從樹脂上的解吸具有重要作用。而且,XAD-16N成功地富集了戰(zhàn)骨中存在的黃酮碳苷類化合物,并能選擇性地吸附黃酮碳苷類化合物。與傳統(tǒng)的純化工藝(D101)相比,樹脂XAD-16N的吸附率(86.65%)和解吸率(86.54%),均顯著優(yōu)于D101(吸附率74.30%,解吸率77.21%)。本研究通過單因素篩選及正交工藝優(yōu)化,最終確定其最佳富集純化工藝為上樣濃度為原提取液稀釋2倍、上樣流速2 BV·h-1、洗脫液為60%乙醇??傸S酮碳苷的含量由1.73%(原植物中含量)提高到14.50%,提高了7.38倍。因此,本研究開發(fā)了一種簡(jiǎn)單有效的從戰(zhàn)骨植物中提取黃酮碳苷的方法。該方法操作簡(jiǎn)單,回收率高,工藝穩(wěn)定可行,可為今后戰(zhàn)骨工業(yè)大批量生產(chǎn)提供一定的參考價(jià)值。

      參考文獻(xiàn):

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      (責(zé)任編輯 李 莉)

      收稿日期:? 2020-12-02

      基金項(xiàng)目:? 廣西創(chuàng)新驅(qū)動(dòng)發(fā)展專項(xiàng)(桂科AA18118015);廣西自然科學(xué)基金(2018GXNSFAA294031);中央引導(dǎo)地方科技發(fā)展專項(xiàng)(桂科ZY20111010) [Supported by Innovation-Driven Development Special Project of Guangxi(AA18118015); Natural Science Foundation of Guangxi(2018GXNSFAA294031); Special Project of Local Science and Technology Development Guided by the Central Government (ZY20111010)]。

      第一作者: 黨驕陽(1996-),碩士研究生,研究方向?yàn)樗幬镅邪l(fā)與轉(zhuǎn)化,(E-mail)545121289@qq.com。

      *通信作者:? 李典鵬,博士,研究員,主要從事植物化學(xué)研究,(E-mail)ldp@gxib.cn。

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