艾煙對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化小鼠抑制機(jī)制研究

康虹亮　易?！堥∏駶摗∥榻瓭±畋?/p>

摘要：目的：人們?nèi)粘Ｉ钪杏冒~燃燒的艾煙對(duì)發(fā)生的心血管疾病動(dòng)脈粥樣硬化的保護(hù)作用。方法：小鼠作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，建立動(dòng)脈粥樣硬化模型，我們以單純高脂飼料喂養(yǎng)，為期12周，建造小鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型。我們用艾葉中燃燒的艾煙，之后再使用它干預(yù)小鼠，進(jìn)行觀察和記錄。其主要分四個(gè)步驟，艾煙的充分燃燒、小鼠動(dòng)脈粥樣硬化模型的建立、分組實(shí)驗(yàn)觀察記錄、數(shù)據(jù)分析。結(jié)果：艾煙使動(dòng)脈粥樣硬化小鼠的TC，TG，HDL，LDL全部都大幅度的下降，八周齡小鼠高脂飲食喂養(yǎng)十二周以后，體重以及血脂變化都出現(xiàn)了異常，相對(duì)于正常小鼠，APOE體重減輕，TG，LDL，VLDL含量增高，HDL含量下降.結(jié)論：艾煙進(jìn)行煙熏12周可以有效降低TG，LDL的水平，可以調(diào)整小鼠血脂水平。

關(guān)鍵詞：艾煙，動(dòng)脈粥樣硬化小鼠，抑制機(jī)制

艾煙是艾絨燃燒的產(chǎn)物，艾的藥性成分可能存在其中。古代文獻(xiàn)中有用艾煙治療疾病的記載，如在《圣濟(jì)總錄》、《本草綱目》《神農(nóng)本草經(jīng)疏》等古籍中，有將艾葉做卷后點(diǎn)燃，口吸艾煙以治療咳嫩，鼻吸艾煙治療牙痛，熏艾治療病疾，掩口不愈等記載。研究發(fā)現(xiàn)，艾煙在膽固醇代謝，血液流變方面有一定的良性調(diào)整作用。而對(duì)于艾煙是否為艾灸抗動(dòng)脈粥樣硬化的起效因素之一，國內(nèi)外未見報(bào)道。本研究以小鼠為研究對(duì)象，以艾艾煙暴露為干預(yù)方法，觀察艾煙干預(yù)對(duì)小鼠生存狀態(tài)、血脂、血清炎性指標(biāo)、主動(dòng)脈粥樣硬化斑塊、肝臟病理，以及膽固醇攝取和膽固醇逆向運(yùn)轉(zhuǎn)機(jī)制的影響，以期從抑制炎癥、改善胎代謝障礙等途徑闡釋艾灸、艾煙的作用機(jī)制。

1、材料與方法

1. ? 30只8周齡的Apoe小鼠隨機(jī)分為2 組：模型組以及艾煙組，每組15只。15只小鼠作為正常對(duì)照，小鼠喂養(yǎng)一周后，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)干預(yù)，干預(yù)方法如下：正常組：采用小鼠固定器固定小鼠，不進(jìn)行干預(yù);模型組：采用固定器固定小鼠四肢，不進(jìn)行干預(yù);艾煙組：將小鼠固定后放入自制玻璃缸，玻璃鋼內(nèi)有調(diào)試好的粉塵儀。點(diǎn)燃艾條，從玻璃缸的上方的圓孔中插入，令艾煙充滿玻璃缸測試其濃度在5mg/m3 到15mgm3時(shí)將艾條取出，然后封閉圓孔。并且每隔三分鐘就記錄一次濃度數(shù)值，數(shù)值過高或者過低都需要及時(shí)補(bǔ)充。
2. 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法? 應(yīng)用SPSS23.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行相關(guān)數(shù)據(jù)分析，計(jì)量數(shù)據(jù)以（±s）表示，采用Fisher確切概率法檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2、結(jié)果

2.1實(shí)驗(yàn)前普通小鼠和APOE小鼠皮毛烏黑有光澤， 且活波好動(dòng) ， 但在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí) ， 小鼠皮毛灰暗干澀并出現(xiàn)多處脫落。實(shí)驗(yàn)前各組小鼠體重?zé)o差異 ，隨時(shí)間增長各組小鼠體重逐漸增加 ，干預(yù)12周后，各組小鼠體重呈現(xiàn)正常組模型 組 、 艾煙組的趨勢 。 模型組小鼠體重顯著低于正常組（p=0.001） ; 艾煙組小鼠體重與模型組沒有特別大的差異，且都具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。

模型組小鼠血清TG，LDL含量顯著高于正常組，HDL含量顯著低于正常組，血清TC與正常組無差異。艾煙組小鼠血清TG，LDL含量顯著低于模型組，HDL含量與模型組無顯著差異（見表1）。

3、討論

現(xiàn)代研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)艾煙中含有多種活性成分，可以通過呼吸系統(tǒng)和血液循環(huán)系統(tǒng)，達(dá)到抗炎殺菌、調(diào)節(jié)免疫、抗氧化、調(diào)節(jié)自主神經(jīng)功能，調(diào)節(jié)膽固醇代謝等多種效果。艾煙具有殺菌、抗病毒的作用，可抑制大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、傷寒軒菌、結(jié)核桿菌等還可抑制流感病毒、腺病毒、鼻病毒等可用于治療呼吸系統(tǒng)疾病。同時(shí)艾煙還可局部作用于皮膚，治療局部皮膚感染，如足癬、外傷感染等艾煙的提高免疫，抗氧化作用表現(xiàn)在艾煙可以調(diào)節(jié)細(xì)胞因子平衡，抑制（經(jīng)脂多糖（誘導(dǎo)的）小鼠巨嗟細(xì)胞系（的釋放和的表達(dá)“，提高血清抗氧化酶活性，抗氧化損傷，和清除自由基。艾煙可以良性調(diào)整心率變異性，提高心臟自主神經(jīng)功能、并且研究發(fā)現(xiàn)，艾煙在膽固醇代謝，血液流變方面有一定的良性調(diào)整作用。一定濃度艾煙暴露可以降低高脂血癥大鼠、升高，降低血柴枯度。還可降低大鼠血清中和血管性假血友病因子水平，升高并認(rèn)為，艾煙可以通過呼吸進(jìn)入機(jī)體，并最終進(jìn)入血液循環(huán)，可能對(duì)心血管系統(tǒng)具有一定的的作用。

研究表明Toll受體 （Toll-like receptors TLRs） 作為免疫細(xì)胞表面識(shí)別病原相關(guān)分子模式的一個(gè)模式識(shí)別受體家族， 與天然免疫反應(yīng)有著密切的關(guān)系， TLR4是其中發(fā)現(xiàn)較早同時(shí)也是目前研究較多的Toll受體， 在血脂代謝紊亂和慢性炎癥的相互作用起著重要橋梁作用， 一方面氧化修飾的血清脂蛋白可通過TLR4受體激活免疫細(xì)胞， 介導(dǎo)TNF-α、IL-1、IL-6等炎癥因子的釋放， 同時(shí)炎癥細(xì)胞因子也可以促進(jìn)脂蛋白的氧化， 使具有生物活性的氧化修飾的脂蛋白的比例和含量均升高促進(jìn)脂質(zhì)沉積。目前多數(shù)研究認(rèn)為Hcy導(dǎo)致的內(nèi)皮功能障礙是動(dòng)脈粥樣硬化的重要機(jī)制。NO是內(nèi)皮細(xì)胞維持血管擴(kuò)張的主要調(diào)節(jié)因子， 而血管內(nèi)皮在成生NO過程中出現(xiàn)異常， 使NO生成減少， 導(dǎo)致內(nèi)皮功能障礙， 是動(dòng)脈粥樣硬化的前奏。

高脂飼料喂養(yǎng)法建立的模型以脂質(zhì)沉積為主要特征，操作性強(qiáng)，也較常被采用，但其造模時(shí)間較長，且形成的斑塊位置不固定，從而人們?cè)诖嘶A(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn)，免疫法、神經(jīng)及機(jī)械損傷法、血流動(dòng)力改變法、基因工程法等建立動(dòng)脈粥樣硬化動(dòng)物模型的方法應(yīng)運(yùn)而生，這些方法都能加速模型的建立，也各有優(yōu)缺點(diǎn)，它們與人類自發(fā)型的動(dòng)脈粥樣硬化存在一定差異，在研究動(dòng)脈粥樣硬化并發(fā)癥時(shí)，部分結(jié)扎頸動(dòng)脈法發(fā)揮了不可替代的作用;球囊損傷法形成的斑塊位置確切，便于研究者實(shí)施各種干預(yù)措施后觀察斑塊的變化;免疫法建立的模型可為研究疫苗預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化提供線索，因此人們可根據(jù)自己的需要選擇比較合適的造模方法。

目前，動(dòng)脈粥樣硬化的研究已是全國共通的話題，在美國也有大量的研究，在美國，每年約785 000人新發(fā)冠心?。–AD），約470 000人再發(fā)CAD。2007年美國平均每6個(gè)死亡病例中有1例死于CAD。盡管腦卒中發(fā)生率下降，但美國2007年的死亡數(shù)據(jù)顯示每18個(gè)死亡病例中有1例死于腦卒中。血脂異常是CAD最主要的危險(xiǎn)因素，甚至是CAD的首要條件。流行病學(xué)資料也顯示高膽固醇血癥以及冠狀動(dòng)脈粥樣硬化是缺血性腦卒中的危險(xiǎn)因素。冠心病流行病學(xué)和預(yù)防美國是冠心病高發(fā)病國家，全國共有冠心病患者約400萬，每年約有70萬心肌梗塞發(fā)作。1949年開始了Framingham地區(qū)冠心病流行病學(xué)研究，研究出吸煙、高血壓、高血脂、超體重、缺少運(yùn)動(dòng)、糖尿病、陽性家族史等為主要的易患因素。研究對(duì)象目前尚有60%存活。

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項(xiàng)目基金：2021年湖南省大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)項(xiàng)目：湘教通[2021]197號(hào)-3904;2021年長沙醫(yī)學(xué)院大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃項(xiàng)目：長醫(yī)教[2021]47 號(hào)-059

*通訊作者：李兵，（1987-11-），男，本科，講師，解剖學(xué)專業(yè)

第一作者：康虹亮（2001-12-），男，本科在讀，臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)

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