董磊 臧磊 王嬌嬌

過敏性紫癜（Henoch?Schonlein purpura，HSP）為常見血管疾病，主要好發(fā)于兒童，其發(fā)病率較高［1］。HSP 主要表現(xiàn)有毛細(xì)血管通透性及脆性增加，導(dǎo)致皮膚、臟器及關(guān)節(jié)發(fā)生炎癥和出血，具有一定遺傳傾向。目前，臨床上對于此病病因及發(fā)病機(jī)理尚不明確。本病多為自限性疾病，大部分患兒有輕微癥狀，經(jīng)臨床治療后，恢復(fù)較快；少數(shù)患兒病情進(jìn)展快，全身器官功能出現(xiàn)衰竭，甚至引起死亡［2］。有研究表明，HSP 的發(fā)生與免疫功能有著密切關(guān)系，患兒發(fā)病期存在明顯體液免疫功能紊亂、T 淋巴細(xì)胞亞群失調(diào)等情況［3］。免疫球蛋白及補體在機(jī)體免疫過程中發(fā)揮重要抗感染作用。正常生理情況下，部分人體內(nèi)出現(xiàn)少量抗核抗體，但對于HSP 患者，其血液中有自身抗體存在，通?？梢詫?xì)胞核抗原成分產(chǎn)生直接針對作用［4］。本研究選取過敏性紫癜患兒為研究對象，分析其免疫球蛋白、補體水平及抗核抗體變化，為臨床針對性治療提供重要依據(jù)。報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年2月至2021年3月在阜南縣人民醫(yī)院兒內(nèi)科接受治療的92 例過敏性紫癜患兒為研究對象。其中男48 例，女44 例，平均年齡為（8.51±1.58）歲。于同期，選取健康兒童41 例為對照組，男21 例，女20 例，平均年齡為（8.26±1.19）歲。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。本研究符合赫爾辛基宣言。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)臨床診斷，均符合過敏性紫癜相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)［5］；②近期未接受糖皮質(zhì)激素治療或免疫制劑治療；③病情穩(wěn)定，意識清醒；④均有一位陪護(hù)家屬；⑤年齡均在14 歲以下；⑥所有入試者監(jiān)護(hù)人均簽署同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重器質(zhì)性病變；②患者凝血功能異常；③伴有惡性腫瘤；④合并其他感染者；⑤有家族過敏史；⑥中途轉(zhuǎn)院治療或退出研究。

1.3 方法

免疫球蛋白、補體水平檢測：所有人員均于清晨采集空腹靜脈血5 mL，以3 000 r/min 離心，20 min 后將血清分離，離心半徑為13.5 cm，放置于-80℃環(huán)境中保存。使用全自動生化分析儀（生產(chǎn)廠家：基蛋生物科技股份有限公司）采取免疫比濁法測定IgA、IgG、IgM、C3、C4，并計算出IgA/C3值。試劑盒購于北京中西華大科技有限公司，相關(guān)操作嚴(yán)格遵守說明書規(guī)范。

抗核抗體檢測：所有人員均于清晨采集空腹靜脈血5 mL，30 min 后進(jìn)行離心操作，以3 000 r/min離心，離心半徑為13.5 cm，時間為10 min，后將樣品置于-20℃環(huán)境中保存。采取間接免疫熒光法進(jìn)行檢測，血清和熒光標(biāo)記物的稀釋采用磷酸鹽緩沖液（1∶100），將其添加于樣品中，常溫環(huán)境下和生物薄片上的Hep?2 細(xì)胞核靈長類肝臟進(jìn)行培育，30 min 后進(jìn)行沖洗（采用PBS 緩沖液），去除未結(jié)合的非特異性物質(zhì)；結(jié)合熒光標(biāo)記物抗人IgG 抗體、生物薄片基質(zhì)，行二次孵育，30 min 后進(jìn)行浸泡沖洗；采用甘油進(jìn)行封片處理，于顯微鏡下觀察抗核抗體。試劑盒購于北京和杰創(chuàng)新生物醫(yī)學(xué)科技有限公司，相關(guān)操作嚴(yán)格遵守說明書規(guī)范。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

數(shù)據(jù)采用SPSS 22.0 軟件分析，計數(shù)數(shù)據(jù)采用n（%）表示，組間行χ2檢驗；計量數(shù)據(jù)采用（±s）表示，組間比較獨立樣本行t檢驗；采用受試者工作特征曲線（ROC 曲線）分析IgA、IgA/C3 對過敏性紫癜患兒的診斷價值，曲線下面積（AUC）0.7～0.9時有一定準(zhǔn)確性，AUC>0.9 時準(zhǔn)確性較高。P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組免疫球蛋白水平比較

觀察組IgA 水平顯著高于對照組，比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）；兩組IgG、IgM 水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

表1 兩組免疫球蛋白比較（±s）Table 1 Comparison of two groups of immunoglobulins（±s）

表1 兩組免疫球蛋白比較（±s）Table 1 Comparison of two groups of immunoglobulins（±s）

組別觀察組對照組t 值P 值n 92 41 IgA（g/L）2.21±0.64 0.98±0.29 11.761<0.001 IgG（g/L）8.06±2.41 9.46±2.32 0.782 0.436 IgM（g/L）1.49±0.46 1.41±0.37 0.981 0.329

2.2 兩組補體水平比較

兩組C3、C4 比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；觀察組IgA/C3 顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表2。

表2 兩組補體水平比較（±s）Table 2 Comparison of complement levels between the two groups（±s）

表2 兩組補體水平比較（±s）Table 2 Comparison of complement levels between the two groups（±s）

組別觀察組對照組t 值P 值n 92 41 C3（g/L）1.21±0.14 1.19±0.23 0.617 0.538 C4（g/L）0.22±0.06 0.23±0.04 0.974 0.332 IgA/C3（g/L）1.58±0.41 1.09±0.21 7.231<0.001

2.3 兩組抗核抗體比較

觀察組抗Sm 陽性率、抗SS?A 陽性率、抗SS?B 陽性率、抗SCL?70 陽性率、抗PM?SCL 陽性率、抗PCNA 陽性率、抗核小體陽性率、抗組蛋白陽性率、抗核糖體核蛋白陽性率、ANA 陽性率顯著高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。見表3。

表3 兩組抗核抗體比較［n（%）］Table 3 Comparison of two groups of antinuclear antibodies［n（%）］

2.4 IgA、IgA/C3 對過敏性紫癜患兒的診斷價值

ROC 曲線分析顯示，IgA、IgA/C3 對HSP 的診斷價值A(chǔ)UC 分別為0.848、0.835，具有一定準(zhǔn)確性；其敏感度、特異度分別為：IgA 為100.0%、56.1%，IgA/C3 為51.1%、100.0%，具有一定診斷價值。

將IgA、IgA/C3 納入Logistic 回歸模型，通過回歸系數(shù)得出聯(lián)合檢測的數(shù)值計算公式為：聯(lián)合檢測=IgA+（0.835/0.848）*IgA/C3，統(tǒng)計分析得出聯(lián)合數(shù)據(jù)。進(jìn)一步ROC 曲線顯示，聯(lián)合檢測AUC 為0.909，敏感度、特異度為66.3%、100.0%，提示聯(lián)合檢測預(yù)測價值較高（P<0.05）。見表4、圖1。

表4 IgA、IgA/C3 對過敏性紫癜患兒的診斷價值Table 4 The diagnostic value of IgA and IgA/C3 in children with Henoch?Schonlein purpura

圖1 IgA、IgA/C3 對過敏性紫癜患兒的診斷價值Figure 1 The diagnostic value of IgA and IgA/C3 in children with Henoch?Schonlein purpura

3 討論

過敏性紫癜為兒童常見自身免疫性疾病，HSP典型癥狀為皮膚紫癜、關(guān)節(jié)癥狀、胃腸道癥狀及腎臟損傷［6］。有研究發(fā)現(xiàn)，HSP 患兒存在免疫功能失調(diào)，抗體分泌增多，T 淋巴細(xì)胞亞群功能紊亂［7］。其發(fā)病機(jī)制臨床尚不清楚，目前認(rèn)為除遺傳因素之外，感染、接觸過敏原等都為其主要因素［8］。各種刺激因子如感染源、過敏原，激活T 細(xì)胞，引起細(xì)胞因子異常分泌，凝血、纖溶功能異常，導(dǎo)致周圍血管炎性改變，造成組織和臟器損傷［9］。因此臨床上因探尋有效評估HSP 疾病的診斷指標(biāo)，以早期發(fā)現(xiàn)異常，及時干預(yù)，改善患兒預(yù)后。

有研究表明，IgA 在HSP 患兒中呈較高水平，并在HSP 患兒皮損組織中出現(xiàn)大量沉淀，其染色強(qiáng)度明顯強(qiáng)于正常兒童［10］。本研究結(jié)果顯示，從免疫球蛋白水平來看，觀察組IgA 水平顯著高于對照組，但是兩組IgG、IgM 水平比較無明顯差異，說明HSP 對免疫球蛋白存在選擇性分泌異常，IgA 顯著升高，說明其在HSP 患兒發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用。有研究表明，IgA 可在HSP 患兒皮膚、關(guān)節(jié)及腎臟毛細(xì)血管出沉積，誘發(fā)小血管炎癥，從而使得毛細(xì)血管通透性增加，致病理損害［11］。另有文獻(xiàn)報道，IgA 可抑制粒細(xì)胞吞噬IgG 免疫復(fù)合物，使得IgG 免疫復(fù)合物堆積于腎臟，加重腎臟損傷［12］。對于IgM、IgG 在HSP 患兒體內(nèi)變化，目前報道不一致。有研究表明，IgM、IgG 失調(diào)會使得HSP 患兒腎臟損傷加重。而本研究中HSP 患兒與健康兒童比較IgG、IgM 水平無明顯差異。楊煥丹等［13］通過研究HSP 患兒體內(nèi)補體水平，發(fā)現(xiàn)補體水平與HSP 的病情無關(guān)。本研究中結(jié)果顯示，兩組C3、C4 比較無顯著差異，這與本研究結(jié)論一致。暢曉元等［14］報道IgA/C3 值可較好反映HSP 病情變化，同時可反映腎臟損害程度。本研究通過分析IgG/C3 值，發(fā)現(xiàn)觀察組IgA/C3 顯著高于對照組，說明IgA/C3 值對HSP 疾病變化具有較好的監(jiān)測作用。相關(guān)資料表明，抗核抗體檢測對自身免疫疾病的診斷準(zhǔn)確性較高，臨床上醫(yī)生可根據(jù)患者抗核抗體檢出情況判斷患者是否存在自身免疫疾病，從而及時治療［15］?？购丝贵w為自身抗體中最為常見，與疾病的發(fā)生有著密切關(guān)系。本研究結(jié)果說明抗核抗體檢測診斷HSP 效果較為顯著。

本文進(jìn)一步將IgA、IgG/C3 作ROC 分析，ROC 曲線分析顯示，IgA、IgA/C3 對HSP 的診斷價值A(chǔ)UC 分別為0.848、0.835，具有一定準(zhǔn)確性；其敏感度、特異度分別為：IgA 為100.0%、56.1%，IgA/C3為51.1%、100.0%，具有一定診斷價值。當(dāng)聯(lián)合檢測兩項時，AUC 為0.909，敏感度、特異度為66.3%、100.0%，提示聯(lián)合檢測預(yù)測價值較高，由此得出，IgA、IgA/C3 可作為HSP 的重要診斷指標(biāo)［16］。

綜上所述，HSP 患兒體內(nèi)IgA、IgA/C3 較高，抗核抗體檢測均呈陽性，且IgA、IgA/C3 對HSP 發(fā)生具有一定診斷價值，可為臨床診治明確方向，值得在臨床推廣。