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      2,6 -二氯靛酚法測(cè)定青椒中抗壞血酸的脫色條件研究

      2022-05-26 07:31:54晶,李會(huì)
      農(nóng)產(chǎn)品加工 2022年7期
      關(guān)鍵詞:皂土二氯青椒

      劉 晶,李 會(huì)

      (1. 武漢尚碼生物科技有限公司,湖北武漢 430073;2. 北京華測(cè)食農(nóng)認(rèn)證服務(wù)有限公司,北京 102199)

      食品中抗壞血酸的測(cè)定方法有很多,國(guó)標(biāo)GB 5009.86—2016[1]中第一法為高效液相色譜法,第二法為熒光法,第三法為2,6 -二氯靛酚法,除此之外,還有猝滅-恢復(fù)型電化學(xué)發(fā)光傳感器法[2]、比色法[3-4]、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法[5-6]、共振散射法[7]、氧化還原法[8]、修飾電極伏安法[9]等,這些方法各有特點(diǎn),適用于不同樣品和場(chǎng)景分析。其中,2,6 -二氯靛酚法具有不需要大型分析儀器設(shè)備、操作簡(jiǎn)單、試劑價(jià)格便宜、精密度和準(zhǔn)確度高等優(yōu)點(diǎn),廣泛用于水果、蔬菜及其制品中L -抗壞血酸的測(cè)定。由于該方法利用顏色判斷終點(diǎn),因而對(duì)于富含色素的樣品如青椒、番茄等測(cè)定存在一定的干擾,往往需要進(jìn)行脫色處理,而脫色過(guò)程中不可避免地會(huì)對(duì)抗壞血酸造成吸附損失,從而造成測(cè)定誤差。擬考查3 種吸附劑皂土、高嶺土和活性炭對(duì)青椒中抗壞血酸的脫色效果及抗壞血酸吸附率,從中選取較優(yōu)的吸附劑,為2,6 -二氯靛酚法測(cè)定深色果蔬中抗壞血酸含量提供參考。

      1 材料與方法

      1.1 材料

      2,6 -二氯靛酚鈉為分析純,上海賽諾化工有限公司提供;抗壞血酸、草酸、氫氧化鈉、無(wú)水乙醇、丙酮、活性炭,均為分析純,國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司提供;皂土為化學(xué)純,上海山浦化工有限公司提供;高嶺土為化學(xué)純,天津市凱通化學(xué)試劑有限公司提供。

      1.2 儀器設(shè)備

      722 型可見(jiàn)分光光度計(jì),天津市普瑞斯儀器有限公司產(chǎn)品;AL-104 型分析天平,瑞士Metteler toledo公司產(chǎn)品;DF-2 電熱磁力攪拌器,金壇市醫(yī)療儀器有限公司產(chǎn)品。

      1.3 試驗(yàn)方法

      1.3.1 抗壞血酸吸附試驗(yàn)

      取50 mL 0.2 mg/mL 的抗壞血酸溶液于100 mL燒杯中,加入一定質(zhì)量的皂土、活性炭和高嶺土,將燒杯分別置于一定溫度下的磁力攪拌器中恒溫?cái)嚢?,過(guò)濾,采用2,6 -二氯靛酚滴定法測(cè)定濾液中抗壞血酸的含量。

      1.3.2 葉綠素吸附試驗(yàn)

      取5 g 新鮮的青椒,加入少許提取劑(無(wú)水乙醇∶丙酮= 1∶1) 進(jìn)行研磨后定容至100 mL,然后將其轉(zhuǎn)移至燒杯中,加入一定質(zhì)量的皂土、活性炭和高嶺土,將燒杯分別置于一定溫度下的磁力攪拌器中恒溫?cái)嚢?,過(guò)濾,參照NY/T 3082—2017[10]中的方法測(cè)定溶液中的葉綠素含量。

      2 結(jié)果與分析

      2.1 吸附溫度對(duì)抗壞血酸吸附率的影響

      研究了吸附溫度分別為25,35,45,55,65 ℃時(shí)對(duì)抗壞血酸吸附率的影響。

      吸附溫度對(duì)抗壞血酸吸附率的影響見(jiàn)圖1。

      圖1 吸附溫度對(duì)抗壞血酸吸附率的影響

      由圖1 可知,吸附溫度對(duì)抗壞血酸吸附率有比較明顯的影響,隨著吸附溫度的升高,3 種吸附劑對(duì)溶液中抗壞血酸的吸附率都呈先快速上升后緩慢上升并逐漸趨于平緩的變化趨勢(shì)。當(dāng)吸附溫度達(dá)到45 ℃時(shí),吸附率增長(zhǎng)趨勢(shì)趨于平緩。3 種吸附劑中,高嶺土對(duì)抗壞血酸的吸附率最高,當(dāng)吸附溫度為25 ℃時(shí),吸附率為50.7%;吸附溫度為65 ℃時(shí),吸附率可達(dá)72.0%。皂土對(duì)抗壞血酸的吸附率最低,當(dāng)吸附溫度為25 ℃時(shí),吸附率僅為4.8%;吸附溫度為65 ℃時(shí),吸附率達(dá)到了33.5%。隨著吸附溫度的升高,吸附劑孔徑因熱脹冷縮效應(yīng)而增加,從而使更多的抗壞血酸被吸附。此外,溶液中部分抗壞血酸也因?yàn)檫^(guò)高的溫度而被破壞掉,使溶液中抗壞血酸含量降低,從而造成最終吸附率的增加。

      2.2 吸附劑添加量對(duì)抗壞血酸吸附率的影響

      研究了吸附劑添加量分別為2%,4%,6%,8%,10%時(shí)對(duì)抗壞血酸吸附率的影響。

      吸附劑添加量對(duì)抗壞血酸吸附率的影響見(jiàn)圖2。

      圖2 吸附劑添加量對(duì)抗壞血酸吸附率的影響

      由圖2 可知,吸附劑添加量對(duì)抗壞血酸吸附率的影響不是很明顯,當(dāng)吸附劑添加量為2%時(shí),抗壞血酸的吸附率較低,當(dāng)繼續(xù)加大吸附劑添加量,對(duì)于皂土和高嶺土而言,抗壞血酸吸附率略有增加,對(duì)于活性炭而言,抗壞血酸吸附率由28.2%迅速增加到42.8%,繼續(xù)加大活性炭添加量,吸附率增長(zhǎng)趨緩。

      2.3 吸附劑添加量對(duì)脫色效果的影響

      研究了吸附劑添加量分別為2%,4%,6%,8%,10%時(shí)對(duì)青椒葉綠素吸附率的影響。

      吸附劑添加量對(duì)葉綠素吸附率的影響見(jiàn)圖3。

      圖3 吸附劑添加量對(duì)葉綠素吸附率的影響

      由圖3 可知,皂土和活性炭對(duì)青椒中葉綠素的吸附效果相當(dāng),皂土效果略好于活性炭,且隨著吸附劑添加量的增加,對(duì)葉綠素吸附率變化不大,基本維持在80%~90%。而高嶺土對(duì)青椒中葉綠素的吸附率隨著添加量的加大而逐漸減小,當(dāng)添加量為6.0%時(shí),吸附率轉(zhuǎn)為負(fù)值,可能是高嶺土中某種成分促進(jìn)了吸光值的增加。也有可能是過(guò)濾時(shí)部分高嶺土穿透濾紙進(jìn)入溶液中,從而使濾液渾濁,導(dǎo)致吸光度增加。

      2.4 吸附時(shí)間對(duì)脫色效果的影響

      研究了吸附時(shí)間分別為10,15,20,25,30 min時(shí)對(duì)青椒葉綠素吸附率的影響。

      吸附時(shí)間對(duì)葉綠素吸附率的影響見(jiàn)圖4。

      圖4 吸附時(shí)間對(duì)葉綠素吸附率的影響

      由圖4 可知,隨著吸附時(shí)間的延長(zhǎng),皂土和活性炭對(duì)青椒中葉綠素吸附率呈現(xiàn)先上升后趨于平緩的趨勢(shì),當(dāng)吸附時(shí)間為15 min 時(shí),吸附率基本達(dá)到較高水平,皂土對(duì)葉綠素最大吸附率為86.1%,活性炭對(duì)葉綠素最大吸附率為78.2%。高嶺土對(duì)葉綠素的吸附效果低于皂土和活性炭,且基本不受吸附時(shí)間的影響,其對(duì)葉綠素的最大吸附率為78.2%。

      綜上而言,結(jié)合3 種吸附劑對(duì)抗壞血酸和葉綠素的吸附效果分析,可以得出,當(dāng)采用2,6 -二氯靛酚法測(cè)定青椒中抗壞血酸含量時(shí),采用4%皂土為吸附劑,在25 ℃下脫色25 min,此時(shí)對(duì)抗壞血酸的吸附率最小而脫色效果最好。

      2.5 方法精密度

      對(duì)該方法的精密度進(jìn)行測(cè)定。

      方法精密度見(jiàn)表1。

      表1 方法精密度

      從表1 可看出,方法的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為4.17%,表明該方法測(cè)定青椒中抗壞血酸的精密度較好。

      2.6 方法回收率

      對(duì)該方法的回收率進(jìn)行測(cè)定。

      方法回收率見(jiàn)表2。從表2 可看出,抗壞血酸的加標(biāo)回收率在97.7%~107.0%,能夠滿(mǎn)足測(cè)定要求。

      表2 方法回收率

      3 結(jié)論

      為了減輕2,6 -二氯靛酚法測(cè)定青椒中抗壞血酸含量時(shí)葉綠素對(duì)終點(diǎn)顏色的判斷,研究3 種吸附劑對(duì)葉綠素的脫除效果,同時(shí)將其對(duì)抗壞血酸的吸附率降至最低。結(jié)果表明,以4%的皂土為吸附劑,在25 ℃下吸附25 min,對(duì)抗壞血酸的吸附率為5.1%,對(duì)葉綠素的脫除率達(dá)86.1%,經(jīng)脫色處理后的樣品基本上無(wú)顏色,且抗壞血酸的吸附量小。采用2,6 -二氯靛酚法測(cè)定其中的抗壞血酸含量,終點(diǎn)顏色易于判斷且基本不影響分析結(jié)果,方法精密度為4.17%,回收率在97.7%~107.0%,能夠滿(mǎn)足測(cè)定要求。

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