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      IL-6、ANCA、PAB聯(lián)合腸道菌群檢測對IBD的診斷價值

      2022-06-12 21:52:44董麗麗李華銘
      中國現(xiàn)代醫(yī)生 2022年13期
      關(guān)鍵詞:腸病炎癥性菌群

      董麗麗 李華銘

      [摘要] 目的 探討白細(xì)胞介素-6(IL-6)、抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(ANCA)、抗胰腺腺泡抗體(PAB)聯(lián)合腸道菌群檢測對炎癥性腸?。↖BD)的診斷價值。 方法 回顧性分析2018年3月至2020年3月在杭州市第三人民醫(yī)院消化內(nèi)科住院并行結(jié)腸鏡檢查的IBD患者130例設(shè)為IBD組,其中潰瘍性結(jié)腸炎(UC)患者74例為UC組,克羅恩病(CD)患者56例為CD組,42例非IBD患者為疾病對照組,46例同期來我院健康體檢者為健康對照組。檢測各組的IL-6、ANCA、PAB及腸道菌群水平,比較各組的ANCA、PAB陽性率,及聯(lián)合檢測對IBD的檢測效能。 結(jié)果 IBD組的ANCA、PAB、腸球菌(EC)、酵母菌(SB)、雙歧桿菌(BL)、擬桿菌(BD)、真桿菌(ES)陽性率顯著高于疾病對照組、健康對照組(均P<0.05);聯(lián)合檢測陽性率均顯著高于單獨(dú)檢測(P<0.05);UC組的ANCA、ES及腸道菌群聯(lián)合檢測敏感度、陽性預(yù)測值均顯著高于CD組,PAB檢測敏感度顯著低于CD組(P<0.05);UC組的SB、ANCA+PAB+腸道菌群聯(lián)合檢測陰性預(yù)測值均顯著高于CD組(P<0.05);IBD組、疾病對照組、健康對照組的IL-6、SB、腸桿菌(EMB)、EC、BL、ES水平比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);聯(lián)合檢測敏感度、特異度均顯著高于單獨(dú)檢測(P<0.05)。 結(jié)論 IL-6、ANCA、PAB聯(lián)合腸道菌群檢測有助于IBD的臨床診斷,具有推廣應(yīng)用價值。

      [關(guān)鍵詞] 白細(xì)胞介素-6;抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體;抗胰腺腺泡抗體;腸道菌群;炎癥性腸病

      [中圖分類號] R392.1? ? ? ? ? [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] B? ? ? ? ? [文章編號] 1673-9701(2022)13-0106-04

      [Abstract] Objective To explore the diagnostic value of interleukin-6 (IL-6), anti-neutrophil cytoplasmic antibody (ANCA), anti-pancreatic acinar antibody (PAB) combined with intestinal flora detection for inflammatory bowel disease (IBD). Methods A retrospective analysis of 130 patients with IBD hospitalized in the Department of Gastroenterology in Hangzhou Third People′s Hospital and underwent colonoscopy from March 2018 to March 2020 were selected as the IBD group, including the UC group of 74 patients with ulcerative colitis (UC) and the CD group of 56 patients with Ron′s disease (CD).Another 42 non-IBD patients were selected as the disease control group,and 46 patients who came to our hospital for physical examination during the same period were selected as the healthy control group. The levels of IL-6,ANCA,PAB and intestinal flora in each group were detected. The positive rates of ANCA and PAB in each group and efficacy of combined detection for IBD were compared. Results The positive rates of ANCA, PAB, Enterococcus (EC), Saccharomyces(SB),Bifidobacterium (BL),Bacteroides (BD) and Eubacterium (ES) in the IBD group were significantly higher than those in the disease control group and the healthy control group(P<0.05).The positive rate of combined detection was significantly higher than that of single detection (P<0.05).The sensitivity and positive predictive value of combined detection of ANCA, ES and intestinal flora in the UC group were significantly higher than those in the CD group,and sensitivity of PAB detection in the UC group was significantly lower than that in the CD group (P<0.05).The negative predictive values of SB and combined detection of ANCA+PAB+intestinal flora in the UC group were significantly higher than those in the CD group(P<0.05).There were statistically significant differences in levels of IL-6, SB, enterobacteria (EMB),EC,BL,and ES in the IBD group, the disease control group, and the healthy control group(P<0.05).The sensitivity and specificity of combined detection were significantly higher than those of single detection (all P<0.05). Conclusion IL-6,ANCA and PAB combined with intestinal flora detection is helpful for the clinical diagnosis of IBD. It is worthy of promotion and application.

      [Key words] Interleukin-6; Anti-neutrophil cytoplasmic antibody; Anti-pancreatic acinar antibody; Intestinal flora; Inflammatory bowel disease

      炎癥性腸?。╥nflammatory bowl disease,IBD)是一種累及回腸、直腸、結(jié)腸的特發(fā)性慢性腸道炎癥性疾病。臨床診斷IBD主要通過其臨床表現(xiàn)、內(nèi)鏡及病理組織學(xué)檢查結(jié)果。但由于該病臨床表現(xiàn)復(fù)雜多樣,極易導(dǎo)致誤診,且難以判斷炎癥活動程度,因而探索多方式聯(lián)合診斷進(jìn)而提高診斷準(zhǔn)確度具有積極意義。腸鏡檢查及鏡下組織活檢是目前IBD診斷的金標(biāo)準(zhǔn),但該操作侵入性大,耗時長,具有一定局限性[1]。目前研究[2-3]普遍認(rèn)為IBD的發(fā)病與腸道菌群密切相關(guān),主要原因為腸道菌群作為腸道內(nèi)的內(nèi)生菌,與腸道黏膜免疫存在復(fù)雜的交互作用,從而維持腸道穩(wěn)態(tài),腸道菌群失衡是IBD發(fā)生、發(fā)展的重要因素,還和多種自身免疫性疾病緊密聯(lián)系。白細(xì)胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、抗中性粒細(xì)胞胞漿抗體(antineutrophil cytoplasmic antibody,ANCA)、抗胰腺腺泡抗體(antipancreatic acinar antibody,PAB)是傳統(tǒng)用于診斷IBD的血清學(xué)指標(biāo)。本研究通過分析IBD患者與健康人群的血清IL-6、ANCA、PAB抗體及腸道菌群差異,探討以上指標(biāo)對IBD的診斷價值,以期為臨床診斷IBD提供一定參考,現(xiàn)報道如下。

      1 資料與方法

      1.1 一般資料

      回顧性分析2018年3月至2020年3月在杭州市第三人民醫(yī)院消化內(nèi)科住院并行結(jié)腸鏡檢查的IBD患者130例,其中潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis,UC)患者74例(UC組),克羅恩病(crohn′s diseas,CD)患者56例(CD組);選取杭州市第三人民醫(yī)院消化內(nèi)科收治的42例非IBD患者為疾病對照組,另選取46例同期來杭州市第三人民醫(yī)院健康體檢者為健康對照組。四組受試者的性別、年齡、身高、BMI比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。見表1。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn)。

      納入標(biāo)準(zhǔn):①符合IBD診斷標(biāo)準(zhǔn)[4];②均經(jīng)腸鏡檢查及鏡下組織活檢確診為IBD;③知情同意,并簽署相關(guān)協(xié)議書;④結(jié)腸鏡證實患者沒有腸道器質(zhì)性和阻塞性病變。排除標(biāo)準(zhǔn):①身體體征極其不穩(wěn)定,依從性較差,完全不配合醫(yī)囑;②細(xì)菌性痢疾、阿米巴痢疾、慢性血吸蟲病、腸結(jié)核、缺血性結(jié)腸炎、放射性結(jié)腸炎、結(jié)腸癌、不明原因的一過性結(jié)腸炎等;③嚴(yán)重精神疾病與認(rèn)知障礙,無法配合相關(guān)試驗進(jìn)行;④合并惡性腫瘤、惡性血液病、肝硬化、糖尿病、腎功能衰竭、重度脂肪肝、肥胖患者;⑤臨床資料不全,近期患有急性感染性胃腸疾病或上消化道糜爛/潰瘍者;⑥近期內(nèi)服用益生菌制劑、非甾體類抗炎藥和他汀類藥物者。

      1.2 方法

      1.2.1 ANCA、PAB評價金標(biāo)準(zhǔn)? 參考2018年中華醫(yī)學(xué)會消化病學(xué)會炎癥性腸病學(xué)組《炎癥性腸病診斷與治療的共識意見》[5],以結(jié)腸鏡檢查結(jié)果為本試驗金標(biāo)準(zhǔn)。

      1.2.2 IL-6、ANCA、PAB? 空腹抽取患者血樣5 ml,采用酶聯(lián)免疫檢測法檢測受試者的血清IL-6水平。采用間接免疫熒光薄片法檢測ANCA、PAB水平,試劑盒均購自德國歐蒙公司,取25 μl血清采用PBS按1∶10比例稀釋,稀釋血清移入樣板反應(yīng)區(qū),封膜,37℃ 30 min,移出反復(fù)沖洗3次,加入20 μl熒光標(biāo)記的抗人IGg,室溫孵育30 min,顯微鏡下熒光細(xì)胞核周圍呈線條狀分布者為陽性。

      1.2.3 腸道菌群檢測? 全部受檢對象于結(jié)腸鏡檢查當(dāng)日留取新鮮糞便樣本5~10 g,放置于密閉無菌便盒中,常溫30 min送檢,根據(jù)光岡知足法進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)、鑒定及菌落檢測。腸桿菌(enterobacillus,EMB)、腸球菌(enterococcus,EC)及酵母菌(saccharomycetes,SB)采用需氧菌培養(yǎng)基培養(yǎng);雙歧桿菌(bifidobacteria,BL)、擬桿菌(bacteroidetes,BD)、真桿菌(eubacterium sp,ES)采用厭氧培養(yǎng)基。細(xì)菌經(jīng)革蘭染色,生化試驗進(jìn)行鑒定,計算各組樣本所含菌群數(shù)量,結(jié)果以對數(shù)LgN(CFU/g)表示。

      1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

      采用SPSS 22.0統(tǒng)計學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計量資料用(x±s)表示,采用t檢驗,計數(shù)資料用[n(%)]表示,采用χ2檢驗,P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義,IL-6、ANCA、PAB及各腸道菌群指標(biāo)的診斷效能采用ROC曲線表示。

      2 結(jié)果

      2.1 各組的ANCA、PAB陽性率比較

      IBD組的ANCA、PAB、EC、SB、BL、BD、ES陽性率顯著高于疾病對照組、健康對照組(P<0.05);聯(lián)合檢測的陽性率均顯著高于單獨(dú)檢測,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

      2.2 ANCA、PAB、腸道菌群及聯(lián)合檢測對IBD的診斷價值

      UC組的ANCA、ES及腸道菌群聯(lián)合檢測的敏感度、陽性預(yù)測值均顯著高于CD組,PAB檢測敏感度顯著低于CD組(P<0.05);UC組的SB、ANCA+PAB+腸道菌群聯(lián)合檢測陰性預(yù)測值均顯著高于CD組(P<0.05)。見表3。

      2.3 三組的IL-6、腸道菌群水平比較

      IBD組、疾病對照組、健康對照組的IL-6、SB、EMB、EC、BL、BD、ES水平比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

      2.4 ANCA、PAB、IL-6、腸道菌群及聯(lián)合檢測對IBD的ROC曲線分析

      聯(lián)合檢測的敏感度、特異度均顯著高于單獨(dú)檢測,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表5、圖1。

      3 討論

      IBD臨床表現(xiàn)為反復(fù)腹痛、腹瀉、黏液膿血便、腸梗阻和腸穿孔,甚至出現(xiàn)各種全身并發(fā)癥如視物模糊、癌變等[6]。研究[7]顯示其發(fā)病率呈顯著上升趨勢。超過40%的IBD患者伴有腸外表現(xiàn),可涉及多個器官系統(tǒng),包括關(guān)節(jié)、皮膚、眼、肝、膽、肺、腎臟、免疫或血液系統(tǒng)等[8]。研究[9]發(fā)現(xiàn)IBD發(fā)生是環(huán)境因素、飲食習(xí)慣、遺傳基因、腸道菌群及患者自身免疫因素等共同作用的結(jié)果。目前尚無可治愈的藥物,且病情反復(fù),嚴(yán)重影響患者的生活質(zhì)量。

      IBD相關(guān)抗體、血清標(biāo)志物、腸道菌群等檢測因其簡單方便、無創(chuàng)經(jīng)濟(jì)等優(yōu)勢,近年來得到廣泛關(guān)注[10]。IBD患者存在不同程度的腸道菌群紊亂現(xiàn)象,其中梭狀芽孢菌呈降低趨勢,而硝酸鹽還原菌、大腸桿菌等數(shù)量則呈顯著增長趨勢[11,12]。

      ANCA是一種以中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞胞漿中溶酶體酶發(fā)生反應(yīng)的抗體,研究[13]發(fā)現(xiàn)ANCA在IBD相關(guān)的靶抗原多數(shù)為宿主反應(yīng)中的中性粒細(xì)胞殺傷微生物的活性蛋白。PAB是一種針對胰腺泡的糖基磷脂醇的錨定蛋白,UC和CD患者中均可檢測到PAB。本研究顯示,UC、CD患者ANCA陽性率分別為48.65%、7.14%,疾病對照組與健康對照組分別為9.52%、0;相關(guān)研究[14]發(fā)現(xiàn)UC患者ANCA陽性率為50%~70%,CD患者為2%~28%、正常人為0~2.5%,且IBD組的ANCA、PAB陽性率顯著高于對照組,提示ANCA抗體可用于輔助檢測IBD,但研究[15]發(fā)現(xiàn)在免疫性疾病如自身免疫性肝病中可檢測出ANCA,因此臨床診斷IBD應(yīng)將免疫性疾病納入考量。本研究結(jié)果顯示,UC、CD患者的PAB陽性率分別為24.32%、48.21%,略高于國外研究[16]。但值得關(guān)注的是,未行無麥膠飲食的乳糜瀉患者中PAB陽性率與CD患者相近,因此,IBD患者診斷時應(yīng)參考多指標(biāo)共同評定[17]。

      本研究顯示,UC組的ANCA、ES及腸道菌群聯(lián)合檢測敏感度、陽性預(yù)測值均顯著高于CD組,PAB檢測敏感度顯著低于CD組;UC組的SB、ANCA+PAB+腸道菌群聯(lián)合檢測陰性預(yù)測值均顯著高于CD組,進(jìn)一步證實ANCA在UC患者中表達(dá)更高,CD組表達(dá)更低,腸道菌群可輔助IBD診斷。測量不同對照組腸道菌群數(shù)量顯示,IBD患者IL-6水平顯著升高,提示炎癥因子水平升高是IBD發(fā)生的前期征兆,F(xiàn)aubion等[18]研究與本研究相似。此外,IBD患者SB、EMB、EC、BL、BD水平顯著上升,ES水平顯著下降。表明腸道菌群發(fā)生紊亂,厭氧菌數(shù)量升高,梭狀芽胞桿菌數(shù)量顯著降低是IBD發(fā)生的標(biāo)志之一。主要原因為正常生理狀態(tài)下,腸道內(nèi)菌群之間存在相互依存、制約機(jī)制,而腸道微生態(tài)失衡,導(dǎo)致拮抗病原微生物定植抗力減弱,腸黏膜屏障功能受損,腸道通透性增加,繼而引發(fā)慢性炎癥性疾病[19]。此外,ROC分析結(jié)果顯示,IL-6、ANCA、PAB聯(lián)合腸道菌群檢測的敏感度、特異度分別為100.0%、93.3%,表明聯(lián)合多指標(biāo)檢測可輔助診斷IBD,與楊文宏等[20]研究結(jié)果一致。本研究樣本量較少,研究結(jié)論難免存在一定偏倚。

      綜上所述,IBD患者菌群結(jié)構(gòu)改變顯著,炎癥因子表達(dá)水平顯著升高,IL-6、ANCA、PAB及腸道菌群水平可輔助用于IBD診斷。

      [參考文獻(xiàn)]

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      (收稿日期:2021-09-27)

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