硒化低分子果膠的制備與結構表征及抗氧化活性

陶 雯，張 瑞，楊 寧，吳慕慈，何靜仁,*

（1.武漢輕工大學硒科學與工程現代產業(yè)學院，湖北 武漢 430023；2.武漢輕工大學食品科學與工程學院，湖北 武漢 430023）

果膠是一種具有重要價值的水溶性膳食纖維，廣泛存在于高等植物的根、莖、葉和果實等組織器官的細胞壁中，與纖維一起具有結合植物組織的作用，相對分子質量介于5×10～3×10之間，主鏈由半乳糖醛酸經-1,4糖苷鍵連接而成，側鏈由阿拉伯糖、鼠李糖和半乳糖等中性多糖組成。天然果膠作為聯(lián)合國糧農組織/世界衛(wèi)生組織推薦的不受添加量限制的安全食品添加劑，廣泛用于食品工業(yè)，主要用作膠凝劑、增稠劑、乳化劑和穩(wěn)定劑；還可以用于制藥工業(yè)，對高血壓、便秘等慢性疾病有一定療效，并可降低血糖、血脂，減少膽固醇，解除鉛中毒，同時還具有抗氧化、防癌、抗癌等作用。國內果膠資源豐富，但加工利用率低，大部分原料都被直接丟棄，蘋果果膠是僅次于柑橘果膠的第二大商品果膠來源。作為一類多糖，果膠生理功效和生物活性與其分子質量、分支度、聚合度以及溶液中的高級構象等相關。天然果膠由于分子質量較大，食用后不能被腸道吸收，只有部分在大腸內發(fā)酵，因此對人體沒有顯著功效。低分子果膠由于分子質量、酯化度降低，更容易被小腸微絨毛吸收而進入血液循環(huán)，從而更好地發(fā)揮其藥用價值。

硒是人體必需的14種微量元素之一，參與維持機體健康和生長發(fā)育，是谷胱甘肽過氧化物酶的活性中心，在人類防癌、延緩衰老、提高機體免疫力、預防治療心血管疾病、克山病和大骨節(jié)病等方面發(fā)揮重要作用。世界衛(wèi)生組織對健康成人的硒推薦攝入量為55 μg/d，由于人體自身不能合成硒，只能從膳食中獲得硒，因此補硒勢在必行。自然界中硒主要以無機硒和有機硒的形式存在，無機硒包括硒單質、亞硒酸鹽、硒酸鹽等，有機硒主要以硒蛋白、硒多糖、硒核酸等形式存在。由于無機硒的毒性較大，使用具有一定限制，而有機硒具有吸收率和生物活性高、毒性低、環(huán)境污染小等特點，因此新型有機硒補充劑的開發(fā)是目前研究的一個熱點。

硒多糖作為一種有機硒化合物，兼具硒和多糖的雙重生物功效。硒多糖的來源主要有2種，一種是從植物中提取天然硒多糖，另一種是利用多糖和硒人工合成硒多糖，但前者硒含量較低。因此，本研究以蘋果果膠為原料，采用果膠酶水解、硝酸-亞硒酸鈉法超聲輔助制備硒化低分子果膠，對其進行結構表征，并考察其抗氧化能力、-葡萄糖苷酶抑制作用，以期為果膠的精深加工利用以及有機硒天然食品補充劑開發(fā)提供理論基礎。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

果膠（來源：蘋果；型號：APA185；酯化度60.9%；半乳糖醛酸含量＞65%） 煙臺帝斯曼安德利果膠股份有限公司。

亞硒酸鈉（≥97%）、硝酸、鹽酸（均為優(yōu)級純）、溴化鉀（色譜純） 國藥集團化學試劑有限公司；氫氧化鈉、硼氫化鉀（均為優(yōu)級純） 天津科密歐化學試劑有限公司；硒標準品 國家有色金屬及電子材料分析測試中心；果膠酶（EC3.2.1.15，來源于，5 000 U/mL） 德國Meker公司；-葡萄糖苷酶 上海阿拉丁生化科技股份有限公司；-(+)-半乳糖醛酸（≥98%） 上海源葉生物科技有限公司；單糖標準品 揚州博睿糖生物技術有限公司；醋酸銨、醋酸鈉（均為優(yōu)級純） 美國Thermo Fisher公司；A052-1-1抑制與產生超氧陰離子自由基測定試劑盒、A018-1-1羥自由基清除能力試劑盒 南京建成生物工程研究所；其他試劑均為分析純。

1.2 儀器與設備

SB-5200DTD超聲清洗機 寧波新芝生物科技股份有限公司；Multiwave Pro微波消解儀 奧地利安東帕公司；AFS-8530原子熒光光度計 北京海光儀器有限公司；6700傅里葉變換紅外光譜儀 美國尼高力儀器公司；ICS5000離子色譜儀、E220紫外-可見分光光度計美國Thermo Fisher公司；S01b10873熱重分析儀梅特勒-托利多儀器公司；Zetasizer Nano ZS動態(tài)光散射儀英國馬爾文公司；EnSpire多功能酶標儀 美國珀金埃爾默公司。

1.3 方法

1.3.1 硒化果膠的制備

準確稱取1 g果膠于錐形瓶中，依次加入100 mL體積分數0.5%硝酸溶液、1 mL 1 g/mL亞硒酸鈉溶液，于50 ℃（體系pH 3.19±0.01）充分攪拌至完全溶解，置于超聲波清洗器（240 W、75 ℃）中反應6 h，冷卻至室溫。用0.1、1.0 mol/L NaCO溶液調節(jié)pH值至6，真空濃縮至原體積1/2，加入4 倍體積無水乙醇，醇沉過夜，于4 000 r/min離心25 min，棄上清液，沉淀瀝干后加入70 mL去離子水溶解，使用截留相對分子質量500的透析袋透析48 h，通過抗壞血酸檢測透析液直至無紅色時結束，未透過液經濃縮、冷凍干燥得硒化果膠。

1.3.2 低分子果膠的制備

參考杜麗娟等的方法，略有修改。準確稱取1 g果膠，加入8 μL果膠酶，用檸檬酸-磷酸氫二鈉緩沖液（pH 4.0）定容至100 mL，攪拌分解（50 ℃、3 h），沸水浴中加熱滅酶10 min，冷卻后6 000 r/min離心10 min取上清液，上清液真空濃縮至原體積的1/4，用截留相對分子質量500的透析袋透析48 h除去小分子雜質和鹽分，冷凍干燥得低分子果膠。

1.3.3 硒化低分子果膠的制備

參考上述硒化果膠制備方法稍作修改，超聲波清洗器反應后，用0.1、1.0 mol/L NaCO溶液調節(jié)pH值至6，真空濃縮至原體積1/2，用截留相對分子質量500的透析袋透析48 h，通過抗壞血酸檢測透析液直至無紅色時結束，未透過液經濃縮、冷凍干燥得硒化低分子果膠。

1.3.4 低分子果膠、硒化果膠、硒化低分子果膠得率計算

分別按式（1）～（3）計算：

1.3.5 相對分子質量測定

采用體積排阻色譜-示差檢測器-激光光散射聯(lián)用技術測定樣品相對分子質量與分布，按Zimm擬合計算果膠分子重均分子質量（m）。

測試條件：色譜柱：Aglient PL Aquagel-OH凝膠色譜柱（8.0 mm×300 mm）；流動相：0.2 mol/L醋酸銨；流速0.7 mL/min；進樣量20 μL；柱溫30 ℃。

1.3.6 單糖組成測定

采用咔唑硫酸法測定半乳糖醛酸含量，離子色譜法測定中性糖組成及含量，取單糖標準品配制混合標準溶液。根據絕對定量方法測定不同單糖含量。準確稱取10 mg樣品置于安培瓶中，加入10 mL 3 mol/L三氟乙酸溶液，120 ℃水解3 h。準確吸取酸水解液轉移至試管中氮吹至干，加入10 mL蒸餾水旋渦混合，吸取100 μL加入900 μL去離子水，12 000 r/min離心5 min，取上清液進行離子色譜分析。

測試條件：Dionex CarbopacPA20色譜柱（3 mm×150 mm）；流動相：A：HO，B：15 mmol/L NaOH溶液，C：15 mmol/L NaOH和100 mmol/L NaOAC溶液；梯度洗脫：0～18 min，98.8% A、1.2% B；18.1～30 min，50% A、50% B；30.1～46 min，100% C；46.1～50 min，100% B；50.1～80 min，98.8% A、1.2% B；流速0.3 mL/min；進樣量5 μL；柱溫30 ℃；電化學檢測器。

1.3.7 傅里葉變換紅外光譜測定

取2 mg粉末試樣、200 mg純溴化鉀研細均勻，置于模具中，在油壓機上壓成透明薄片，將樣片放入紅外光譜儀中測試，波數范圍4 000～400 cm，掃描次數32，分辨率4 cm。

1.3.8 紫外光譜分析

配制1 mg/mL樣品溶液，采用紫外-可見分光光度計進行掃描，掃描波長范圍190～400 nm。

1.3.9 熱重分析

參考商龍臣等的方法稍作修改，樣品40 ℃干燥2 h，在氧化鋁坩堝中加入樣品5.00 mg，以空坩堝作為對照，程序升溫速率10 ℃/min，掃描溫度30～800 ℃，氮氣流速20 mL/min。

1.3.10 粒徑和電位測定

參考連科迅的方法稍作修改。用蒸餾水配置1 mg/mL樣品溶液，采用激光粒度儀檢測樣品的粒徑和電位。

1.3.11 蛋白質含量測定

采用碧云天Cat No.P0006 Braford蛋白濃度測定試劑盒測定。

1.3.12 硒含量測定

采用GB 5009.93—2017《食品中硒的測定》中氫化物原子熒光光譜法，稍作修改測定硒含量。

準確稱取0.1 g樣品，加入7 mL硝酸，振搖混合均勻后放入微波消解儀中消解，消解結束待冷卻后，在電熱板上180 ℃繼續(xù)加熱至消化液剩余體積約為1 mL，冷卻后再加5 mL 50%鹽酸溶液，繼續(xù)180 ℃加熱至0.5 mL，冷卻，轉移至100 mL容量瓶中，用10%鹽酸溶液定容、混勻，待測。

以1 mol/L HCl溶液為載流，2%硼氫化鉀和0.5 g/100 mL氧化鈉混合溶液為還原劑，測定0、20、40、60、80、100 μg/L硒標準溶液的熒光強度，以硒標準溶液質量濃度為橫坐標、熒光強度為縱坐標繪制標準曲線。樣品中硒含量按式（4）計算：

式中：為試樣中硒的含量/（μg/g）；為試樣溶液中硒的質量濃度/（μg/L）；為空白溶液中硒的質量濃度/（μg/L）；為試樣消化液總體積/mL；為試樣質量/g；1 000為換算系數。

1.3.13 羥自由基清除能力測定

采用羥自由基試劑盒進行測定，以VC作為陽性對照。

1.3.14 超氧陰離子自由基清除能力的測定

采用抑制與產生超氧陰離子自由基測定試劑盒進行測定，以VC作為陽性對照。

1.3.15-葡萄糖苷酶抑制作用的測定

參考Luyen等的方法稍作修改。配制不同質量濃度樣品溶液（0.5、1、1.5、2、2.5、3 mg/mL）。取50 μL樣品溶液，加入50 μL磷酸鹽緩沖液（pH 6.8）、50 μL 0.5 U/mL-葡萄糖苷酶溶液，37 ℃溫浴15 min后，加入100 μL 5 mmol/L對硝基苯---吡喃半乳糖苷溶液，37 ℃下溫浴10 min，加入750 μL 0.20 mol/L NaCO溶液終止反應。以200 μL磷酸鹽緩沖液（pH 6.8）為對照組，不加樣品溶液、加入100 μL磷酸鹽緩沖液（pH 6.8）為空白組，以阿卡波糖作為陽性對照。在405 nm波長處測定吸光度，按式（5）計算樣品對-葡萄糖苷酶的抑制率：

式中：為樣品組吸光度；為對照組吸光度；為空白組吸光度。

1.4 數據處理與分析

采用SPSS 22.0、Origin 9.0、Excel 2010軟件進行數據分析與作圖，利用最小顯著差異法、Duncan多重比較進行差異顯著性分析。

2 結果與分析

2.1 低分子果膠、硒化果膠、硒化低分子果膠得率

低分子果膠的制備方法有酸法水解、物理降解、酶水解等，但酸法水解在加熱條件下降解速率極快，得到大量單糖，不易得到低分子果膠，并且在反應中引入了各種反應試劑，反應難以控制；物理降解不易引入副產物，但生產成本較高。因此，常使用反應條件相對較為溫和、對果膠分子結構幾乎沒有破壞操作工藝簡單的酶解法制備低分子果膠。果膠酶選擇性作用，切斷果膠分子中-1,4糖苷鍵，生成低分子果膠，也可能產生果膠低聚糖等，可通過透析等方式除去。低分子果膠、硒化果膠、硒化低分子果膠得率如表1所示。

表1 低分子果膠、硒化果膠、硒化低分子果膠得率Table 1 Yields of low-molecular-mass pectin, selenylated pectin, and selenylated low-molecular-mass pectin

2.2 相對分子質量分布

如表2所示，果膠的相對分子質量分布較均勻，主要集中在5.165×10，占56.1%，其次是6.491×10、1.881×10，分別占23.6%、17.4%。硒化果膠的相對分子質量較果膠略有提高，且分布比較集中，主要分布于1.148×10～7.574×10，分布比例達99%。酶解后，低分子果膠的相對分子質量明顯降低，主要集中在5.161×10，占72.3%。硒化低分子果膠的相對分子質量主要分布在8.905×10，占61.3%。綜上，說明果膠、低分子果膠經過硒化處理后相對分子質量均略有提高，這可能與果膠羥基被新的硒官能團取代有關。

表2 低分子果膠、硒化低分子果膠、果膠、硒化果膠的相對分子質量分布Table 2 Relative molecular mass distribution of low-molecular-mass pectin,selenylated low-molecular-mass pectin, pectin, and selenylated pectin

2.3 單糖組成

各單糖標準品在離子色譜中的保留時間如圖1所示，2.0 min為溶劑氫氧化鈉，40.0 min為溶劑乙酸鈉。如表3所示，4種果膠多糖都主要由半乳糖醛酸組成，還含有少量鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖，但含量存在一定差異，可能是酶解過程中一些支鏈從糖鏈上斷裂，也有可能是硒化修飾過程中較強的酸性環(huán)境破壞了多糖結構，部分支鏈被降解成單糖或寡糖，在后續(xù)透析過程中被除去。結果表明酶解與硒化處理對果膠的單糖組成不會造成較大影響，均主要以半乳糖醛酸為主鏈、中性糖為側鏈的多糖組成。半乳糖醛酸標準曲線擬合方程為=0.005 2+0.002 9，=0.991 7，在20～100 μg/mL線性范圍內擬合度良好。酶解后，低分子果膠中半乳糖醛酸含量顯著低于果膠（＜0.05），可能是因為酶解過程中產生果膠低聚糖，再經過透析除去。硒化處理后，硒化低分子果膠、硒化果膠半乳糖醛酸含量也較果膠顯著降低（＜0.05），可能是因為硒化反應時，果膠中加入溶劑攪拌預溶產生剪切力，同時使用超聲輔助硒化產生空化效應，從而破壞了半乳糖醛酸羧基的C—O鍵。

圖1 混合單糖標準品離子色譜圖Fig. 1 Ion chromatogram of mixed monosaccharide standards

表3 低分子果膠、硒化低分子果膠、果膠、硒化果膠的單糖組成和含量（以干質量計）Table 3 Monosaccharide composition of low-molecular-mass pectin,selenylated low-molecular-mass pectin, pectin, and selenylated pectin(calculated on a dry mass basis)%

2.4 紅外光譜分析

如圖2所示，3 448 cm處出現的寬峰為O—H伸縮振動，峰形寬鈍，表明不是游離—OH，而是其分子間發(fā)生締合反應；2 926 cm為C—H伸縮振動吸收峰，1 448、1 336 cm為C—H彎曲振動吸收峰，這些均為多糖的典型結構；1 631 cm是自由羧基中C＝O的伸縮振動峰，1 746 cm為酯化羧基中C＝O的伸縮振動峰；1 245、1 104 cm為C—O伸縮振動峰，同時1 245、1 746 cm處的峰表明4種果膠均為酸性多糖。果膠經過酶解后，結構沒有發(fā)生明顯改變，均具有果膠多糖的典型結構。但果膠、低分子果膠經過硒化后，分別在697.49、794.09 cm和768、894.38 cm處出現新的吸收峰，根據研究推測可能是C—O—Se對稱伸縮振動和Se＝O伸縮振動，果膠、低分子果膠作為一種多羥基化合物，經硒化處理后硒與多糖基團以共價鍵相連，主要以亞硒酸酯形式存在。但相較硒化果膠，硒化低分子果膠的硒特征吸收峰出現了一定藍移，可能是因為硒與多糖的結合位點發(fā)生變化。

圖2 低分子果膠、硒化低分子果膠、果膠、硒化果膠的紅外光譜圖Fig. 2 Infrared spectra of low-molecular-mass pectin, selenylated lowmolecular-mass pectin, pectin, and selenylated pectin

2.5 熱重分析

熱穩(wěn)定性是評價物質是否具有生物應用的一個重要特性，常使用熱重分析。樣品質量由于脫水、分解、氧化等隨著時間、溫度的變化而變化。如圖3所示，在30～800 ℃下，果膠、硒化果膠、低分子果膠、硒化低分子果膠的熱重曲線趨勢相似。在30～100 ℃下，果膠、硒化果膠、低分子果膠、硒化低分子果膠發(fā)生脫水，質量略有降低，可能是果膠損失了從環(huán)境中吸收的水分或結合水導致，質量損失分別為9.36%、10.08%、14.02%、15.86%。在200～400 ℃下果膠開始分解，質量損失最大；果膠、硒化果膠、低分子果膠、硒化低分子果膠，在200～250 ℃區(qū)間的質量損失分別為28.50%、23.98%、20.84%、18.44%，說明經酶解、硒化后果膠在此溫度范圍內熱穩(wěn)定性增強；在250～400 ℃區(qū)間的質量損失分別為24.99%、25.23%、27.85%、25.60%，果膠經過酶解、硒化后熱穩(wěn)定性略有降低。600～800 ℃后樣品質量基本恒定，此期間的質量損失主要為加熱分解導致，800 ℃時果膠、硒化果膠、低分子果膠、硒化低分子果膠的剩余質量分別為22.05%、14.57%、14.57%、15.68%。綜合來說，酶解和硒化處理后，果膠熱穩(wěn)定性降低，可能是因為酶解后糖苷鍵發(fā)生斷裂，生成了聚合度較低的低分子果膠；硒化反應時，果膠基團和亞硒酸根結合生成亞硒酸酯，使得產物在較高溫條件下更容易脫水裂解，導致熱穩(wěn)定性降低。

圖3 低分子果膠、硒化低分子果膠、果膠、硒化果膠的熱重分析曲線Fig. 3 TGA curves of low-molecular-mass pectin, selenylated low-molecular-mass pectin, pectin, and selenylated pectin

2.6 紫外光譜分析

如圖4所示，低分子果膠、硒化低分子果膠、果膠、硒化果膠均在200 nm波長附近有吸收峰，該吸收峰為多糖的特征吸收峰，在250～300 nm處有一小的吸收峰，可能含有少量蛋白質，經測定蛋白質含量均小于5%。

圖4 低分子果膠、硒化低分子果膠、果膠、硒化果膠的紫外全波長掃描圖Fig. 4 UV spectra of low-molecular-mass pectin, selenylated low-molecular-mass pectin, pectin, and selenylated pectin

2.7 粒徑和電位分析

研究表明，粒徑越小越易被機體吸收利用并發(fā)揮藥理活性，Zeta電位通過粒子間靜電排斥作用影響粒子在分散液中的穩(wěn)定性，進而影響其生物活性。如表4所示，在質量濃度1 mg/mL下，低分子果膠、果膠經硒化處理后，聚合物分散性指數均顯著降低（＜0.05），分子質量分布變均勻，Zeta電位絕對值均顯著增加（＜0.05），粒徑均降低，其中硒化低分子果膠的聚合物分散性指數最低、Zeta電位絕對值最大，粒徑最小，說明果膠經過酶解、硒化處理后，分子質量分布均勻，粒子在溶液中呈分散狀態(tài)不易凝結和聚集，分散度變高，體系穩(wěn)定性增強。

表4 低分子果膠、硒化低分子果膠、果膠、硒化果膠的粒徑、電位和聚合物分散性指數Table 4 Particle size, potential and polydispersity index of lowmolecular-mass pectin, selenylated low-molecular-mass pectin, pectin,and selenylated pectin

2.8 硒含量

硒含量標準曲線擬合方程為=50.732-13.95，=0.999 7，在0～50 μg/L范圍內線性關系良好。低分子果膠、果膠中幾乎沒有硒，可忽略不計。如表5所示，硒化果膠中硒含量明顯高于硒化低分子果膠，可能與半乳糖醛酸、總糖含量有關。研究表明，硒多糖中的硒一般是通過氫鍵、鹽鍵、范德華力等弱相互作用或者共價鍵與多糖的醛基或羥基相連。

表5 硒化低分子果膠、硒化果膠的硒含量Table 5 Selenium contents of selenylated low-molecular-mass pectin and selenylated pectin

2.9 體外抗氧化活性與α-葡萄糖苷酶抑制作用

硒化可以通過活化多糖異構碳上的氫原子提高多糖的抗氧化活性。如圖5、表6所示，在0～1.5 mg/mL質量濃度范圍內，樣品的羥自由基清除能力隨質量濃度的增加逐漸增強；當質量濃度超過1.5 mg/mL后，硒化低分子果膠、硒化果膠的羥自由基清除能力逐漸降低，低分子果膠、果膠的羥自由基清除能力趨于平緩。根據半最大效應濃度（concentration for 50% of maximal effect，EC），羥自由基清除能力依次為：VC＞硒化低分子果膠＞低分子果膠＞果膠＞硒化果膠。在0～1 mg/mL質量濃度范圍內，樣品超氧陰離子自由基清除能力隨著質量濃度的增加呈線性增強，當質量濃度大于1 mg/mL時趨近平緩，且酶解、硒化處理增強了果膠清除超氧陰離子自由基的能力。根據EC可知，超氧陰離子自由基清除能力依次為：VC＞硒化低分子果膠＞硒化果膠＞低分子果膠＞果膠。

氧化應激和糖尿病代謝綜合征密切相關，抑制-葡萄糖苷酶活力對緩解餐后血糖升高和減少糖尿病并發(fā)癥具有重要意義。低分子果膠、硒化低分子果膠、果膠、硒化果膠、阿卡波糖均能抑制-葡萄糖苷酶活力，且呈量效關系，根據EC可知，-葡萄糖苷酶活力抑制作用依次為硒化低分子果膠＞阿卡波糖＞果膠＞低分子果膠＞硒化果膠，硒化低分子果膠抑制-葡萄糖苷酶能力強于阿卡波糖（＜0.05）。與本研究結果相似，硒化南瓜多糖、硒化新疆烏拉爾甘草多糖、硒化榆樹根多糖的體外抗氧化活性均明顯強于未硒化多糖。以上結果表明，硒化低分子果膠不僅能作為一種有機硒補充劑，還具有一定的體外抗氧化活性，以及輔助降血糖、降血脂的潛力。

圖5 低分子果膠、硒化低分子果膠、果膠、硒化果膠的體外抗氧化活性與α-葡萄糖苷酶抑制作用Fig. 5 In vitro antioxidant activity and α-glucosidase inhibitory effect of low-molecular-mass pectin, selenylated low-molecular-mass pectin,pectin and selenylated pectin

表6 低分子果膠、硒化低分子果膠、果膠、硒化果膠體外抗氧化活性與α-葡萄糖苷酶抑制作用的EC50Table 6 EC50 for in vitro antioxidant activity and α-glucosidase inhibitory effect of low-molecular-mass pectin, selenized low-molecularmass pectin, pectin and selenized pectin

3 結 論

多糖的活性與分子質量、溶解度、黏度、初級結構、高級結構等相關。相對分子質量越大，分子體積越大，越不利于多糖跨膜進入生物體內發(fā)揮生物學活性，相對分子質量小的多糖更容易結合活性位點，但是相對分子質量過低，又無法形成活性聚合結構。果膠作為一種高分子多糖常因其食品纖維功能被用作功能性食品材料，但其較大相對分子質量和黏度導致的操作不便性限制了其應用。近年來大量研究表明，硒多糖較普通多糖具有更強的抗氧化、降血糖活性等，因此受到廣泛關注。本研究以蘋果果膠為原料，分別制備低分子果膠、硒化低分子果膠、硒化果膠，結果表明，硒化低分子果膠的得率為（78.07±1.66）%，硒含量為（148.29±1.97）μg/g，半乳糖醛酸含量為（68.02±3.21）%，相對分子質量多為8.905×10，占61.3%。4種多糖均由鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖、半乳糖醛酸組成，但含量存在一定差異，在200 nm波長附近均具有多糖的特征吸收峰，硒化低分子果膠粒徑為（361.2±12.0）nm，具有較好的分散性，但熱穩(wěn)定性降低。傅里葉變換紅外光譜中，果膠酶解前后結構無明顯差異，但硒化后出現Se＝O、C—O—Se新吸收峰。此外，果膠、硒化果膠、低分子果膠、硒化低分子果膠均具有較好的羥自由基、超氧陰離子自由基清除能力以及-葡萄糖苷酶活力抑制能力，且硒化低分子果膠的效果最強。硒化低分子果膠克服了果膠黏度大、分子質量大的缺點，具有硒和低分子果膠的雙重功效，更容易被腸道吸收利用，且具有一定體外抗氧化活性，這可能與酶解后更多活性基團的暴露，或分子質量降低有利于其空間結構舒展并與自由基的結合有關；但體外抗氧化實驗易存在假陽性結論，因此還需動物和細胞實驗等進一步探究硒化低分子果膠生物活性的具體機制。