王 娟 查青青 雷 敏 于 文

西安開米股份有限公司，陜西西安，710075

氯氰菊酯是一種擬除蟲菊酯類農(nóng)藥，是模擬天然除蟲菊素由人工合成的一類殺蟲劑，有效成分是天然菊素。市面上除螨洗衣液中大多都添加氯氰菊酯類成分，但目前除螨洗衣液中氯氰菊酯含量的檢測方法是一個空白。需要檢測它們是否添加防蟲防蛀成分氯氰菊酯，所以目前文獻中大多是關(guān)于食品中氯氰菊酯的檢測方法[1-4]，尚無洗衣液中氯氰菊酯含量的檢測方法。除螨洗衣液中含有大量表面活性劑和功能成分，成分較復雜，干擾因素較多，故需對高效液相色譜法加以調(diào)整。為此，采用高效液相色譜法，確定了適宜的檢測波長，有效去除干擾，以期建立一種準確性高、可靠性強、適用性廣的檢測方法。

1 實驗部分

1.1 儀器及試劑

儀器：UV6000LP（二極管陣列檢測器）液相色譜儀，Thermo Finnigan公司。

甲醇：色譜純，德國Merck公司。

氯氰菊酯：標準品（純度≥99.0%，上海哈靈生物科技有限公司）。

無水乙醇：分析純，安徽安特食品股份有限公司。冰醋酸：分析純，重慶北碚精細化工廠。超純水：自制。

1.2 色譜條件

色譜柱：K ro m a s i l 1 0 0-5 C 1 8 柱（1 5 0 mm×4.6 mm，5 μm）。

柱溫：室溫。

進樣方式：20 μl閥進樣。

檢測波長：235 nm。

流速：1.2 ml/min。

流動相：甲醇∶純水∶醋酸 = 80∶20∶0.1，用0.45 μm濾膜過濾。

洗脫方式：等度洗脫。

1.3 溶液的配制及樣品處理

1.3.1 流動相的配制

流動相：將甲醇、純水、冰醋酸按80∶20∶0.1的比例混勻，用0.45 μm濾膜過濾，再用超聲振蕩脫氣10 min，備用。

1.3.2 標準溶液的制備

稱取0.2500 g氯氰菊酯標準樣品于100 ml容量瓶中，用無水乙醇稀釋至刻度，再繼續(xù)稀釋配制一系列不同質(zhì)量濃度的樣品（2.06 μg/ml、4.12 μg/ml、25.74 μg/ml、51.48 μg/ml、102.96 μg/ml、257.4 μg/ml）備用。

1.3.3 樣品溶液的制備

精確稱量2.0000 g樣品于50 ml容量瓶中，用無水乙醇稀釋，超聲振蕩，定容至刻度備用。

2 結(jié)果和討論

2.1 流動相的選擇

主要進行甲醇/水/醋酸與乙腈/水/醋酸的篩選，并根據(jù)實際情況調(diào)整其配比，以達到最佳分離效果和減少干擾，最后比較看哪個體系比較適合洗衣液中氯氰菊酯的檢測。實際實驗過程中發(fā)現(xiàn)乙腈/水/醋酸體系峰分不開。并對甲醇體系與乙腈體系進行比較分析，總結(jié)出甲醇∶純水∶醋酸 = 80∶20∶0.1（體積比，v/v）、梯度洗脫能達到最佳分離效果、基線平穩(wěn)和減少干擾，比較適合本項目檢測。

2.2 檢測波長的選擇

氯氰菊酯最大吸收波長（圖1）為235 nm，其次為277 nm。由于氯氰菊酯紫外吸收峰不大，在277 nm處氯氰菊酯的吸收峰較小，選擇235 nm作為液相檢測波長，其目標色譜峰與其他色譜峰分離度高（圖2、圖3），干擾峰少，提高了樣品中氯氰菊酯的檢測精度，故選擇235 nm作為檢測波長。

2.3 線性關(guān)系

圖1 氯氰菊酯的紫外光譜圖

圖2 235 nm處除螨洗衣液溶液的液相圖譜

圖3 235 nm處氯氰菊酯的液相圖譜

在上述液相色譜條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，采用濃度-峰面積外標法定量，配制質(zhì)量濃度為2.06 μg/ml、4.12 μg/ml、25.74 μg/ml、51.48 μg/ml、102.96 μg/ml、257.4 μg/ml標準溶液進樣分析。實驗數(shù)據(jù)見表1，由實驗得線性回歸方程為y =3×10-5X+0.5238，r2= 0.9997，其中y為氯氰菊酯濃度（μg/ml）、X為氯氰菊酯峰面積、r為相關(guān)系數(shù)，r值大于0.999，說明在氯氰菊酯濃度2.06～257.4 μg/ml內(nèi)線性關(guān)系良好。洗衣液樣品黏度較高，需要稀釋定容后進樣檢測。

2.4 重復性

精確稱取0.2500 g含氯氰菊酯的樣品于100 ml容量瓶中，用無水乙醇溶解并稀釋到刻度、搖勻，再吸取1 ml上述溶液于100 ml容量瓶中，用無水乙醇稀釋到刻度，搖勻。按此方法配制6份樣品溶液，進行6次檢測，實驗結(jié)果見表2。

由表2中實驗結(jié)果可知，此樣品檢測結(jié)果RSD為3.22%，說明方法誤差小，具有良好的重復性。

表1 標準曲線溶液

表2 重復性實驗

2.5 精密度

精確稱取0.2500 g氯氰菊酯樣品于100 ml容量瓶中，用無水乙醇溶解并稀釋到刻度，搖勻；再稀釋兩次，至2 μg/ml，備用。將此標準溶液，檢測6次，實驗結(jié)果見表3。

由表3中實驗結(jié)果可知， RSD為0.32%，說明方法誤差小，精密度比較好。

表3 精密度實驗

2.6 回收率

回收率實驗采取在已知含量（氯氰菊酯含量2.17 μg/ml）的市售樣品1作為基質(zhì)樣品，加入已知質(zhì)量濃度的氯氰菊酯標準溶液；精確稱量2.0000 g含氯氰菊酯的樣品于50 mL容量瓶中，加入1 ml或2 ml濃度為102.96 μg/ml氯氰菊酯標準溶液，用無水乙醇溶解并稀釋至刻度，超聲振蕩，定容至刻度備用，利用選定的色譜條件進行分析，實驗結(jié)果見表4。

表4 回收率實驗（n＝6）

由表4可知，回收率在100.19%～101.35%之間，滿足分析要求。

2.7 市售樣品的測試結(jié)果

精確稱量2.0000 g市售樣品于50 ml容量瓶中，用無水乙醇稀釋，超聲振蕩，定容至刻度備用。測定樣品中的氯氰菊酯含量，實驗結(jié)果見表5。

由表5中實驗結(jié)果可知，兩組市售樣品的六次結(jié)果的RSD分別為1.03%和2.84%，說明方法誤差小，平行性比較好。

3 結(jié)論

采用高效液相色譜法測定洗衣液中氯氰菊酯的含量方法簡便快速，精密度高。標準溶液在2～257.4 μg/ml線性相關(guān)，回收率為100.19%～101.35%。此方法精確、可靠，可作為除螨洗衣液產(chǎn)品質(zhì)量控制的檢測方法。

表5 樣品中的氯氰菊酯的測試結(jié)果