付薇,陳偉,王小利,周麗,覃濤英,韓永芬*,孟軍江
(1貴州省草業(yè)研究所,貴州貴陽 550006;2貴州金農(nóng)富平生態(tài)農(nóng)牧科技有限公司,貴州銅仁 554100)
【研究意義】高丹草(×)是由飼用高粱[(L.)Moench]和蘇丹草[(Piper).Stapf]雜交產(chǎn)生的禾本科高光效C4植物,其鮮草產(chǎn)量高,再生能力強(qiáng)、抗倒伏、粗蛋白質(zhì)含量高,飼喂家畜消化率高、適口性好(白春生等,2020)。6—9月是高丹草的生長(zhǎng)旺季,集中生長(zhǎng)通常造成鮮草過剩,利用乳酸菌發(fā)酵迅速降低體系pH,最大程度減緩植物呼吸,抑制好氧微生物生長(zhǎng),是目前長(zhǎng)效保存高丹草的常用辦法。【前人研究進(jìn)展】國(guó)內(nèi)學(xué)者從營(yíng)養(yǎng)供給、留茬高度、混合青貯等方面對(duì)高丹草發(fā)酵效果開展了一定研究。白春生等(2020)通過不同施氮量和留茬高度開展高丹草發(fā)酵品質(zhì)比較研究,結(jié)果表明施氮量300 kg/ha時(shí),高丹草青貯發(fā)酵品質(zhì)良好,留茬高度從15 cm增至60 cm,可明顯改善高丹草青貯飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值;張歡等(2020)、郭暉(2021)開展高丹草與紫花苜?;熨A比例研究,結(jié)果表明混合高丹草能顯著降低青貯pH,各混貯比例間發(fā)酵品質(zhì)差異顯著;尤思涵等(2021)研究高丹草與黑麥草混貯效果,結(jié)果表明高丹草與黑麥草以3∶7比例混貯,可獲得最高乳酸值和乳酸菌數(shù)量。有研究發(fā)現(xiàn),添加適宜乳酸菌可快速主導(dǎo)發(fā)酵,有效增加環(huán)境乳酸含量、加速青貯進(jìn)程,對(duì)改善底物營(yíng)養(yǎng)品質(zhì)有著積極的促進(jìn)作用(許冬梅等,2017;周俊華等,2020);但不同類型乳酸菌具有不同的發(fā)酵功能,底物種類、乳酸菌類別、菌系間協(xié)同作用等多種因素均會(huì)對(duì)青貯的終期發(fā)酵效果產(chǎn)生不同程度的影響(Liu et al.,2016;Oliveira et al.,2017)。植物乳桿菌()和戊糖片球菌()是青貯常見的同型發(fā)酵乳酸菌,在快速增加乳酸含量、降低pH和減緩營(yíng)養(yǎng)損失方面效果顯著(關(guān)皓等,2017);李小鈴等(2019)利用植物乳桿菌、戊糖片球菌和食竇魏斯氏菌()復(fù)合添加發(fā)酵扁穗牛鞭草,其微生物菌群和感官品質(zhì)最優(yōu),乳酸含量最高。短乳桿菌()為異型發(fā)酵乳酸菌,青貯時(shí)能產(chǎn)生大量抑制酵母菌、霉菌等好氧微生物生長(zhǎng)的乙酸(黃峰等,2019)。徐生陽等(2019)研究指出,短乳桿菌對(duì)防止全株玉米青貯有氧腐敗變質(zhì)有顯著作用?!颈狙芯壳腥朦c(diǎn)】不同乳酸菌復(fù)合添加對(duì)不同作物青貯效果的影響有所差異(苗芳等,2017;王旭哲等,2018),但其對(duì)高丹草青貯品質(zhì)及微生物變化的影響研究鮮見報(bào)道?!緮M解決的關(guān)鍵問題】以前期從禾本科牧草中篩選出的植物乳桿菌、戊糖片球菌和短乳桿菌為試驗(yàn)材料,通過單一和復(fù)合乳酸菌添加,探索不同菌劑組配對(duì)高丹草青貯效果的影響,為高丹草優(yōu)良青貯菌劑的研發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。
青貯原料為蜀草1號(hào)高丹草,于2018年4月12日播種于貴州省草業(yè)研究所松桃縣高產(chǎn)飼草基地,種植面積0.67 ha,種植行距50 m×50 m,2018年7月31日蠟熟初期收割。供試菌種是貴州省草業(yè)研究所前期從禾本科牧草中分離獲得的植物乳桿菌(保存編號(hào)LP06)、戊糖片球菌(保存編號(hào)PP02)和短乳桿菌(保存編號(hào)LBR02)。
將高丹草晾曬至水分含量約65%,切碎至3~5 cm長(zhǎng)度,裝入聚乙烯袋(塑料袋規(guī)格為600 mm×500 mm),每袋1500 g。設(shè)8個(gè)菌劑添加處理:(1)CK(無乳 酸 菌);(2)LP06;(3)PP02;(4)LBR02;(5)F-1(LP06∶PP02=1∶1);(6)F-2(LP06∶LBR02=1∶1);(7)F-3(PP02∶LBR02=1∶1);(8)F-4(LP06∶PP02∶LBR02=1∶1∶1),每處理3次重復(fù),乳酸菌添加量5×10CFU/g。按10 mL/kg的總劑量混合各乳酸菌組合,10倍無菌蒸餾水稀釋后均勻噴灑至高丹草原料上,真空密封機(jī)抽氣密封,常溫貯藏60 d。
青貯60 d后開窖,對(duì)各處理進(jìn)行感官品質(zhì)評(píng)定,測(cè)定微生物數(shù)量、發(fā)酵品質(zhì)和營(yíng)養(yǎng)成分。
1.3.1 感官品質(zhì)評(píng)定采用德國(guó)農(nóng)業(yè)協(xié)會(huì)(Deutche Landwirtschaftes Gesellschaft,DLG)評(píng)分方法,根據(jù)氣味、結(jié)構(gòu)和色澤3項(xiàng)指標(biāo)對(duì)各處理青貯品質(zhì)感官進(jìn)行評(píng)定,總分20分,其中氣味14分,結(jié)構(gòu)4分,色澤2分,得分16~20分為優(yōu)等,10~15分為良等,5~9分為中等,0~4分為下等。
1.3.2 微生物數(shù)量測(cè)定包括乳酸菌、酵母菌和霉菌,稱取20 g樣品于180 mL無菌生理鹽水(0.85%NaCl)中,4℃下振蕩1 h后制備系列梯度稀釋液(10~10)(李小鈴等,2019)。各微生物均采用菌落計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù),將稀釋液涂布于MRS固體培養(yǎng)基,37℃下厭氧培養(yǎng)72 h,統(tǒng)計(jì)乳酸菌菌落數(shù);在馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基上涂布稀釋液,25℃下有氧培養(yǎng)72 h后統(tǒng)計(jì)酵母菌菌落數(shù);于馬丁培養(yǎng)基上涂布稀釋液,25℃下有氧培養(yǎng)72 h,統(tǒng)計(jì)霉菌菌落數(shù)。
1.3.3 發(fā)酵品質(zhì)測(cè)定包括pH、氨態(tài)氮(Ammonium nitrogen,NH-N)、乳酸、乙酸、丙酸和丁酸。pH采用酸度計(jì)(PHS-25)測(cè)定;NH-N含量采用苯酚—次氯酸鈉比色法分析,乳酸及有機(jī)酸采用高效液相色譜法分析(Broderick and Kang,1980)。
1.3.4 營(yíng)養(yǎng)成分測(cè)定包括干物質(zhì)(Dry matter,DM)、粗蛋白質(zhì)(Crude protein,CP)、可溶性碳水化合物(Water-soluble carbohydrates,WSC)、酸性洗滌纖維(Acid detergent fiber,ADF)和中性洗滌纖維(Neutral detergent fiber,NDF)。DM和CP含量參照AOAC(2005)的方法測(cè)定,其中DM采用烘干重量法,CP采用凱氏定氮法;WSC含量采用蒽酮—硫酸比色法(Dubois et al.,1956)測(cè)定,ADF和NDF含量采用范氏洗滌纖維法(van Soest et al.,1991)測(cè)定。
使用Excel 2007對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行整理。采用SPSS v18.0進(jìn)行單因子方差分析,并用鄧肯氏法進(jìn)行組間差異顯著性分析。根據(jù)試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析結(jié)果,用模糊數(shù)學(xué)隸屬函數(shù)法對(duì)青貯60 d的感官品質(zhì)、發(fā)酵品質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)成分和微生物數(shù)量指標(biāo)進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)(苗芳等,2017),計(jì)算公式如下:
式中,為各指標(biāo)正相關(guān)隸屬函數(shù)值,為各指標(biāo)負(fù)相關(guān)隸屬函數(shù)值,為某指標(biāo)測(cè)定值,和分別為某指標(biāo)所有測(cè)定值中的最小值和最大值。以全部指標(biāo)隸屬函數(shù)值平均值大小進(jìn)行排名。
由表1可知,高丹草青貯發(fā)酵后,各處理均無酸臭味,莖葉結(jié)構(gòu)保持較好,無腐敗變質(zhì)現(xiàn)象,LP06和F-1處理具有明顯芳香果味,質(zhì)地結(jié)構(gòu)柔軟松散,感官評(píng)分17分,感官品質(zhì)優(yōu)于其他處理。CK和LBR02處理葉片柔軟但稍粘手,感官評(píng)分14分,青貯品質(zhì)等級(jí)為良。
單一和復(fù)合乳酸菌添加對(duì)高丹草青貯主要微生物數(shù)量的影響效果見表2。高丹草乳酸菌初始數(shù)量較少,為3.61×10CFU/g,青貯后,全部處理附著的乳酸菌數(shù)量均顯著高于青貯前乳酸菌數(shù)量(<0.05,下同);7個(gè)乳酸菌添加處理的乳酸菌數(shù)量也顯著高于CK,其中LP06、F-1和F-4處理乳酸菌增殖效果最佳,數(shù)量均在7.00×10CFU/g以上,顯著高于CK、LBR02和F-3處理。青貯60 d后,各處理酵母菌數(shù)量顯著下降,其中LBR02、F-2和F-3處理未檢測(cè)到酵母菌,酵母菌生長(zhǎng)得到有效抑制。各處理霉菌數(shù)量顯著下降,LP06、LBR02、F-2和F-3處理未檢測(cè)到霉菌。綜上,F(xiàn)-2處理有效增加高丹草青貯乳酸菌數(shù)量的同時(shí),能顯著抑制酵母菌和霉菌生長(zhǎng)繁殖,微生物菌群整體表現(xiàn)最佳。
表1 不同菌劑添加對(duì)高丹草青貯感官評(píng)分的影響Table 1 Effects of adding different bacteria agents on sensory score of S.bicolor×S.sudanense silage
表2 不同菌劑添加對(duì)高丹草青貯60 d后主要微生物數(shù)量的影響(×105CFU/g)Table 2 Effects of adding different bacteria agents on major microbial quantity of S.bicolor×S.sudanense after 60 d silage(×105CFU/g)
由表3可知,高丹草青貯60 d后,8個(gè)處理的DM含量均有所下降,但青貯前后差異不顯著(>0.05,下同)。各處理CP營(yíng)養(yǎng)有不同程度損失,7個(gè)乳酸菌添加處理CP含量顯著高于CK,其中F-2處理CP含量較CK高10.2%。各處理WSC含量較青貯前大幅下降,降幅為52.34%~68.54%,其中CK的WSC營(yíng)養(yǎng)損失最少,WSC含量為5.09%,顯著高于7個(gè)乳酸菌添加處理,LP06、F-1、F-2和F-4處理營(yíng)養(yǎng)損失最大,顯著低于其他處理。青貯前后,各處理ADF和NDF含量變化不顯著。
單一和復(fù)合乳酸菌添加對(duì)高丹草青貯發(fā)酵品質(zhì)的影響效果見表4。青貯60 d后,F(xiàn)-2處理pH表現(xiàn)最優(yōu),為3.88。CK的NH-N含量顯著高于7個(gè)乳酸菌添加處理,含量最低的為F-2處理(0.086%),各乳酸菌添加處理之間NH-N含量差異不顯著。青貯發(fā)酵顯著提高高丹草乳酸含量,各乳酸菌添加處理乳酸含量顯著高于CK,其中LP06和PP02處理的乳酸含量最高,分別為4.21%和4.03%,顯著高于其他處理。全部處理乙酸含量相對(duì)發(fā)酵前顯著增加,其中LBR02、F-2、F-3和F-4處理乙酸含量顯著高于CK和其他3個(gè)同型發(fā)酵乳酸菌處理,以LBR02處理乙酸含量最高,為2.20%。高丹草青貯發(fā)酵前后均未檢測(cè)到丙酸和丁酸。從發(fā)酵品質(zhì)上看,F(xiàn)-2處理顯著降低pH和NH-N含量的同時(shí),有效提高青貯飼料乳酸和乙酸含量,發(fā)酵品質(zhì)最佳。
為全面評(píng)價(jià)各菌劑添加處理對(duì)高丹草青貯感官品質(zhì)、發(fā)酵品質(zhì)、營(yíng)養(yǎng)成分和微生物數(shù)量影響的綜合效果,利用隸屬函數(shù)法對(duì)8個(gè)處理進(jìn)行綜合評(píng)定,其中感官品質(zhì)、乳酸、乙酸、DM、CP、WSC含量和乳酸菌數(shù)量與發(fā)酵效果呈正相關(guān),為正向指標(biāo),pH、NH-N、NDF、ADF含量及酵母菌、霉菌數(shù)量與發(fā)酵效果呈負(fù)相關(guān),為負(fù)向指標(biāo),各處理均未檢測(cè)出丙酸和丁酸,不納入評(píng)價(jià)指標(biāo)。以7個(gè)正向指標(biāo)和6個(gè)負(fù)向指標(biāo)的隸屬函數(shù)值進(jìn)行綜合價(jià)值評(píng)定,隸屬函數(shù)平均值越高表明該處理青貯效果綜合表現(xiàn)越好,8個(gè)處理得分從高至低依次為:F-2處理(0.69)>LP06處理(0.65)>F-1處理(0.56)>PP02處理(0.55)>F-3和F-4處理(0.52)>LBR02處理(0.51)>CK(0.23)(表5)。
表3 不同菌劑添加對(duì)高丹草青貯60 d后營(yíng)養(yǎng)成分含量的影響(%)Table 3 Effects of adding different bacteria agents on nutritional component of S.bicolor×S.sudanense after 60 d silage(%)
表4 不同菌劑添加對(duì)高丹草青貯60 d后發(fā)酵品質(zhì)的影響Table 4 Effects of adding different bacteria agents on fermentation quality of S.bicolor×S.sudanense after 60 d silage
表5 不同菌劑添加對(duì)高丹草青貯發(fā)酵效果的綜合評(píng)價(jià)Table 5 Effects of adding different bacteria agents on comprehensive evaluation of fermentation of S.bicolor×S.sudanense silage
劉晗璐(2008)研究指出,因新鮮牧草中附著大量酵母菌、霉菌等好氧微生物,乳酸菌數(shù)量一般需達(dá)5×10CFU/g以上才易保障青貯發(fā)酵質(zhì)量。本研究中高丹草初始乳酸菌數(shù)量?jī)H為3.61×10CFU/g,含量低于酵母菌和霉菌總量7.46×10CFU/g。當(dāng)牧草表面附著的乳酸菌數(shù)量過低時(shí),可額外添加乳酸菌主導(dǎo)發(fā)酵以增加優(yōu)勢(shì)菌群,加速青貯發(fā)酵進(jìn)程,抑制有害菌繁殖,降低營(yíng)養(yǎng)損耗,從而獲得優(yōu)質(zhì)的牧草青貯(李小鈴等,2019)。本研究中,青貯60 d后的高丹草乳酸菌數(shù)量較青貯前大幅增加,以植物乳桿菌LP06單獨(dú)添加和LP06與戊糖片球菌PP02復(fù)合添加增殖效果表現(xiàn)最優(yōu)。李小鈴等(2019)在單一和復(fù)合乳酸菌添加對(duì)扁穗牛鞭草青貯品質(zhì)的影響中指出,植物乳桿菌單一添加乳酸菌增殖效果最佳,數(shù)量最多。
Filya(2003)在玉米和高粱的乳酸菌配比添加試驗(yàn)中指出,不同乳酸菌添加比例對(duì)乳酸菌的增殖速度有不同影響,一般同型發(fā)酵乳酸菌生長(zhǎng)速度快于異型發(fā)酵乳酸菌,本研究結(jié)果也進(jìn)一步證明了同型發(fā)酵乳酸菌在主導(dǎo)青貯發(fā)酵方面的優(yōu)勢(shì)。高丹草青貯60 d后,短乳桿菌單獨(dú)添加、短乳桿菌+植物乳桿菌、短乳桿菌+戊糖片球菌3個(gè)處理均未檢測(cè)出酵母菌和霉菌,對(duì)有害微生物的生長(zhǎng)抑制效果顯著。短乳桿菌LBR02是異型發(fā)酵乳酸菌,異型發(fā)酵乳酸菌在青貯過程中能產(chǎn)生大量乙酸,對(duì)提高青貯有氧穩(wěn)定性、抑制有害菌生長(zhǎng)有促進(jìn)作用(塔娜等,2017;賈婷婷等,2018)。
青貯飼料的氣味、色澤和結(jié)構(gòu)等感官品質(zhì)在一定程度上能反映青貯發(fā)酵優(yōu)劣。LP06和F-1處理感官評(píng)定最優(yōu),與這2個(gè)處理乳酸含量和乳酸菌數(shù)量檢測(cè)結(jié)果相吻合,表明以植物乳桿菌主導(dǎo)青貯發(fā)酵,能在發(fā)酵前期快速形成優(yōu)勢(shì)菌種,從而更易保障發(fā)酵的感官品質(zhì)。短乳桿菌LBR02單一添加或與戊糖片球菌PP02以1∶1比例復(fù)合添加,在氣味評(píng)分上得分較低,可能與短乳桿菌代謝有關(guān),其合成自身氨基酸時(shí)分解蛋白質(zhì)產(chǎn)生部分具有不良?xì)馕兜陌焙桶奉愇镔|(zhì)(Juracek et al.,2018)。
營(yíng)養(yǎng)成分是評(píng)定青貯質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo),一般認(rèn)為青貯飼料DM、WSC和CP含量與青貯質(zhì)量呈正相關(guān),含量越高,青貯質(zhì)量越好。李小鈴等(2019)研究表明,異型發(fā)酵乳酸菌食竇魏斯氏菌添加組青貯發(fā)酵的DM含量最高。張凡凡等(2021)利用纖維素分解菌與布氏乳桿菌聯(lián)合接種,發(fā)現(xiàn)布氏乳桿菌可顯著提高青貯玉米DM含量。本研究各處理間DM含量差異不顯著,4個(gè)異型發(fā)酵短乳桿菌添加處理均未在DM含量上表現(xiàn)出明顯優(yōu)勢(shì),與李小鈴等(2019)、張凡凡等(2021)的研究結(jié)果不一致,可能是因?yàn)椴煌l(fā)酵類型乳酸菌的不同比例、種類組合或受發(fā)酵底物影響,均會(huì)表現(xiàn)出不同的協(xié)同作用所致,但菌株之間、菌株與底物代謝間如何協(xié)同作用還需深入研究。
高丹草發(fā)酵60 d后,8個(gè)處理的CP含量同青貯前相比均出現(xiàn)不同程度降低,推測(cè)可能是發(fā)酵初期,體系內(nèi)酸性環(huán)境尚未形成,蛋白質(zhì)分解酶和部分微生物代謝活躍導(dǎo)致蛋白質(zhì)快速分解所致(韓立英等,2013)。高丹草青貯60 d后,各處理CP含量較青貯前顯著下降,可能與高丹草青貯后的呼吸作用、蛋白質(zhì)分解酶和相關(guān)微生物代謝活動(dòng)有關(guān)(韓立英等,2013),7個(gè)乳酸菌添加處理的CP含量均顯著高于CK,也進(jìn)一步證實(shí)了添加乳酸菌在抑制高丹草蛋白質(zhì)降解方面的優(yōu)勢(shì)。青貯發(fā)酵時(shí)微生物需要能量來源以保證自身生長(zhǎng),WSC作為乳酸菌生長(zhǎng)碳源攝取的主要底物,在青貯過程中被乳酸菌代謝消化,其含量可間接反映乳酸菌生長(zhǎng)情況。本研究中,高丹草青貯60 d后,CK、戊糖片球菌和短乳桿菌單獨(dú)添加或這2種菌復(fù)合添加的WSC含量顯著高于其他處理,可能與這4個(gè)處理乳酸菌代謝活動(dòng)相對(duì)較弱、WSC分解消耗較慢有關(guān)。NDF作為飼料纖維質(zhì)量判定的有效標(biāo)準(zhǔn),其含量高低可初步估測(cè)日糧精粗比例是否合理;ADF是飼料能值的重要評(píng)判指標(biāo),其含量與青貯飼料的飼用價(jià)值成反比。尤思涵等(2021)在高丹草與黑麥草混貯研究中指出,不同混貯比例的NDF和ADF含量存在明顯差異,本研究中8個(gè)處理的ADF和NDF含量變化不顯著,與尤思涵等(2021)的研究結(jié)果不一致,推測(cè)原因可能與發(fā)酵底物有關(guān),本研究發(fā)酵底物為高丹草單貯,尤思涵等(2021)報(bào)道為高丹草與黑麥草混合青貯,混合青貯在一定程度上改變了營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的比例。
pH、NH-N、乳酸和乙酸含量是評(píng)判青貯發(fā)酵效果的關(guān)鍵指標(biāo)。pH大小直接反映青貯飼料是否處于良好的酸性環(huán)境,對(duì)底物發(fā)酵至關(guān)重要,一般認(rèn)為優(yōu)良的青貯飼料pH為3.8~4.2。本研究中,全部同型發(fā)酵乳酸菌添加處理的pH均低于短乳桿菌LBR02單獨(dú)添加處理,進(jìn)一步體現(xiàn)了同型發(fā)酵乳酸菌在提升發(fā)酵進(jìn)程方面的優(yōu)勢(shì)作用。研究表明,隨著發(fā)酵進(jìn)行,蛋白質(zhì)被多種好氧微生物代謝繁殖所消耗,亦或通過不同途徑被分解轉(zhuǎn)化成NH-N和胺類物質(zhì),NH-N含量越高,間接反映底物蛋白質(zhì)消耗越多(蔣蘇蘇等,2017)。一般認(rèn)為NH-N含量≤5%,青貯發(fā)酵品質(zhì)優(yōu)良。本研究中,所有處理的NH-N含量極低,推測(cè)原因,一方面蜀草1號(hào)高丹草屬高光效C4植物,WSC含量較高,豐富的WSC含量為青貯發(fā)酵提供了充足的碳源,各處理體系內(nèi)乳酸菌群快速增殖形成酸性環(huán)境,pH均≤4.10,達(dá)優(yōu)良飼草發(fā)酵pH,良好的酸性環(huán)境有效抑制了有害微生物對(duì)蛋白質(zhì)的分解消耗;另一方面,可能與蛋白分解酶活性有關(guān),隨著pH降低,蛋白酶活性極大降低,很大程度上減少NH-N含量。
前人研究結(jié)果(王旭哲等,2018;徐生陽等,2019)表明,同型、異型乳酸菌單獨(dú)添加或復(fù)合添加,均可獲得較高的乳酸含量,且顯著高于CK。同型、異型發(fā)酵乳酸菌生長(zhǎng)代謝均可產(chǎn)生大量乳酸。本研究所用發(fā)酵底物高丹草的乳酸菌初始數(shù)量較低,自然發(fā)酵乳酸濃度增加較慢,乳酸菌添加后快速生長(zhǎng)代謝,進(jìn)而顯著提高乳酸含量,與pH試驗(yàn)結(jié)果相吻合。除F-4處理外,其余3個(gè)異型發(fā)酵乳酸菌添加處理乙酸含量顯著高于其他處理,其中短乳桿菌單獨(dú)添加含量最高。黃峰等(2019)、李菲菲等(2019)研究指出,短乳桿菌、布氏乳桿菌和希氏乳桿菌等眾多異型發(fā)酵乳酸菌不僅能產(chǎn)生乳酸,還會(huì)產(chǎn)生乙酸等抑制有害微生物生長(zhǎng)的有機(jī)酸,LBR02、F-2和F-3 3個(gè)短乳桿菌添加處理的乙酸測(cè)定結(jié)果與酵母菌、霉菌抑制效果相一致,而F-4乙酸含量顯著低于這3個(gè)處理,可能與短乳桿菌添加比例較低,生長(zhǎng)代謝受影響有關(guān)。
青貯60 d時(shí),同型發(fā)酵乳酸菌LP06添加在提高高丹草青貯感官品質(zhì)、降低NH-N含量、減少CP損失、增加乳酸含量和乳酸菌數(shù)量上表現(xiàn)更具優(yōu)勢(shì),異型發(fā)酵乳酸菌LBR02在抑制有害微生物生長(zhǎng)方面作用更顯著。綜上分析,植物乳桿菌LP06與短乳桿菌LBR02按1∶1比例復(fù)合添加,高丹草青貯效果綜合表現(xiàn)最優(yōu)。