血清血管生成素樣蛋白8、白細(xì)胞介素-23 水平與缺血性卒中患者頸動(dòng)脈斑塊易損風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系

安然 楊 璐 艾志兵

湖北省十堰市太和醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，湖北十堰 442000

缺血性卒中（ischemic stroke，IS）是腦部血液循環(huán)障礙引起局限性腦組織缺血性壞死或軟化，而出現(xiàn)一系列相應(yīng)神經(jīng)功能缺失[1]。顱內(nèi)動(dòng)脈粥樣硬化是IS 發(fā)生的主要原因，頸動(dòng)脈粥樣硬化不穩(wěn)定易損斑塊破裂繼發(fā)血管和破裂脫落堵塞遠(yuǎn)端血管是IS 發(fā)生的重要機(jī)制之一[2]。研究表明，血脂紊亂和炎癥反應(yīng)在動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成和穩(wěn)定性降低中發(fā)揮重要作用[3-4]。血管生成素樣蛋白8（angiopoietin-like protein 8，ANGPTL8）是一種促代謝因子，能抑制細(xì)胞內(nèi)外脂蛋白脂肪酶，調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝[5]。研究顯示，血清ANGPTL8水平是2 型糖尿病患者頸動(dòng)脈斑塊形成的危險(xiǎn)因素[6]。白細(xì)胞介素-23（interleukin-23，IL-23）是新近發(fā)現(xiàn)的促炎細(xì)胞因子，能刺激T 細(xì)胞增殖和分化，參與多種炎癥疾病的發(fā)展[7]。研究報(bào)道，IL-23 受體（IL-23 receptor，IL-23R）rs6682925 基因多態(tài)性與IS 患者頸動(dòng)脈斑塊易損性相關(guān)[8]。本研究旨在分析IS 患者血清ANGPTL8、IL-23 水平變化，探討二者與頸動(dòng)脈斑塊易損風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2020 年1 至2021 年9 月湖北省十堰市太和醫(yī)院收治的197 例IS 患者，其中男107 例，女90 例；年齡39～83 歲，平均（61.27±7.92）歲；體重指數(shù)18～27 kg/m2，平均（23.06±1.73）kg/m2；病史：高血壓119 例，糖尿病64 例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)頭顱CT/MRI 確診為IS，符合《中國(guó)急性缺血性腦卒中診治指南2018》[9]診斷標(biāo)準(zhǔn)；②年齡≥18 歲；③初次發(fā)作就診；④臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①顱內(nèi)感染、腦創(chuàng)傷使、腦出血；②頸部開(kāi)放性、閉合性損傷；③合并血液系統(tǒng)、自身免疫性疾??；④合并心、肝、腎功能損害；⑤長(zhǎng)期或近3 個(gè)月內(nèi)服用他汀類(lèi)藥物。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)（20211201）。

1.2 研究方法

1.2.1 基線資料收集 收集患者基線資料，包括性別、年齡、體重指數(shù)、病史、吸煙史、飲酒史，采集患者入院后次日清晨空腹靜脈血，貝克曼庫(kù)爾特AU5800 全自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)血清甘油三酯（triglycerides，TG）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein-cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein-cholesterol，LDL-C）、超敏C 反應(yīng)蛋白（hypersensitivity C-reactive protein，hs-CRP）水平。

1.2.2 血清ANGPTL8、IL-23 水平檢測(cè) 采集患者入院后次日清晨空腹靜脈血，3000 r/min 離心10 min，離心半徑為10 cm，取上清液，置于-80℃環(huán)境中保存，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測(cè)血清ANGPTL8、IL-23 水平，所有操作嚴(yán)格按照試劑盒（上海極威生物科技有限公司，貨號(hào)：GV-E11923、GV-E10106）說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.2.3 頸動(dòng)脈血管超聲檢查 患者入院后6 h 內(nèi)采用Philips CV550 彩色多普勒超聲診斷儀（頻率5～10 MHz）行頸動(dòng)脈血管超聲檢查，測(cè)量雙側(cè)頸動(dòng)脈和分叉處及顱外段頸動(dòng)脈內(nèi)中膜厚度。參考《頭頸部血管超聲若干問(wèn)題的專(zhuān)家共識(shí)（頸動(dòng)脈部分）》[10]評(píng)價(jià)頸動(dòng)脈斑塊。根據(jù)頸動(dòng)脈血管超聲檢查結(jié)果將197 例IS 患者分為易損組（112 例）、穩(wěn)定組（46 例）、無(wú)斑塊組（39 例）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 27.0 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較采用t 檢驗(yàn)；不符合正態(tài)分布的采用中位數(shù)（M）和四分位數(shù)（P25，P75）表示，組間比較采用H 檢驗(yàn)，兩兩比較采用U 檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料用例數(shù)或百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。IS 患者頸動(dòng)脈斑塊易損風(fēng)險(xiǎn)的危險(xiǎn)因素采用logistic 回歸分析；受試者操作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲線分析血清ANGPTL8、IL-23 水平對(duì)IS 患者頸動(dòng)脈斑塊易損風(fēng)險(xiǎn)的預(yù)測(cè)價(jià)值，曲線下面積（area under the curve，AUC）比較采用Hanley 和McNeil 法。以P <0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 IS 患者頸動(dòng)脈斑塊易損風(fēng)險(xiǎn)的單因素分析

易損組血清hs-CRP、ANGPTL8、IL-23 水平高于穩(wěn)定組、無(wú)斑塊組，穩(wěn)定組血清hs-CRP、ANGPTL8、IL-23 水平高于無(wú)斑塊組（P ＜0.05）；易損組、穩(wěn)定組血清LDL-C 水平高于無(wú)斑塊組，HDL-C 水平低于無(wú)斑塊組（P ＜0.05）。見(jiàn)表1。

表1 IS 患者頸動(dòng)脈斑塊易損風(fēng)險(xiǎn)的單因素分析

2.2 IS 患者頸動(dòng)脈斑塊易損風(fēng)險(xiǎn)的多因素分析

以HDL-C、LDL-C、hs-CRP、ANGPTL8、IL-23 為自變量（原值代入），斑塊易損為因變量（是=1，否=0），多因素logistic 回歸分析顯示，LDL-C、hs-CRP、ANGPTL8、IL-23 為IS 患者頸動(dòng)脈斑塊易損風(fēng)險(xiǎn)的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（OR ＞1，P ＜0.05）。見(jiàn)表2。

表2 IS 患者頸動(dòng)脈斑塊易損風(fēng)險(xiǎn)的多因素分析

2.3 血清ANGPTL8、IL-23 水平對(duì)IS 患者頸動(dòng)脈斑塊易損風(fēng)險(xiǎn)的預(yù)測(cè)價(jià)值

ROC 曲線顯示，ANGPTL8、IL-23 聯(lián)合預(yù)測(cè)IS 患者頸動(dòng)脈斑塊易損風(fēng)險(xiǎn)的AUC 值高于ANGPTL8、IL-23 單獨(dú)預(yù)測(cè)（Z=2.654、2.096，P=0.014、0.036）。見(jiàn)表3、圖1。

圖1 血清ANGPTL8、IL-23 水平預(yù)測(cè)IS 患者頸動(dòng)脈斑塊易損風(fēng)險(xiǎn)的ROC 曲線

表3 血清ANGPTL8、IL-23 水平對(duì)IS 患者頸動(dòng)脈斑塊易損風(fēng)險(xiǎn)的預(yù)測(cè)價(jià)值

3 討論

腦卒中是我國(guó)常見(jiàn)的急性腦血管疾病，年發(fā)病率為246.8/10 萬(wàn)，死亡率為149.49/10 萬(wàn)，是我國(guó)人口死亡的首要病因[11-12]。頸動(dòng)脈斑塊可分為穩(wěn)定與不穩(wěn)定易損斑塊，易損斑塊是指具有破裂傾向，易發(fā)生血栓形成和/或可能迅速發(fā)展為責(zé)任病變的斑塊，為IS 發(fā)生的重要原因之一[13]。目前臨床主要通過(guò)影像學(xué)方法識(shí)別易損斑塊，各有利弊且難以普及，因此迫切需要新的方法識(shí)別高危人群。

脂蛋白代謝紊亂為動(dòng)脈斑塊不穩(wěn)定的一個(gè)重要機(jī)制，血液中巨噬細(xì)胞過(guò)量攝取脂質(zhì)形成泡沫細(xì)胞是動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成的主要原因，同時(shí)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊吸收過(guò)量泡沫細(xì)胞還可導(dǎo)致斑塊纖維帽變薄、破裂[14]。ANGPTL 是一類(lèi)分泌性糖蛋白家族，由肝臟分泌并能調(diào)節(jié)ANGPTL3、ANGPTL4 表達(dá)，ANGPTL3、ANGPTL4 通過(guò)調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝影響動(dòng)脈粥樣硬化形成，同時(shí)ANGPTL8 能通過(guò)改變細(xì)胞內(nèi)磷脂成分，上調(diào)血液中脂質(zhì)水平[15-17]。本研究結(jié)果顯示，易損組ANGPTL8高于穩(wěn)定組、無(wú)斑塊組，穩(wěn)定組ANGPTL8 高于無(wú)斑塊組，提示ANGPTL8 可能參與斑塊發(fā)生和易損發(fā)生。進(jìn)一步分析顯示，ANGPTL8 水平是IS 患者頸動(dòng)脈斑塊易損風(fēng)險(xiǎn)的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，提示ANGPTL8 參與頸動(dòng)脈斑塊易損。Jiao等[18]研究顯示，ANGPTL8 在人類(lèi)和小鼠動(dòng)脈粥樣硬化斑塊中表達(dá)上調(diào)，過(guò)表達(dá)ANGPTL8的巨噬細(xì)胞表現(xiàn)出泡沫細(xì)胞形成增強(qiáng)和膽固醇積累增加，而敲除ANGPTL8 可改善動(dòng)脈粥樣硬化。因此，筆者推測(cè)ANGPTL8 可能通過(guò)上調(diào)血液中脂質(zhì)水平導(dǎo)致脂蛋白代謝紊亂，增加巨噬細(xì)胞對(duì)脂質(zhì)的攝取，導(dǎo)致頸動(dòng)脈易損。動(dòng)脈粥樣硬化是一種慢性炎癥反應(yīng)過(guò)程，炎癥反應(yīng)貫穿動(dòng)脈粥樣硬化斑塊始終，參與誘導(dǎo)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成，動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成后炎癥浸潤(rùn)能破壞纖維帽中的纖維成分，增加斑塊易損性[19-20]。IL-23 是一種異二聚體細(xì)胞因子，主要由活化的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生，能與其特異性受體IL-23R 結(jié)合，并誘導(dǎo)CD4T 細(xì)胞分化為輔助性T 細(xì)胞17（helper T cells 17，Th17）細(xì)胞，形成IL-23/IL-23R、IL-23/Th17、IL-23/IL-17 等炎癥軸[19-20]。Esch等[21]研究指出，IL-23和IL-23R 在主動(dòng)脈動(dòng)脈粥樣硬化病變中表達(dá)上調(diào)。本研究結(jié)果顯示，易損組IL-23 高于穩(wěn)定組、無(wú)斑塊組，穩(wěn)定組IL-23 高于無(wú)斑塊組，提示IL-23 可能參與斑塊發(fā)生和易損發(fā)生。進(jìn)一步分析顯示，IL-23 是IS 患者頸動(dòng)脈斑塊易損的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，提示IL-23參與頸動(dòng)脈斑塊易損，其機(jī)制可能與IL-23 能通過(guò)炎癥軸引起頸動(dòng)脈斑塊炎癥浸潤(rùn)，增加斑塊易損風(fēng)險(xiǎn)有關(guān)。IL-23/Th17 炎癥軸激活和Th17、IL-17 表達(dá)上調(diào)能增加動(dòng)脈粥樣硬化斑塊炎癥浸潤(rùn)，進(jìn)一步驗(yàn)證了本研究結(jié)果[22-25]。ROC 曲線結(jié)果顯示，血清ANGPTL8、IL-23 可作為IS 患者頸動(dòng)脈斑塊易損風(fēng)險(xiǎn)的預(yù)測(cè)指標(biāo)，且聯(lián)合檢測(cè)具有較高的預(yù)測(cè)效能，便于指導(dǎo)臨床防治。

綜上所述，血清ANGPTL8、IL-23 水平為IS 患者頸動(dòng)脈斑塊易損風(fēng)險(xiǎn)的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，可作為頸動(dòng)脈斑塊易損風(fēng)險(xiǎn)的預(yù)測(cè)指標(biāo)。但本研究為單中心小樣本量研究，關(guān)于ANGPTL8 和IL-23 參與頸動(dòng)脈斑塊易損的機(jī)制還需進(jìn)一步研究，可能為IS 防治提供新的認(rèn)知。