駱 曦，向國(guó)云

（重慶市萬(wàn)州區(qū)上海醫(yī)院檢驗(yàn)科，重慶 404120）

在現(xiàn)代臨床中，腸桿菌科細(xì)菌屬于十分常見(jiàn)且重要的致病菌種類，共包含70 多種細(xì)菌，其中陰溝腸桿菌、大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌較為常見(jiàn)，易出現(xiàn)在人體多個(gè)重要器官、組織中[1-2]，從而使患者發(fā)生尿路感染、呼吸道感染、消化系統(tǒng)感染、血流感染等。近年來(lái)隨著臨床上抗生素的廣泛應(yīng)用[3-4]，使得對(duì)碳青霉烯類抗生素耐藥的腸桿菌科細(xì)菌逐漸增多，且其耐藥性越來(lái)越高，治療的難度也越來(lái)越大，受到了全世界醫(yī)學(xué)者的廣泛關(guān)注[5-6]。目前，我國(guó)各級(jí)醫(yī)院腸桿菌科細(xì)菌的檢出數(shù)量明顯增多，尤其是耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌數(shù)量的增加，為臨床治療帶來(lái)了極大挑戰(zhàn)[7-8]。本文主要是分析耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌的分布與耐藥性，為臨床合理用藥提供指導(dǎo)，保障患者用藥的安全性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本文的研究對(duì)象是2020 年1 月至12 月期間我院實(shí)驗(yàn)室分離出的100 株耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌。檢測(cè)標(biāo)本包括尿液標(biāo)本、痰液標(biāo)本、膿液本病、血樣標(biāo)本等。

1.2 方法

1.2.1 儀器 細(xì)菌測(cè)定系統(tǒng)，型號(hào)：DL-96 Ⅱ，產(chǎn)品注冊(cè)號(hào)：粵械注準(zhǔn)20152400595，生產(chǎn)廠家：珠海迪爾生物功能有限公司。

1.2.2 試驗(yàn)方法 根據(jù)質(zhì)控菌、實(shí)驗(yàn)菌微量稀釋法- 藥物敏感性試驗(yàn)獲取最小抑菌濃度（MIC），并分別用水稀釋成4 個(gè)不同藥物濃度，以備用。向比濁管中按拉丁方排列分別加入配置好的各濃度藥物1.0 mL，然后加入9.0 mL 合適濃度的菌懸液，使菌液的終濃度為5×105 cfu/mL，使藥物的終濃度分別為MIC、1/2MIC、1/4MIC、1/8MIC。將含有不同濃度藥物、菌液混懸液的比濁管放置于細(xì)菌測(cè)定系統(tǒng)中，培養(yǎng)溫度為37℃，監(jiān)測(cè)間隔時(shí)間為30 min，監(jiān)測(cè)時(shí)間為16 h，對(duì)實(shí)時(shí)吸光度進(jìn)行測(cè)定。采用微生物系統(tǒng)對(duì)菌株類別進(jìn)行鑒定，并開展藥物敏感性試驗(yàn)（藥敏試驗(yàn)），采用mic 濁度法對(duì)菌株的耐藥性進(jìn)行檢測(cè)，利用改良Hodre 試驗(yàn)法對(duì)腸桿菌科細(xì)菌的耐碳青霉烯類抗生素的效能進(jìn)行測(cè)定分析。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察100 株耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌的分布、檢測(cè)標(biāo)本來(lái)源、科室分布及耐藥性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

用SPSS 21.0 軟件處理本研究中的數(shù)據(jù)，計(jì)量資料用±s表示，用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用% 表示，用χ2 檢驗(yàn)，P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 100 株耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌的分布

在100 株耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌中，共有肺炎克雷伯菌83 株（占83.0%），陰溝腸桿菌12 株（占12.0%），大腸埃希菌5 株（占5.0%）。詳見(jiàn)表1。

表1 100 株耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌的分布

2.2 耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌的檢測(cè)標(biāo)本來(lái)源

在100 株耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌中，有50株（占50.0%）細(xì)菌分離自痰液標(biāo)本，有27 株（占27.0%）細(xì)菌分離自尿液標(biāo)本，有13 株（占13.0%）細(xì)菌分離自膿液標(biāo)本，有10 株（占10.0%）細(xì)菌分離自其他標(biāo)本。詳見(jiàn)表2。

表2 耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌的檢測(cè)標(biāo)本來(lái)源

2.3 100 株耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌的科室分布

在100 株耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌中，有72株（占72.0%）細(xì)菌來(lái)源于重癥監(jiān)護(hù)室，有11 株（占11.0%）細(xì)菌來(lái)源于呼吸內(nèi)科，有9 株（占9.0%）細(xì)菌來(lái)源于心血管與腎內(nèi)科，有8 株（占8.0%）細(xì)菌來(lái)源于其他科室。詳見(jiàn)表3。

表3 100 株耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌的科室分布

2.4 100 株耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌的耐藥性分析

在100 株耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌中，陰溝腸桿菌對(duì)氨芐西林、頭孢呋辛、頭孢西丁、頭孢唑林的耐藥性最高（均達(dá)到100%），對(duì)復(fù)方新諾明、哌拉西林、替卡西林、頭孢吡肟、頭孢曲松、頭孢他啶的耐藥性較高；大腸埃希菌對(duì)氨芐西林、頭孢噻肟、頭孢唑林、頭孢曲松、復(fù)方新諾明、頭孢呋辛的耐藥性較高；肺炎克雷伯菌對(duì)頭孢噻肟的耐藥性最高（達(dá)到100%），對(duì)氨芐西林、呋喃妥因、氯霉素、頭孢吡肟、復(fù)方新諾明、頭孢呋辛、頭孢曲松、頭孢唑林均有一定的耐藥性（均達(dá)到10% 以上）。詳見(jiàn)表4。

表4 100 株耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌的耐藥性分析（%）

3 討論

近年來(lái)的臨床研究發(fā)現(xiàn)，在感染標(biāo)本中分離出的耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌的數(shù)量逐年增多[8]。耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌具有較高的耐藥性及多重耐藥性，因此此類病原菌所致感染的致死率高于其他病原菌，具有更大的風(fēng)險(xiǎn)[9]。本研究的結(jié)果顯示，在100 株耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌中，共有肺炎克雷伯菌83 株，陰溝腸桿菌12 株，大腸埃希菌5 株。其中，有50 株細(xì)菌分離自痰液標(biāo)本，有27 株細(xì)菌分離自尿液標(biāo)本，有13 株細(xì)菌分離自膿液標(biāo)本，有10 株細(xì)菌分離自其他標(biāo)本；有72 株細(xì)菌來(lái)源于重癥監(jiān)護(hù)室，有11 株細(xì)菌來(lái)源于呼吸內(nèi)科，有9 株細(xì)菌來(lái)源于心血管與腎內(nèi)科，有8 株細(xì)菌來(lái)源于其他科室。腸桿菌科細(xì)菌屬于革蘭陰性菌，主要存在于人體的呼吸道、尿道及消化道中，可引發(fā)呼吸道感染、泌尿系統(tǒng)感染及消化系統(tǒng)感染[10]。耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌的耐藥性較高，其原因在于：耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌多來(lái)源重癥監(jiān)護(hù)室，而重癥監(jiān)護(hù)室收治的患者普遍存在病情危重、高齡、免疫功能低下、需要接受氣管插管或氣管切開術(shù)、留置導(dǎo)管等情況，因此其應(yīng)用的廣譜抗生素較多，且用藥時(shí)間較長(zhǎng)[11]，易導(dǎo)致病原菌出現(xiàn)嚴(yán)重的耐藥性，增加臨床治療的難度[12-13]。腸桿菌科細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類抗生素產(chǎn)生耐藥性的機(jī)制主要是：1）腸桿菌科細(xì)菌可產(chǎn)生碳青霉烯酶；2）腸桿菌科細(xì)菌可產(chǎn)生AmpCβ 內(nèi)酰胺酶（AmpC 酶），且存在膜孔蛋白缺失的情況；3）腸桿菌科細(xì)菌青霉素結(jié)合蛋白（PBPs）的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變。文獻(xiàn)報(bào)道，耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌的產(chǎn)生與外膜孔蛋白的丟失及產(chǎn)酶情況有關(guān)[14-15]。腸桿菌科細(xì)菌在上述機(jī)制的共同影響下，可使其對(duì)碳青霉烯類抗生素的耐藥性越來(lái)越強(qiáng)。本研究的結(jié)果顯示，在100 株耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌中，陰溝腸桿菌對(duì)氨芐西林、頭孢呋辛、頭孢西丁、頭孢唑林的耐藥性最高（均達(dá)到100%），對(duì)復(fù)方新諾明、哌拉西林、替卡西林、頭孢吡肟、頭孢曲松、頭孢他啶的耐藥性較高；大腸埃希菌對(duì)氨芐西林、頭孢噻肟、頭孢唑林、頭孢曲松、復(fù)方新諾明、頭孢呋辛的耐藥性較高；肺炎克雷伯菌對(duì)頭孢噻肟的耐藥性最高（達(dá)到100%），對(duì)氨芐西林、呋喃妥因、氯霉素等抗生素均有一定的耐藥性。研究指出，雖然耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌對(duì)阿米卡星的耐藥性較低[16]，但此藥的腎毒性較為明顯，因此臨床上在應(yīng)用此藥時(shí)要嚴(yán)格控制其用藥劑量，在保證患者治療有效性的同時(shí)盡量減少其不良反應(yīng)，提升其治療的安全性[17-18]。美羅培南和亞胺培南是臨床上常用的β 內(nèi)酰胺類抗生素，具有較強(qiáng)的抑菌活性及較廣的抗菌譜，能有效抑制革蘭陰性菌[19]，尤其是對(duì)于腸桿菌科細(xì)菌，能產(chǎn)生較強(qiáng)的抑菌活性。美羅培南和亞胺培南的抗菌機(jī)制是：阻礙細(xì)菌細(xì)胞壁粘肽的合成，使細(xì)菌的胞壁缺失，并提升酶的穩(wěn)定性及細(xì)胞膜的通透性[20]。本研究的結(jié)果顯示，在100 株耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌中，肺炎克雷伯菌的占比為83.0%，陰溝腸桿菌的占比為12.0%，大腸埃希菌的占比為5.0%。這與張貞等[21]的研究結(jié)果（在耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌中肺炎克雷伯菌的占比為85.0%，陰溝腸桿菌的占比為11.0%，大腸埃希菌的占比為4.0%）基本一致。雖然耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌多分布于歐美國(guó)家，但近年來(lái)于我國(guó)耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌的檢出數(shù)量明顯增加，因此臨床上應(yīng)提高重視度，以減少耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌感染的發(fā)生。

綜上所述，本研究中分離出的耐碳青霉烯類腸桿菌科細(xì)菌主要為肺炎克雷伯菌、陰溝腸桿菌和大腸埃希菌，其中陰溝腸桿菌和大腸埃希菌的耐藥性均較高，肺炎克雷伯菌的耐藥性相對(duì)較低。