黃彩云，何吉福，宋春虹，王 楠，馬玉德

甘肅中醫(yī)藥大學(xué)體育健康學(xué)院，甘肅蘭州730000

運(yùn)動性疲勞是最為常見的一種疲勞形式，又稱體力疲勞。通常是由于機(jī)體經(jīng)大量體力勞動及大量運(yùn)動后所導(dǎo)致的，伴隨著肌肉過度緊張，體內(nèi)能量消耗過多等生理現(xiàn)象［1］。研究已證實，運(yùn)動耐力下降是運(yùn)動疲勞最為直接的表現(xiàn)，而負(fù)重游泳是常見的評估運(yùn)動耐力的動物實驗，可體現(xiàn)運(yùn)動后的疲勞狀態(tài)，因此游泳實驗成為衡量抗疲勞特征的重要指標(biāo)［2］。關(guān)于運(yùn)動疲勞的產(chǎn)生其主要作用機(jī)制可能與體內(nèi)的血乳酸（lactic acid，LD）、肌糖原（muscle glycogen，MG）、肝糖原（liver glycogen，LG）、氮的代謝產(chǎn)物和ATP酶的含量有關(guān)。

當(dāng)歸，為多年生傘形科草本植物當(dāng)歸Angelica sinensis（Oliv.）Diels 的干燥根，當(dāng)歸氣血雙補(bǔ)，使機(jī)體的氣血各有所歸，故名當(dāng)歸［3-4］。當(dāng)歸的化學(xué)成分復(fù)雜，有效成分主要為多糖和揮發(fā)油等［5］，其中當(dāng)歸多糖（Angelica sinensispolysaccharide，ASP）的重要藥用價值已被很好的證實，包括抗氧化、增強(qiáng)免疫、延緩衰老、降血脂、抗心肌缺血、抗炎鎮(zhèn)痛等［6］，特別是一些多糖還被作為一種新型的天然能源物質(zhì)迅速補(bǔ)充人體糖類損耗，達(dá)到良好的抗疲勞效果［7-8］，也有研究發(fā)現(xiàn)許多植物多糖成分也具有改善運(yùn)動性疲勞的作用［9］，如熟地黃多糖［10］、黑參多糖［11］、枸杞子多糖［12］等對小鼠有較好的抗疲勞作用?？梢妼ふ野踩?、有效且毒副作用小的抗疲勞天然藥材已然成為當(dāng)前研究的熱點之一［13］。ASP是天然植物的提取物，憑借獨特的優(yōu)勢深受學(xué)者們的青睞，目前，關(guān)于ASP 的研究主要集中在降血脂、防感染、調(diào)免疫、抗腫瘤和提高抗氧化能力等藥理作用方面，關(guān)于其抗運(yùn)動疲勞及其機(jī)制的研究較少。因此，本研究通過實驗研究觀察不同劑量ASP 的抗運(yùn)動性疲勞作用，并初步探討其機(jī)制，旨在為ASP 的開發(fā)與應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 實驗動物

選擇SPF 級健康雄性昆明種小鼠60只，2月齡，體質(zhì)量（25±2）g，購于中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所（實驗動物生產(chǎn)許可證號：甘SCXK2015-0001），飼養(yǎng)于甘肅中醫(yī)藥大學(xué)SPF 級動物實驗室（使用許可證號：SYXK（甘）2015-0005）。小鼠飼養(yǎng)環(huán)境：室內(nèi)溫度（23±2）℃，相對濕度60%～80%，12 h 晝夜循環(huán)光照，期間自由飲水、進(jìn)食。動物實驗嚴(yán)格遵循動物倫理原則，經(jīng)甘肅中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物倫理委員會批準(zhǔn)（審批號：2019-213）。

1.2 主要藥品、試劑和儀器

當(dāng)歸購于蘭州市黃河藥材市場，經(jīng)甘肅中醫(yī)藥大學(xué)中藥鑒定教研室李成義教授鑒定為傘形科植物當(dāng)歸Angelica sinensis（Oliv.）Diels 的干燥根。乳酸試劑盒（南京建成生物工程研究所，A019-2-2）、血尿素氮試劑盒（南京建成生物工程研究所，C013-1-1）、ATP 酶試劑盒（南京建成生物工程研究所，A016-1），肝/肌糖原試劑盒（上海滬鼎生物科技有限公司，D-20743），其余均為常見化學(xué)藥品。超細(xì)勻漿機(jī)（上海弗魯克公司，F(xiàn)6/10-10G），臺式低速離心機(jī)（湖南赫西儀器裝備有限公司，TD6），酶標(biāo)儀（日本Thermo公司，Benchmark Plus）。

1.3 實驗方法

1.3.1 ASP 溶液的制備 將1 kg 當(dāng)歸洗凈，60 ℃干燥12 h，粉碎后過40 目篩，得到當(dāng)歸干粉。稱取500 g 當(dāng)歸干粉，用5 倍體積的95%乙醇滲漏浸提2次，待冷卻后過濾，濾渣在真空干燥箱干燥后備用。采用熱水浸提法提取多糖，將干燥后的濾渣加水煎煮2次、煎液合并抽濾、離心，取上清，即為ASP 粗提液。將所得多糖粗提液減壓濃縮成黏稠浸膏狀，加入95%乙醇使溶液的含醇量為70%，充分?jǐn)嚢瑁? ℃醇沉過夜，于4 000 r/min 離心20 min，棄上清，收集沉淀物，進(jìn)行冷凍干燥，所得干燥物即為ASP，共21.4 g，得率為4.28%。將ASP 配制成質(zhì)量濃度分別為2.78、5.56、11.12 mg/mL的多糖溶液。

1.3.2 動物分組及運(yùn)動疲勞模型的建立 經(jīng)適應(yīng)性喂養(yǎng)和游泳適應(yīng)性運(yùn)動訓(xùn)練后，保留50只大鼠進(jìn)行正式實驗。按照隨機(jī)數(shù)字表法分為空白對照組、模型組、ASP 高劑量組、ASP 中劑量組、ASP 低劑量組，每組10 只。除空白對照組外，其余各組小鼠負(fù)荷體質(zhì)量5%鉛絲于尾根部，放入（25.0±2.0）℃水溫的游泳箱（水深40 cm）中開始負(fù)重游泳，觀察小鼠每次力竭時的狀態(tài)，即當(dāng)其頭部完全不露出水面10 s時撈出，將其腹部朝上放于臺面上，可見小鼠反應(yīng)遲鈍、呼吸加快、雙下肢及尾部自然下垂且身體不能自行翻轉(zhuǎn)，立即擦拭且用吹風(fēng)機(jī)烘干毛發(fā)；1 次/d，連續(xù)負(fù)重游泳至力竭15 d［14］，造模期間飲水正常，飲食減半。

1.3.3 干預(yù)方法 造模第6 天開始，ASP 高、中、低劑量組小鼠分別灌胃相應(yīng)劑量的藥物。根據(jù)人與小鼠體表面積系數(shù)法折算給藥量［15］，得出小鼠當(dāng)歸每日灌胃量為1.3 g/kg，當(dāng)歸提取ASP 的得率為4.28%，所以ASP 每日灌胃量為55.64 mg/kg，為低劑量組。按低劑量∶中劑量∶高劑量＝1∶2∶4 的比例，計算得出中劑量灌胃量為111.28 mg/kg、高劑量灌胃量為222.56 mg/kg。對應(yīng)低、中、高濃度的ASP 溶液（2.78、5.56、11.12 mg/mL），每10 g灌胃量為0.2 mL；空白對照組和模型組僅以等量生理鹽水灌胃，連續(xù)灌胃10 d。

1.4 觀察指標(biāo)

1.4.1 小鼠運(yùn)動耐力評估 疲勞最直接的表現(xiàn)是運(yùn)動耐力的下降，負(fù)重游泳時間是反映運(yùn)動耐力的重要指標(biāo)［16］。記錄最后1次小鼠負(fù)重游泳至力竭的時間，負(fù)重游泳時間越長，小鼠運(yùn)動耐力越強(qiáng)。

1.4.2 血清肌糖原、肝糖原、血乳酸及血尿素氮含量檢測 模型組和不同劑量組進(jìn)行最后1次負(fù)重游泳后，休息30 min，采用摘眼球方法取血。血液于室溫靜置2 h（或4 ℃過夜）后，離心（2 400 r/min），抽取血清備用。選取對應(yīng)的試劑盒檢測血乳酸、肌糖原、肝糖原、血尿素氮含量。空白對照組不負(fù)重游泳進(jìn)行以上操作采樣。

1.4.3 肝臟、腎臟及后肢肌肉中不同ATP 酶含量檢測 小鼠取完血后，迅速摘取肝臟、腎臟及后肢肌肉（腓腸肌），采用生理鹽水漂洗后，制備勻漿，離心（4 000 r/min）后，取上清液備用。選取對應(yīng)的試劑盒檢測肝臟、腎臟及后肢肌肉中不同ATP 酶含量。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 21.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。計量資料服從正態(tài)分布時以（）表示，組間比較采用單因素方差分析（One-wayANOVA），兩兩比較采用LSD-t法（方差齊）或Tamhane'sT2 檢驗（方差不齊）。P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 5組小鼠負(fù)重游泳時間比較

與模型組比較，ASP中、高劑量組小鼠負(fù)重游泳時間均有所延長（P＜0.05）。分別與ASP 低劑量組和ASP 中劑量組比較，ASP 高劑量組小鼠的負(fù)重游泳時間均更長（P＜0.05）。可見隨著ASP 劑量的增加，小鼠負(fù)重游泳的時間越長，說明在一定劑量范圍內(nèi)，小鼠的負(fù)重游泳時間與ASP 攝入量存在量效效應(yīng)。見表1。

表1 5組小鼠負(fù)重游泳時間比較（）minTable 1 Comparison of weight-bearing swimming times of mice in five groups（）min

表1 5組小鼠負(fù)重游泳時間比較（）minTable 1 Comparison of weight-bearing swimming times of mice in five groups（）min

注：與模型組比較，1）P＜0.05；與ASP低劑量組比較，2）P＜0.05；與ASP中劑量組比較，3）P＜0.05。Note:Compared with the model group,1) P＜0.05;compared with the ASP low-dose group,2) P＜0.05;compared with the ASP medium-dose group,3)P＜0.05.

2.2 5組小鼠血清肌糖原和肝糖原含量比較

與空白對照組比較，模型組小鼠血清肌糖原和肝糖原含量均降低（P＜0.05）。與模型組比較，ASP中劑量組血清肝糖原含量升高（P＜0.05）；ASP 高劑量組血清肌糖原和肝糖原含量均升高（P＜0.05）。與ASP低劑量組比較，ASP中、高劑量組血清肌糖原和肝糖原含量均較高（P＜0.05）。與ASP 中劑量組比較，ASP高劑量組血清肌糖原含量較高（P＜0.05）。見表2。

表2 5組小鼠血清肌糖原和肝糖原含量比較（）ng/LTable 2 Comparison of muscle glycogen and liver glycogen contents of mice in five groups（）ng/L

表2 5組小鼠血清肌糖原和肝糖原含量比較（）ng/LTable 2 Comparison of muscle glycogen and liver glycogen contents of mice in five groups（）ng/L

注：與空白對照組比較，1）P＜0.05；與模型組比較，2）P＜0.05；與ASP 低劑量組比較，3）P＜0.05；與ASP 中劑量組比較，4）P＜0.05。Note:Compared with the control group,1) P＜0.05;compared with the model group,2)P＜0.05;compared with the ASP low-dose group,3) P＜0.05;compared with the ASP medium-dose group,4)P＜0.05.

2.3 5組小鼠血清血乳酸和血尿素氮含量比較

與空白對照組比較，模型組小鼠血清血乳酸和尿素氮含量均升高（P＜0.05）。與模型組比較，ASP低劑量組小鼠血清血乳酸含量降低（P＜0.05）；ASP中、高劑量組血清血乳酸和血尿素氮含量均降低（P＜0.05）。與ASP 低、中劑量組比較，ASP 高劑量組血清血乳酸含量均較低（P＜0.05）。見表3。

表3 5組小鼠血清血乳酸和血尿素氮含量比較（）mmol/LTable 3 Comparison of serum blood lactate and blood urea nitrogen content of mice in five groups（）mmol/L

表3 5組小鼠血清血乳酸和血尿素氮含量比較（）mmol/LTable 3 Comparison of serum blood lactate and blood urea nitrogen content of mice in five groups（）mmol/L

注：與空白對照組比較，1）P＜0.05；與模型組比較，2）P＜0.05；與ASP 低劑量組比較，3）P＜0.05；與ASP 中劑量組比較，4）P＜0.05。Note:Compared with the control group,1) P＜0.05;compared with the model group,2)P＜0.05;compared with the ASP low-dose group,3) P＜0.05;compared with the ASP medium-dose group,4)P＜0.05.

2.4 5組小鼠肝臟不同ATP酶含量比較

與空白對照組比較，模型組小鼠肝臟中Na+-K+-ATP 和Ca2+-Mg2+-ATP 酶含量均降低（P＜0.05）。與模型組比較，ASP中劑量組小鼠肝臟中Ca2+-Mg2+-ATP 含量升高（P＜0.05），ASP 高劑量組小鼠肝臟中Na+-K+-ATP 和Ca2+-Mg2+-ATP 酶含量均升高（P＜0.05）。與ASP 低劑量組比較，ASP 中、高劑量組小鼠肝臟中Ca2+-Mg2+-ATP 酶含量均較高（P＜0.05）。與ASP 中劑量組比較，ASP 高劑量組小鼠肝臟中Ca2+-Mg2+-ATP酶含量較高（P＜0.05）。見表4。

表4 5組小鼠肝臟不同ATP酶含量比較（）U/mgprotTable 4 Comparison of different ATPase content in the liver of mice in five groups（）U/mgprot

表4 5組小鼠肝臟不同ATP酶含量比較（）U/mgprotTable 4 Comparison of different ATPase content in the liver of mice in five groups（）U/mgprot

注：與空白對照組比較，1）P＜0.05；與模型組比較，2）P＜0.05；與ASP 低劑量組比較，3）P＜0.05；與ASP 中劑量組比較，4）P＜0.05。Note:Compared with the control group,1) P＜0.05;compared with the model group,2) P＜0.05;compared with the ASP low-dose group,3)P＜0.05;compared with the ASP medium-dose group,4)P＜0.05.

2.5 5組小鼠腎臟不同ATP酶含量比較

與空白對照組比較，模型組小鼠腎臟中Na+-K+-ATP 酶、Mg2+-ATP 酶和Ca2+-Mg2+-ATP 酶含量均降低（P＜0.05），Ca2+-ATP含量降低不明顯（P＞0.05）。與模型組比較，ASP 高劑量組小鼠腎臟中Na+-K+-ATP酶和Mg2+-ATP酶含量均升高（P＜0.05）。與ASP低劑量組比較，ASP 高劑量組小鼠腎臟中Na+-K+-ATP 酶含量較高（P＜0.05）。與ASP 中劑量組比較，ASP 高劑量組小鼠腎臟中Na+-K+-ATP 和Mg2+-ATP酶含量均較高（P＜0.05）。見表5。

表5 5組小鼠腎臟不同ATP酶含量的比較（）U/mgprotTable 5 Comparison of different ATPase contents in kidneys of mice in five groups（）U/mgprot

表5 5組小鼠腎臟不同ATP酶含量的比較（）U/mgprotTable 5 Comparison of different ATPase contents in kidneys of mice in five groups（）U/mgprot

注：與空白對照組比較，1）P＜0.05；與模型組比較，2）P＜0.05；與ASP 低劑量組比較，3）P＜0.05；與ASP 中劑量組比較，4）P＜0.05。Note:Compared with the control group,1) P＜0.05;compared with the model group,2) P＜0.05;compared with the ASP low-dose group,3)P＜0.05;compared with the ASP medium-dose group,4)P＜0.05.

2.6 5組小鼠后肢肌肉不同ATP酶含量比較

與空白對照組比較，模型組小鼠后肢肌肉中Na+-K+、Mg2+、Ca2+、Ca2+-Mg2+4 種ATP 酶含量均降低（P＜0.05）。與模型組比較，ASP 低劑量組小鼠后肢肌肉中Ca2+-Mg2+-ATP 酶含量升高（P＜0.05）；ASP中劑量組后肢肌肉中Mg2+-ATP 酶、Ca2+-ATP 酶和Ca2+-Mg2+-ATP酶含量均升高（P＜0.05）；ASP高劑量組小鼠后肢肌肉中Na+-K+、Mg2+、Ca2+、Ca2+-Mg2+4 種ATP酶含量均升高（P＜0.05）。與ASP低劑量組比較，ASP中劑量組小鼠后肢肌肉中Mg2+-ATP 酶含量較高（P＜0.05），ASP 高劑量組小鼠后肢肌肉中Mg2+-ATP酶和Ca2+-ATP酶含量均較高（P＜0.05）。見表6。

表6 5組小鼠后肢肌肉不同ATP酶含量比較（）U/mgprotTable 6 Comparison of different ATPase contents in hindlimb muscles of mice in five groups（）U/mgprot

表6 5組小鼠后肢肌肉不同ATP酶含量比較（）U/mgprotTable 6 Comparison of different ATPase contents in hindlimb muscles of mice in five groups（）U/mgprot

注：與空白對照組比較，1）P＜0.05；與模型組比較，2）P＜0.05；與ASP低劑量組比較，3）P＜0.05。Note:Compared with the control group,1) P＜0.05;compared with the model group,2) P＜0.05;compared with the ASP low-dose group,3)P＜0.05.

3 討論

3.1 ASP能夠延長負(fù)重小鼠游泳的時間

運(yùn)動性疲勞是由運(yùn)動引起的一種常見的生理現(xiàn)象，其疲勞程度可依據(jù)體內(nèi)組織、器官的機(jī)能水平和運(yùn)動能力來評定［17］。小鼠負(fù)重游泳是強(qiáng)迫性全身消耗性運(yùn)動，負(fù)重游泳時間是衡量抗疲勞特性中最常見的指標(biāo)之一［5］，延緩運(yùn)動性疲勞的發(fā)生可體現(xiàn)為運(yùn)動耐力的增強(qiáng)，負(fù)重游泳時間越長，則說明藥物的抗疲勞效果越好［18］。本實驗結(jié)果顯示，連續(xù)灌胃10 d 低、中、高3 個劑量的ASP 后，小鼠負(fù)重游泳時間分別延長了14.42%、28.10%和184.11%，表明ASP 可以提高負(fù)重游泳小鼠的運(yùn)動耐力，延長運(yùn)動力竭的時間，發(fā)揮抗運(yùn)動疲勞作用，且存在一定的量效關(guān)系。這與LIU等［19］及阮治寰等［20］研究發(fā)現(xiàn)ASP 能夠提高小鼠的運(yùn)動耐力，且其作用效果與ASP劑量有關(guān)的研究結(jié)論基本一致。

3.2 ASP 對負(fù)重游泳小鼠肌糖原和肝糖原含量的影響

糖原是機(jī)體劇烈運(yùn)動時的能量來源，運(yùn)動過程中先消耗肌糖原，繼而消耗肝糖原［21］，肌/肝糖原含量增多，機(jī)體耐力越好，運(yùn)動時間則越長［22］，因此，其儲備量也可反映機(jī)體的疲勞程度［23］。本研究結(jié)果顯示：與空白對照組比較，模型組小鼠肌糖原和肝糖原含量顯著降低，說明負(fù)重游泳會迅速消耗小鼠的肌糖原和肝糖原。給予不同劑量ASP 后，與模型組比較，ASP 高劑量組肌糖原和肝糖原的含量顯著增加，提示ASP 可能通過提升糖原儲備或減少運(yùn)動時機(jī)體糖原消耗，進(jìn)而延緩疲勞的過早發(fā)生，顯示出ASP抗疲勞的功效。

3.3 ASP 對負(fù)重游泳小鼠血清血乳酸和血尿素氮的影響

生化指標(biāo)檢測也是評價體力疲勞的主要方法之一［24］。人體在進(jìn)行長時間運(yùn)動時，所需能量優(yōu)先由葡萄糖供能，當(dāng)體內(nèi)的葡萄糖消耗大于供應(yīng)時，機(jī)體出現(xiàn)缺氧反應(yīng)，此時能量則由有氧供能開始向無氧供能轉(zhuǎn)換。無氧供能過程中體內(nèi)部分葡萄糖分解不徹底，從而產(chǎn)生大量乳酸，當(dāng)乳酸含量驟增時，血乳酸濃度也相應(yīng)升高，導(dǎo)致肌肉中H＋濃度升高，pH值下降，進(jìn)而導(dǎo)致機(jī)體能量代謝能力下降，產(chǎn)生疲勞，進(jìn)一步引起機(jī)體運(yùn)動能力降低［25］。因此，機(jī)體疲勞產(chǎn)生和消除速度的重要指標(biāo)可用血乳酸水平來評定［26］。尿素氮與機(jī)體運(yùn)動耐力、身體機(jī)能和疲勞密切相關(guān)，是在能量供給不充足情況下產(chǎn)生的代謝物，負(fù)荷越大則產(chǎn)生的尿素氮越多［27］，其含量也可反映疲勞的程度［28］。本實驗結(jié)果顯示：與空白對照組相比，模型組小鼠血清血乳酸和血尿素氮顯著升高；與模型組比較，ASP低劑量組顯著降低了負(fù)重游泳小鼠運(yùn)動后血乳酸含量，ASP中、高劑量組均顯著降低了小鼠運(yùn)動后血清血乳酸和血尿素氮含量。結(jié)果表明，ASP達(dá)到一定劑量后，可能通過降低負(fù)重游泳小鼠血清血乳酸和血尿素氮含量，發(fā)揮其抗疲勞功效。

3.4 ASP 對負(fù)重游泳小鼠肝臟、腎臟和后肢肌肉ATP酶含量的影響

生物體內(nèi)能量直接供給的唯一來源是ATP［29］，其酶活性可反映機(jī)體能量代謝的水平，其中Na＋-K＋-ATP 酶和Ca2＋-Mg2＋-ATP 是細(xì)胞膜上特殊的蛋白質(zhì)，對于維持細(xì)胞內(nèi)外離子平衡至關(guān)重要，可分別驅(qū)動Na＋/K＋和Ca2＋/Mg2＋于細(xì)胞膜兩側(cè)進(jìn)行雙向運(yùn)輸，從而維持細(xì)胞膜電位，進(jìn)而催化ATP 分解供能［30］。本實驗結(jié)果顯示，與空白對照組比較，模型組小鼠負(fù)重運(yùn)動后肝臟中Na＋-K＋-ATP 和Ca2＋-Mg2＋-ATP 酶含 量降低，腎臟中Na＋-K＋-ATP 酶、Mg2＋-ATP 酶和Ca2＋-Mg2＋-ATP 酶含量降低，后肢肌肉中的Na＋-K＋、Mg2＋、Ca2＋、Ca2＋-Mg2＋4 種ATP酶含量均降低。表明機(jī)體能量代謝發(fā)生異常，這可能是導(dǎo)致機(jī)體最終出現(xiàn)疲勞的直接原因［31］。與模型組比較，ASP 低劑量組小鼠后肢肌肉中Ca2＋-Mg2＋-ATP酶含量升高；ASP中劑量組小鼠肝臟中的Ca2＋-Mg2＋-ATP 含量升高，后肢肌肉Mg2＋-ATP 酶、Ca2＋-ATP 酶和Ca2＋-Mg2＋-ATP 酶含量升高；ASP 高劑量組小鼠肝臟中的Na＋-K＋-ATP 和Ca2＋-Mg2＋-ATP 酶含量升高，腎臟中Na＋-K＋-ATP 酶和Mg2＋-ATP 酶含量升高，后肢肌肉中Na＋-K＋、Mg2＋、Ca2＋、Ca2＋-Mg2＋4種ATP 酶含量均升高；其中以ASP 高劑量組升高最明顯。提示ASP 抗疲勞作用可能與其能調(diào)節(jié)機(jī)體ATP 酶含量、改善機(jī)體能量代謝水平有關(guān)。

4 小 結(jié)

本研究探討了不同劑量ASP 與抗運(yùn)動疲勞作用的關(guān)系及其機(jī)制，結(jié)果表明，ASP在一定范圍內(nèi)可顯著延長小鼠負(fù)重游泳時間，發(fā)揮抗疲勞功效，其作用機(jī)制與ASP 可顯著提高小鼠運(yùn)動耐力、提升糖原儲備、減少乳酸與尿素氮堆積、改善機(jī)體能量代謝水平有關(guān)。