六甲蜜胺聯(lián)合培美曲塞治療中晚期乳腺癌的療效

趙 欽 王立欣

乳腺癌因具有較高的發(fā)病率和致死率，現(xiàn)已成為影響女性生命和身體健康的頭號(hào)殺手，其發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，影響因素眾多，如激素水平異常、家族遺傳等。乳腺癌在早期發(fā)病比較隱匿，故被確診時(shí)大部分已發(fā)展至中晚期，錯(cuò)失了手術(shù)的最佳時(shí)期。化療是治療中晚期乳腺癌的主要手段之一。目前，常用于乳腺癌治療的化療藥物有紫杉醇、卡帕等，其雖在初期取得較好療效，但長(zhǎng)期使用易產(chǎn)生耐藥性，且不良反應(yīng)明顯，患者依從性較差[1-2]。培美曲塞屬于多靶點(diǎn)抗葉酸制劑，而六甲蜜胺屬于嘧啶類抗代謝類藥物，患者可以將其帶至家中口服化療?，F(xiàn)大量研究證實(shí)兩者可以在多種癌癥的治療中發(fā)揮作用，但關(guān)于兩者聯(lián)用研究較少。故為了明確六甲蜜胺聯(lián)合培美曲塞在乳腺癌化療中的作用，本研究就六甲蜜胺聯(lián)合培美曲塞治療中晚期乳腺癌療效及對(duì)血管內(nèi)皮因子、血清miR-155、miR-497及HCY水平的影響進(jìn)行分析?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019年1月至2020年12月?lián)犴樖兄嗅t(yī)院收治的56例中晚期乳腺癌患者作為研究對(duì)象，隨機(jī)分為對(duì)照組與觀察組，各28例。對(duì)照組年齡37～63歲，平均（46.78±6.54）歲；TNM分期：Ⅱa期10例，Ⅱb期8例，Ⅲa期8例，Ⅲb期2例。觀察組年齡38～62歲，平均（46.14±5.98）歲；TNM分期：Ⅱa期9例，Ⅱb期6例，Ⅲa期10例，Ⅲb期3例。兩組患者一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。具有可比性。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：1）符合中晚期乳腺癌診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]；2）TNM分期屬于Ⅱ～Ⅲ期；3）卡氏評(píng)分60分以上；4）自愿參與試驗(yàn)并簽署了知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：1）其他惡性腫瘤；2）病情嚴(yán)重生存期短于3個(gè)月；3）配合度較差；4）對(duì)本試驗(yàn)使用藥物不耐受。

1.3 治療方案

兩組患者均在治療前一周口服葉酸400 μg/次，1次/d，化療期間繼續(xù)服用；并肌內(nèi)注射1 mg維生素B12，每4周注射1次。對(duì)照組靜脈滴注500 mg/m2培美曲塞（上海凱茂生物醫(yī)藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H20080210）10 min，第1天。觀察組在對(duì)照組基礎(chǔ)上口服六甲蜜胺片（葵花藥業(yè)集團(tuán)有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H23020451），150 mg/d。兩組均連續(xù)化療8周。

1.4 觀察指標(biāo)

1）療效判定標(biāo)準(zhǔn)：完全緩解，目標(biāo)病灶消失并持續(xù)一個(gè)月；部分緩解，目標(biāo)病灶直徑縮短＞50%；穩(wěn)定，目標(biāo)病灶縮小未達(dá)部分緩解標(biāo)準(zhǔn)或增加18%以下；進(jìn)展，出現(xiàn)新病灶，目標(biāo)病灶直徑無(wú)變化或增加[4]。治療有效率（%）=（完全緩解例數(shù)+部分緩解例數(shù)）/總例數(shù)×100%。2）治療前后，分別收集患者空腹靜脈血5 ml，使用免疫熒光法檢測(cè)患者腫瘤標(biāo)志物糖類抗原125（CA125）、癌胚抗原（CEA）、糖類抗原153（CA153）、糖類抗原199（CA199）水平；使用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法測(cè)定患者血清血管內(nèi)皮因子-121（VEGF-121）、血管內(nèi)皮因子-145（VEGF-145）、血管內(nèi)皮因子-165（VEGF-165）水平，操作嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書進(jìn)行。3）取患者治療后空腹靜脈血5 ml，靜置15 min，3 500 r/min離心10 min，取上清液檢測(cè)。通過(guò)循環(huán)酶法檢測(cè)HCY；通過(guò)Trizol試劑盒提取總RNA，通過(guò)一步法將RNA反轉(zhuǎn)錄為cDNA（16 ℃ 0.5 h，42 ℃ 0.5 h，85 ℃ 5 min），并通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量檢測(cè)試劑盒對(duì)cDNA中的miR-155和miR-497進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)，反應(yīng)條件：95 ℃預(yù)變性10 min，95 ℃ 15 s，60 ℃退火45 s，反復(fù)40個(gè)循環(huán)，運(yùn)用比較閾值循環(huán)值方法（2-ΔΔCt）計(jì)算miR-155和miR-497的相對(duì)表達(dá)量。4）詳細(xì)記錄患者出現(xiàn)的不良反應(yīng)，嚴(yán)重者及時(shí)停藥，留院觀察。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 25.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 臨床療效

觀察組治療有效率明顯優(yōu)于對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組患者臨床療效比較

2.2 腫瘤標(biāo)志物

治療前，兩組腫瘤標(biāo)志物CA125、CEA、CA153、CA199水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；治療后，觀察組腫瘤標(biāo)志物CA125、CEA、CA153、CA199水平低于對(duì)照組（P＜0.05）。見表2。

表2 兩組患者腫瘤標(biāo)志物水平比較(±s)

表2 兩組患者腫瘤標(biāo)志物水平比較(±s)

注：與本組治療前比較，aP＜0.05；與對(duì)照組治療后比較，bP＜0.05

組別 例數(shù) CA125(U/ml)CEA(ng/ml)CA153(U/ml)CA199(U/ml)對(duì)照組 28 治療前 75.36±7.62 17.25±2.08 42.59±6.14 80.38±9.85 治療后 60.24±4.76a 10.51±1.94a 33.48±4.01a 68.44±7.96a 觀察組 28 治療前 75.88±6.65 17.58±1.99 41.83±5.97 81.02±9.59 治療后 45.28±4.37ab 7.36±1.45ab 21.85±3.47ab 50.41±6.95ab

2.3 血管內(nèi)皮因子

治療前，兩組血管內(nèi)皮因子VEGF-121、VEGF-145、VEGF-165水平比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；治療后，觀察組血管內(nèi)皮因子VEGF-121、VEGF-145、VEGF-165水平低于對(duì)照組（P＜0.05）。見表3。

表3 兩組患者血管內(nèi)皮因子水平比較(ng/L,±s)

表3 兩組患者血管內(nèi)皮因子水平比較(ng/L,±s)

注：與本組治療前比較，aP＜0.05；與對(duì)照組治療后比較，bP＜0.05

組別 例數(shù) VEGF-121 VEGF-145 VEGF-165 對(duì)照組 28 治療前 303.16±13.32 208.24±20.38 242.17±18.59 治療后 254.25±14.58a 154.31±19.64a 196.29±15.11a 觀察組 28 治療前 304.38±13.95 207.59±15.64 243.48±19.12 治療后 186.07±12.37ab 100.42±14.85ab 125.85±14.39ab

2.4 miR-155、miR-497、HCY表達(dá)水平

治療后，與對(duì)照組比較，觀察組miR-155、HCY表達(dá)水平明顯降低（P＜0.05），miR-497表達(dá)水平明顯升高（P＜0.05）。見表4。

表4 兩組患者miR-155、miR-497、HCY表達(dá)水平 比較(±s)

表4 兩組患者miR-155、miR-497、HCY表達(dá)水平 比較(±s)

組別 例數(shù)miR-155 miR-497 HCY(μmol/L)對(duì)照組28 3.56±1.260.81±0.32 12.64±2.01 觀察組28 1.98±0.961.42±0.63 10.15±1.49 t值 14.268 9.234 10.685 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.5 不良反應(yīng)發(fā)生率

治療后，觀察組骨髓抑制、肝腎功能損害、血小板下降、白細(xì)胞降低、厭食惡心、腹瀉、神經(jīng)毒 性發(fā)生率均明顯低于對(duì)照組（P＜0.05）。見表5。

表5 兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生率比較[例(%)]

3 討論

乳腺癌是女性常見惡性腫瘤之一，其發(fā)生率在我國(guó)高達(dá)23%。乳腺癌發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，現(xiàn)在臨床上普遍認(rèn)為乳腺癌的發(fā)生與高水平雌激素刺激、長(zhǎng)期酗酒、致癌性RNA病毒感染、家族遺傳等關(guān)系密切。有研究表明其與表觀遺傳學(xué)改變有關(guān)，在乳腺癌中，總體高甲基化的概率高，而局部高甲基化的概率較低[5]，還存在DNA甲基化修飾組蛋白尾部、染色質(zhì)結(jié)構(gòu)改變以沉默基因表達(dá)和核小體重構(gòu)等表觀遺傳機(jī)制[6]。目前，西醫(yī)臨床上常用手術(shù)、放療、化療等手段治療乳腺癌[7]，雖然能有效抑制腫瘤細(xì)胞，延長(zhǎng)患者生存期，但長(zhǎng)期應(yīng)用易造成骨髓抑制、消化道反應(yīng)及肝腎功能異常等，依從性較差，且仍不能阻止腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移，此外內(nèi)分泌治療無(wú)明顯針對(duì)性，晚期患者手術(shù)難度依然較大，預(yù)后較差，所以常用的方案還是以化療為主，且其治療是一個(gè)長(zhǎng)期的過(guò)程，常規(guī)單純化療效果并不十分理想，目前已有大量試驗(yàn)證實(shí)在腫瘤治療中聯(lián)合化療方案具有較好療效，同時(shí)也可以降低患者耐藥性，減輕毒副作用，因此主張采用聯(lián)合化療方案。故本研究采用六甲蜜胺聯(lián)合培美曲塞，以期提高療效。

本研究對(duì)照組給予培美曲塞化療方案，培美曲塞是一種新型的多靶點(diǎn)抗葉酸制劑，抗腫瘤作用機(jī)制與抑制二氫葉酸還原酶、胸苷酸合酶等酶活性有關(guān)，其可以通過(guò)阻斷嘧啶核苷酸和嘌呤核苷酸的合成，妨礙細(xì)胞內(nèi)正常代謝，使細(xì)胞分裂停止在S期，進(jìn)而抑制腫瘤細(xì)胞增殖，促使腫瘤細(xì)胞凋亡，此外其還可以降低腫瘤的耐藥性[8-9]。六甲蜜胺是一種周期特異性抗代謝藥物，具有廣譜抗癌活性，近年來(lái)已在卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌等惡性腫瘤治療中被證實(shí)有確切療效。其可以通過(guò)干擾二氫葉酸還原酶、抑制葉酸代謝，并選擇性抑制DNA、RNA與蛋白質(zhì)合成來(lái)發(fā)揮抗腫瘤作用。六甲蜜胺在使用時(shí)與烷化劑無(wú)交叉耐藥性，不良反應(yīng)較少，此外，患者還可以將藥物帶回家口服，可減輕其在醫(yī)院就醫(yī)的心理負(fù)擔(dān)，且價(jià)格較易接受。六甲蜜胺經(jīng)口服后血漿達(dá)峰時(shí)間（Tmax）1～3 h，起效迅速，可快速緩解不適癥狀。六甲蜜胺在患者體內(nèi)需經(jīng)過(guò)肝臟微粒體P-450單氧化酶活化后成為N-去甲基代謝物，發(fā)揮細(xì)胞毒效應(yīng)，同時(shí)其代謝物經(jīng)尿液排出體外，可以有效控制局部腫瘤復(fù)發(fā)，提高生存率[5]。本研究結(jié)果顯示，觀察組治療有效率明顯優(yōu)于對(duì)照組，且肝腎功能損害、血小板下降、白細(xì)胞降低、厭食惡心、腹瀉、神經(jīng)毒性發(fā)生率均明顯降低，表明與單純使用培美曲塞比較，六甲蜜胺聯(lián)合培美曲塞能夠提高中晚期乳腺癌的近期療效，且具有良好的安全性。

研究證實(shí)腫瘤標(biāo)志物在腫瘤患者體內(nèi)高表達(dá)，其水平一定程度上可以預(yù)測(cè)腫瘤的惡性程度并有效監(jiān)測(cè)腫瘤的發(fā)展[10]。CA125與CEA均屬于腫瘤標(biāo)志物指標(biāo)，其在乳腺癌中的陽(yáng)性表達(dá)分別占25%、50%。CA153是從乳腺組織碎片中提取出來(lái)的糖蛋白的一種變異體，屬于糖類抗原物質(zhì)，其在乳腺癌患者機(jī)體內(nèi)水平明顯上升。CA199對(duì)乳腺癌轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)有一定的診斷價(jià)值。故對(duì)這幾項(xiàng)標(biāo)志物進(jìn)行檢測(cè)可以在分析乳腺癌的進(jìn)展及惡性程度中產(chǎn)生積極參考作用[11]。新生血管對(duì)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移起到了至關(guān)重要的作用，VEGF是血管生成過(guò)程中重要的促進(jìn)因子，可由腫瘤細(xì)胞分泌，誘導(dǎo)腫瘤血管生成，增加血管通透性，還可以加速腫瘤細(xì)胞的分裂及分化，促進(jìn)其轉(zhuǎn)移等。按照剪切方式可分為VEGF-121、VEGF-145、VEGF-165等分泌型可溶性蛋白。乳腺癌腫瘤組織中VEGF高表達(dá)，與乳腺癌轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)等關(guān)系密切[12]。本研究結(jié)果顯示，治療后觀察組CA125、CEA、CA153、CA199水平均明顯低于對(duì)照組，且觀察組血管內(nèi)皮因子水平下降程度也比對(duì)照組更顯著，說(shuō)明六甲蜜胺聯(lián)合培美曲塞化療治療中晚期乳腺癌，可以下調(diào)患者體內(nèi)腫瘤標(biāo)志物水平，緩解腫瘤的惡性程度，并有效降低腫瘤細(xì)胞新生血管的形成，抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)。

mRNA在近年來(lái)的腫瘤研究中備受關(guān)注，其可以廣泛參與人體細(xì)胞增殖、分化、代謝及凋亡過(guò)程，同時(shí)其也是一類抑癌基因，可調(diào)控腫瘤的發(fā)生發(fā)展[13]。眾多研究顯示，miRNAs與乳腺癌之間存在密切關(guān)聯(lián)。miR-155是具有促癌活性的miRNA，其表達(dá)水平在乳腺癌患者血清中升高，且可促進(jìn)體內(nèi)外乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖，是一個(gè)可行的診斷乳腺癌、監(jiān)測(cè)療效和預(yù)后評(píng)估的生物標(biāo)志物[14]。miR-497是miR-15家族成員之一，屬于內(nèi)含子編碼的高度保守的miRNA，在多種腫瘤中呈低表達(dá)，其在腫瘤的進(jìn)展過(guò)程中具有抑癌基因的作用[15]。HCY是含有硫基的腫瘤標(biāo)記物之一，屬于蛋氨酸代謝過(guò)程中產(chǎn)生的非必需氨基酸。HCY主要通過(guò)轉(zhuǎn)硫化途徑、甲基化途徑在體內(nèi)代謝掉。有研究顯示，HCY可以促進(jìn)過(guò)氧化氫生成，導(dǎo)致代謝紊亂，進(jìn)而可能促進(jìn)癌癥的發(fā)生[16]。本研究結(jié)果顯示，治療后，與對(duì)照組比較，觀察組miR-155、HCY表達(dá)水平明顯降低，miR-497表達(dá)水平明顯升高，表明六甲蜜胺聯(lián)合培美曲塞能有效調(diào)節(jié)乳腺癌患者體內(nèi)miR-155、miR-497等抑癌基因的表達(dá)，這可能與兩者聯(lián)合協(xié)同增效有關(guān)。

綜上所述，六甲蜜胺聯(lián)合培美曲塞治療中晚期乳腺癌患者可以提高近期療效，同時(shí)降低體內(nèi)腫瘤標(biāo)志物及血管內(nèi)皮因子水平，此外還可以調(diào)節(jié)miR-155、miR-497、HCY表達(dá)水平，且具有良好的安全性。