肝纖維化發(fā)生及逆轉(zhuǎn)途徑的研究進(jìn)展

蘇 靜，胡以平

(海軍軍醫(yī)大學(xué)細(xì)胞生物學(xué)教研室，上海 200082)

肝病是一項全球范圍內(nèi)引起廣泛關(guān)注且非常嚴(yán)重的公眾健康問題，全世界每年約有200萬人死于肝病[1]。引起肝病的潛在病因主要包括病毒，代謝，藥物毒性，自身免疫等，持續(xù)的刺激使得患者從最初的慢性肝損傷逐步發(fā)展到晚期肝硬化甚至肝癌。在慢性肝損傷中多伴隨著肝纖維化，而進(jìn)行性肝纖維化的一個共同結(jié)果是肝硬化，其中中國占全球肝硬化死亡人數(shù)的11%[2]?，F(xiàn)階段，晚期肝病的治療手段依舊主要依賴器官移植，但受其資源限制性，晚期肝病的治療面臨許多困難。目前在早期實驗和臨床研究中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了肝纖維化的可逆現(xiàn)象，如果臨床治療中能提前發(fā)現(xiàn)并在此階段進(jìn)行肝纖維化的逆轉(zhuǎn)干預(yù)，將對肝病治療具有重大意義。本文就目前肝纖維化逆轉(zhuǎn)的主要進(jìn)展進(jìn)行綜述，以期為肝纖維化相關(guān)疾病的治療和進(jìn)一步研究提供理論指導(dǎo)。

1 肝纖維化發(fā)生的病理生理機(jī)制

肝纖維化是肝臟在受到外界刺激后發(fā)生的自我修復(fù)和傷口愈合，這是一個復(fù)雜的多細(xì)胞反應(yīng)的結(jié)果。國內(nèi)肝病多數(shù)是由于大量飲酒和慢性乙型、丙型病毒性肝炎感染引起的，但不管是何種病因，肝纖維化的形成過程非常相似，主要包括長期慢性實質(zhì)損傷，持續(xù)激活炎癥反應(yīng)和氧化應(yīng)激，細(xì)胞外基質(zhì)大量沉積，纖維瘢痕形成等，共同破壞肝臟的正常結(jié)構(gòu)和功能[3]。

纖維化的發(fā)生始于效應(yīng)細(xì)胞的激活。肝臟受到損傷后，肝內(nèi)細(xì)胞的死亡以及免疫細(xì)胞的浸潤引起炎癥和纖維化信號的級聯(lián)反應(yīng)激活。細(xì)胞損傷會釋放危險相關(guān)分子模式(damage associated molecular patterns，DAMPs)，是一種細(xì)胞內(nèi)異質(zhì)分子，如游離DNA、ATP、核因子(high mobility group protein B1，HMGB1)，熱休克蛋白等，或許還有病原體相關(guān)分子模式(pathogen-associated molecular patterns，PAMPS)[4]，如 酒 精，革蘭氏陰性菌脂多糖(LPS)等，這些相關(guān)模式刺激并激活一些炎癥細(xì)胞如巨噬細(xì)胞、T 細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞(natural killer T cell，NKT)、庫普弗細(xì)胞等，分泌如白介素(interleukin，IL)-1β、-18、-13， 干 擾 素γ， 腫 瘤 壞 死 因 子-α(tumor necrosis factor-α， TNF-α) 等 促 炎 因 子 和CCL2(C-C motif chemokine ligand 2)等趨化因子，進(jìn)一步誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞，單核細(xì)胞等在損傷處的募集和激活。在炎癥微環(huán)境下，肌成纖維細(xì)胞活化和增殖，并在趨化因子的作用下遷徙，肌成纖維細(xì)胞是產(chǎn)生細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix，ECM)的主力來源。肌成纖維細(xì)胞的來源可根據(jù)病因的不同，大致分為4種，以靜息期的肝星狀細(xì)胞(hepatic stellate cells，HSC)激活分化為主，α-平滑肌肌動蛋白(actin alpha 2，α-SMA)和I型膠原的表達(dá)增加是活化的肝星狀細(xì)胞(activated hepatic stellate cells，aHSCs)的特征標(biāo)志；還有內(nèi)源性門靜脈成纖維細(xì)胞、骨髓來源細(xì)胞和肝實質(zhì)細(xì)胞來源，可經(jīng)過上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)換(epithelial-mesenchymal transition，EMT)產(chǎn)生肌成纖維細(xì)胞，通過分泌細(xì)胞外基質(zhì)蛋白等對肝纖維化進(jìn)展產(chǎn)生重要作用。

在進(jìn)展性肝慢性損傷中[5]，ECM 的生成降解平衡狀態(tài)被打破而大量沉積是肝纖維化的重要特征。活化的巨噬細(xì)胞、肝星狀細(xì)胞，以及其他肌成纖維細(xì)胞可以釋放腫瘤生長因子-β1(transforming growth factor beta 1，TGF-β1)，TGF-β1 是誘導(dǎo)纖維膠原(主要是I 型和III 型)、α-SMA、層黏連蛋白和纖維連接蛋白產(chǎn)生的最有效的細(xì)胞因子，同時該因子也會促進(jìn)肌成纖維細(xì)胞存活和增殖。肝星狀細(xì)胞可以分泌基底膜蛋白酶、基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMP)包括MMP-2、MMP-3和MMP-9和間質(zhì)膠原酶MMP-13，aHSCs可以分泌金屬蛋白酶組織抑制劑(tissue inhibitor of metalloproteases，TIMP)1和2。MMPs是一種鈣依賴性酶，能特異性降解膠原和非膠原性ECM底物，而在肝損傷期間金屬蛋白酶組織抑制劑的持續(xù)產(chǎn)生可以抑制基質(zhì)金屬蛋白酶的活性，使得金屬蛋白酶對多余的纖維膠原去除效率降低，打破基質(zhì)降解合成的平衡，從而促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)的沉積。

在肝纖維化的典型特征中，除了ECM的大量沉積，還會發(fā)生竇道毛細(xì)血管化，這主要是由于HSC激活后，合成和釋放血管生成介質(zhì)，如VEGFA(vascular endothelial growth factor A)，PDGF(platelet derived growth factor)等，同時分泌纖維膠原I 和III 在剝離間隙中取代IV 型膠原引起的；膽管反應(yīng)，在慢性肝損傷的情況下，持續(xù)的炎癥和氧化應(yīng)激使得肝細(xì)胞增殖和肝干細(xì)胞分化被抑制，短暫擴(kuò)增的肝祖細(xì)胞被迫主要分化為激活和應(yīng)激抵抗的膽管樣細(xì)胞或反應(yīng)性膽管細(xì)胞。

2 肝纖維化的可逆性分析

目前肝纖維化的逆轉(zhuǎn)已經(jīng)在許多實驗研究和臨床治療中得到驗證。 大量的基礎(chǔ)研究， 包括四氯化碳(carbon tetrachloride，CCl4)，硫代乙酰胺(thioacetamide，TAA)，膽管結(jié)扎等誘導(dǎo)的動物肝纖維化模型[6]，以及豐富的臨床治療數(shù)據(jù)[7]，均展示了不同病因引起的慢性肝病中出現(xiàn)肝纖維化消退現(xiàn)象。正如在大鼠慢性CCl4損傷中，晚期肝纖維化在損傷停止后被重塑到接近未損傷肝的水平[8]；Poynard 等[9]報告，所有慢性丙型肝炎患者在治療后纖維化發(fā)生率均有下降。

在肝纖維化的逆轉(zhuǎn)過程中，標(biāo)志性特點是膠原纖維降解，肌成纖維細(xì)胞、炎癥和纖維化細(xì)胞因子減少，肝功能改善以及肝生理結(jié)構(gòu)的恢復(fù)。具體體現(xiàn)在，在去除肝臟外界刺激的影響下，由于肝臟本身的再生能力影響和肝壞死細(xì)胞的減少，使得炎癥因子和促纖維化因子分泌也減少，同時活化的肝星狀細(xì)胞會逐漸走向衰老和凋亡，或轉(zhuǎn)為靜息狀態(tài)，TGF-β和TIMP1表達(dá)水平降低，MMPs活性增加，加快ECM降解，促進(jìn)肝臟ECM的重塑。

3 肝纖維化逆轉(zhuǎn)途徑研究

3.1 減少活化的肝星狀細(xì)胞數(shù)量

在正常肝臟中，HSCs約占肝駐留細(xì)胞總數(shù)的15%和肝非實質(zhì)細(xì)胞的30%，通常表現(xiàn)為靜息狀態(tài)并含有脂滴[10]。但在肝臟受到損傷時，不同炎癥因子導(dǎo)致HSCs 激活或轉(zhuǎn)分化為具有高度增殖性和收縮性的肌成纖維細(xì)胞，持續(xù)的HSCs 激活釋放的細(xì)胞因子可增強炎癥和纖維化組織反應(yīng)。目前靶向HSCs 的治療已經(jīng)取得了較多成果，主要有兩種治療方法。

3.1.1 促進(jìn)HSCs 衰老和凋亡利匹韋林(Rilpivirine，RPV)，是一種抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥物，在肝臟毒性和脂質(zhì)特性方面更具有安全性。研究者已在細(xì)胞和實驗動物層面證明RPV 能夠通過JAK-STAT 通路調(diào)節(jié)STAT1 (signal transducer and activator of transcription 1)和STAT3 之間的平衡，通過STAT1 的選擇性調(diào)控誘導(dǎo)HSCs 凋亡，可在不同的慢性肝損傷實驗?zāi)Ｐ椭?，改善炎癥和肝纖維化，凋亡HSCs 分泌的IL-6 還能特異性激活肝細(xì)胞中STAT3，以增強肝再生[11]。aHSCs 還具有以NF-kB(nuclear factor kappa B)依賴的方式增強生存率的特征，從而促進(jìn)纖維化，因此，抑制NF-kB 通路可能通過誘導(dǎo)HSCs 凋亡來抑制肝纖維化[12]。除此之外，CCN家族基質(zhì)細(xì)胞蛋白，富含半胱氨酸的蛋白61(CCN1/CYR61)通過減弱TGF-β信號通路來促進(jìn)HSCs的衰老和凋亡[13]。纖維連接蛋白肽[14]可以通過aHSCs 凋亡導(dǎo)致自限性反應(yīng)，最終限制慢性纖維化的發(fā)展。

3.1.2 抑制或逆轉(zhuǎn)HSCs 活化成纖維細(xì)胞生長因子(fibroblast growth factor，F(xiàn)GF)是在肝損傷中表達(dá)增加的主要生長因子家族之一，F(xiàn)GF信號除了加速損傷肝臟的再生外，還會導(dǎo)致纖維化的發(fā)展。研究表明CCL4誘導(dǎo)的肝纖維化在FGF1/FGF2 缺陷小鼠中顯著降低[15]；2020 年Wang 等[16]的研究再次證明，抑制FGFR(fibroblast growth factor receptors)信號通路通過抑制促炎細(xì)胞因子的分泌和MMPs 的表達(dá)，特別是MMP9 的激活，抑制單核細(xì)胞對HSCs 的黏附，且在炎癥階段抑制FGF 信號以抑制HSCs 的活化來減輕纖維化的進(jìn)展。膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(glial cell line-derived neurotrophic factor，GDNF)，是TGF-β超家族的一員，可通過Ret/ALK5 受體以及AKT(AKT serine/threonine kinase 1) 和Smad(mothers against dpp)通路誘導(dǎo)HSCs 激活，阻斷GDNF 可抑制HSCs 的激活，而抑制纖維化進(jìn)展[17]。目前多項研究表明過氧化物酶體增殖物激活 受 體(peroxisome proliferator activated receptor gamma，PPARγ)是HSCs激活和表型改變的關(guān)鍵介質(zhì)，可影響HSCs處于靜息期的狀態(tài)。Lu等[18]研究發(fā)現(xiàn)，大鼠在低氧刺激下引起肝纖維化，HSCs 活化標(biāo)記物增多，同時伴隨著PPARγ表達(dá)的降低，而通過體內(nèi)外加入PPARγ激動劑可以減少HSCs 活化和膠原沉積，抑制肝纖維化。

3.2 促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)降解

肝纖維化的一個重要特征是肝臟結(jié)構(gòu)的破壞和過度的ECM合成和沉積。正常肝臟中ECM的含量非常有限，但其構(gòu)成了一個復(fù)雜的結(jié)構(gòu)支持性蛋白質(zhì)網(wǎng)絡(luò)，在調(diào)節(jié)組織穩(wěn)態(tài)、重塑和再生中發(fā)揮重要作用。ECM成分的交聯(lián)，特別是纖維膠原和彈性蛋白，與纖維化進(jìn)展密切相關(guān)。越來越多的證據(jù)表明，ECM降解可能參與肝纖維化的自發(fā)溶解。

3.2.1 減少膠原產(chǎn)生減少膠原產(chǎn)生是肝纖維化逆轉(zhuǎn)的重要策略之一。C9復(fù)合物[19]可以抑制LARP6(La ribonucleoprotein 6)與編碼I 型膠原的mRNA 結(jié)合，從而抑制動物模型中的纖維化發(fā)生，還可以減少HSCs的I型膠原分泌。趨化劑受體同源分子[20](prostaglandin D2 receptor 2，CRTH2)是前列腺素D2 的質(zhì)膜受體，錨定的CRTH2可以與LARP6的膠原mRNA識別序列結(jié)合，并促進(jìn)細(xì)胞中膠原mRNA的降解。Fan等[21]研究發(fā)現(xiàn)ECM1敲除小鼠可自發(fā)發(fā)展為肝纖維化，并在第2個月時死亡；而且ECM1可通過與αv整合素相互作用使TGF-β保持在非活化狀態(tài)以抑制肝星狀細(xì)胞活化和肝纖維化的發(fā)生。抑制素家族中的β-抑制素2 隨著肝纖維化的進(jìn)展而表達(dá)增加，小鼠模型和體外實驗均表明降低β-抑制素2 的表達(dá)可減少膠原的表達(dá)并改善纖維化[22]。也有研究表明，相比于減少膠原的產(chǎn)生，增強金屬蛋白酶的活性，減弱其抑制劑的表達(dá)在肝纖維化回歸中更為重要。

3.2.2 增強ECM的降解在纖維形成過程中，I型、III型膠原以及纖維連接蛋白逐漸取代正常肝臟中IV 型、VI 型膠原，這種高度穩(wěn)定和交聯(lián)的ECM分子可以被MMP特異性降解。TIMP可導(dǎo)致基質(zhì)金屬蛋白酶的催化活性下降，多項研究表明TIMP的持續(xù)產(chǎn)生似乎是纖維化進(jìn)展的關(guān)鍵。

早在2003年[23]發(fā)現(xiàn)腺病毒介導(dǎo)的MMP1表達(dá)可以改善TAA誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化，并提出ECM的降解伴隨著aHSCs的抑制和凋亡。在CCl4和膽管結(jié)扎誘導(dǎo)的肝硬化大鼠模型中，腺病毒載體介導(dǎo)的MMP-8過表達(dá)[24]可以逆轉(zhuǎn)纖維化，并改善肝功能和肝內(nèi)血壓，同時降低TGF-β 表達(dá)，而MMP-9 和HGF(hepatocyte growth factor)表達(dá)升高。MMP-9 突變體[25]可作為TIMP-1拮抗劑以減弱CCl4誘導(dǎo)的纖維化；除此之外，Tsay等[26]提出，抑制肝細(xì)胞中miR-221-3p 會導(dǎo)致沉積的細(xì)胞外基質(zhì)的更快溶解；下調(diào)miR-221-3p 可誘導(dǎo)肝細(xì)胞中GNAI2 的表達(dá)，抑制CCl2的分泌，從而導(dǎo)致HSCs活化減少，改善肝纖維化。

3.2.3 改變ECM 的空間構(gòu)象和基質(zhì)剛度賴氨酸氧化酶(lysyl oxidase，LOX)和賴氨酸氧化酶樣蛋白2(lysyl oxidase like 2，LOXL2)都在肝纖維化的缺氧環(huán)境中表達(dá)上調(diào)，其賴氨酸殘基可誘導(dǎo)纖維蛋白的共價交聯(lián)，增加對ECM降解的抵抗，促進(jìn)肝纖維化的穩(wěn)定和積累。近來Klepfish 等[27]提出，使用一種新型抗LOXL2 中和抗體GS3411 能使膠原降解后的空間構(gòu)建發(fā)生變化，使得單核來源的巨噬細(xì)胞等分泌的MMPs 更易發(fā)揮作用，加速和增強了膠原蛋白的降解，有效緩解肝纖維化和促進(jìn)纖維化逆轉(zhuǎn)。在肝臟中，基質(zhì)剛度的升高可以激活HSCs 或成纖維細(xì)胞，進(jìn)而導(dǎo)致ECM的沉積，形成正反饋回路。所以有研究[28]表明，抑制ROCK(Rho kinase)信號，靶向YAP(Yes1 associated transcriptional regulator)或直接靶向α-SMA的表達(dá)等可以降低纖維組裝，減輕肝纖維化。

3.3 免疫細(xì)胞及免疫反應(yīng)是把雙刃劍

在纖維化進(jìn)展過程中，非實質(zhì)細(xì)胞，如肝間充質(zhì)細(xì)胞，免疫細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞是纖維化微環(huán)境的關(guān)鍵細(xì)胞組成部分，通過引發(fā)炎癥等參與傷口愈合和組織修復(fù)，并調(diào)節(jié)HSCs 轉(zhuǎn)分化和調(diào)節(jié)ECM 重塑來促進(jìn)ECM 的積累。免疫反應(yīng)在纖維化疾病中起著重要作用，對免疫細(xì)胞以及其信號通路的系統(tǒng)研究仍然是開發(fā)新療法的基礎(chǔ)。

3.3.1 巨噬細(xì)胞具有雙重作用肝臟中含有大量組織駐留的巨噬細(xì)胞，稱為庫普弗細(xì)胞(KCs)，在生理和病理上可維持肝臟免疫穩(wěn)態(tài)。庫普弗細(xì)胞的激活和單核/巨噬細(xì)胞的募集是控制纖維化起始、持續(xù)和解決的關(guān)鍵事件。在損傷的肝臟中，巨噬細(xì)胞表型隨炎癥、纖維化的持續(xù)時間和程度而動態(tài)變化，具有較高的可塑性且具有異質(zhì)性表型。

肝巨噬細(xì)胞具有雙重功能，如新鮮浸潤的Ly-6C+單核細(xì)胞來源的巨噬細(xì)胞具有促炎表型，加重炎癥。因此，使用抗CCl2或CCR2[29](C-C motif chemokine receptor 2)的拮抗劑可以抑制對乙酰氨基酚(acetaminophen，APAP)給藥后早期單核細(xì)胞浸潤從而改善肝損傷，發(fā)揮抗纖維化作用。在非酒精性脂肪性肝炎(non-alcoholic steatohepatitis，NASH)患者[30]中，CCR2/CCR5 雙抑制劑治療可阻止單核細(xì)胞來源的巨噬細(xì)胞招募和星狀細(xì)胞激活，并抑制纖維化。而在最近的兩項Ⅱ期臨床試驗的報告中強調(diào)了這一概念，這些報告顯示炎癥信號的特異性抑制劑絲氨酸/蘇氨酸激酶ASK1 抑制劑selonsertib[31]和雙CCR2/CCR5 抑制劑cenicriviroc[32]會靶向NASH和纖維化患者的巨噬細(xì)胞。雖然這兩種藥物可能針對巨噬細(xì)胞的不同功能，但均具有抗纖維化作用。

然而，一些肝纖維化的小鼠模型顯示，肝巨噬細(xì)胞在纖維化的進(jìn)展和消退過程中具有相反的功能。浸潤單核/巨噬細(xì)胞也通過產(chǎn)生抗纖維化介質(zhì)如MMP12 和MMP13 促進(jìn)纖維化消退，或吞噬肝細(xì)胞碎片誘導(dǎo)Wnt3a(Wnt family member 3A)的表達(dá)而有利于實質(zhì)再生[33]。CD11b(integrin subunit alpha M)雙胎菌毒素受體轉(zhuǎn)基因小鼠中巨噬細(xì)胞的選擇性消耗能夠阻止了慢性損傷后的纖維化發(fā)展，但它也能延緩損傷停止后的修復(fù)過程[34]。并且巨噬細(xì)胞和HSCs雙向調(diào)控，活化的HSCs有助于巨噬細(xì)胞表型改變?yōu)榇傺装Y和促纖維化，而在HSCs[35]中抑制p38(p38 kinase)可以消除這種巨噬細(xì)胞表型的變化，巨噬細(xì)胞浸潤的消耗或阻斷會減少星狀細(xì)胞的活化和纖維化。所以浸潤的單核/巨噬細(xì)胞可以環(huán)境依賴的方式具有促纖維化性和抗纖維化性。

3.3.2 其他免疫細(xì)胞除此之外，中性粒細(xì)胞，適應(yīng)性T細(xì)胞和B 細(xì)胞，NKT 細(xì)胞等免疫細(xì)胞在肝纖維化中同樣起重要作用。中性粒細(xì)胞[36]是一種先天免疫細(xì)胞，通常會加劇炎癥從而促進(jìn)纖維化的進(jìn)展，但也有減輕肝臟炎癥和纖維化的能力，在小鼠肝纖維化模型中通過MMP 的表達(dá)產(chǎn)生抗纖維化作用。適應(yīng)性免疫系統(tǒng)中的T 細(xì)胞和B 細(xì)胞在慢性損傷的肝臟中都很豐富。B細(xì)胞已被鑒定為肝纖維化中的促纖維化細(xì)胞成分，可能通過調(diào)節(jié)HSCs-單核細(xì)胞的相互作用來調(diào)節(jié)早期纖維化[37]。T細(xì)胞[38]的貢獻(xiàn)長期以來一直被Th1/Th2理論所解釋，其中Th1和Th2 細(xì)胞分別具有抗纖維化和促纖維化作用。NKT 細(xì)胞[39]也是肝損傷、修復(fù)、炎癥和纖維化過程中免疫反應(yīng)的中心組成部分，其在纖維化中的功能會受到不同背景的影響。在CCl4誘導(dǎo)的肝纖維化中，NKT缺陷小鼠更易發(fā)生肝纖維化；浸潤的NKT細(xì)胞增加NKG2D 配體的表達(dá)激活HSCs，改善肝纖維化。由此可見，免疫系統(tǒng)中免疫反應(yīng)所在的微環(huán)境和細(xì)胞表型在肝纖維化的逆轉(zhuǎn)中同樣關(guān)鍵。

3.4 抑制纖維化相關(guān)信號通路

肝纖維化發(fā)生發(fā)展過程極其復(fù)雜，各種炎癥，趨化因子的刺激不僅能夠改變肝臟微環(huán)境，也通過不同的信號通路發(fā)揮作用。廣泛研究的TGF-β，YAP-TAZ 等通路均與肝纖維化密切相關(guān)。

在哺乳動物中，轉(zhuǎn)化生長因子TGF-β具有TGF-β1、TGFβ2和TGF-β3三種不同亞型，其分布具有細(xì)胞類型差異性，能夠調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡、增殖、分化、遷移和侵襲等過程。TGF-β1在健康和慢性損傷的肝臟中被廣泛研究，并在多項臨床研究中作為治療靶點。YAP/TAZ通路在肝纖維化過程中的正調(diào)控和負(fù)調(diào)控存在相互矛盾的數(shù)據(jù)。Liu等[40]的研究證明了維替泊芬抑制YAP可加劇肝纖維化。最近有研究表明，抑制YAP/TAZ信號可以減弱肝纖維化，如肝細(xì)胞特異性YAP 和YAP/TAZ 敲除可以減少纖維生成[41]。

3.5 其他療法

近年來，干細(xì)胞移植已成為一種有效的肝病治療方法。鹿角干細(xì)胞[42](antler stem cells，ASCs)移植可有效減輕肝纖維化，抑制星狀細(xì)胞的活化，減少脂肪變性，增加肝細(xì)胞再生，減少炎癥，顯著增強肝功能，并且ASCs 具有易于獲得、增殖能力高和體外擴(kuò)增的優(yōu)勢。間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells，MSCs)可促進(jìn)肝細(xì)胞再生，增強肝功能，逆轉(zhuǎn)肝纖維化[43]。

在肝細(xì)胞和LSECs中，自噬主要作為一種抗氧化和細(xì)胞保護(hù)機(jī)制保持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)。LC3 相關(guān)吞噬作用(LC3-associated phagocytosis，LAP)[44]，是一種非典型的自噬形式，在嚙齒動物 慢性肝損傷期間防止肝臟和全身炎癥，具有抗纖維化作用。自噬[45]的促纖維化作用直接依賴于HSCs活化過程，自噬可以誘導(dǎo)肝纖維化中HSCs 的激活和增殖，而用自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤(3-MA)或特異性小干擾RNA(siRNA)阻斷自噬相關(guān)基因可減少HSCs激活，減輕纖維化程度。

4 小結(jié)及展望

隨著肝臟損傷和纖維化機(jī)制研究的深入，目前大家普遍認(rèn)為肝纖維化處于一個可逆轉(zhuǎn)期，在這一時期進(jìn)行干預(yù)，肝臟可回歸相對健康的狀態(tài)。因此肝纖維化的早期診斷和可逆轉(zhuǎn)期的有效把握對肝臟疾病的治療非常重要。由于體內(nèi)很多細(xì)胞和分子在不同的肝臟微環(huán)境下有雙重作用，所以關(guān)于機(jī)體微環(huán)境，細(xì)胞表型和機(jī)制的關(guān)系的研究，對肝纖維化的靶向治療至關(guān)重要。

除此之外，肝損傷和纖維化是一個各因子互相交聯(lián)，互相作用的復(fù)雜系統(tǒng)。而研究時，往往是從細(xì)胞模型或是動物模型入手，而這還不能完全代表人類疾病，并且模型建立比人類疾病要快得多，這肯定會影響細(xì)胞對損傷的反應(yīng)。它們通常只反映了發(fā)病機(jī)制的某些方面(例如，蛋氨酸膽堿缺乏飲食模型中的嚴(yán)重炎癥和纖維化，且缺乏胰島素抵抗、肥胖或心血管共病)，很少納入完整的病因特異性機(jī)制。并且有的藥物具有多種靶點，為避免引起非必要性損傷，綜合分析每一種藥物的毒副作用，調(diào)整不同的整合方案，將不同優(yōu)勢治療方案結(jié)合是進(jìn)行肝纖維化逆轉(zhuǎn)的有效解決手段，例如嵌合抗原受體CART 治療。技術(shù)的進(jìn)步也提供了更多了解纖維化疾病的研究方式，如單細(xì)胞RNA測序、空間蛋白質(zhì)組學(xué)、多參數(shù)組織學(xué)分析或系統(tǒng)生物學(xué)方法，深入了解病理機(jī)制，將有助于克服困難，為特異性靶點的尋找和有效的肝纖維化治療鋪平道路。