陳儀婷，趙安達(dá)，李 榮，康文慧，李生慧

1.上海交通大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院，上海 200025；2.上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院營養(yǎng)科，上海 200011

據(jù)統(tǒng)計(jì)，目前全球約有3 億人患支氣管哮喘（簡稱哮喘），且患病率正呈指數(shù)級(jí)增長，預(yù)計(jì)到2025年，將有1億的新增哮喘患者［1］。哮喘是一種遺傳和環(huán)境因素共同作用的異質(zhì)性疾病，其病理特點(diǎn)復(fù)雜，臨床表現(xiàn)各異，缺乏靈敏、有效的診斷方法；作為一種慢性疾病，它目前尚無法徹底治愈，只能通過規(guī)范用藥緩解癥狀，使病情在一定程度上得到控制［2］。臨床上根據(jù)哮喘的嚴(yán)重程度來確定用藥的劑量和頻率，因此準(zhǔn)確判斷哮喘病情分級(jí)是治療的關(guān)鍵。目前主要根據(jù)患者的臨床癥狀和第一秒用力呼氣容積（forced expiratory volume in one second，F(xiàn)EV1）進(jìn)行哮喘的病情分級(jí)。然而，據(jù)報(bào)道20%～73%的哮喘患者被漏診或病情被低估，延誤了治療［3］。目前尚未有研究證實(shí)存在敏感的生物標(biāo)志物可用來判斷哮喘的病情和表型、預(yù)測患者的治療效果及預(yù)后。越來越多的證據(jù)表明哮喘受到各種外泌體的調(diào)節(jié)。因此，了解外泌體在哮喘發(fā)病機(jī)制中的作用，有助于發(fā)現(xiàn)特異性的生物標(biāo)志物用以早期診斷和開發(fā)有效的治療方法，并對(duì)哮喘預(yù)后作出準(zhǔn)確評(píng)估［4］。微RNA（microRNA，miRNA）有作為診斷哮喘的生物標(biāo)志物的潛在價(jià)值，但外周循環(huán)中的miRNA易受其他成分的干擾，導(dǎo)致以往該領(lǐng)域的研究結(jié)果尚不一致［5］。外泌體具有雙層膜結(jié)構(gòu)，可抵抗血液中核糖核酸酶的降解，使循環(huán)外泌體miRNA 具有高穩(wěn)定性，是一種理想的生物標(biāo)志物［5］。既往研究多關(guān)注肺部以及氣道微環(huán)境中的外泌體在哮喘中的作用［6］。在這篇綜述中，我們總結(jié)了血液中的循環(huán)外泌體miRNA作為哮喘診斷、表型鑒別、病情進(jìn)展和預(yù)后療效判斷的生物標(biāo)志物的最新進(jìn)展。

1 循環(huán)外泌體miRNA

外泌體是直徑為30～100 nm 的細(xì)胞外微小囊泡，主要由體細(xì)胞分泌，分布于血漿、血清、乳汁等體液中；其內(nèi)容物成分通常由生物分子組成，如脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、短肽鏈、DNA 片段、RNA［包括信使RNA（messenger RNA，mRNA）以及miRNA］等［7］。其中，miRNA 是一類內(nèi)源性短鏈非編碼RNA，長度為19～25 個(gè)核糖核苷酸［8］。除細(xì)胞中的miRNA 外，血液、尿液等體液中還有以游離形式存在的miRNA，其中在血液中的游離miRNA 被稱為循環(huán)miRNA［9］。2008 年，循環(huán)外泌體miRNA 首次在人體外周血中被發(fā)現(xiàn)，其具有高度穩(wěn)定性，比傳統(tǒng)蛋白質(zhì)組學(xué)生物標(biāo)志物更高效［9］。

外泌體在形成過程中會(huì)選擇性地裝載miRNA 等物質(zhì)，從而反映分泌細(xì)胞的病理生理狀況［10］。循環(huán)外泌體miRNA 穩(wěn)定性的前提是外泌體外層的磷脂雙分子層結(jié)構(gòu)，該結(jié)構(gòu)能夠保護(hù)其內(nèi)容物免受血液中各種酶類物質(zhì)的影響，確保外泌體在血液循環(huán)過程中其內(nèi)包含的miRNA 在分泌細(xì)胞和靶細(xì)胞之間實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定的、遠(yuǎn)距離的表觀遺傳信息傳遞；這是一種新發(fā)現(xiàn)的生物信息傳遞機(jī)制［11］。且miRNA 在轉(zhuǎn)錄后調(diào)控基因的表達(dá)中具有特異性，參與炎癥反應(yīng)、細(xì)胞增殖、分化及凋亡等生理過程，調(diào)控多種疾病的發(fā)展，因此其具有的生物標(biāo)志物潛力受到廣泛的關(guān)注。

2 哮喘的病因

隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，哮喘發(fā)病機(jī)制的假說也不斷得到更新。目前，學(xué)者［12］普遍認(rèn)為哮喘發(fā)病和病情進(jìn)展與多種機(jī)制存在關(guān)聯(lián)，主要是氣道炎癥和氣道重塑機(jī)制。其中，氣道炎癥在哮喘發(fā)病過程中發(fā)揮著重要的調(diào)節(jié)作用。哮喘的主要病理生理特征表現(xiàn)為輔助性T 細(xì)胞2（T helper cell 2，Th2）和2 型固有淋巴細(xì)胞（type 2 innate lymphoid cells，ⅠLC2）釋放促炎因子［如白細(xì)胞介素-4（interleukin-4，ⅠL-4）、ⅠL-5、ⅠL-13 等］，氣道嗜酸性粒細(xì)胞增多，呼出一氧化氮水平升高。這一炎癥反應(yīng)對(duì)氣管的持續(xù)性損傷導(dǎo)致氣管壁結(jié)構(gòu)發(fā)生變化（如基底膜增厚、平滑肌細(xì)胞肥大或增生、膠原纖維增生、彈性組織破壞、黏膜化等），即出現(xiàn)氣道重塑，并伴隨著氣道高反應(yīng)性的持續(xù)存在。

3 循環(huán)外泌體miRNA與哮喘間的聯(lián)系

目前已有大量研究提示miRNA 在哮喘的診斷、病情嚴(yán)重程度和表型判斷、預(yù)后預(yù)測中起到重要的作用。然而，大部分研究集中于淋巴細(xì)胞、支氣管上皮細(xì)胞和免疫細(xì)胞源性外泌體miRNA 在其原代細(xì)胞和器官中的調(diào)控作用［6］。而循環(huán)外泌體miRNA 具有穩(wěn)定且易于檢測的特性，能夠被遠(yuǎn)處的細(xì)胞吸收進(jìn)行信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答和參與相關(guān)炎癥性疾病的發(fā)生發(fā)展，成為許多免疫性疾病的關(guān)鍵信號(hào)調(diào)節(jié)分子。目前針對(duì)循環(huán)外泌體miRNA 與哮喘之間的研究較少，現(xiàn)有的數(shù)據(jù)結(jié)果提示其具有成為診斷、鑒別和反應(yīng)哮喘治療效果的生物標(biāo)志物的潛力。

3.1 哮喘臨床診斷

哮喘早期癥狀輕微，可能無明顯癥狀，若不及時(shí)有效控制氣道炎癥，少部分患者在接觸誘因后可出現(xiàn)急性發(fā)作，嚴(yán)重時(shí)危及生命。此外，即使無急性發(fā)作情況，反復(fù)的發(fā)作也會(huì)加重氣道重塑，導(dǎo)致肺功能的不可逆損傷。所以，哮喘防治的關(guān)鍵在于是否能夠早診斷、早治療。

目前，人群研究［13-20］的結(jié)論均提示：哮喘患者循環(huán)外泌體miRNA表達(dá)失調(diào)，與健康對(duì)照存在差異。2015年，ⅠSHMAEL等［13］從38例哮喘患者和29例非哮喘患者的血液中分離出miRNA，首次表明哮喘患者與非哮喘患者中30 種miRNA（21 種增加，9 種減少）存在表達(dá)差異，并進(jìn)一步提出miR-570-3p 和miR-155 可誘導(dǎo)氣道上皮細(xì)胞產(chǎn)生大量細(xì)胞因子，初步提示miRNA 的差異性表達(dá)可能通過參與氣道炎癥反應(yīng)參與到哮喘的病情發(fā)展。一項(xiàng)研究［15］則直接選擇將重度哮喘患者（n=30）與健康人群（n=30）的血漿外泌體miRNA 做對(duì)比，除發(fā)現(xiàn)多種外泌體表達(dá)水平的差異外，還證實(shí)血漿外泌體miR-125b 的上調(diào)與高水平的免疫球蛋白E（immunoglobulin E，ⅠgE）和C 反應(yīng)蛋白（C-reactive protein，CRP）相關(guān)，但沒有對(duì)miR-125b 具體的信號(hào)通路做進(jìn)一步的探究；該研究結(jié)果再次提示miRNA 可作為重度哮喘患者炎癥水平的生物標(biāo)志物。此外，一項(xiàng)在成人哮喘患者（n=35）和健康受試者（n=15）的研究中首次關(guān)注了中性粒細(xì)胞表型哮喘患者血漿中miRNA 水平［18］；發(fā)現(xiàn)具有中性粒細(xì)胞表型的患者更容易對(duì)皮質(zhì)類固醇藥物產(chǎn)生不良反應(yīng)，從而增加疾病的嚴(yán)重程度并導(dǎo)致難以控制的哮喘［21］；研究［18］結(jié)果提示miRNA-199a-5p僅在中性粒細(xì)胞中被誘導(dǎo)，水平較健康對(duì)照顯著升高，通過Wnt、哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mamalian target of rapamycin，mTOR）和Hippo 信號(hào)通路參與哮喘的氣道重塑過程。綜合以上研究，外泌體miRNA 在哮喘患者與健康人群間存在差異性表達(dá)，目前研究主要認(rèn)為其通過參與氣道炎癥反應(yīng)參與到哮喘的發(fā)展進(jìn)程中；而在中性粒細(xì)胞型哮喘中，外泌體miRNA主要參與哮喘的氣道重塑過程。

3.2 哮喘嚴(yán)重程度和表型鑒別

鑒別哮喘患者的嚴(yán)重程度和不同表型，分級(jí)、分類治療哮喘患者，對(duì)確保哮喘治療的延續(xù)性、準(zhǔn)確性有著重要的作用。目前大部分研究［14，17，19-20，22-25］表明，部分循環(huán)外泌體miRNA 表達(dá)水平與哮喘的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，能鑒別不同嚴(yán)重程度、不同表型的哮喘，具有作為臨床上判斷哮喘嚴(yán)重程度和表型的無創(chuàng)性診斷生物標(biāo)志物的潛力。

哮喘的嚴(yán)重程度主要分為輕度、中度、重度持續(xù)以及間歇狀態(tài)。王湘云等［14］的研究在未經(jīng)治療的哮喘患者（n=82）和健康對(duì)照（n=80）中，發(fā)現(xiàn)除了哮喘患者與健康人群血清中外泌體miR-21的表達(dá)水平存在差異外，血清外泌體miR-21表達(dá)水平還與哮喘嚴(yán)重程度呈正相關(guān)（r=0.974，P=0.016 7），對(duì)間歇狀態(tài)、輕度持續(xù)、中度持續(xù)、重度持續(xù)哮喘患者診斷的受試者操作特征曲線（receiver operator characteristic curve，ROC曲線）曲線下面積（area under the curve，AUC）分別為0.657、0.769、0.847、0.916。另一項(xiàng)研究［22］在血清外泌體miR-125b 中發(fā)現(xiàn)了類似的結(jié)論，其對(duì)間歇狀態(tài)、輕度持續(xù)、中度持續(xù)和重度持續(xù)哮喘患者診斷效果的ROC 曲線的AUC 比前者高，分別為0.777 0、0.857 3、0.911 1 和0.999 5；提示將來的研究可納入多種miRNA 來對(duì)哮喘嚴(yán)重程度進(jìn)行鑒別，以達(dá)到更好的診斷效果。近期的一項(xiàng)研究［17］根據(jù)既往的文獻(xiàn)積累，選擇性地提取了血漿中的miRNA，并發(fā)現(xiàn)與健康對(duì)照組（n=24）相比，中度哮喘患者（n=22）中miR-223 和miR-21 顯著上調(diào)，對(duì)中度哮喘患者診斷的敏感度分別為83%和76%；但與以往研究結(jié)果不一致的是，與中度哮喘患者和對(duì)照組相比，重度哮喘患者中miR-21 表達(dá)明顯下調(diào)。導(dǎo)致這一差異的原因可能是由于樣本量的不足，從外泌體中提取的miRNA 濃度不夠，以及一些環(huán)境因素干擾了miRNA的表達(dá)。

除了嚴(yán)重程度的判別外，在不同表型中，如過敏性哮喘和非過敏性哮喘成年個(gè)體中，miRNA 表達(dá)譜也存在差異表達(dá)；與健康對(duì)照相比，miR-155和miR-146a 在過敏性哮喘患者中表達(dá)增加，在非過敏性哮喘患者中表達(dá)下降；miR-223 的表達(dá)與上述2 個(gè)miRNA 相反；而miR-374a、miR-126、miR-145 在上述2 組中的表達(dá)，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義［24］。而在另一項(xiàng)針對(duì)哮喘兒童的研究［26］中則發(fā)現(xiàn)：miR-126 和miR-374a 的表達(dá)與肺功能［FEV1 與用力肺活量（forced vital capacity，F(xiàn)VC）之比］呈正相關(guān)。上述研究提示年齡水平等生理因素可能影響miRNA 表達(dá)與哮喘間的關(guān)聯(lián)。

衰老是影響miRNA 表達(dá)的重要因素，HUAN等［27］對(duì)全血中150種的miRNA 的分析結(jié)果顯示，近70%的miRNA 與年齡呈負(fù)相關(guān)；而目前研究大部分在成人中開展，僅有3 項(xiàng)關(guān)于兒童和一項(xiàng)在老年人中的研究。除上述提及的關(guān)于哮喘兒童肺功能的研究［26］外，一項(xiàng)在2016年開展的研究［19］將95例哮喘患兒分為3 組，分別為40 例未吸入皮質(zhì)類固醇的哮喘、40 例類固醇敏感型哮喘和15 例類固醇耐受型哮喘，并將80 例健康兒童作為對(duì)照。該研究發(fā)現(xiàn)血清miRNA-21 在鑒別類固醇敏感型哮喘和類固醇耐受型哮喘方面具有預(yù)測價(jià)值（AUC 為0.99，特異度86.7%，敏感度97.5%）。針對(duì)急性期發(fā)作的兒童哮喘患者，研究［20］進(jìn)一步在哮喘住院患兒（48例）和其他疾病住院患兒（48 例）中展開，其結(jié)果表明血清外泌體中miR-7b 的表達(dá)可用于鑒別急性發(fā)作期和臨床緩解期的兒童哮喘（AUC 為0.801，特異度72.9%，敏感度74.5%）。一項(xiàng)研究同時(shí)納入了老年和非老年人群，并對(duì)分別對(duì)2 個(gè)年齡段人群中的哮喘和非哮喘患者miRNA 的表達(dá)進(jìn)行對(duì)比［25］；盡管在所有研究對(duì)象中，哮喘患者的氣道炎癥水平都高于健康對(duì)照組，但miRNA-106a 和miRNA-126a 的表達(dá)僅與非老年人群的哮喘控制呈負(fù)相關(guān)，在老年人群中沒有發(fā)現(xiàn)該相關(guān)性，再一次提示年齡等生理因素可能影響miRNA的表達(dá)，從而影響其對(duì)哮喘表型的鑒別效果。未來需要更多針對(duì)不同年齡、不同身體健康狀況人群的研究來進(jìn)一步證實(shí)這一觀點(diǎn)。

綜合已有研究可知，部分特定的循環(huán)外泌體miRNA 濃度可能與哮喘病情的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)，且miRNA 濃度在哮喘病情穩(wěn)定時(shí)也保持同步穩(wěn)態(tài)。此外，循環(huán)外泌體miRNA 還具有鑒別過敏性哮喘和非過敏性哮喘等不同哮喘表型的潛力。但是由于目前該領(lǐng)域研究數(shù)量較少，已有研究中大部分的樣本量較少，外泌體提取方案的不同等原因，導(dǎo)致研究結(jié)論尚不統(tǒng)一。未來需要更大樣本量的前瞻性研究，并開發(fā)更加成熟有效的技術(shù)高效地提取miRNA，針對(duì)不同哮喘表型和嚴(yán)重程度，考慮不同年齡人群的特點(diǎn)，進(jìn)一步確定循環(huán)外泌體miRNA 質(zhì)與量的變化規(guī)律，提供有價(jià)值的研究成果以指導(dǎo)臨床應(yīng)用。

3.3 哮喘藥物治療效果和預(yù)后評(píng)估

RⅠAL 等［28］的研究中納入了16 例嗜酸粒細(xì)胞性哮喘患者，分為瑞利珠單抗治療組（10 例）和美泊利單抗治療組（6 例）進(jìn)行為期8 周的治療，發(fā)現(xiàn)患者血清中的miRNA 在治療后表達(dá)水平發(fā)生改變，其中miRNA-338-3p 表達(dá)水平升高最為顯著，但是在不同治療組間沒有差異。在對(duì)健康受試者外周血單核細(xì)胞體外試驗(yàn)中，研究者［13］發(fā)現(xiàn)糖皮質(zhì)激素可抑制miR-155、miR-374a、miR-570-3p 的產(chǎn)生。而另一項(xiàng)研究［24］結(jié)合了臨床數(shù)據(jù)和生物信息學(xué)分析手段，發(fā)現(xiàn)當(dāng)哮喘患者吸入糖皮質(zhì)激素后，在過敏性哮喘患者血清中觀察到miR-155、miR-146a、miR-374a和miR-145 的表達(dá)增加；在非過敏性哮喘患者血清中miR-223 和miR-374a 的表達(dá)與血液嗜酸粒細(xì)胞的水平相關(guān)，與是否吸入糖皮質(zhì)激素?zé)o關(guān)。隊(duì)列研究［23］在基線調(diào)查后的6～12 個(gè)月對(duì)20 例哮喘患者進(jìn)行隨訪，其結(jié)果則提示在治療措施沒有改變、自身病情保持穩(wěn)定時(shí)，miRNA 的表達(dá)在一段時(shí)間內(nèi)保持穩(wěn)定。哮喘藥物治療是否可導(dǎo)致血液中循環(huán)miRNA 表達(dá)的改變，以及這一變化的幅度，可能受患者自身健康狀況和疾病表型等的影響。但目前該領(lǐng)域研究較少，證據(jù)尚不充分，需要未來更多的研究來擴(kuò)充和證實(shí)。

3.4 潛在生物學(xué)機(jī)制

根據(jù)大部分已有研究結(jié)果顯示，miRNA 的表達(dá)差異參與調(diào)節(jié)氣道炎癥過程，維持上皮細(xì)胞穩(wěn)態(tài)和氣道重塑［29］；并且與肺功能呈負(fù)相關(guān)［16，18，24］，與炎癥指標(biāo)如嗜酸性粒細(xì)胞［16，19］、中性粒細(xì)胞［16］、血清ⅠgE 和CRP［15］、促炎細(xì)胞因子［20］、ⅠL-4［20］呈正相關(guān)。

miRNA 參與了T 淋巴細(xì)胞和氣道結(jié)構(gòu)細(xì)胞（如氣道平滑肌細(xì)胞、氣道上皮細(xì)胞）之間的通信，T 細(xì)胞的激活誘導(dǎo)miRNA 的產(chǎn)生和分泌，這些miRNA 被氣道結(jié)構(gòu)細(xì)胞吸收導(dǎo)致嗜酸性粒細(xì)胞增多和肺部炎癥［30］。循環(huán)外泌體miRNA 還調(diào)控哮喘的重要信號(hào)通路［28］。例如，miR-223 靶向胰島素樣生長因子-1 受體（insulin-like growth factor-1 receptor，ⅠGF-1R）、Ras/絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase， MAPK） 和 磷 脂 酰 肌 醇 3 激 酶（phosphoinositide 3-kinase， PⅠ3K）/蛋白激酶 B（protein kinase B，PKB/Akt）信號(hào)通路，促進(jìn)肥大細(xì)胞凋亡［31］。miR-125b 可以抑制p53 的表達(dá)，而p53是參與細(xì)胞增殖的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子，也參與線粒體生物合成［32-33］。p53通過激活p21和Bax的轉(zhuǎn)錄（其中p21能阻斷細(xì)胞周期，Bax 誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡），抑制氣道上皮細(xì)胞增殖并促使其凋亡［34］。miR-21 被認(rèn)為是在哮喘的動(dòng)物體內(nèi)和人體氣道平滑肌細(xì)胞中上調(diào)幅度最為顯著的miRNA，在哮喘氣道炎癥和氣道重塑中發(fā)揮了重要作用［35］。miR-21 在MAPK 和B 淋巴細(xì)胞受體信號(hào)通路中抑制PTEN基因（phosphates and tensin homologue deleted on chromosome ten gene，PTENgene）表達(dá)并增加Akt 活性，激活mTOR 信號(hào)通路的靶點(diǎn)并產(chǎn)生ⅠgE［36］。此外，miR-21 通過靶向ⅠL-12 的p35基因調(diào)節(jié)Th2 和Th1 的平衡，影響ⅠL-12/γ 干擾素（interferon-γ，ⅠNF-γ）促炎通路，或通過抑制Toll 樣受體2（toll-like receptor 2，TLR2）信號(hào)通路調(diào)節(jié)肺部炎癥反應(yīng)［35］。另外，miR-21 可通過PTEN 通路，激活PⅠ3K/Akt 信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng)，誘導(dǎo)細(xì)胞增殖和遷移，在哮喘氣道重塑中發(fā)揮重要作用［37］。因此，在哮喘的發(fā)病機(jī)制中，miR-21 的功能與抗炎、類固醇不敏感和氣道重塑相關(guān)。類固醇是一類有效的抗炎藥物，參與轉(zhuǎn)錄因子調(diào)節(jié)過程，如誘導(dǎo)核轉(zhuǎn)錄因子-κB（nuclear factor-kappa B， NF- κB） 和激活蛋白1（activator protein 1，AP-1）［38］。而miR-21 受NF-κB和AP-1 的調(diào)控，兩者通過與miRNA 啟動(dòng)子結(jié)合激活miRNA 轉(zhuǎn)錄并增強(qiáng)其表達(dá)，可部分解釋miRNA 在不同類固醇耐受型哮喘患者中的表達(dá)差異［39-40］。但其中機(jī)制尚未完全闡明，還可能受到年齡、自身健康狀況等因素的影響［24，27］。

4 總結(jié)與展望

在哮喘的臨床診斷、病情嚴(yán)重程度和表型判斷、療效和預(yù)后評(píng)估領(lǐng)域，對(duì)特異性循環(huán)外泌體miRNA表達(dá)的差異和變化的探究是一個(gè)新穎且具有前景的方向。然而，由于外泌體研究的臨床起步較晚，目前仍然面臨著許多問題與挑戰(zhàn)?；谏鲜稣撌觯梢钥偨Y(jié)出以下2 點(diǎn)：①既往研究中差異化表達(dá)的miRNA 種類尚不一致，主要涉及miR-21［14，17，19］和miR-125［15，22］。多種循環(huán)外泌體miRNA 可能協(xié)調(diào)作用于哮喘發(fā)生與發(fā)展，且一些與哮喘相關(guān)的miRNA 似乎具有相同的功能，但各研究結(jié)果不一致，無法得出統(tǒng)一結(jié)論。②目前報(bào)道的大部分研究樣本量較小，且絕大部分在成人中進(jìn)行，沒有考慮到特殊人群不同的生理特征差異。另外，雖然不少研究對(duì)循環(huán)外泌體miRNA 在哮喘病理機(jī)制中的作用進(jìn)行了初步研究，但miRNA 的組織或細(xì)胞來源、運(yùn)輸方式與途徑、以及靶細(xì)胞尚不清楚。循環(huán)外泌體miRNA 的靶向特異性較差，這可能導(dǎo)致miRNA 在實(shí)際治療過程中出現(xiàn)脫靶等情況。并且缺乏統(tǒng)一的提取方案，提取出的循環(huán)外泌體miRNA 含量少，檢測難度大、成本高。

目前，該領(lǐng)域僅有的相關(guān)基礎(chǔ)研究，提示循環(huán)外泌體miRNA 在哮喘疾病的診斷、病情嚴(yán)重程度和表型鑒別以及治療效果的評(píng)估等方面都可能發(fā)揮著重要的作用，但將研究結(jié)果轉(zhuǎn)化應(yīng)用于臨床仍有較大的距離。希望未來研究的不斷深入與發(fā)展，為哮喘的診斷和表型鑒別提供安全、便利、靈敏的早期生物標(biāo)志物，為哮喘治療以及預(yù)后評(píng)估提供可靠、可行的靶向性策略。