臧洪英

(山東省日照市東港區(qū)政務(wù)服務(wù)中心，山東 日照 276800)

0 引言

豬空腸彎曲菌又被稱為空腸弧菌病，是一種傳染性消化道疾病。該病菌可導(dǎo)致病豬出現(xiàn)嚴(yán)重的腹瀉和腸炎現(xiàn)象。除感染豬群外，還可導(dǎo)致多種畜禽動(dòng)物發(fā)病，誘發(fā)空腸彎曲菌腸炎，給養(yǎng)殖業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。另外，空腸彎曲菌還可感染人類，造成人類多器官出現(xiàn)炎癥，誘發(fā)格林-巴利綜合癥、心血管疾病等。豬空腸彎曲菌感染在世界范圍內(nèi)廣泛存在，在我國小規(guī)模養(yǎng)豬場(chǎng)內(nèi)發(fā)病率最大。該病短時(shí)間內(nèi)可快速傳播，患病動(dòng)物為病菌的主要傳染源。為降低豬空腸彎曲菌感染，提高畜產(chǎn)品質(zhì)量安全，養(yǎng)殖人員應(yīng)針對(duì)空腸彎曲菌的流行特點(diǎn)及病原特征開展相應(yīng)的檢測(cè)、防治工作。

1 病原學(xué)與流行病學(xué)

1.1 病原

空腸彎曲菌隸屬于螺旋菌科彎曲菌屬。該菌為革蘭氏陰性菌，菌體大小為0.3～0.8 μm。空腸彎曲菌為末端較細(xì)的彎曲狀，少數(shù)為S形，且通常多個(gè)排列，隨著傳代次數(shù)增加，菌形逐漸變?yōu)榍蛐??？漳c彎曲菌有鞭毛，可呈直線或螺旋形運(yùn)動(dòng)，無莢膜、無芽孢?？漳c彎曲菌具有20多種血清型，在普通培養(yǎng)基內(nèi)生長速度緩慢，在血清培養(yǎng)基內(nèi)可快速繁殖，培養(yǎng)過程中需要氧氣。該菌對(duì)環(huán)境抵抗力較差，日常使用的消毒劑可將其滅活。另外，該菌對(duì)高溫較為敏感，70℃以上環(huán)境下可快速失活，100℃的水中可瞬間失活。空腸彎曲菌對(duì)紫外線敏感，陽光直射下數(shù)小時(shí)可將其殺滅。

1.2 流行病學(xué)

豬空腸彎曲菌感染一年四季均可發(fā)生。健康豬群通過接觸被污染的糞便或病豬而感染。通常彎曲菌在感染后主要寄生于豬的空腸內(nèi)。該菌可造成養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)疾病大規(guī)模傳播。目前，我國已發(fā)現(xiàn)20種以上的空腸彎曲菌。在豬空腸內(nèi)經(jīng)常檢測(cè)到病菌的存在。該病菌對(duì)仔豬的感染概率較高，且感染途徑較多，被污染的飲水、飼料或直接接觸病豬等均可感染。除感染豬外，還可感染雞、牛、猴等動(dòng)物。養(yǎng)殖過程中養(yǎng)殖環(huán)境的改變，可導(dǎo)致豬群出現(xiàn)環(huán)境應(yīng)激，造成機(jī)體抵抗力下降，從而造成空腸彎曲菌入侵。對(duì)于飼養(yǎng)密度較大的養(yǎng)殖場(chǎng)，該病菌可在短時(shí)間內(nèi)造成豬群大量感染[1]。

2 臨床表現(xiàn)

由于豬機(jī)體抵抗力不同，因此在感染空腸彎曲菌后表現(xiàn)的臨床癥狀不同。抵抗力較強(qiáng)的病豬在感染后臨床癥狀較輕，病豬表現(xiàn)為輕微的腹瀉。抵抗力較差的豬在感染后臨床癥狀較為嚴(yán)重，病豬表現(xiàn)為嚴(yán)重的腹瀉、體溫升高、食欲廢絕、腹痛、嚴(yán)重脫水、毛色無光澤等，其中仔豬發(fā)病率較高。病菌在仔豬體內(nèi)潛伏5～7 d后，仔豬表現(xiàn)出臨床癥狀。發(fā)病初期，仔豬表現(xiàn)為全身顫抖、怕冷、警覺、嘔吐，隨著病情的發(fā)展，病豬出現(xiàn)水樣腹瀉，糞便惡臭且?guī)а?，呼吸困難，甚至死亡。

3 病理變化

對(duì)病死豬進(jìn)行解剖可發(fā)現(xiàn)腸道出現(xiàn)嚴(yán)重病變，其中空腸病變程度最為嚴(yán)重，回腸與結(jié)腸內(nèi)存在少量病變組織?？漳c表現(xiàn)為潰瘍性腸炎，且伴有不同程度的出血和水腫等現(xiàn)象。腸道內(nèi)出現(xiàn)增生，腸壁增厚。腸上皮細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)空腸彎曲菌病原體，腸道隱窩增生。除此之外，病豬其他器官組織無明顯病變[2]。

4 診斷方法

對(duì)豬空腸彎曲菌感染可通過臨床癥狀與病理變化進(jìn)行初步診斷，若需要確診還要進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢查。常用的實(shí)驗(yàn)室方法有培養(yǎng)法、免疫學(xué)檢驗(yàn)法、分子學(xué)法、基質(zhì)輔助激光解析飛行質(zhì)譜法等。

4.1 培養(yǎng)法

培養(yǎng)法主要分為國標(biāo)法和驅(qū)動(dòng)增強(qiáng)過濾培養(yǎng)法兩種。國標(biāo)法主要是依據(jù)《食品微生物學(xué)空腸彎曲菌檢驗(yàn)》對(duì)細(xì)菌進(jìn)行分離培養(yǎng)和生化反應(yīng)，從而確定病原菌是否為空腸彎曲菌，該方法是目前最常用的檢驗(yàn)方法。驅(qū)動(dòng)增強(qiáng)過濾培養(yǎng)法是以濾膜替代國標(biāo)法中的選擇性培養(yǎng)基，從而解決空腸彎曲菌耐藥性高、檢出率低的問題，該方法操作簡(jiǎn)單。兩種培養(yǎng)法可操作性強(qiáng)、成本低、應(yīng)用范圍廣，但特異性和敏感性較低。

4.2 免疫學(xué)檢驗(yàn)法

ELISA法和免疫磁珠分離法是較為常用的兩種免疫學(xué)檢驗(yàn)方法。ELISA法是利用空腸彎曲菌外膜蛋白OMP18基因進(jìn)行血清學(xué)檢測(cè)。ELISA法靈敏度高、特異性強(qiáng)。免疫磁珠分離法是以包被抗體的磁珠為載體，通過抗原抗體結(jié)合，從而使磁場(chǎng)產(chǎn)生定向的移動(dòng)。該方法靈敏性高且抗干擾，操作簡(jiǎn)便。

4.3 分子學(xué)法

PCR檢測(cè)法中的多重PCR檢測(cè)、實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)以及環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)檢測(cè)法是目前常用的分子學(xué)檢測(cè)方法。多重PCR檢測(cè)法是指將多對(duì)引物同時(shí)加至同一反應(yīng)體系內(nèi)進(jìn)行擴(kuò)增，可同時(shí)檢測(cè)多種病原菌。實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)是指將熒光基團(tuán)加入反應(yīng)體系內(nèi)，根據(jù)熒光信號(hào)進(jìn)行產(chǎn)物量的監(jiān)測(cè)，該方法綜合普通PCR技術(shù)以及探針雜交技術(shù)等的優(yōu)點(diǎn)，通過定量檢測(cè)，降低擴(kuò)增產(chǎn)物的污染，該方法目前應(yīng)用范圍較廣。環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)檢測(cè)法是一種恒溫核酸擴(kuò)增方法。該方法具有較高的特異性和靈敏度，目前在空腸彎曲菌的檢測(cè)應(yīng)用越來越廣泛[3]。

4.4 基質(zhì)輔助激光解析飛行質(zhì)譜

基質(zhì)輔助激光解析飛行質(zhì)譜是一種分子成像技術(shù)。根據(jù)空腸彎曲菌細(xì)胞內(nèi)含有的種屬特征進(jìn)行鑒定，該檢測(cè)方法鑒別準(zhǔn)確率高達(dá)80%以上。隨著質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫的不斷完善，該檢測(cè)結(jié)果更為可靠。

5 防控措施

5.1 常規(guī)措施

由于豬空腸彎曲菌主要通過糞口途徑進(jìn)行傳播，因此在養(yǎng)殖過程中保持環(huán)境衛(wèi)生可有效降低空腸彎曲菌感染概率。飼養(yǎng)過程中，養(yǎng)殖人員在進(jìn)出豬舍應(yīng)進(jìn)行全面的殺菌消毒，穿著專業(yè)的隔離衣。另外，還須對(duì)養(yǎng)豬場(chǎng)定期進(jìn)行清潔和消毒。對(duì)于有疫病的養(yǎng)殖場(chǎng)，應(yīng)保持1～2次/d殺菌消毒，可選用0.1%濃度的新潔爾滅溶液進(jìn)行消毒。消毒液的選擇應(yīng)以安全無毒為原則，同時(shí)定期更換消毒液，避免病菌對(duì)消毒液產(chǎn)生耐藥性，從而影響消毒效果。對(duì)于無疫情的養(yǎng)殖場(chǎng)每周應(yīng)不低于2次環(huán)境消毒。養(yǎng)殖過程中，飼養(yǎng)人員應(yīng)保證飲水、飼料等未被污染，及時(shí)清理雞舍內(nèi)的糞污等，防止出現(xiàn)大規(guī)模感染。夏季還應(yīng)做好蒼蠅、蚊蟲等的殺滅工作，通過減少病菌傳播媒介數(shù)量，有效降低豬空腸彎曲菌感染概率。定期對(duì)日糧飼料進(jìn)行檢查，避免飼喂過期、霉變的飼料。除此之外，還應(yīng)定期對(duì)水線、料線進(jìn)行清理。

科學(xué)、合理使用抗生素可有效預(yù)防空腸彎曲菌感染。但抗生素的使用可造成耐藥菌出現(xiàn)，因此養(yǎng)殖人員在使用過程中應(yīng)嚴(yán)格控制抗生素使用劑量。

由于空腸彎曲菌對(duì)酸敏感，因此可通過酸化處理預(yù)防空腸彎曲菌感染。在飲水和飼料中添加甲酸和山梨酸可有效抑制空腸彎曲菌的繁殖。另外，還可在日糧中添加乙酸、辛酸等中鏈脂肪酸，從而降低空腸彎曲菌在豬腸道內(nèi)的定植率，從而導(dǎo)致病菌存活率下降。此外，還可在養(yǎng)殖過程中產(chǎn)生的垃圾內(nèi)添加硫酸鋁和硫酸氫鈉酸化劑，通過降低垃圾pH值有效降低污染物中空腸彎曲菌數(shù)量。

由于空腸彎曲菌對(duì)溫度較為敏感，因此完成屠宰后須對(duì)豬胴體進(jìn)行低溫處理，低溫環(huán)境可導(dǎo)致豬空腸彎曲菌數(shù)量下降。

5.2 拮抗預(yù)防措施

5.2.1 做好疫苗接種

對(duì)健康豬群定期皮下注射疫苗可有效降低空腸彎曲菌感染。目前多采用多糖結(jié)合疫苗，該類應(yīng)當(dāng)具有強(qiáng)免疫原性，對(duì)空腸彎曲菌感染導(dǎo)致的腹瀉具有顯著的保護(hù)作用。另外，空腸彎曲菌重組蛋白亞單位疫苗也具有良好的免疫原性和保護(hù)性，該類疫苗可直接添加到飼料中，操作簡(jiǎn)單。

5.2.2 噬菌體預(yù)防

噬菌體可大大降低豬空腸彎曲菌的定植率，使其無法在豬腸道內(nèi)進(jìn)行定植。由于噬菌體降低空腸彎曲數(shù)量的效果在使用后可快速出現(xiàn)，因此在養(yǎng)殖過程中使用噬菌體防治應(yīng)當(dāng)在屠宰前幾天進(jìn)行。

5.2.3 投喂發(fā)酵改良飼料

發(fā)酵后的飼料飼喂給健康畜禽后，可有效抑制空腸彎曲菌感染。發(fā)酵產(chǎn)生的有機(jī)酸可降低飼料pH值。另外，添加的酶對(duì)空腸彎曲菌具有良好的拮抗作用，在日糧中添加木聚糖酶等可有效抑制空腸彎曲菌定植。目前該方法成本較高，應(yīng)用場(chǎng)景有限。

5.2.4 抑菌劑預(yù)防

除抗生素外，在對(duì)空腸彎曲菌感染的防治上，養(yǎng)殖人員可使用化學(xué)制劑、抑菌劑等。使用具有抗空腸彎曲菌活性的化合物可有效清除空腸彎曲菌。該類抗菌劑主要包括芳基胺、哌嗪類、吡哆嗪類和哌啶類。對(duì)于機(jī)體體質(zhì)弱，免疫功能缺失的豬群，可使用該類抗菌劑進(jìn)行預(yù)防。

5.2.5 細(xì)菌拮抗生物預(yù)防

可通過給豬群飼喂益生菌、益生元、合生元、細(xì)菌素等進(jìn)行細(xì)菌拮抗生物防治。飼喂對(duì)豬機(jī)體有益的菌群可有效抑制空腸彎曲菌在腸道內(nèi)的繁殖，增加腸道內(nèi)消化酶活性，從而降低空腸彎曲菌數(shù)量，提高豬機(jī)體代謝，中和腸內(nèi)毒素，激活免疫功能，進(jìn)而增加采食量，改善胃腸道消化功能。常用的益生菌包括乳酸菌、雙歧桿菌、腸球菌等。研究發(fā)現(xiàn)，乳酸菌對(duì)豬空腸彎曲菌具有顯著的抑制作用。乳酸菌分泌產(chǎn)生的有機(jī)酸可降低腸道pH值，抑制空腸彎曲菌繁殖。除乳酸菌外，嗜酸乳桿菌和糞鏈球菌對(duì)空腸彎曲菌具有顯著的抑制作用，日糧中添加上述2種有益菌可顯著降低空腸彎曲菌數(shù)量。飼喂益生元和合生元也可抑制空腸彎曲菌感染。益生元是一種促進(jìn)腸道內(nèi)微生物生長或活性的食物成分，常見的益生元包括木糖醇、低聚果糖、甘露寡糖等。益生元主要在消化道末端進(jìn)行發(fā)酵，發(fā)酵可產(chǎn)生短鏈脂肪酸、二氧化碳等，通過降低消化道pH值，從而抑制空腸彎曲菌增殖。益生菌與益生元組合即為合生元，低聚果糖與雙歧桿菌混合組成的合生元可有效降低豬空腸彎曲菌數(shù)量。另外，芽孢桿菌、唾液乳桿菌與甘露聚糖組成的合生元同樣具有良好的抑菌效果。細(xì)菌素是細(xì)菌產(chǎn)生的具有抗菌活性的多肽，其作用于細(xì)菌的細(xì)胞膜，通過損傷細(xì)胞膜，從而導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)的離子外流，造成細(xì)胞大量死亡。使用細(xì)菌素可靶向拮抗特定的致病菌，且不影響機(jī)體內(nèi)原有的菌群結(jié)構(gòu)。唾液乳酸桿菌、唾液鏈球菌、彎曲乳桿菌等細(xì)菌產(chǎn)生的細(xì)菌素對(duì)空腸彎曲菌具有顯著的抑制作用。由于細(xì)菌素只對(duì)具有較高同源性的菌株發(fā)揮作用，因此在空腸彎曲菌感染的防控上具有一定的局限性[4]。

5.3 聯(lián)合防控措施

目前使用多種防治措施聯(lián)合防治豬空腸彎曲菌感染的研究較少，主要集中于益生菌和益生元聯(lián)合應(yīng)用方面。除此之外，益生菌與酶同時(shí)加入日糧飼料內(nèi)可有效提高益生菌對(duì)豬空腸彎曲菌的抑制作用。該原理主要為酶對(duì)日糧中谷物水解產(chǎn)生大量營養(yǎng)物質(zhì)，通過提高有益菌對(duì)營養(yǎng)物質(zhì)的利用率，促進(jìn)有益菌數(shù)量增加。

另外，也可將疫苗與飼料添加物聯(lián)合使用。豬從養(yǎng)殖到烹飪的任意環(huán)節(jié)的綜合防控對(duì)有效降低感染概率都至關(guān)重要。對(duì)于豬空腸彎曲菌感染的防控應(yīng)根據(jù)我國國情，考慮防控成本和可操作性采取合適的措施，通過強(qiáng)化衛(wèi)生學(xué)管理以及酸化處理等措施提高空腸彎曲菌防控效果。

6 治療方法

抗生素是治療豬空腸彎曲菌感染最為有效的藥物之一。養(yǎng)殖人員應(yīng)根據(jù)病豬實(shí)際的臨床癥狀與病情嚴(yán)重程度選擇適宜的抗生素進(jìn)行治療。治療過程中為保證治療效果，預(yù)防耐藥菌的產(chǎn)生，養(yǎng)殖人員應(yīng)嚴(yán)格控制抗生素使用劑量及頻率，直至病豬痊愈?？漳c彎曲桿菌在感染健康豬群后可寄生于豬腸黏膜上皮細(xì)胞，導(dǎo)致豬腸道出現(xiàn)病變。因此，養(yǎng)殖人員可通過口服給藥的方式選擇腸道難以吸收的藥物進(jìn)行治療，既可減少病豬體內(nèi)的藥物殘留，又可增強(qiáng)對(duì)腸道內(nèi)病菌的殺傷力。常用的抗生素包括慶大霉素、新霉素等，同時(shí)也可使用廣譜抗生素進(jìn)行治療，比如土霉素、恩諾沙星等。連續(xù)用藥5～7 d可取得良好的治療效果。

由于豬在感染空腸彎曲菌后，病豬表現(xiàn)為嚴(yán)重的腹瀉和脫水癥狀，因此治療過程中除給予抗生素外還應(yīng)對(duì)病豬及時(shí)補(bǔ)充液鹽。通常對(duì)病豬進(jìn)行液鹽灌服治療，可有效改善病豬病情，加快痊愈。對(duì)于病情較為嚴(yán)重的病豬，例如病豬出現(xiàn)腸黏膜潰瘍、脫落、出血或其他繼發(fā)病時(shí)，養(yǎng)殖人員除給予抗生素治療外，還應(yīng)提供VC、VK、VA等恢復(fù)腸黏膜的藥物。通過修復(fù)腸黏膜從而提高抗生素藥效。VA可以幫助病豬修復(fù)腸黏膜；VC可使病豬血管變得緊密，抑制腸黏膜出血；VK可提高病豬的凝血功能，抑制腸黏膜出血[5]。

7 結(jié)語

空腸彎曲菌是一種常見且危害嚴(yán)重的致病菌，對(duì)我國養(yǎng)豬業(yè)及人類健康危害嚴(yán)重?？漳c彎曲菌感染范圍較廣，可導(dǎo)致病豬出現(xiàn)嚴(yán)重的腹瀉、腸炎，甚至死亡。養(yǎng)殖過程中應(yīng)根據(jù)空腸彎曲菌特點(diǎn)，采取合理有效的防治措施進(jìn)行防控。通過加強(qiáng)常規(guī)防治、拮抗防治以及聯(lián)合防治措施，提高生豬抵抗力，降低豬空腸彎曲菌感染，保證生豬健康生長。