■郭曉華 謝正軍 吳志青 李 龍
(1.江西生物科技職業(yè)學(xué)院,江西 南昌330200;2.雙胞胎(集團(tuán))股份有限公司,江西 南昌330095)
畜禽提供的肉類具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和保健功能。隨著人們消費(fèi)水平的提高,人們關(guān)注的焦點(diǎn)已經(jīng)從能夠吃到肉向吃到安全且風(fēng)味佳的優(yōu)質(zhì)肉轉(zhuǎn)變[1-3]。育肥期是肉質(zhì)形成的關(guān)鍵期,該階段日糧營(yíng)養(yǎng)決定肉的風(fēng)味、品質(zhì)和安全。因此,如何在無(wú)抗養(yǎng)殖的背景下,通過(guò)補(bǔ)充綠色功能性飼料添加劑,以提高機(jī)體免疫力、減少疾病發(fā)生、改善肉品質(zhì),成為目前在大規(guī)模集約化畜禽養(yǎng)殖過(guò)程中人們關(guān)注的重點(diǎn)。
海藻提取物富含各種多糖及功能活性成分(如氨基酸、不飽和脂肪酸、多糖類、多酚類和黃酮類等)。海藻提取物可以提高動(dòng)物機(jī)體的抗氧化、抗菌、抗炎、抗病毒等生理功能,促進(jìn)動(dòng)物的健康生長(zhǎng)[4-5]。然而,目前關(guān)于海藻提取物對(duì)育肥豬的健康狀態(tài)和肉品質(zhì)的影響還鮮有報(bào)道。因此,研究以育肥豬為研究對(duì)象,探討日糧添加海藻提取物對(duì)其生長(zhǎng)性能、免疫功能和肉品質(zhì)的影響。研究結(jié)果可為促進(jìn)海藻提取物在養(yǎng)殖行業(yè)中的合理應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)和理論參考。
1.1.1 材料與試劑
試驗(yàn)所用海藻主要為滸苔,收集于渤海海域的北戴河沿岸。滸苔經(jīng)曬干后,磨成粉末,乙醇提取,濃縮后經(jīng)噴霧干燥制成海藻提取物,主要活性成分為海藻多糖、多酚類和黃酮類物質(zhì)。
無(wú)水乙醇為分析純,購(gòu)于國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。
1.1.2 主要儀器設(shè)備
肉色測(cè)定儀(OPTO-STAR,德國(guó)麥特斯儀器有限公司);肉類pH 測(cè)定儀(HI99163,意大利哈納儀器有限公司);索氏抽提器(YSXT-06,上海熙揚(yáng)儀器有限公司)。
1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)
試驗(yàn)選取48 頭初始體重為60 kg 左右健康杜×長(zhǎng)×大三元雜交閹公豬,隨機(jī)分為2組,每組6個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)4頭豬。試驗(yàn)時(shí)間為2021年3月3日-2021年4月24日,預(yù)試期7 d,正試期45 d。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧,試驗(yàn)組在基礎(chǔ)日糧中添加1 000 mg∕kg 海藻提取物。試驗(yàn)期為45 d?;A(chǔ)日糧參照NRC(2012)育肥豬營(yíng)養(yǎng)需要量配制,日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。
表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平
1.2.2 飼養(yǎng)管理
試驗(yàn)期間所有育肥豬自由采食和飲水,每日上午10:00 和下午16:00 各飼喂1 次。豬舍溫度控制在(24±2)℃,相對(duì)濕度控制在(50%±5%)。每日定時(shí)清掃豬舍,定期對(duì)豬舍進(jìn)行消毒和免疫,具體按照豬場(chǎng)常規(guī)要求進(jìn)行。
1.2.3 樣品采集
試驗(yàn)過(guò)程中,每周記錄采食量;試驗(yàn)開(kāi)始和結(jié)束時(shí)稱重,并計(jì)算平均日增重、平均日采食量和料重比。試驗(yàn)結(jié)束時(shí),從每組每個(gè)重復(fù)中隨機(jī)選取1 頭豬采血,收集血清。育肥豬在250 V、0.5 A 條件下電擊5 s 處死。取左側(cè)酮體靠近最后肋骨處背最長(zhǎng)肌樣本于-80 ℃保存。
1.2.4 抗氧化能力指標(biāo)測(cè)定
按照試劑盒說(shuō)明檢測(cè)血漿中谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)、總超氧化物歧化酶(T-SOD)和過(guò)氧化氫酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量。試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所有限公司。
1.2.5 免疫功能指標(biāo)測(cè)定
按照試劑盒說(shuō)明檢測(cè)血漿中免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白G(IgG)和免疫球蛋白M(IgM)等含量。試劑盒購(gòu)自南京博研生物科技有限公司。
1.2.6 肉品質(zhì)檢測(cè)和體脂含量測(cè)定
屠宰分割的酮體在4 ℃條件下放置24 h后,取第13~14肋骨段背最長(zhǎng)肌測(cè)定肉品質(zhì)。用肉色測(cè)定儀測(cè)定肌肉亮度值(L*)、紅度值(a*)和黃度值(b*),每個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定3 次,最后取平均值。用肉類pH 測(cè)定儀檢測(cè)放置45 min 和24 h 的背最長(zhǎng)肌pH,用索氏抽提法提取粗脂肪并測(cè)定其含量。稱取20 g(初始重)背最長(zhǎng)肌樣品,置于塑料袋中,于75 ℃水浴,待肌肉中心溫度達(dá)到70 ℃后,拿出樣品清除表面水漬,稱取重量(末重)。
屠宰率=胴體重∕總體重;體脂率=脂肪重∕總體重;背膘厚計(jì)算方法為第一、第十、最后一根肋骨以及最后腰椎4個(gè)位置背脂厚度的平均值;肌內(nèi)脂肪含量=粗脂肪含量∕肌肉重;蒸煮損失=(初始重-末重)∕初始重。
1.2.7 數(shù)據(jù)處理
試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 23.0 軟件作獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)(t-test),統(tǒng)計(jì)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤(Mean±SE)”表示。P<0.05作為顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。
表2 海藻提取物對(duì)育肥豬生長(zhǎng)性能的影響
注:同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不含有相同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05),含有相同字母或無(wú)字母表示差異不顯著(P>0.05);下表同。如表2 所示,添加海藻提取物組和對(duì)照組豬相比,平均日采食量、平均日增重和料重比均無(wú)顯著差異(P>0.05)。
表3 海藻提取物對(duì)育肥豬抗氧化能力的影響
由表3可知,與對(duì)照組相比,日糧中添加海藻提取物后,育肥豬血清中GSH-Px、T-SOD和CAT的活性顯著提高(P<0.05),而MDA含量顯著降低(P<0.05)。
由表4可知,與對(duì)照組相比,日糧中添加海藻提取物的育肥豬血清中IgA和IgG的含量分別由774 μg∕mL、25.6 mg∕mL提高至903 μg∕mL和38.0 mg∕mL,差異顯著(P<0.05),而IgM的含量無(wú)顯著變化(P>0.05)。
表4 海藻提取物對(duì)育肥豬免疫功能的影響
表5 海藻提取物對(duì)育肥豬肉品質(zhì)的影響
由表5 可知,與對(duì)照組相比,日糧中添加海藻提取物的育肥豬其背最長(zhǎng)肌L*值和b*值無(wú)顯著變化,但a*值顯著提高(P<0.05)。與對(duì)照組相比,日糧中添加海藻提取物后屠宰胴體放置45 min 背最長(zhǎng)肌pH45min無(wú)顯著變化(P>0.05),但放置24 h 的屠宰胴體背最長(zhǎng)肌pH24h(P<0.05)顯著提高。日糧中添加海藻提取物的育肥豬其背最長(zhǎng)肌蒸煮損失與對(duì)照組無(wú)顯著差異(P>0.05)。
表6 海藻提取物對(duì)育肥豬屠宰率、體脂率、背膘厚和肌內(nèi)脂肪含量的影響
如表6 所示,與對(duì)照組相比,日糧中添加海藻提取物的育肥豬屠宰率、體脂率和背膘厚無(wú)顯著變化(P>0.05)。與對(duì)照組相比,日糧中添加海藻提取物的育肥豬背最長(zhǎng)肌肌內(nèi)脂肪含量顯著提高了39.9%(P<0.05)。
生長(zhǎng)性能是商品豬育肥期間關(guān)注的重要指標(biāo)。已有研究報(bào)道指出日糧中海藻提取物的添加可以顯著提高豬的平均日增重[6];此外,研究發(fā)現(xiàn),日糧中添加100 mg∕kg和300 mg∕kg的可溶性海藻多糖對(duì)仔豬的生長(zhǎng)性能具有顯著的促進(jìn)作用,而添加1 000 mg∕kg對(duì)生長(zhǎng)性能無(wú)顯著影響[7]。本試驗(yàn)在日糧中補(bǔ)充1 000 mg∕kg的海藻提取物對(duì)育肥豬生長(zhǎng)性能并無(wú)顯著的影響。這表明不同濃度的海藻提取物對(duì)不同生長(zhǎng)階段豬生長(zhǎng)性能產(chǎn)生不同的影響。
商品豬在育肥期間,由于轉(zhuǎn)欄、運(yùn)輸、打架等多種因素,往往導(dǎo)致機(jī)體產(chǎn)生氧化應(yīng)激和免疫機(jī)能下降,進(jìn)而影響健康[8]。大量研究證實(shí),MDA可以作為脂質(zhì)氧化的終產(chǎn)物,是評(píng)判出現(xiàn)氧化應(yīng)激的關(guān)鍵指標(biāo);而抗氧化物酶GSH-Px、T-SOD 和CAT 等的存在,對(duì)于實(shí)現(xiàn)機(jī)體的氧化和抗氧化系統(tǒng)處于動(dòng)態(tài)平衡的狀態(tài)至關(guān)重要[9]。添加海藻提取物可以顯著地降低MDA 含量,提高抗氧化物酶的活性,這與之前關(guān)于海藻提取物具有緩解氧化應(yīng)激的研究結(jié)果相一致[4]。本試驗(yàn)進(jìn)一步證實(shí)了海藻提取物可提高育肥豬的抗氧化能力。IgA、IgG和IgM是發(fā)揮免疫功能的重要免疫球蛋白,與免疫水平呈現(xiàn)正相關(guān),在機(jī)體免疫系統(tǒng)中發(fā)揮關(guān)鍵作用[10-11]。本試驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)日糧中添加海藻提取物可以顯著提高血清中IgA和IgG的含量;這些結(jié)果與前期報(bào)道海藻提取物可以提高機(jī)體免疫水平相一致[4]。本試驗(yàn)進(jìn)一步提示海藻提取物可提高機(jī)體的免疫機(jī)能,
肉色包括亮度(L*)值、紅度(a*)值和黃度(b*)值以及屠宰后pH是評(píng)價(jià)肉品質(zhì)的關(guān)鍵指標(biāo)。肉的L*值和b*值越低,a*值越高,表明肉色越好[12-13]。海藻提取物雖然對(duì)L*值和b*值沒(méi)有顯著的影響,但顯著提高了a*值,這表明添加海藻提取物可改善肉色。生豬屠宰后,隨著肌肉糖酵解速率的加劇,會(huì)有大量的乳酸積累,造成肌肉pH 降低[14]。海藻提取物顯著提高了pH24h,這表明海藻提取物可以有效緩解屠宰后乳酸積累對(duì)肉品質(zhì)的負(fù)面影響。育肥豬的屠宰率、體脂率、背膘厚、肌內(nèi)脂肪是商品豬在育肥期間重要考慮的因素。其中,肌內(nèi)脂肪含量與肉的嫩度和風(fēng)味密切相關(guān),這與脂肪在氧化過(guò)程中可以溶解肌纖維束、提高肉的嫩度和通過(guò)美拉德反應(yīng)產(chǎn)生風(fēng)味物質(zhì)有關(guān)[15-16]。添加海藻提取物顯著提高肌內(nèi)脂肪含量,這進(jìn)一步表明了海藻提取物可改善肉品質(zhì)。
在抗生素禁用的條件下,通過(guò)在日糧中添加功能性成分提高商品豬育肥期間抗氧化能力和免疫功能,改善肉品質(zhì)對(duì)于畜禽養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展尤為重要。本試驗(yàn)結(jié)果表明,在日糧中添加海藻提取物,一方面可以提高商品豬的抗氧化能力以及免疫功能,減少氧化應(yīng)激對(duì)于育肥階段的影響。另一方面,還可以顯著的改善肉色和屠宰24 h的pH以及提高肌內(nèi)脂肪的含量,這表明海藻提取物顯著地改善了肉品質(zhì)。后續(xù)可進(jìn)一步研究海藻提取物在育肥階段發(fā)揮功能活性的具體組分及相應(yīng)的分子機(jī)制。