胡重重，李獲朋，劉天龍，佘銳萍，田紀(jì)景

(中國農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)院，北京 海淀 100193)

戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)是一種重要的人獸共患病病原，在全球范圍內(nèi)廣泛流行。豬是HEV的重要自然宿主，自然感染率較高，通常為亞臨床感染或與其他病原混合感染。HEV主要通過糞口途徑在人和動物之間傳播，國內(nèi)外均可見人群HEV聚集性感染的報道。由此可見，HEV的流行不僅對畜牧業(yè)生產(chǎn)造成威脅，還嚴(yán)重危害人類的食品安全。因此，了解豬群HEV的流行情況和防控措施具有重要的公共衛(wèi)生學(xué)意義。本文調(diào)研近年來HEV相關(guān)的研究進(jìn)展，對HEV在豬群中的流行情況、傳播方式、診斷和防控等方面展開論述。

1 HEV發(fā)現(xiàn)史

關(guān)于HEV感染的最早記錄是1955—1956年發(fā)生在印度新德里的一場大規(guī)模流行的水源性非甲非乙型病毒肝炎[1]。直到1983年，科學(xué)家通過免疫電子顯微鏡技術(shù)首次在志愿者的糞便中觀察并鑒定到了病毒顆粒[2]。8年后，研究人員通過緬甸分離株測定到了該病毒的全基因序列，隨后將其命名為戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus，HEV)[3]。2004年，國際病毒學(xué)分類委員會將其歸入戊肝病毒科(Hepeviridae)。該科包括正戊肝病毒屬(Orthohepevirus)和魚戊肝病毒屬(Piscihepevirus)，其中正戊肝病毒屬主要感染陸生脊椎動物，包括A、B、C、D四個種，能夠感染人類的HEV主要為HEV-A種，目前共發(fā)現(xiàn)8個基因型，即HEV1型～HEV8型。

1997年，Meng等[4]在美國的豬群中分離到了HEV毒株，這是首次從動物上分離到HEV毒株的報道，同時，研究人員發(fā)現(xiàn)其與人源HEV具有極高的同源性，且可感染黑猩猩和恒河猴，從而首次證實了HEV跨種間傳播的可能性。此后，在豬養(yǎng)殖業(yè)比較發(fā)達(dá)的國家和地區(qū)都鑒定出了豬源HEV毒株，豬也成為公認(rèn)的HEV最重要的自然宿主，且豬源HEV已被證實可以傳播給人并引起人群戊型肝炎聚集性暴發(fā)[5]。研究顯示，病毒基因組上ORF1片段的變異可能會導(dǎo)致其宿主適應(yīng)性的改變[6]，但目前HEV跨物種傳播的具體機(jī)制尚不完全清楚。

2 豬群HEV流行情況

世界范圍內(nèi)普遍存在于人群和豬群中的人獸共患型HEV主要是HEV-3型和HEV-4型。HEV-3型主要分布在歐洲(如英國、法國、新西蘭、西班牙、希臘、意大利)、美洲(如美國、阿根廷)、亞洲(如日本、中國、韓國)、澳州(如澳大利亞)等國家和地區(qū)，而HEV-4型主要集中在中國、印度以及東亞的一些國家和地區(qū)。迄今為止，我國多個省份和地區(qū)都進(jìn)行了豬群HEV流行病學(xué)調(diào)查，結(jié)果顯示，HEV在我國豬群中呈普遍流行的趨勢[7-12]。葛勝祥等[12]對來自全國20個省共9 055只育成豬進(jìn)行抗-HEV抗體檢測，發(fā)現(xiàn)不同地區(qū)的陽性率差別較大，其中華東地區(qū)陽性率最高(88.7%)，華中地區(qū)最低(77.2%)，東南地區(qū)主要檢出HEV-4型，HEV-3型檢出較少。目前研究一般認(rèn)為HEV-4型是我國豬場主要流行的基因型，研究人員對上海部分地區(qū)豬場進(jìn)行跟蹤調(diào)查后發(fā)現(xiàn)，受感染豬只HEV-3型的RNA陽性率差異較大(4.0%～20.0%)，而HEV-4型則維持在較高水平(30.0%～44.0%)[13]，說明不同基因型的HEV在豬中可能存在感染上的競爭差異。Li等[7]首次在我國陜西省一養(yǎng)殖場的豬精液中檢測到了HEV的RNA，提示HEV可能通過人工授精在豬群中傳播?，F(xiàn)有研究已證實HEV可以在豬場中持續(xù)存在，豬場的混批飼養(yǎng)模式、糞尿的不當(dāng)處理、畜舍及運(yùn)輸環(huán)境的污染、非商業(yè)化的自制飼料、嚙齒動物的媒介作用等都可能是HEV在豬場中流行的重要風(fēng)險因素[14]。

豬群HEV感染率與豬只年齡和生理狀態(tài)密切相關(guān)。由于母源抗體的保護(hù)，初生仔豬較少感染HEV，2～3月齡仔豬的HEV陽性率較高，患病仔豬一般會表現(xiàn)出1～2周的病毒血癥，并在接下來的3～7周內(nèi)從糞便中大量排毒。而大部分育成豬雖然血清可能呈HEV-IgG陽性，但并不排毒，這可能是由于HEV抗體在豬體內(nèi)可以長期存在，且一個豬群在飼養(yǎng)過程中如果不斷有豬被感染，會使血清陽性率存在累積升高的現(xiàn)象[10]。Li等[11]在四川省展開研究，在其所調(diào)查的6個豬品種中，成華豬膽汁和糞便HEV RNA陽性檢出率最高，但HEV感染率與豬品種的相關(guān)性仍需進(jìn)一步研究。此外，有報道發(fā)現(xiàn)，經(jīng)產(chǎn)母豬的HEV感染風(fēng)險比預(yù)產(chǎn)期母豬高出約2.5倍[15]，這可能與分娩應(yīng)激或妊娠期間高類固醇激素水平促進(jìn)HEV復(fù)制有關(guān)[16]，但仍需進(jìn)一步的研究加以證實。豬只自然感染HEV一般不表現(xiàn)明顯的臨床癥狀，病理組織學(xué)檢查可發(fā)現(xiàn)存在彌散性或局灶性的肝臟壞死，且免疫功能低下的病例可能呈現(xiàn)慢性感染。值得注意的是，有研究發(fā)現(xiàn)HEV和豬繁殖與呼吸綜合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus，PRRSV)或豬圓環(huán)病毒2型(Porcine circovirus-2，PCV-2)共同感染時，病豬臨床癥狀會加重[17]，HEV是否是引起豬群其他疫病暴發(fā)的潛在因子亟待進(jìn)一步深入研究。飼養(yǎng)環(huán)境和飼養(yǎng)方式也是影響豬群HEV流行情況的重要因素。有調(diào)查顯示，普通養(yǎng)殖場豬HEV的感染率遠(yuǎn)高于SPF級豬養(yǎng)殖場，SPF級豬在普通養(yǎng)殖環(huán)境中飼養(yǎng)一段時間后亦會出現(xiàn)HEV感染[12]，提示我國部分養(yǎng)殖豬場現(xiàn)有的飼養(yǎng)方式和飼養(yǎng)環(huán)境可能易于HEV傳播。

研究人員對屠宰場豬HEV進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)，英國有21%的豬在屠宰時HEV RNA檢測呈陽性[18]，新加坡在進(jìn)口的活豬血清樣本和屠宰豬的肝臟樣品中也檢測到了病毒核酸[19]，提示存在豬源HEV通過豬肉產(chǎn)品流向人類的風(fēng)險。雖然HEV本身對外界的抵抗力不強(qiáng)，但屠宰場豬肉儲存和運(yùn)輸時常用的冷鏈系統(tǒng)在一定程度上有助于延長豬肉中病毒的存活時間，可能造成攜帶HEV的肉產(chǎn)品流入消費(fèi)市場，導(dǎo)致人群暴發(fā)戊型肝炎[20]。已有研究報道從市場銷售的豬產(chǎn)品中檢測到了HEV，且不同豬產(chǎn)品中HEV RNA檢出率有一定差異，生豬肝和肝臟制品的檢出率最高，而豬肉及其制品則相對較低[21]。目前有關(guān)我國消費(fèi)市場中豬產(chǎn)品HEV攜帶率的研究較少。我國是一個豬肉消費(fèi)大國，地域廣泛，飲食習(xí)慣多樣，全面深入地調(diào)查國內(nèi)消費(fèi)市場豬產(chǎn)品HEV的流行情況將有利于提高動物性食品安全監(jiān)管水平，并為制定相應(yīng)的公共衛(wèi)生政策提供科學(xué)依據(jù)。

3 國際貿(mào)易對HEV在全球范圍內(nèi)傳播的影響

隨著經(jīng)濟(jì)貿(mào)易全球化，疫病的傳播也呈現(xiàn)全球化態(tài)勢。一項關(guān)于HEV-4型在全球擴(kuò)散歷史的研究顯示，HEV-4型最初起源于日本，隨后擴(kuò)散至我國，并進(jìn)一步傳播至亞洲其他國家和歐洲部分地區(qū)，提示HEV在全球的擴(kuò)散可能與豬貿(mào)易與運(yùn)輸行業(yè)的發(fā)展有關(guān)[22]。多項研究表明，豬群HEV感染在全球范圍內(nèi)均呈現(xiàn)較高的趨勢，我國豬群HEV IgG血清陽性率為48.0%(39.6%～56.9%)，HEV RNA陽性率為14.4%(10.7%～18.5%)[23]；法國豬群HEV IgG血清陽性率高達(dá)65.0%(57.0%～74.0%)，肝臟中HEV RNA 陽性率為4.0%(2.0%～6.0%)[24]；對美國2017—2019年間屠宰場豬HEV的檢測發(fā)現(xiàn)，HEV RNA和血清IgG陽性率分別為6.3%和40.0%[25]。那么，如何在進(jìn)出口貿(mào)易中避免HEV跨地區(qū)和國家傳播也正成為全球性的公共衛(wèi)生問題。

4 HEV傳播方式

HEV主要經(jīng)糞口途徑或食源性傳播。1986年在新疆維吾爾自治區(qū)暴發(fā)的疫情中，被病毒污染的水即為HEV傳染源。有報道稱在野外種植的草莓中曾檢測到了豬源HEV-3型，而灌溉用水被確認(rèn)為潛在的傳染源[26]。2018年我國青島某工廠發(fā)生的戊肝聚集性暴發(fā)就與該工廠食堂的豬內(nèi)臟菜品未煮熟有關(guān)[27]，其他國家也有因食用生的或未徹底加熱的豬肉而導(dǎo)致食源性HEV感染的類似報告，包括英國、澳大利亞[18,28]等國家。

職業(yè)暴露也是HEV常見的傳播途徑，獸醫(yī)、養(yǎng)豬場和屠宰場從業(yè)人員感染人獸共患型HEV的風(fēng)險會相對升高。研究發(fā)現(xiàn)，在普通人群、職業(yè)暴露人群和豬群中，HEV-IgG的血清陽性率有較大差異，分別為27.3%、47.4%和66.4%[29]。普通人群直接接觸受感染動物也會導(dǎo)致受感染的風(fēng)險增加[30]。此外，HEV也可垂直傳播、血源性傳播和器官移植傳播等[20,31]。

5 HEV的診斷方法

目前，HEV的診斷主要基于血清學(xué)檢測技術(shù)和分子生物學(xué)檢測技術(shù)。在HEV被發(fā)現(xiàn)早期，研究人員通過免疫電子顯微鏡和免疫熒光顯微鏡對臨床樣本中的病毒顆?；蝾惒《绢w粒進(jìn)行檢測，該檢測方法因準(zhǔn)確性較高，曾一度成為診斷HEV感染的金標(biāo)準(zhǔn)，但由于其操作復(fù)雜、靈敏度不高，現(xiàn)在已經(jīng)很少被采用。1990年Reyes等[3]首次應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)(Reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR)在實驗獼猴的膽汁中檢測到了HEV RNA，由于RT-PCR具備敏感性高、特異性強(qiáng)等優(yōu)點，因此，這項技術(shù)在HEV的診斷中逐漸得到廣泛的應(yīng)用。此后，實時熒光定量PCR法(Real-time quantitative PCR,qRT-PCR)由于操作簡便、特異性和靈敏度高，被廣泛應(yīng)用于病毒載量較低樣本的檢測[32-33]。相較于分子生物學(xué)檢測方法，血清抗原和抗HEV IgM/IgG的檢測在實際生產(chǎn)中的應(yīng)用更加廣泛，其具備操作簡便、靈敏度高、特異性強(qiáng)等優(yōu)點，而且抗原還可以作為區(qū)分急慢性感染的指標(biāo)，并可以評估戊型肝炎的預(yù)后，實現(xiàn)HEV的簡單分型，其應(yīng)用對于診斷的重要性不可忽視[34]。HEV的檢測技術(shù)不斷更新，HEV診斷和防控的效率也不斷提高，但不同技術(shù)各有其利弊，目前尚無公認(rèn)的HEV檢測金標(biāo)準(zhǔn)。

6 展望

豬是HEV最為重要的自然宿主和傳染源，我國作為一個養(yǎng)豬和豬產(chǎn)品消費(fèi)大國，監(jiān)測HEV在豬群的流行規(guī)律并制定相應(yīng)的防控措施，對保證食品安全、保障人類健康具有非常重要的公共衛(wèi)生意義。做好豬場日常飼養(yǎng)管理工作，提高豬群動物福利水平，做到防病于未然，是避免豬群HEV等流行和暴發(fā)的重要措施，同時，也應(yīng)考慮全球豬貿(mào)易與運(yùn)輸行業(yè)的發(fā)展所帶來的HEV跨地區(qū)擴(kuò)散的傳播風(fēng)險。

目前臨床尚無特異且適合推廣的對抗HEV感染的治療方法，通過各種綜合防治手段消除傳染源、切斷傳播途徑是防止豬HEV傳播給人類的關(guān)鍵措施。因此，在養(yǎng)殖過程中應(yīng)注重畜舍、管理和運(yùn)輸工具、糞尿等的消毒和無害化處理，并加強(qiáng)外購豬的檢疫，盡量采取“全進(jìn)全出”策略，以有效切斷HEV的傳播途徑。同時，應(yīng)做好養(yǎng)殖場和屠宰場工作人員的健康監(jiān)測，加強(qiáng)疫苗和治療手段的研發(fā)，以便防范和控制HEV的聚集性暴發(fā)。