蜂毒的生物學(xué)作用及蜂針治療免疫失衡相關(guān)疾病的研究進(jìn)展▲

薛浩鳴 黃卓燕 譚宏韜 楊培培 黃夢秋 張 勉

(1 廣西中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院耳鼻喉頭頸外科，廣西南寧市 530001；2 惠州市中心人民醫(yī)院中醫(yī)內(nèi)科，廣東省惠州市 516008；3 廣西中醫(yī)藥大學(xué)護(hù)理學(xué)院，廣西南寧市 530001)

【提要】 隨著免疫調(diào)節(jié)研究的不斷深入，多數(shù)疾病被發(fā)現(xiàn)與免疫失衡有關(guān)，將調(diào)節(jié)免疫失衡應(yīng)用于疾病的治療逐漸受到關(guān)注。蜂針療法是指將蜜蜂尾針刺入穴位并注入蜂毒，引起局部皮膚充血、發(fā)熱以達(dá)到中醫(yī)的針、灸、藥三種作用的復(fù)合型刺灸法，該療法具有調(diào)節(jié)機體免疫的作用，被長期用于治療各種免疫性疾病。本文對蜂毒的成分、生物學(xué)功能及蜂針治療免疫失衡相關(guān)疾病的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，以期為深入了解蜂針療法調(diào)節(jié)免疫失衡的機制提供參考。

蜂針療法是將蜜蜂尾針刺入人體皮膚并注入蜂毒，使皮膚局部潮紅、充血、發(fā)熱，以達(dá)到類似于中醫(yī)灸法效果的治療手段，是一種針、藥、灸相結(jié)合的復(fù)合型刺灸法。蜂針療法常用于治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和脊柱炎[1]，而這兩種疾病均與人體免疫失衡有關(guān)[2-3]，表明蜂針療法在調(diào)節(jié)免疫失衡上具有一定優(yōu)勢[4]。本文介紹蜂毒的成分及其生物學(xué)功能，并對蜂針治療免疫失衡相關(guān)疾病的研究進(jìn)行綜述，以期為深入了解蜂針療法調(diào)節(jié)免疫失衡的機制提供參考。

1 蜂針的起源及發(fā)展

蜂針療法是我國廣大勞動人民從生產(chǎn)和生活實踐中總結(jié)出來的一種療法。養(yǎng)蜂人在采集蜂蜜時不慎被蟄，發(fā)現(xiàn)蜂蟄可以治療身上的某些疾患，蜂針療法由此被提出。早在晚唐時期，我國就有蜂針相關(guān)的記載，“足病蹣跚行路難,招蜂刺我獲平安”[5]。到了明清時期，人們開始有意識地用蜂針來治療疾病，方以智在《物理小識》中提及“取黃蜂之尾針，合硫煉，加冰麝為藥，置瘡瘍之頭，以火點而灸之”[6]。而我國對蜂針療法的系統(tǒng)研究開始于近代。1957年，房柱[7]較系統(tǒng)地論述了蜂毒的應(yīng)用范圍、應(yīng)用方法及蜂毒的成分。1959年，房柱首先提出結(jié)合“經(jīng)絡(luò)穴位”使用蜂針療法[5]。1981年，第一個蜂療研究室在江蘇省連云港市設(shè)立。1991年，李萬瑤在廣州中醫(yī)藥大學(xué)開辦蜂針療法課程。1996年，成永明首創(chuàng)“無痛蜂療法”[5]。2007年國家發(fā)改委、原衛(wèi)生部、國家中醫(yī)藥管理局聯(lián)合發(fā)文，將“蜂蟄療法”列入《全國醫(yī)療服務(wù)價格項目規(guī)范》新增加項目，確定將蜂蟄療法納入中醫(yī)及民族醫(yī)診療類的針刺類中[1]。目前 ，蜂針療法已經(jīng)成為正規(guī)的醫(yī)療手段，并受到越來越多人的關(guān)注。

2 免疫失衡概述

正常機體的細(xì)胞免疫和體液免疫處于平衡狀態(tài)，Th1類細(xì)胞因子介導(dǎo)細(xì)胞免疫，而Th2類因子介導(dǎo)體液免疫，故Th1與Th2細(xì)胞的平衡尤為重要。近年來的研究表明，新的亞群如Th17與調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞(regulatory T cell,Treg)也參與了多種免疫疾病的發(fā)生。若Th亞群之間的平衡被打破，優(yōu)勢方釋放的細(xì)胞因子過多，會使細(xì)胞因子間的平衡也被打破，導(dǎo)致炎性反應(yīng)，并且過多的細(xì)胞因子還會抑制劣勢方細(xì)胞的生成，使失衡進(jìn)一步加重[8]。Th1分泌的常見細(xì)胞因子為γ干擾素，Th2可以產(chǎn)生白細(xì)胞介素(interleukin，IL)-4、IL-5和IL-13[8]。Th的平衡受到多方面的調(diào)控，例如核因子κB對T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的發(fā)育、增殖的調(diào)控[9]，一氧化氮-核因子κB信號通路對Th1與Th2分泌細(xì)胞因子的調(diào)控[10]，轉(zhuǎn)化生長因子(transforming growth factor,TGF)-β可單獨誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞向Treg分化，TGF-β聯(lián)合IL-6則會誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞向Th17分化，IL-1β、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α能夠增強TGF-β、IL-6對Th17的促分化作用等[8]。目前常見的免疫失衡相關(guān)疾病有類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、強直性脊柱炎、變應(yīng)性鼻炎、哮喘、特應(yīng)性皮炎、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、動脈粥樣硬化、腫瘤等。

3 蜂毒的主要成分及其生物學(xué)功能

蜜蜂在受到威脅時，會用其尾部的蜂針攻擊敵對生物。在蜇刺后，蜜蜂會將蜂針及毒囊留下，毒囊離開蜂體后仍可自行收縮，將蜂毒注入。蜂毒的主要成分為蜂毒肽、磷脂酶A2、蜂毒明肽和肥大細(xì)胞脫粒肽，是蜂針療法的一部分，具有特殊的生物學(xué)功能。

3.1 蜂毒肽 蜂毒肽又叫蜂毒溶血肽，是蜂毒中最主要的成分，占蜂毒干重的50%左右。賀守第等[11]發(fā)現(xiàn)，蜂毒肽可以下調(diào)Th1，上調(diào)Th2，從而抑制類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎大鼠的炎癥反應(yīng)。譚寧等[12]進(jìn)一步研究后發(fā)現(xiàn)，蜂毒肽可以下調(diào)Th17，上調(diào)Treg，并抑制關(guān)節(jié)滑膜增生，延緩骨質(zhì)破壞。熊浪平等[13]報告，蜂毒肽可以上調(diào)Th1，下調(diào)Th2，使Th1分泌的具有抗腫瘤作用的γ干擾素增多，從而達(dá)到抗腫瘤的目的。上述研究說明蜂毒肽平衡免疫的作用是雙向的。蜂毒肽還能通過阻斷核因子κB信號通路促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡[14]。此外，蜂毒肽可以增強蜂毒磷脂酶A2的活性[15]。

3.2 磷脂酶A2 磷脂酶A2存在于多種生物體內(nèi)，占蜂毒干重的8%～12%。磷脂酶A2對人體的治療作用包括與人體樹突狀細(xì)胞上的甘露糖受體結(jié)合來上調(diào)Treg水平，緩解特應(yīng)性皮炎的癥狀，減輕表皮增生和淋巴細(xì)胞浸潤[16]，保護(hù)帕金森病大鼠的多巴胺能神經(jīng)元[17]，抑制順鉑誘導(dǎo)的急性腎損傷[18]等。Jung等[19]發(fā)現(xiàn)，蜂毒中的磷脂酶A2可以抑制IgE和趨化因子的產(chǎn)生，減輕哮喘小鼠的肺組織病理學(xué)改變。

3.3 蜂毒明肽 蜂毒明肽占蜂毒干重的2%～3%。蜂毒明肽被認(rèn)為是小電導(dǎo)Ca2+激活的K+(small conductance Ca2+activated potassium，SK)通道的特異性選擇性阻滯劑[20]，在帕金森病中其可通過阻斷SK通道保護(hù)多巴胺能神經(jīng)元免于變形[21]。SK通道在動脈粥樣硬化的發(fā)生中亦發(fā)揮著關(guān)鍵作用[22]。有研究表明，蜂毒明肽可通過抑制核因子κB活化和降低細(xì)胞黏附分子-1水平來減輕動脈粥樣硬化[22-23]。Kim等[24]發(fā)現(xiàn)蜂毒明肽可通過抑制核因子κB信號通路來減少IL-1β和IL-6的表達(dá)，進(jìn)而激活淋巴遷移和角質(zhì)形成，從而治療炎癥性皮膚病(如特應(yīng)性皮炎)。此外，蜂毒明肽可以阻斷電壓依賴性K+通道，而電壓依賴性K+通道是治療過敏性哮喘的有效靶點[25-26]。Ichinose等[27]報告蜂毒明肽可以抑制肺組織中的組胺釋放，減輕氣道反應(yīng)，其應(yīng)用于過敏性哮喘治療或可使患者獲益。

3.4 肥大細(xì)胞脫粒肽 肥大細(xì)胞脫粒肽占蜂毒干重的1%～2%。低劑量(0.1 mg/kg)的肥大細(xì)胞脫粒肽可引起肥大細(xì)胞脫顆粒[28]，即肥大細(xì)胞釋放預(yù)先儲備的物質(zhì)(如組胺、趨化因子等)。該過程與人體的過敏反應(yīng)過程類似，因此低劑量的肥大細(xì)胞脫粒肽具有致敏作用。但在較高劑量時(1.0 mg/kg)，它又表現(xiàn)出完全相反的生物學(xué)效應(yīng)，是一種強大的抗炎、抗過敏藥[28]。Bidard等[29]將不同劑量的肥大細(xì)胞脫粒肽注射入大鼠腦室內(nèi)，發(fā)現(xiàn)注入高劑量(100 pmol)的肥大細(xì)胞脫粒肽的大鼠出現(xiàn)了脫敏現(xiàn)象。有研究顯示，肥大細(xì)胞脫粒肽與同等劑量的氫化可的松相比，其抗炎效果強100倍[30]。目前，有關(guān)肥大細(xì)胞脫粒肽的研究較少，其抗過敏機制目前尚無定論。

4 蜂針療法在免疫失衡相關(guān)疾病中的應(yīng)用

周穎芳等[31]使用蜂針治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者，發(fā)現(xiàn)蜂針下調(diào)γ干擾素(Th1標(biāo)志物)的作用雖然不及甲氨蝶呤和依那西普，但上調(diào)IL-10與IL-4(Th2細(xì)胞標(biāo)志物)的效果更優(yōu)，并且具有恢復(fù)Th1/Th2平衡的作用。隨后周穎芳等[32-33]通過動物實驗發(fā)現(xiàn)，蜂針療法可以恢復(fù)Th17/Treg平衡，并且對脾、肺、腎上腺等臟器無明顯毒副作用。陳瑩等[34]報告，蜂針療法可下調(diào)類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎小鼠的血清TNF-α、IL-1β、IL-6等炎性因子水平。Lee等[35]用蜂針治療自身免疫性腦脊髓炎小鼠，發(fā)現(xiàn)治療后小鼠Th1、Th17下調(diào)，Treg上調(diào)，小鼠的神經(jīng)功能缺損改善。賴耀銘等[36]用蜂針治療變應(yīng)性鼻炎患者，發(fā)現(xiàn)患者的γ干擾素水平升高，而IL-4、血清特異性IgE水平下降，認(rèn)為蜂針對Th1/Th2失衡有著雙向調(diào)節(jié)作用。溫偉強等[37]采用蜂針治療強直性脊柱炎，發(fā)現(xiàn)蜂針可以使患者的血清TNF-α及IL-6水平下降，有效率達(dá)80%。Eltaher等[38]應(yīng)用蜂針治療銀屑病，亦發(fā)現(xiàn)蜂針下調(diào)了患者血清TNF-α、IL-1β、IL-6等炎性因子水平，患者的痊愈率達(dá)到92%。

在蜂針療法的選穴方面，學(xué)者們觀點不一。李莉等[39]通過對比研究發(fā)現(xiàn)，采用阿是穴治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的療效比循經(jīng)選穴更好；郭春艷等[40]提出腧穴的療效優(yōu)于阿是穴。熱敏點是疾病導(dǎo)致的腧穴熱覺異常現(xiàn)象。黃瑞聰?shù)萚41]使用熱敏點作為蜂刺點治療強直性脊柱炎，發(fā)現(xiàn)患者的癥狀改善效果優(yōu)于采用普通選穴。溫偉強等[37]則采用了子午流注針法擇時取穴治療強直性脊柱炎，有效率高達(dá)82.5%。張倞等[42]采用靈龜八法擇時取穴治療強直性脊柱炎，對照組采用靈龜八法非擇時取穴治療，結(jié)果靈龜組有效率為86.7%，療效優(yōu)于對照組。郭春艷等[43]對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎行蜂針治療時，配以不同配比的蜂針減毒增效口服液(桑白皮、威靈仙、蜂蜜)，結(jié)果顯示使用配比為5 ∶6的口服液時，患者的不良反應(yīng)發(fā)生率降低，治療有效率提高。廖雪等[44]將直刺法和散刺法分別應(yīng)用于蜂針治療風(fēng)寒濕型類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎，發(fā)現(xiàn)二者療效無差異，但散刺法的不良反應(yīng)發(fā)生率更低。陳瑩等[45]分別觀察使用單蜂、雙蜂及三蜂治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的效果，發(fā)現(xiàn)單蜂組癥狀改善的程度和有效率均優(yōu)于其他兩組。

5 小結(jié)和展望

與西藥治療相比，蜂針治療在治療免疫失衡相關(guān)疾病方面展現(xiàn)出了一定的優(yōu)勢。但免疫失衡相關(guān)疾病易反復(fù)、遷延難愈，仍需要長期追蹤研究來明確蜂針治療的長期療效。蜂針蜇刺后可能會引起過敏反應(yīng)，故需要先行皮試。而目前尚無公認(rèn)的皮試方法，今后可將目前常用的幾種皮試方法進(jìn)行比較，觀察其后續(xù)治療不良反應(yīng)的發(fā)生率以篩選較優(yōu)的皮試方法。此外，蜂針療法的過敏反應(yīng)要求穴位選擇須精簡高效，不宜廣泛采穴，今后可針對不同的疾病探索其特異性的選穴，以便更好地開展蜂針療法的臨床應(yīng)用。蜂針療法豐富了免疫失衡相關(guān)疾病的治療方案，并具有較好的療效，值得進(jìn)一步深入研究。未來期待更多的大樣本、多中心的隨機對照研究以提供更可靠的臨床證據(jù)，并開展免疫功能調(diào)節(jié)、抗炎等方面的基礎(chǔ)研究以探討相關(guān)作用機制。