祁根兄
(山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學(xué)院,山東濰坊 261061)
動物生理學(xué)是研究動物機體正常生命活動規(guī)律的一門科學(xué),是動物醫(yī)學(xué)、畜牧獸醫(yī)等相關(guān)專業(yè)的專業(yè)基礎(chǔ)課。家兔在體小腸吸收實驗,是山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學(xué)院動物醫(yī)學(xué)專業(yè)大一學(xué)生在《動物生理》課程消化生理這一章節(jié)中的實訓(xùn)技能課。這一實驗耗時較長,技術(shù)難度很大,根據(jù)大一新生動手能力不強,責(zé)任意識薄弱,團隊協(xié)作精神較差,知識的連貫性和系統(tǒng)性掌握不扎實的特點對實驗教學(xué)的設(shè)計和把控就尤為重要。筆者根據(jù)多年的教學(xué)實踐對《動物生理》實訓(xùn)進行了優(yōu)化,盡可能減少實驗失敗的幾率,從而提高學(xué)生的實習(xí)熱情,把學(xué)生的注意力吸引到實驗課上來,進而為實驗課教學(xué)改革提供一定的理論和實踐依據(jù)。
小腸屬于消化系統(tǒng)的核心器官,小腸和所有的消化器官相比較細長而彎曲,食物在此處停留的時間較長,并且特有結(jié)構(gòu)小腸絨毛增大了消化和吸收的表面積[1]。另外小腸內(nèi)消化酶豐富,消化液種類多,有胰液、膽汁、小腸液等。再者小腸的運動方式多樣,食物在小腸內(nèi)已被消化到適于吸收的小分子物質(zhì)。以上原因使小腸成為了最主要的的消化和吸收的部位[2]。而小腸的在體吸收實驗可以使學(xué)生更容易理解小腸的的解剖構(gòu)造,并直觀的看到小腸是最主要的的消化和吸收的部位這一結(jié)果,從而更有利于消化生理這一章節(jié)的學(xué)習(xí)。
山東畜牧獸醫(yī)職業(yè)學(xué)院大多數(shù)動物醫(yī)學(xué)專業(yè)的大一學(xué)生,接觸的活體動物實驗還非常少,而家兔小腸在體吸收實驗正是一種動物活體實驗,學(xué)生動手實踐能力還是有一定的難度,能將其學(xué)好、學(xué)精、做好者為數(shù)不多,具體表現(xiàn)為學(xué)生相關(guān)理論知識欠缺,多數(shù)學(xué)生僅停留在觀看老師示教或看別人做,實習(xí)熱情不高,因此為了激發(fā)興趣、調(diào)動積極性并保證每個學(xué)生都主動地投入實驗[3],取得較滿意的教學(xué)效果,對家兔小腸在體吸收實驗提出改進優(yōu)化,盡可能減少實驗失敗的幾率,提高學(xué)生的實習(xí)熱情,把學(xué)生的注意力吸引到實驗課上來,因此從以下幾方面對家兔在體小腸實驗進行改進,為圓滿完成實驗教學(xué)創(chuàng)造必要條件[4]。
對于接觸活體實驗動物不多的動物醫(yī)學(xué)專業(yè)的大一新生來講,應(yīng)選取體重在2~4kg 的長耳朵短毛家兔。白色更佳,因為白色家兔血管清晰可見,對初學(xué)者更有利于麻醉劑的注入。若選取的家兔太小,家兔的小腸相應(yīng)也很細,不好注入試劑,實驗中出現(xiàn)的變化也不好用肉眼觀察,若選取的家兔太大且體重過重,這樣的家兔勁很大不好保定。麻醉藥物的用量也多,因為學(xué)生都是新手不熟練,耳緣靜脈注射時就會出問題,若選取短耳朵長毛兔,首先剃毛費事不說,耳緣靜脈注射麻醉藥會影響視線,而且一旦第一針注射失敗,留給我們的血管長度也非常有限,不利于學(xué)生的練習(xí),所以更應(yīng)選擇適宜此實驗的家兔。
家兔稱重選用電子臺秤,這種臺秤可以快速稱出兔子的體重,還帶了一個臺子,有空間讓兔子待在上面。由于兔子膽子小,若稱不合適,它就會掙扎,影響體重的準(zhǔn)確性。體重稱不準(zhǔn)確,麻醉藥劑量的計算也不準(zhǔn)確。
用繃帶或繩子將家兔背位保定在兔臺上,這個過程要小心,防止家兔因害怕而抓傷同學(xué)。將家兔4 條腿先分別綁上繃帶,然后把繃帶固定在兔臺下面的立柱上,繃帶不能系的太緊,以免阻礙家兔腿部的血液循環(huán)。也不能太松,以免家兔由于掙扎而導(dǎo)致松脫。
采用20%的烏拉坦溶液,每千克體重5mL 的劑量耳緣靜脈(如圖1 所示)緩慢注入,選用5mL 注射器,若選用的注射器太大容易刺破血管。可用5mL 注射器多次注入,值得注意的是,多次注入時不必拔下針頭,只扭下針筒并吸取麻醉藥即可。這樣可以避免在耳緣靜脈上留下多個針孔。第一針注射應(yīng)從靠近耳尖的地方開始,因為初學(xué)者第一針失敗的可能性很大,要為下一針留有余地,第一針千萬不要從耳根的地方開始,若注射失敗,就沒辦法再從這只耳朵注射了,因為再從耳尖端注射時,麻醉劑就會從注射失敗的針孔溢出。為了提高注射的成功率,注射前可以用酒精棉球擦拭耳緣靜脈處,使血管更清楚的呈現(xiàn)在學(xué)生眼前,當(dāng)然白色短毛家兔這一方面更有優(yōu)勢。麻醉劑注射時左手大拇指壓住要注射的部位,左手其余手指可以置于家兔耳下?lián)纹蕉?,保證整條耳緣靜脈均在同一個水平上,以利于進針(如圖2 所示)。
圖1 鑷子所示耳緣靜脈
圖2 耳緣靜脈注射
腹部用剪毛剪進行剪毛或用電推子進行剃毛,將剪下(剃下)的毛悉數(shù)及時收集至垃圾袋內(nèi),保持好環(huán)境衛(wèi)生。剪毛完畢后,剪毛區(qū)域用碘伏進行消毒,消毒后再用酒精脫一遍碘。
在消毒區(qū)域,用手術(shù)刀自劍突沿腹中線(腹部白線)切開腹壁,打開腹腔(勿刺破胃腸)。亦可用手術(shù)剪沿腹中線先將腹腔剖開一小段,然后將左手食指和中指(手指背面朝下)伸入切口內(nèi)壓住腸管,右手用手術(shù)剪沿腹中線剪開腹壁,打開腹腔,拉出小腸腸管。刺破腸系膜,切勿傷到腸系膜血管,將空腸分3段結(jié)扎,每段長8cm 左右,結(jié)扎前用手指輕輕按壓要接扎的腸管,把腸內(nèi)容物擠向兩側(cè),每段做法重復(fù),盡可能排空內(nèi)容物,以免影響吸收觀察。結(jié)扎完成后,在各段腸管中分別注入5mL 的生理鹽水、蒸餾水、25%硫酸鎂溶液。
等量的生理鹽水、蒸餾水、25%硫酸鎂3 種溶液注射完成后,將拉出的腸管全部重新送回腹腔,切不可使腸管扭轉(zhuǎn)。用數(shù)把止血鉗關(guān)閉腹腔。在切口處蓋上4~5 層干紗布保暖,也可以插上兔臺自帶的電源,用兔臺下的保溫?zé)魜肀E却∧c吸收20~30min。30min 后,去掉止血鉗,打開腹腔,再次輕輕拉出腸管,觀察小腸對所注入的3 種試劑的吸收情況。發(fā)現(xiàn)注入生理鹽水段的腸管內(nèi)的溶液量幾乎沒變化;注入蒸餾水段的腸管皺縮,溶液幾乎全部被吸收;注入25%硫酸鎂段的腸管鼓脹,溶液明顯增加很多。小腸對各種營養(yǎng)的吸收受多種因素的制約[5],而腸內(nèi)容物的滲透壓是影響腸吸收的重要因素。家畜生理中常用“小腸吸收與滲透壓關(guān)系”一實驗加以驗證。我們在教學(xué)過程中使用的《家畜生理學(xué)實驗指導(dǎo)》[6]。這一實驗原理認為:腸內(nèi)容物的滲透壓為制約腸吸收的重要因素。通過此實驗,使學(xué)生理解壓力、滲透壓對吸收的影響,并理解小腸對物質(zhì)吸收具有選擇性。
家兔在體小腸吸收實驗,對初學(xué)者來講,難度非常大,因此將此實驗拆分為兩個實驗。第一個實驗可以進行選兔、保定、麻醉、剪毛。第二個實驗在第一個實驗的基礎(chǔ)上再進行開腹、分段結(jié)扎、注入試劑、觀察吸收,經(jīng)過拆分練習(xí)后的實驗效果明顯好于不拆分實驗。學(xué)生無論是學(xué)習(xí)熱情,動手能力、團隊協(xié)作能力均得到很大提升。另外麻醉劑的注射;(劑量過大兔子會猝死,這種無法補救。劑量過小實驗未完成兔子會清醒,這種我們可以及時補注麻醉劑);沿體正中線的開腹;拉出小腸;分三段結(jié)扎;注入所需試劑難度均不小。此實驗耗時較長,對初學(xué)者的耐心和毅力均是一種考驗。以任務(wù)為主線、教師為主導(dǎo)、學(xué)生為主體,讓學(xué)生在完成"任務(wù)"的過程中,培養(yǎng)分析問題、解決問題的能力及培養(yǎng)獨立探索和合作精神[7]。
高職動物醫(yī)學(xué)專業(yè)大一新生的《動物生理》的課程每一個實驗,根據(jù)學(xué)生的時代特點及專業(yè)特點都需要花時間、花精力去精心設(shè)計,實驗過程的每一步都至關(guān)重要,稍有疏忽,就會全盤皆輸。因此每一步都要嚴(yán)格把握,不可粗心大意,更不能急于求成,以確保實驗過程順利進行。從一開始就培養(yǎng)學(xué)生的科學(xué)精神、創(chuàng)新精神、團隊精神和奉獻精神等。在實驗教學(xué)時,提倡動物福利的理念,讓學(xué)生認識到實驗動物為了生命科學(xué)的發(fā)展和人類健康做出了巨大的貢獻和犧牲,培養(yǎng)學(xué)生對生命的敬畏意識,對動物的仁愛之心,使學(xué)生在具備扎實的動物解剖生理相關(guān)知識和較高實驗技能水平的基礎(chǔ)上,完成“引人以大道,啟人以大智”兩個德育目標(biāo)。