中藥影響膝骨關(guān)節(jié)炎信號通路的研究進展

楊萍

【摘 要】 膝骨關(guān)節(jié)炎是指由于膝關(guān)節(jié)軟骨變性、骨質(zhì)增生引起的一種慢性骨關(guān)節(jié)疾病。致病因素復(fù)雜，目前尚未明確其具體的發(fā)病機制，治療方法也不盡如人意。因此，從中藥中尋找治療膝骨關(guān)節(jié)炎的有效藥物，對于臨床防治膝骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)生發(fā)展具有重要意義。從Wnt/β-catenin、TLR4/MyD88/NF-κB、p38 MAPK及PI3K/AKT信號通路方面綜述近年來中藥治療膝骨關(guān)節(jié)炎的研究進展，為進一步探討中藥治療膝骨關(guān)節(jié)炎提供參考。

【關(guān)鍵詞】 膝骨關(guān)節(jié)炎；中藥；信號通路；有效成分；研究進展；綜述

膝骨關(guān)節(jié)炎（knee osteoarthritis，KOA）是以膝關(guān)節(jié)軟骨非炎癥性退行性改變，伴膝關(guān)節(jié)表面及其邊緣反應(yīng)性新骨形成為特點的一種骨關(guān)節(jié)疾病［1］。主要表現(xiàn)為膝關(guān)節(jié)疼痛、腫脹、積液、軟組織增生、骨質(zhì)增生及膝關(guān)節(jié)功能障礙、關(guān)節(jié)僵硬等，嚴重者關(guān)節(jié)活動受限，甚至并發(fā)關(guān)節(jié)畸形。臨床病理學(xué)特征主要是關(guān)節(jié)軟骨的破壞和降解。目前，西醫(yī)常采用透明質(zhì)酸鈉、雙醋瑞因、硫酸氨基葡萄糖等藥物治療KOA，雖然能夠較快地緩解臨床癥狀，但遠期療效欠佳［2］。中醫(yī)藥防治KOA療效顯著，且不良反應(yīng)小，患者依從性高，具有廣闊的開發(fā)應(yīng)用前景。中醫(yī)學(xué)將KOA歸為“痹證”“骨痹”等范疇，以肝腎虧虛、骨髓失養(yǎng)為本，風(fēng)寒濕邪氣侵襲、痹阻經(jīng)脈為標，屬本虛標實之證［3］。故臨證常根據(jù)補益肝腎、祛風(fēng)散寒、健脾益氣、清熱通絡(luò)、化痰活血等治則組方［4］。目前，中醫(yī)藥在治療KOA相關(guān)疾病方面取得不少進展，已深入到細胞分子水平。本文對中藥調(diào)控KOA的相關(guān)信號通路進行綜述，為進一步探討中藥治療KOA提供參考。

1 Wnt/β-catenin信號通路

Wnt/β-catenin信號通路是通過調(diào)節(jié)成骨細胞和軟骨細胞分化，產(chǎn)生蛋白酶，參與KOA發(fā)病的經(jīng)典途徑，對軟骨細胞功能的表達非常重要［5］。β-catenin經(jīng)糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）磷酸化后經(jīng)泛素-蛋白酶體途徑分解，保持其含量在較低水平，Wnt信號系統(tǒng)激活后，Wnt與卷曲蛋白（Frizzled）結(jié)合后使胞漿內(nèi)的蓬亂蛋白（Dvl）磷酸化而激活，活化的Dvl抑制GSK-3β活性，從而阻斷β-catenin的分解并在細胞內(nèi)聚集，然后轉(zhuǎn)移至細胞核內(nèi)與轉(zhuǎn)錄因子（TCF）/淋巴增強因子（LEF）結(jié)合，從而調(diào)節(jié)細胞周期蛋白D1（cyclin D1）、原癌基因（c-myc）等數(shù)個靶基因的表達，研究表明，β-catenin的過度表達在某種程度上參與了骨關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis，OA）的病變過程［6］。

姜黃素通過調(diào)節(jié)Wnt/β-catenin信號通路中β-catenin蛋白表達，改善膝關(guān)節(jié)軟骨損傷程度［7］；下調(diào)OA軟骨細胞上清液基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）-13、白細胞介素（IL）-6水平，抑制骨關(guān)節(jié)炎軟骨細胞增殖，保護軟骨細胞，其機制可能與激活Wnt/β-catenin中Wnt、β-catenin關(guān)鍵蛋白有關(guān)［8］；通過促進Wnt信號分子與細胞膜上特異性受體Frizzled蛋白結(jié)合，上調(diào)β-catenin表達，促進細胞增殖、分化，起到修復(fù)保護骨關(guān)節(jié)的作用［9］。其濃度為10 μmol·L^-1，作用于軟骨細胞24 h，Wnt-2及β-catenin蛋白表達量較其他條件均高，對軟骨細胞的促增殖作用最為明顯［10］。

牛膝多糖上調(diào)Wnt-4、Frizzled-2、β-catenin和cyclin D1的表達，下調(diào)GSK-3β的表達，誘導(dǎo)β-catenin核移位，增加軟骨細胞中膠原蛋白Ⅱ（Collagen Ⅱ）表達，激活Wnt/β-catenin信號通路促進軟骨細胞增殖［11］。牛膝總皂苷能有效抑制OA滑膜炎癥，改善關(guān)節(jié)粘連度，降低滑膜組織β-catenin蛋白表達以及減少關(guān)節(jié)液腫瘤壞死因子-1（TNF-1）、IL-1β、MMP-3因子含量［12］。

雷公藤多苷通過抑制Wnt/β-catenin通路負反饋調(diào)節(jié)IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細胞活性降低、乳酸脫氫酶（LDH）分泌和細胞凋亡率增加，以及葡萄糖氨基聚糖（GAG）、MMP-13、蛋白聚糖（Acan）、硫氧化物（Sox-9）水平的降低和環(huán)氧合酶-2（COX-2）、誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶（iNOS）水平的上升［13］。九里香黃酮類成分通過上調(diào)Foxo3a的表達并抑制miR-29a/Wnt/β-catenin信號轉(zhuǎn)導(dǎo)活性而具有軟骨保護作用［14］。大黃素在IL-1β誘導(dǎo)的大鼠軟骨細胞mRNA和蛋白水平上均劑量依賴性地下調(diào)MMP-3、MMP-13、整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶抗體-4（ADAMTS-4）和ADAMTS-5表達，抑制NF-κB和Wnt信號激活，改善OA進展［15］。黃芪甲苷抑制滑膜細胞Wnt/β-catenin信號通路，降低共培養(yǎng)體系異?；ぜ毎?軟骨細胞體系的MMP-7、軟骨寡聚基質(zhì)蛋白（COMP）、Ⅱ型膠原羧基端肽（CTX-Ⅱ）含量，抑制軟骨降解［16］。

2 TLR4/MyD88/NF-κB信號通路

Toll樣受體（TLRs）在炎癥、免疫細胞調(diào)控、存活和增殖方面發(fā)揮著重要作用，是機體抵御病原體入侵的第一道防線。同時也是機體炎性反應(yīng)鏈的啟動蛋白，可通過與相應(yīng)的配體結(jié)合，觸發(fā)髓樣分化因子88（MyD88）依賴性或非依賴性途徑，活化核轉(zhuǎn)錄因子-κB（NF-κB），導(dǎo)致TNF-α、IL-1β等炎性細胞因子激活，誘發(fā)局部炎癥［17］。TLRs介導(dǎo)的非特異性免疫反應(yīng)調(diào)控炎癥反應(yīng)和炎癥反應(yīng)引起的分解代謝，例如MMP的活性，當(dāng)組織損傷時，TLR4與相應(yīng)的受體激動劑結(jié)合，一些“損傷相關(guān)分子模式”就會被激活。隨著OA的病理進程發(fā)展，TLR4在關(guān)節(jié)軟骨中的表達增加，相應(yīng)的受體激動劑表達上調(diào)而導(dǎo)致炎癥反應(yīng)［18］。

研究發(fā)現(xiàn)，肥胖者OA軟骨細胞經(jīng)IL-1β誘導(dǎo)后TLR4、NF-κB mRNA表達均顯著升高，提示OA時軟骨細胞的TLR4/NF-κB信號通路可能被激活，經(jīng)白藜蘆醇（RES）處理后，TLR4、NF-κB mRNA均顯著降低，提示RES可能通過抑制TLR4/NF-κB信號通路發(fā)揮抗OA作用［19］。抑制IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細胞炎癥反應(yīng)，緩解OA癥狀，通過激活TLR4/MyD88/NF-κB信號通路發(fā)揮調(diào)控作用［20］；降低培養(yǎng)基上清IL-6水平及軟骨細胞TLR4及MyD88蛋白表達，通過抑制TLR4/MyD88依賴性信號通路發(fā)揮抗IL-1β誘導(dǎo)的SW1353細胞的OA效應(yīng)［21］；上調(diào)IL-1β刺激軟骨細胞激活TLR4和與MMP-13和IL-6合成相關(guān)的TLR4/myd88依賴和非依賴的通路下游靶點，逆轉(zhuǎn)IL-1β誘導(dǎo)的分解代謝和炎癥反應(yīng)，抑制TLR4/myd88依賴和非依賴的信號通路［22］。

姜黃素降低滑液細胞因子TLR4、MyD88、p-IκBα、NF-κB表達及滑膜炎性生物標志物TNF-α、IL-1β和IL-6表達，通過激活TLR4/NF-κB信號通路，降低炎癥因子表達水平以保護關(guān)節(jié)軟骨［23］。秦皮素抑制IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細胞凋亡及炎性介質(zhì)釋放，通過調(diào)節(jié)TLR4/MyD88/NF-κB通路，抑制MMP-13上調(diào)和細胞外基質(zhì)Collagen Ⅱ降解，保護MIA誘導(dǎo)的大鼠OA模型關(guān)節(jié)軟骨破壞［24］。小檗堿上調(diào)OA軟骨細胞中表面活性劑蛋白D（SP-D）表達，下調(diào)腫瘤壞死因子受體相關(guān)蛋白6（TRAF6）、TLR4、MD-2和MyD88表達，調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)并減少軟骨降解，通過從MD-2/SP-D復(fù)合物中釋放SP-D和抑制TLR4/NF-κB信號傳導(dǎo)發(fā)揮作用［25］。青藤堿可減輕滑膜炎性細胞浸潤，降低血清TNF-α、IL-17水平，下調(diào)滑膜TLR4、MyD88、NF-κB蛋白及mRNA表達，表明其抗炎作用可能與抑制滑膜TLR4/MyD88/NF-κB炎癥信號通路有關(guān)［26］。

3 p38 MAPK信號通路

p38 MAPK的激活與應(yīng)激反應(yīng)和凋亡過程有關(guān)，是受環(huán)境應(yīng)力和炎癥因素激活的細胞內(nèi)信號通路的一部分［27］。軟骨退化是一個重要的OA發(fā)病機制，異常增殖作用的激活蛋白激酶（MAPK）信號通路在軟骨細胞促進炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致關(guān)節(jié)軟骨基質(zhì)降解酶的釋放，加速軟骨的退化［28］。

p38 MAPK信號通路可調(diào)控軟骨細胞增殖、凋亡，維持細胞外基質(zhì)代謝平衡，調(diào)節(jié)MMPs、促炎癥因子的產(chǎn)生，參與膠原蛋白和蛋白多糖降解，在KOA病理進程中起重要的調(diào)控作用［29］。通過抑制p38通路能抑制軟骨細胞凋亡、促進軟骨修復(fù)、抑制MMPs合成、抑制炎性因子生成，多種經(jīng)p38通路的治療策略均能預(yù)防或者延緩OA動物模型病程進展［30］。

桑葉水提物降低IL-1β誘導(dǎo)的SW1353細胞中MMP-1、MMP-13和炎性介質(zhì)一氧化氮（NO）、前列腺素E2（PGE2）、iNOS及COX-2表達，抑制NF-κB核移位，激活p38 MAPK磷酸化［31］。丹酚酸A抑制MMP-1、MMP-13和ADAMTS-5表達，促進Collagen Ⅱ和蛋白聚糖合成，下調(diào)NF-κB和p38 MAPK通路表達水平［32］。槲皮素通過抑制p38 MAPK信號通路下調(diào)炎癥因子表達水平，保護關(guān)節(jié)軟骨［33］。山奈酚抑制IL-1β誘導(dǎo)的炎性介質(zhì)如iNOS和COX-2蛋白表達，MMP-1、MMP-3、MMP-13和血栓反應(yīng)蛋白motif-5的解整合素和金屬蛋白酶及Collagen Ⅱ降解，抑制MAPK相關(guān)的細胞外信號調(diào)節(jié)激酶（ERK）和P38信號通路發(fā)揮調(diào)控作用［34］。黃芩素通過調(diào)節(jié)miR-29a-3p靶向抑制MAP2K6磷酸化，提高軟骨細胞活性，抑制細胞凋亡，從而改善OA引起的軟骨細胞退化［35］。

4 PI3K/AKT信號通路

磷脂酰肌醇-3-羥激酶（PI3K）/蛋白激酶（AKT）通過廣泛的靶蛋白如雷帕霉素靶蛋白（mTOR）、NF-κB、GSK-3β、p53等調(diào)控一系列級聯(lián)變化，可能是OA成纖維樣滑膜細胞侵襲與軟骨損傷的交聯(lián)機制，PI3K可能參與鈣黏蛋白-11（Cadherin 11）的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控，TNF-α通過PI3K/AKT通路誘導(dǎo)OA成纖維樣滑膜細胞中Cadherin 11表達的增加，PI3K/AKT通路在滑膜炎癥中起重要作用，可能參與OA的發(fā)病機制［36］。PI3K/AKT信號途徑改變在軟骨細胞凋亡中的作用已成為近年來學(xué)者們研究的熱點［37］。PI3K和AKT表達下降使軟骨細胞內(nèi)通過PI3K/AKT信號通路來維持細胞存活的信號不能夠有效傳遞，使促進軟骨細胞生長的能力下降，最終導(dǎo)致細胞凋亡，引起疾?。?8］。

杜仲水提物可能通過抑制PI3K/AKT通路延緩軟骨退變，減少炎癥因子IL-1β、IL-6表達，抑制MMP-3分泌，下調(diào)磷酸化AKT，抑制OA進展［39］。燈盞乙素降低IL-1β誘導(dǎo)的IL-6表達升高，下調(diào)PI3K/AKT/mTOR信號通路中AKT、磷酸化（p）-AKT、mTOR和p-mTOR蛋白表達，表明其通過抑制PI3K/AKT/mTOR信號通路調(diào)節(jié)OA［40］。甘草酸抑制IL-1β引起的NO、PGE2、TNF-α、IL-6及COX-2合成，誘導(dǎo)iNOS、MMP-3、MMP-13、ADAMTS-1和MMP-5，逆轉(zhuǎn)蛋白聚糖和Collagen Ⅱ降解，抑制PI3K/AKT磷酸化和NF-κB核移位，保護小鼠OA模型軟骨破壞［41］。香草酸減輕OA模型大鼠的病情進展，抑制COX-2、iNOS、MMPs、ADAMTS-5等炎癥反應(yīng)及Collagen X、Runx2、血管內(nèi)皮生長因子A（VEGFA）等肥大軟骨細胞表達，保護CollagenⅡ和蛋白聚糖降解，抑制MAPK和PI3K/AKT/NF-κB通路的激活［42］。楊梅素下調(diào)IL-1β誘導(dǎo)損傷的軟骨細胞TNF-α、IL-6及PI3K、AKT、NF-κB P65、IKKαβ、IKBα磷酸化水平，上調(diào)IKBα、IL-10表達，使受損的軟骨細胞形態(tài)變規(guī)則，軟骨組織的膠原纖維排列變緊密，促進軟骨細胞增殖，抑制凋亡及OA炎癥反應(yīng)，抑制PI3K/AKT/NF-κB信號通路的激活，緩解關(guān)節(jié)軟骨退變［43］。芍藥苷下調(diào)軟骨細胞中p-PI3K和p-AKT蛋白表達，應(yīng)用自噬抑制劑3MA后，部分拮抗p-PI3K和p-AKT蛋白減少，表明通過抑制PI3K/AKT信號促進細胞自噬活力，減輕炎癥反應(yīng)，減少軟骨細胞損傷［44］。

5 小 結(jié)

中醫(yī)理論認為，“腎主骨生髓”，腎主骨和髓的生長發(fā)育，與骨的功能密切相關(guān)。腎藏精，精生骨髓，骨髓充實，則骨骼強壯，骨質(zhì)健壯結(jié)實。腎的精氣盛衰，直接影響骨骼的生長、營養(yǎng)、功能等。因此，中醫(yī)臨床常以補腎壯骨法治療骨關(guān)節(jié)疾病。牛膝、杜仲補肝腎、強筋骨；姜黃、雷公藤、九里香、虎杖、燈盞花、丹參活血通經(jīng)；青風(fēng)藤祛風(fēng)濕、通經(jīng)絡(luò)；山奈行氣止痛。根據(jù)KOA中醫(yī)臨床辨證分型的不同，又可配伍秦皮、黃連、黃芩等清熱類藥及黃芪、甘草、當(dāng)歸、白芍等補益類藥。臨床常用這些藥物組方緩解KOA關(guān)節(jié)腫脹、疼痛、屈伸不利，改善患者病理進程，提高生活質(zhì)量。

目前，中藥對KOA的防治在細胞分子水平方面取得很大進展。雖然我們對Wnt/β-catenin、TLR4/MyD88/NF-κB、p38 MAPK及PI3K/AKT通路的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑及調(diào)控機制已有較多了解，但是對這些信號通路與疾病之間的關(guān)系，多種信號通路之間的協(xié)同交叉作用，中藥多通路的調(diào)控機制及多種中藥有效組分對疾病的影響等方面的研究還不夠深入。相信隨著現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)、網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)、蛋白組學(xué)、基因組學(xué)、代謝組學(xué)等研究方法的不斷創(chuàng)新發(fā)展，中藥治療KOA的分子機制將會被更進一步闡釋，在臨床KOA疾病治療方面也將會出現(xiàn)更多具有活性的藥物。

參考文獻

［1］ 楊威，郭斯印，易志勇，等.由筋痹論膝骨關(guān)節(jié)炎病機［J］.風(fēng)濕病與關(guān)節(jié)炎，2021，10（6）：53-56.

［2］ 李鼎.應(yīng)用中西醫(yī)結(jié)合療法治療膝骨關(guān)節(jié)炎的效果評價［J］.當(dāng)代醫(yī)藥論叢，2018，16（12）：97-98.

［3］ 李滿意，劉紅艷，陳傳榜，等.骨痹的證治［J］.風(fēng)濕病與關(guān)節(jié)炎，2020，9（12）：53-56.

［4］ 李濤，吳山，范志勇，等.基于Wnt/β-catenin通路中醫(yī)藥療法治療骨相關(guān)疾病研究進展［J］.遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2020，22（4）：117-121.

［5］ 蔡鑫，唐芳，馬武開，等.中醫(yī)藥調(diào)控Wnt/β-catenin信號治療膝骨關(guān)節(jié)炎的研究進展［J］.貴州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2020，42（6）：81-85.

［6］ 代龍金，鄧紫玉，尹昭，等.β-連環(huán)蛋白與膝骨關(guān)節(jié)炎相關(guān)性研究［J］.昆明醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2015，36（12）：120-122.

［7］ 陳志偉，馮康虎，申建軍，等.姜黃素治療膝骨關(guān)節(jié)炎的相關(guān)分子機制及研究進展［J］.風(fēng)濕病與關(guān)節(jié)炎，2022，11（3）：63-67.

［8］ 瞿杭波，李慶慶，蔣增輝，等.姜黃素對骨關(guān)節(jié)炎軟骨細胞增殖及分泌MMP-13、IL-6的影響［J］.中國現(xiàn)代醫(yī)生，2020，58（26）：38-45.

［9］ 盛旭飏.姜黃素調(diào)節(jié)Wnt/β-catenin信號通路影響軟骨細胞增殖的研究［D］.南京：南京中醫(yī)藥大學(xué)，2016.

［10］ 馬勇，王禮寧，郭楊，等.姜黃素通過調(diào)節(jié)Wnt/β-catenin信號通路促進軟骨細胞增殖的研究［J］.廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2017，34（1）：90-95.

［11］ 范夢夢，范儀銘，李峰，等.基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)探討牛膝治療骨關(guān)節(jié)炎的作用機制［J］.風(fēng)濕病與關(guān)節(jié)炎，2020，9（11）：5-9，23.

［12］ 余闐，彭力平，馬篤軍，等.牛膝總皂苷對實驗兔膝骨關(guān)節(jié)炎滑膜組織的影響［J］.中國中醫(yī)骨傷科雜志，2017，25（6）：1-5.

［13］ 齊秀春，陳昕，曹玉凈，等.雷公藤多苷通過Wnt/β-catenin緩解IL-1β誘導(dǎo)的軟骨細胞損傷［J］.中成藥，2020，42（11）：2890-2896.

［14］ HUANG X，CHEN Z，SHI W，et al.TMF inhibits miR-29a/Wnt/β-catenin signaling through upregulating Foxo3a activity in osteoarthritis chondrocytes［J］.Drug Des Dev Ther，2019，19（13）：2009-2019.

［15］ DING QH，YE CY，CHEN ERM，et al.Emodin ameliorates cartilage degradation in osteoarthritis by inhibiting NF-κB and Wnt/β-catenin signaling in-vitro and in-vivo［J］.Int Immunopharmacol，2018，61（8）：222-230.

16］ 王德剛，許傳勇，姜玉祥，等.黃芪甲苷對Wnt/β-catenin信號通路活化的人滑膜及軟骨細胞共培養(yǎng)體系相關(guān)因子的調(diào)控作用［J］.廣東醫(yī)學(xué)，2017，38（3）：354-357.

［17］ 王圓圓.青藤堿對類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者外周血單核細胞TLR4/MyD88/NF-κB信號通路的影響［D］.合肥：安徽中醫(yī)藥大學(xué)，2015.

［18］ G?MEZ R，VILLALVILLA A，LARGO R，et al.TLR4 signalling in osteoarthritis-finding targets for candidate DMOADs［J］.Nature Reviews Rheumatology，2015，11（3）：159-170.

［19］ 焦永亮，劉慧敏，顧海倫，等.白藜蘆醇對肥胖者骨性關(guān)節(jié)炎軟骨細胞的作用及對TLR4、NF-κBmRNA表達的影響［J］.東南大學(xué)學(xué)報（醫(yī)學(xué)版），2015，34（3）：342-346.

［20］ LIU L，GU HL，LIU HM，et al.Protective effect of resveratrol against IL-1β-induced inflammatory response on human osteoarthritic chondrocytes partly via the TLR4/MyD88/NF-κB signaling pathway：an"in vitro study"［J］.ILMS，2014，15（4）：6925-6940.

［21］ 劉旭丹，于曉璐，趙越，等.白藜蘆醇通過TLR4/MyD88依賴性信號通路對SW1353細胞發(fā)揮抗骨關(guān)節(jié)炎作用的實驗研究［J］.實用預(yù)防醫(yī)學(xué)，2017，24（11）：1296-1299.

［22］ GU HL，JIAO YL，YU XL，et al.Resveratrol inhibits the IL-1β induced expression of MMP-13 and IL-6 in human articular chondrocytes via TLR4/MyD88-dependent and-independent signaling cascades［J］.Int J Mol Med，2017，39（3）：734-740.

［23］ ZHANG Y，ZENG Y.Curcumin reduces inflammation in knee osteoarthritis rats through blocking TLR4/MyD88/NF-κB signal pathway［J］.Drug Dev Res，2019，80（3）：353-359.

［24］ WANG Q，ZHUANG D，F(xiàn)ENG W，et al.Fraxetin inhibits interleukin-1β-induced apoptosis，inflammation，and matrix degradation in chondrocytes and protects rat cartilage in vivo［J］.Saudi Pharm J，2020，28（12）：1499-1506.

［25］ ZHOU Y，MING J，DENG M，et al.Berberine-mediated up-regulation of surfactant protein D facilitates cartilage repair by modulating immune responses via the inhibition of TLR4/NF-κB signaling［J］.Pharmacol Res，2020，155（11）：104690-104698.

［26］ 張玉萍.青藤堿對膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)炎小鼠滑膜TLR4/MyD88/NF-κB通路的影響［D］.合肥：安徽中醫(yī)藥大學(xué)，2016.

［27］ TAKEBE K，NISHIYAMA T，HAYASHI S，et al.Regulation of p38 MAPK phosphorylation inhibits chondrocyte apoptosisin response to heat stress or mechanical stress［J］.Int J Mol Med，2011，27（3）：329-335.

［28］ LIN MN，LIN YH，LI XH，et al.Warm sparse-dense wave inhibits cartilage degradation in papain-induced osteoarthritis through the mitogen-activated protein kinase signaling pathway［J］.Exp Ther Med，2017，14（4）：3674-3680.

［29］ 謝文鵬，徐龍進，王象鵬，等.p38 MAPK信號通路在膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎中醫(yī)藥診療中的作用［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2019，25（8）：219-225.

［30］ 楊華瑞，陳園，陳江水，等.基于p38 MAPK信號通路防治骨性關(guān)節(jié)炎的研究進展［J］.廣東醫(yī)學(xué)，2016，37（14）：2190-2192.

［31］ JEONG JW，LEE HH，LEE KW，et al.Mori folium inhibits interleukin-1β-induced expression of matrix metalloproteinases and inflammatory mediators by suppressing the activation of NF-κB and p38 MAPK in SW1353 human chondrocytes［J］.Int J Mol Med，2016，37（2）：452-460.

［32］ FENG S，CONG H，JI L.Salvianolic acid a exhibits anti-inflammatory and antiarthritic effects via inhibiting?NF-κB and p38/MAPK pathways［J］.Drug Des Devel Ther，2020，14（8）：1771-1778.

［33］ 王象鵬，謝文鵬，畢亦飛，等.基于P38 MAPK信號通路的槲皮素保護骨性關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)軟骨機制的研究［J］.中國實驗方劑學(xué)雜志，2021，27（7）：169-177.

［34］ HUANG XJ，PAN QY，MAO ZK，et al.Kaempferol inhibits interleukin1β stimulated matrix metalloproteinases by suppressing the MAPK associated ERK and p38 signaling pathways［J］.Mol med rep，2018，18（3）：2697-2704.

［35］ 楊波，龍慧，王鄭鋼，等.黃芩素通過促進miR-29a-3p抑制MAP2K6改善骨性關(guān)節(jié)炎模型大鼠軟骨細胞退化［J］.中藥藥理與臨床，2019，35（6）：32-37.

［36］ LIU S，CAO C，ZHANG Y，et al.PI3K/AKT inhibitor partly decreases TNF-α-induced activation of fibroblast-like synoviocytes in osteoarthritis［J］.J Orthop Surg Res，2019，14（1）：425-438.

［37］ 余躍偉.PI3K/AKT信號通路及相關(guān)信號分子的表達在人膝骨關(guān)節(jié)炎中的意義［D］.福州：福建醫(yī)科大學(xué)，2009.

［38］ 鄭耀文，楊安群，謝獲.人膝骨關(guān)節(jié)炎PI3K/AKT信號通路及相關(guān)信號分子的表達的意義分析［J］.中國醫(yī)藥指南，2012，10（29）：83-84.

［39］ XIE GP，JIANG N，WANG SN，et al.Eucommia ulmoides Oliv.bark aqueous extract inhibits osteoarthritis in a rat model of osteoarthritis［J］.J Ethnopharmacol，2015，13（162）：148-154.

［40］ JU SH，TAN LR，LIU PW，et al.Scutellarin regulates osteoarthritis in vitro by inhibiting the PI3K/AKT/mTOR signaling pathway［J］.Mol Med Rep，2021，23（1）：83-88.

［41］ JIANG RH，XU JJ，ZHU DC，et al.Glycyrrhizin inhibits osteoarthritis development through suppressing the PI3K/AKT/NF-κB signaling pathway in vivo and in vitro［J］.Food funct，2020，11（3）：2126-2136.

［42］ HUANGXJ，XI YANG，MAO ZK，et al.Vanillic acid attenuates cartilage degeneration by regulating the MAPK and PI3K/AKT/NF-κB pathways［J］.Eur J Pharmacol，2019，859（15）：172481.

［43］ 楊鑫，李源力，蔣萍，等.楊梅素通過PI3K/AKT/NF-κB信號通路對骨性關(guān)節(jié)炎發(fā)展的影響［J］.暨南大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)與醫(yī)學(xué)版），2020，41（1）：48-57.

［44］ 姚旭，王清華，茹藝，等.芍藥苷抑制PI3K/AKT信號促進細胞自噬治療骨關(guān)節(jié)炎［J］.吉林中醫(yī)藥，2020，40（8）：1076-1079.