陳歡歡，張磊，張珊，崔趁趁，張翠蓮*

(1.河南省人民醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)中心，鄭州 450003；2.河南省生殖醫(yī)學(xué)工程國際聯(lián)合實驗室，鄭州 450003)

多囊卵巢綜合征(PCOS)是一種常見且復(fù)雜的育齡期女性內(nèi)分泌代謝性疾病，其臨床表現(xiàn)為排卵障礙、高雄激素血癥、肥胖及胰島素抵抗(insulin resistant，IR)等，并與2型糖尿病、生育力下降及心血管疾病等遠(yuǎn)期并發(fā)癥相關(guān)，占無排卵性不孕癥的70%～80%[1]。隨著人們生活方式的改變和環(huán)境因素的影響，PCOS的發(fā)病率和患病率均呈增長趨勢，在育齡女性中的發(fā)病率高達(dá)5%～15%[2]。由于PCOS患者卵泡發(fā)育及排卵障礙機制不明，病因復(fù)雜多樣加上遺傳因素的可能，PCOS至今沒有徹底治愈的方法，給患者帶來了巨大的精神和經(jīng)濟(jì)壓力[3]。自噬是細(xì)胞降解胞內(nèi)成分(包括可溶性蛋白、蛋白聚集體、細(xì)胞器、大分子復(fù)合物和異物)重要的、保守的過程，上述物質(zhì)首先被稱為“隔離膜”的囊泡所包被，囊泡逐漸閉合形成雙層膜結(jié)構(gòu)，即自噬體，并最終與溶酶體融合后進(jìn)行降解[4]。近年來，關(guān)于自噬參與PCOS發(fā)生的分子機制日益受到人們的關(guān)注[5]。本文總結(jié)了PCOS相關(guān)自噬的最新進(jìn)展，期望為未來的研究提供參考和借鑒。

一、自噬概述

細(xì)胞降解主要有兩種途徑：蛋白酶體途徑和自噬途徑。蛋白酶體主要降解短壽命蛋白質(zhì)，而自噬則負(fù)責(zé)降解長壽命蛋白質(zhì)以及受損或多余的細(xì)胞器[6]。自噬是一種特定形式的細(xì)胞死亡(Ⅱ型程序性細(xì)胞死亡)，是細(xì)胞對內(nèi)外壓力反應(yīng)的一部分。事實上，正常細(xì)胞很少發(fā)生大規(guī)模的自噬，除非存在誘發(fā)因素，既包括細(xì)胞外的脅迫如營養(yǎng)缺乏、缺血和缺氧，也有細(xì)胞內(nèi)的因素如代謝應(yīng)激、細(xì)胞器損壞、蛋白質(zhì)的異常折疊或聚集[7]。由于這些因素的長期存在，細(xì)胞維持一個非常低的基礎(chǔ)自噬活性，以維持細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)。

根據(jù)自噬的形態(tài)特征和分子機制，哺乳動物細(xì)胞的自噬可以分為三種主要類型：巨自噬、微自噬和分子伴侶介導(dǎo)的自噬(chaperone-mediated autophagy，CMA)。每種類型都有其獨特的分子機制，并受到各種細(xì)胞信號的嚴(yán)格控制，有助于細(xì)胞適應(yīng)不斷變化的環(huán)境。根據(jù)底物選擇性，自噬也可以分為兩類：選擇性自噬和非選擇性自噬。非選擇性自噬指的是細(xì)胞器或其他細(xì)胞質(zhì)成分隨機轉(zhuǎn)運到溶酶體；選擇性自噬是指對需要降解的特定底物的識別，并進(jìn)一步分為以下幾種類型：線粒體自噬、過氧化物酶體自噬、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)自噬、細(xì)胞核自噬、核糖體自噬、脂自噬、聚集體自噬和異體自噬等。自噬是真核細(xì)胞的一種自我保護(hù)機制，在自我吞噬細(xì)胞物質(zhì)的過程中，對受損的細(xì)胞器進(jìn)行再加工或清除，從而維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)，自噬失調(diào)參與多種疾病的發(fā)生[8]。

二、自噬標(biāo)志物

自噬生物標(biāo)志物在正常生理、病理過程或藥物的藥理反應(yīng)中作為自噬的指標(biāo)發(fā)揮著重要作用。在自噬的整個過程中有不同的自噬相關(guān)基因(autophagy-related gene，Atg)參與自噬發(fā)生的不同階段。

1.Atg12-Atg5復(fù)合體：在經(jīng)典的泛素理論中，泛素作為一個前體產(chǎn)生，隨后被特定的蛋白酶切割，暴露某些羧基末端甘氨酸殘基。然后泛素被泛素活化酶(ubiquitin-activating enzyme，E1)激活，并通過硫酯鍵的形成轉(zhuǎn)移到泛素結(jié)合酶(ubiquitin-conjugating enzyme，E2)。泛素連接酶(ubiquitin ligase，E3)在確定靶蛋白后，通過泛素的甘氨酸和靶蛋白的賴氨酸殘基之間的連接，將泛素分子從E2酶轉(zhuǎn)移到靶蛋白[9]。Atg12是第一個被鑒定的類泛素Atg蛋白。自噬相關(guān)蛋白Atg7是一種E1樣激活酶，Atg10是一種E2結(jié)合酶。Atg12首先被Atg7激活，轉(zhuǎn)運到Atg10后與底物蛋白Atg5的賴氨酸殘基共價連接，形成Atg12-Atg5復(fù)合物，此過程中不需要底物特異性E3連接酶。Atg12-Atg5復(fù)合體的形成不受諸如營養(yǎng)缺乏等環(huán)境壓力的影響，它的存在對自噬體的形成至關(guān)重要。

2.Atg16L1：螺旋狀蛋白Atg16L1與Atg12-Atg5復(fù)合物相互作用，通過寡聚化形成Atg12-Atg5-Atg16L1復(fù)合物[10]，在自噬前體膜的延伸中發(fā)揮作用。Atg12-Atg5-Atg16L1復(fù)合物粘附在自噬體表面，主要分布在膜的凸起部位，而在膜的凹部分布較少，即Atg12-Atg5-Atg16L1復(fù)合體主要位于自噬體膜的外側(cè)。在自噬體結(jié)構(gòu)完全閉合后，復(fù)合物從自噬體膜中釋放出來，并在細(xì)胞質(zhì)中重新分布，而分布在膜兩側(cè)的Atg8-PE留在自噬體膜上，并被運輸?shù)饺苊阁w，與溶酶體融合后降解。綜上所述，在自噬體延伸過程中，Atg16L1定位于早期自噬膜上，而不存在于自噬溶酶體膜上。因此，Atg16L1可以被用來檢測早期自噬體的形成。

3.Atg8/LC3：Atg8/LC3是目前自噬研究中應(yīng)用最廣泛的分子生物標(biāo)志物。在酵母中，Atg8與磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine，PE)結(jié)合形成Atg8-PE。在哺乳動物細(xì)胞中，Atg8的同源物包括微管相關(guān)蛋白1輕鏈3(microtubule associated protein 1 light chain 3，MAP1LC3/LC3)和γ-氨基丁酸受體相關(guān)蛋白(γ-aminobutyric acid receptor-associated protein，GABARAP)。LC3參與自噬體膜的形成，GABARAP參與自噬體膜的延伸和閉合[11]。MAP1LC3/LC3蛋白包括LC3A、LC3B、LC3B2和LC3C，其中LC3A和LC3B具有較高的同源性。LC3-Ⅱ和LC3-Ⅰ是兩種可以相互轉(zhuǎn)化的LC3[12]。細(xì)胞中新合成的LC3首先被加工成LC3-Ⅰ，以可溶性形式存在于細(xì)胞質(zhì)中。然后，泛素化的LC3-Ⅰ與存在于自噬體膜表面的PE結(jié)合，形成膜結(jié)合的LC3-Ⅱ。LC3-Ⅱ分布在自噬體膜上，是自噬過程的重要生物標(biāo)志物，LC3-Ⅱ含量或LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值與細(xì)胞自噬體數(shù)量呈正相關(guān)，可用于評估細(xì)胞自噬水平。

4.Beclin-1：哺乳動物中的Beclin-1含有450個氨基酸殘基，相對分子量為60 kD，主要位于高爾基體的反面、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體上。Beclin-1蛋白有4個重要的結(jié)構(gòu)域：Bcl-2同源結(jié)合域(BH3)、螺旋結(jié)構(gòu)域(CCD)、進(jìn)化保守結(jié)構(gòu)域(ECD)和核輸出信號結(jié)構(gòu)域[13]。Beclin-1通過其ECD結(jié)構(gòu)域與磷脂酰肌醇3激酶催化亞基3型(phosphatidylinositol 3-kinase catalytic subunit type 3，PIK3C3/Vps34)結(jié)合形成Ⅲ類磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K)復(fù)合物，而磷脂酰肌醇3-激酶調(diào)節(jié)亞基4(phosphatidylinositol 3-kinase regulatory subunit 4，PI3KR4/Vps15)可以將Vps34固定在細(xì)胞膜上。Vps34磷酸化磷脂酰肌醇，產(chǎn)生的磷脂酰肌醇3-磷酸(phosphatidylinositol 3-phosphate，PI3P)能夠結(jié)合自噬前體膜上的其他自噬相關(guān)蛋白。Beclin-1在調(diào)控自噬起始的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中發(fā)揮作用。在正常條件下，Beclin-1與Bcl-2相互作用，自噬被抑制。當(dāng)細(xì)胞處于應(yīng)激條件時，促凋亡分子BH3從Bcl-2中分離出Beclin-1[14]，然后Beclin-1與Ⅲ類磷脂酰肌醇-3激酶PIK3C3/Vps34結(jié)合激活自噬。

5.p62/SQSTM1：p62也被稱為SQSTM1(sequestosome 1)，是一個相對分子量為62 kD的自噬受體，作為底物在自噬過程中被降解[15]。p62在多種細(xì)胞和組織中表達(dá)，并作為支架蛋白參與多種信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程。免疫組化結(jié)果顯示p62的定位與LC3的定位重疊。p62可以通過其LC3-相互作用區(qū)與LC3結(jié)合，并通過泛素相關(guān)結(jié)構(gòu)域(ubiquitin-associated domain，UBA)與含有泛素的蛋白質(zhì)結(jié)合。p62及其結(jié)合的泛素化蛋白包含在自噬體中，并在自噬溶酶體中降解。當(dāng)自噬受到抑制時，自噬體積累，p62水平升高。因此，p62可以作為自噬的一個標(biāo)志物，其水平的高低反映了自噬活性程度。

三、PCOS相關(guān)內(nèi)分泌代謝中自噬的調(diào)節(jié)

1.高雄激素參與PCOS自噬調(diào)節(jié)：高雄激素血癥是女性無排卵最常見的原因之一，并增加了PCOS患者內(nèi)分泌紊亂的風(fēng)險[16]。自噬在內(nèi)分泌功能障礙和無排卵中起著重要作用。探討高雄激素血癥與自噬的關(guān)系有助于了解PCOS的發(fā)病機制。

高雄是PCOS的臨床特征之一。雄激素對自噬的調(diào)節(jié)可能在PCOS的發(fā)病機制中發(fā)揮了重要作用。研究者收集PCOS患者和非PCOS患者的顆粒細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)Beclin-1的表達(dá)水平與血清總睪酮和雄激素水平呈正相關(guān)；在非PCOS患者的顆粒細(xì)胞中添加二氫睪酮(dihydrotestosterone，DHT)，Beclin-1的表達(dá)水平和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值呈劑量依賴關(guān)系[16-17]。表明雄激素誘導(dǎo)的自噬激活可能在PCOS的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要作用。

Song等[18]在脫氫表雄酮(DHEA)誘導(dǎo)的PCOS小鼠模型中研究了mTOR復(fù)合物1(mTOR complex 1，mTORC1)在調(diào)控骨骼肌自噬中的作用，研究發(fā)現(xiàn)DHEA處理后mTORC1激活(mTORC1磷酸化)，LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的比值降低、SQSTM1的表達(dá)增強，即自噬水平降低；同時，在體外培養(yǎng)的C2C12小鼠成肌細(xì)胞中添加睪酮激活mTORC1，自噬減少、線粒體功能受損、發(fā)生胰島素抵抗；相反的，抑制mTORC1誘導(dǎo)自噬，線粒體功能得到恢復(fù)，胰島素敏感性增加。這項結(jié)果表明mTORC1-自噬通路可能通過損害線粒體功能、降低胰島素敏感性參與雄激素誘導(dǎo)的青春期前雌性小鼠骨骼肌的胰島素抵抗。

Cui等[19]在DHT誘導(dǎo)PCOS大鼠模型中揭示了雄激素通過誘導(dǎo)肝臟細(xì)胞凋亡和自噬參與非酒精性脂肪肝的分子機制，研究發(fā)現(xiàn)DHT誘導(dǎo)的PCOS大鼠肝臟中促凋亡因子Bak的mRNA水平升高，活性caspase-3與caspase-3前體的比值增加；自噬相關(guān)蛋白Atg12的表達(dá)增加，但是LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ的mRNA水平和蛋白水平均降低，且自噬底物p62的表達(dá)在兩組中也沒有顯著差異。這項研究結(jié)果表明自噬在DHT誘導(dǎo)的PCOS大鼠中沒有顯著增加，但是存在自噬失衡現(xiàn)象。

2.自噬調(diào)節(jié)PCOS胰島素抵抗：PCOS不僅是一種內(nèi)分泌紊亂，也是一種代謝紊亂，各種代謝異常在PCOS的進(jìn)展中起著至關(guān)重要的作用[20]。大約50%～75%的PCOS患者存在不同程度的胰島素抵抗[21]。因此，了解PCOS胰島素抵抗的分子機制很有必要。

有研究采用來曲唑誘導(dǎo)PCOS大鼠模型，在口服來曲唑15 d后開始同時口服納米姜黃素(一種新型的姜黃素納米脂質(zhì)體制劑)，研究納米姜黃素調(diào)節(jié)PCOS模型鼠胰腺自噬的分子機制[22]。研究發(fā)現(xiàn)PCOS組性激素水平紊亂，血糖、胰島素水平顯著升高，表現(xiàn)出胰島素抵抗，同時發(fā)現(xiàn)PCOS組miR-223-3p的表達(dá)水平下降、自噬標(biāo)記物p62和LC3-Ⅱ的蛋白水平升高；加入納米姜黃素后miR-223-3p的表達(dá)水平上調(diào)，異常升高的自噬得到恢復(fù)，血糖含量和血清胰島素水平降低，胰島素抵抗減弱。結(jié)果表明，納米姜黃素可通過上調(diào)miR-223-3p，抑制自噬，減輕胰島素抵抗。

已有研究證明柚皮素和桑色素對自噬具有協(xié)同調(diào)控作用[23-24]。mTOR信號通路在自噬過程中發(fā)揮極為重要的作用。mTOR包含兩種復(fù)合體，分別為mTORC1和mTORC2。研究者設(shè)計了對照組、PCOS組、PCOS+柚皮素組、PCOS+桑色素組、PCOS+柚皮素+桑色素組5組實驗，其中PCOS組大鼠連續(xù)注射胰島素，誘導(dǎo)高胰島素血癥和胰島素抵抗[25]。結(jié)果發(fā)現(xiàn)添加柚皮素和桑色素后，與PCOS組相比血清胰島素水平降低，mTORC1、mTORC2和p62的蛋白水平降低，LC3-Ⅱ、Caspase-3的蛋白水平升高。該研究結(jié)果表明柚皮素和桑色素可能通過mTOR信號通路增強自噬降低PCOS大鼠胰島素抵抗。

還有研究采用來曲唑聯(lián)合高脂乳劑構(gòu)建PCOS胰島素抵抗大鼠模型，之后添加不同劑量的桂枝茯苓丸，探討桂枝茯苓丸致PCOS-IR大鼠排卵障礙的分子機制[26]。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，模型組卵巢組織中PI3K、p-Akt和p-MTOR蛋白的磷酸化水平均降低，自噬相關(guān)蛋白LC3-Ⅱ和Beclin-1的相對表達(dá)量顯著升高；添加桂枝茯苓丸后，p-PI3K、p-Akt和p-mTOR蛋白水平均升高，在中、高劑量組中自噬相關(guān)蛋白LC3-Ⅱ、Atg5和Beclin-1的相對表達(dá)量顯著降低。該研究結(jié)果表明桂枝茯苓丸可通過激活PI3K/Akt/mTOR信號通路，抑制卵巢組織過度自噬，改善卵巢功能和胰島素抵抗，且高劑量效果更佳。

3.炎癥誘導(dǎo)PCOS自噬增強：研究表明，炎癥因子在PCOS患者中高表達(dá)，如白介素18(interleukin 18，IL-18)、腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)、白介素6(interleukin 6，IL-6)、C反應(yīng)蛋白(C-reactive protein，CRP)、單核細(xì)胞趨化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1，MCP-1)和巨噬細(xì)胞炎性蛋白-1α(macrophage inflammatory protein-1α，MIP-1α)[27]。PCOS患者存在持續(xù)的低度慢性炎癥，與高雄激素血癥、高胰島素血癥和肥胖等相關(guān)，加重了PCOS患者的病理變化。

TNF-α在肥胖型PCOS患者和非肥胖型PCOS患者的血清中表達(dá)量均升高；在PCOS患者中，TNF-α的升高引起胰島素敏感組織中胰島素受體底物-1(insulin receptor substrate-1，IRS-1)絲氨酸磷酸化增加，使胰島素敏感性葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白(glucose transporter type 4，GLUT4)的表達(dá)下降，最終發(fā)生胰島素抵抗[28]。CRP是肝臟受IL-6刺激后產(chǎn)生的急性期反應(yīng)物，IL-6是一種來自脂肪組織的內(nèi)分泌細(xì)胞因子。有研究表明，CRP是PCOS中最可靠的慢性低級別炎癥標(biāo)記物，在PCOS患者中的表達(dá)量升高，且非肥胖PCOS患者中CRP的表達(dá)量低于肥胖PCOS患者[29]。IL-6在卵巢發(fā)育和胚胎著床過程中發(fā)揮重要作用，影響排卵和妊娠結(jié)局[30]。

作為一種細(xì)胞內(nèi)降解途徑，自噬保護(hù)細(xì)胞免受包括感染在內(nèi)的外源性危害，以及包括分子聚集和受損細(xì)胞器在內(nèi)的內(nèi)源性炎癥。PCOS患者體內(nèi)炎癥因子增加，表明自噬可能通過調(diào)節(jié)炎癥參與調(diào)控PCOS患者胰島素抵抗或者排卵障礙過程。

高遷移率族蛋白1(high mobility group box 1，HMGB1)是一種炎癥介質(zhì)，在2型糖尿病患者中通過糖基化終末產(chǎn)物受體(receptor for advanced glycation endproducts，RAGE)和toll樣受體(toll-like receptors，TLRs)激活核轉(zhuǎn)錄因子kappa B(NF-κB)信號通路參與炎癥反應(yīng)[31]。NF-κB是細(xì)胞中重要的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，參與炎癥反應(yīng)，在PCOS患者中異常高表達(dá)[32]。近年來，HMGB1在調(diào)節(jié)卵巢內(nèi)自噬中的作用受到關(guān)注，它能夠誘導(dǎo)顆粒細(xì)胞的自噬反應(yīng)，導(dǎo)致顆粒細(xì)胞數(shù)量下降。HMGB1通過作用于自噬蛋白增強自噬，包括增加LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值和ATG7水平以及降低SQSTM1水平[33]。

四、PCOS患者卵巢顆粒細(xì)胞的自噬

顆粒細(xì)胞作為卵巢組織的重要組成部分，在卵泡的生長發(fā)育過程中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用。隨著卵泡發(fā)育至竇卵泡期，顆粒細(xì)胞分化為在空間和功能上不同的2個種群，即圍繞在卵母細(xì)胞周圍的卵丘細(xì)胞和排列在卵泡壁上的壁層顆粒細(xì)胞。卵丘細(xì)胞主要為卵母細(xì)胞的生長發(fā)育提供營養(yǎng)和能量，而壁層顆粒細(xì)胞主要承擔(dān)內(nèi)分泌功能。這些細(xì)胞通過分泌營養(yǎng)物質(zhì)和激素來促進(jìn)初級和次級卵泡的生長和發(fā)育，從而為卵母細(xì)胞在卵泡中進(jìn)行減數(shù)分裂和成熟提供適宜的微環(huán)境。顆粒細(xì)胞凋亡導(dǎo)致卵巢激素合成減少，從而降低卵泡卵母細(xì)胞的生長發(fā)育，誘導(dǎo)卵母細(xì)胞凋亡[34]。顆粒細(xì)胞的自噬與凋亡密切相關(guān)，影響PCOS患者的胚胎質(zhì)量和妊娠結(jié)局。

Qin等[35]用DHT構(gòu)建小鼠PCOS模型，自然交配后收集后代小鼠的卵巢組織，免疫組化染色結(jié)果發(fā)現(xiàn)LC3-Ⅱ在PCOS后代小鼠卵巢中的表達(dá)高于對照組，透射電鏡結(jié)果顯示PCOS后代小鼠顆粒細(xì)胞中自噬體的數(shù)量增加。這些結(jié)果表明PCOS后代小鼠卵巢中的自噬水平顯著增加。研究者進(jìn)一步將模型小鼠的卵巢組織進(jìn)行了甲基化測序分析，發(fā)現(xiàn)MAPK通路上的Map3k1(編碼MEKK1)和自噬通路上的Map1lc3a(編碼LC3-Ⅱ)啟動子區(qū)甲基化水平降低，并伴隨著Map3k1和Map1lc3a的表達(dá)水平上調(diào)，且MAPK通路上的自噬相關(guān)基因Beclin-1的表達(dá)量也上調(diào)；另外，將小鼠顆粒細(xì)胞用DHT處理后，發(fā)現(xiàn)Map3k1、Map1lc3a和LC3-Ⅱ的表達(dá)水平顯著上調(diào)，并伴有Map3k1的甲基化水平下調(diào)[35]。該研究結(jié)果表明DHT可能通過調(diào)節(jié)Map3k1的甲基化和表達(dá)水平，導(dǎo)致MAPK信號通路的激活，進(jìn)而影響顆粒細(xì)胞自噬水平。

二甲雙胍是PCOS治療中應(yīng)用最廣泛的藥物之一，可以改善胰島素敏感性，恢復(fù)PCOS患者的排卵功能，促進(jìn)胚胎著床，提高妊娠率。二甲雙胍可通過PI3K/AKT/mTOR通路抑制氧化應(yīng)激誘導(dǎo)的自噬[36]，但二甲雙胍對PCOS患者卵巢顆粒細(xì)胞的作用機制尚不清楚。研究者用二甲雙胍治療來曲唑構(gòu)建的PCOS模型大鼠，發(fā)現(xiàn)PCOS組卵巢組織中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和Beclin-1的表達(dá)以及氧化應(yīng)激水平高于對照組和PCOS+二甲雙胍組；然后，收集大鼠的顆粒細(xì)胞，用H2O2處理后建立氧化應(yīng)激細(xì)胞模型，并用二甲雙胍處理模型細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)H2O2+二甲雙胍組中LC3-Ⅱ、Beclin-1、p-PI3K的表達(dá)低于H2O2組，且PI3K/AKT/mTOR通路干擾組(H2O2+3-MA、H2O2+LY294002和H2O2+Rapa)中AKT磷酸化(p-AKT)和mTOR磷酸化(p-mTOR)水平低于H2O2+二甲雙胍組；此外，加入PI3K和mTOR抑制劑后，Beclin-1和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ升高[37]。該研究結(jié)果表明，二甲雙胍能夠通過PI3K/AKT/mTOR通路降低氧化應(yīng)激改善PCOS顆粒細(xì)胞自噬。

已有大量研究表明異常表達(dá)的miRNA在PCOS發(fā)病機制中起重要作用，對PCOS有潛在的診斷價值[38]。在卵丘卵母細(xì)胞復(fù)合物(cumulus oocyte complex，COCs)和KGN細(xì)胞(人卵巢顆粒細(xì)胞)中l(wèi)et-7家族是表達(dá)最豐富的miRNAS，并參與調(diào)節(jié)妊娠、卵泡發(fā)育、卵母細(xì)胞成熟和激素反應(yīng)[39-40]。研究者發(fā)現(xiàn)let-7e在PCOS患者顆粒細(xì)胞中異常高表達(dá)，并利用KGN細(xì)胞系探究了let-7e影響顆粒細(xì)胞功能的分子機制[41]：抑制let-7e后發(fā)現(xiàn)LC3-Ⅱ水平升高，p62水平降低，p21的表達(dá)被激活；相反，過表達(dá)let-7e后LC3-Ⅱ水平降低，p62水平增加，p21的表達(dá)被抑制；同時也發(fā)現(xiàn)在PCOS患者顆粒細(xì)胞中LC3-Ⅱ和p21蛋白水平下降。因此，該研究結(jié)果表明let-7e可能通過抑制p21信號通路調(diào)節(jié)PCOS顆粒細(xì)胞的自噬。

五、小結(jié)與展望

正常情況下，自噬是維持卵母細(xì)胞發(fā)育、卵泡生長分化、卵泡閉鎖和生殖周期所必需的。相關(guān)研究表明由于受影響的細(xì)胞類型不同，自噬可能會以激活或抑制的狀態(tài)參與PCOS的發(fā)展。例如，在人、大鼠或小鼠的卵巢組織、胰腺組織和顆粒細(xì)胞中，自噬是顯著激活的；而在PCOS小鼠的骨骼肌中，自噬是被抑制的；另外，在PCOS大鼠的肝臟組織中自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)變化不一致，結(jié)果導(dǎo)致整體自噬沒有顯著增加。自噬參與PCOS患者的高雄激素血癥、胰島素抵抗、慢性炎癥等內(nèi)分泌代謝調(diào)節(jié)過程，并通過調(diào)節(jié)卵巢顆粒細(xì)胞的增殖和凋亡降低卵母細(xì)胞質(zhì)量，導(dǎo)致排卵障礙和不孕不育；同時，PCOS動物模型或患者使用的調(diào)節(jié)藥物也可以通過自噬發(fā)揮作用。因此，完善PCOS的自噬模型，探究自噬在PCOS中的作用機制，可為進(jìn)一步了解PCOS的發(fā)病機制以及藥物治療提供新的思路和方法。