王薇,曹雯
(哈爾濱商業(yè)大學(xué),黑龍江 哈爾濱 150028)
我國(guó)沙棘資源豐富,種植面積占全世界沙棘種植總面積的99%以上[1-2]。目前沙棘果主要應(yīng)用于果汁的生產(chǎn),榨汁后會(huì)產(chǎn)生20%的沙棘果殘?jiān)?。?jù)報(bào)道,我國(guó)沙棘產(chǎn)業(yè)每年可產(chǎn)生近百萬(wàn)噸的沙棘果渣[3-4]。這些果渣包括果皮、種子、殘余果肉等,在這些果渣中仍然含有很多的有效物質(zhì),如黃酮、維生素B1、維生素B2、維生素C、維生素E、氨基酸、粗蛋白、粗脂肪、粗纖維、鞣質(zhì)、糖、三萜及甾體類(lèi)等[5]。這些被廢棄的果渣不僅會(huì)造成資源的浪費(fèi),而且還會(huì)造成環(huán)境的污染。研究表明,沙棘果渣中的主要成分為天然多糖,且植物多糖是一種具有良好生物活性的天然抗菌劑和天然生物防腐劑。目前在工業(yè)生產(chǎn)中,已經(jīng)有很成熟技術(shù)可以提取出副產(chǎn)物中的多糖[6]。
納米銀作為一種新型抗菌活性材料,以其自身抗菌功能特性較好、抗菌譜較廣泛,且抗菌不容易引起宿主細(xì)胞感染產(chǎn)生抗耐藥性反應(yīng)等優(yōu)點(diǎn)受到廣泛關(guān)注[7-10]。由于天然多糖的生物相容性極佳,當(dāng)其與納米銀協(xié)同使用時(shí)能夠減少納米銀的用量,從而使納米銀的生物毒性降低[11-15]。因此,本試驗(yàn)以富含多糖的沙棘果渣為原料,選擇大腸桿菌和白色葡萄球菌為食源性致病菌的代表,用單因素試驗(yàn)優(yōu)化合成沙棘果渣多糖-納米銀工藝流程,并研究沙棘果渣多糖-納米銀對(duì)兩種致病菌的抑制效果,為沙棘果渣的開(kāi)發(fā)利用提供參考,同時(shí)可以為尋找新的可替代傳統(tǒng)化學(xué)抑菌劑的植物源抑菌劑提供新的途徑。
沙棘果渣多糖:哈爾濱商業(yè)大學(xué)生物催化與發(fā)酵實(shí)驗(yàn)室自制;牛肉膏:北京奧博星生物技術(shù)有限責(zé)任公司;蛋白胨:北京索萊寶科技有限公司;瓊脂:北京蘭杰柯科技有限公司;大腸桿菌、白色葡萄球菌:哈爾濱商業(yè)大學(xué)生物催化與發(fā)酵實(shí)驗(yàn)室;NaCl:天津市鼎盛鑫化工有限公司;氫氧化鈉:天津市大陸化學(xué)試劑廠(chǎng);硝酸銀:天津市科密歐化學(xué)試劑開(kāi)發(fā)中心;鹽酸:廣東省精細(xì)化學(xué)品工程技術(shù)研究開(kāi)放中心。以上試劑均為分析純。
H2050R高速冷凍離心機(jī):湖南湘儀離心機(jī)儀器有限公司;PHS-3C型pH計(jì):上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司;W201B恒溫水浴鍋:上海申勝生物技術(shù)有限公司;UV5100B型紫外/可見(jiàn)分光光度計(jì):上海元析儀器制造有限公司;PerkinElmer100傅立葉紅外光譜:美國(guó)PerkinElmer公司;Nano-ZS90馬爾文激光粒度儀:英國(guó)馬爾文儀器有限公司;JJ200精密電子天平:美國(guó)雙杰兄弟有限公司;FDU-1200真空冷凍干燥機(jī):東京理化器械株式會(huì)社;LDZX-50KB高壓蒸汽滅菌鍋:上海申安醫(yī)療器械廠(chǎng);LRH-70F恒溫培養(yǎng)箱:上海一恒科學(xué)儀器有限公司;SMP6酶標(biāo)儀:美谷分子儀器(上海)有限公司;MIRA4掃描電鏡:泰思肯有限公司。
1.3.1 單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)
將濃度為50 mmol/L的硝酸銀溶液和1 mg/mL沙棘果渣多糖溶液按0.5∶1的體積比混合,并在pH7和25℃條件下反應(yīng)4 h,然后用波長(zhǎng)365 nm的紫外光照射10 min輔助生成納米銀。在上述工藝條件基礎(chǔ)上,以對(duì)沙棘果渣多糖-納米銀的紫外可見(jiàn)光譜和粒徑影響為指標(biāo),進(jìn)行單因素試驗(yàn)。分別考察反應(yīng)時(shí)間(4、8、12、16、20、24 h)、反應(yīng)溫度(25、30、35、40、45 ℃)、硝酸銀和沙棘果渣多糖的體積比(0.5∶1、1.0∶1、1.5∶1、2.0 ∶1、2.5∶1)、pH 值(7、8、9、10、11)、紫外照射時(shí)間(10、20、30、40、50、60 min)對(duì)沙棘果渣多糖-納米銀的紫外可見(jiàn)光譜和粒徑影響。反應(yīng)完成后10 000 r/min離心30 min,反復(fù)離心2次,去除上清液,收集沉淀,得到棕褐色沉淀即沙棘果渣多糖-納米銀復(fù)合粒子,凍干后置于-4℃冰箱備用。
1.3.2 表征分析
1.3.2.1 紫外可見(jiàn)光譜分析
將1.3.1制得的沙棘果渣多糖-納米銀溶液使用UV5100B型紫外/可見(jiàn)分光光度計(jì)進(jìn)行分析,檢測(cè)波長(zhǎng)范圍為300 nm~800 nm。
1.3.2.2 傅里葉紅外光譜分析
分別將沙棘果渣多糖和沙棘果渣多糖-納米銀樣品冷凍干燥后得到的固體粉末用傅立葉紅外光譜儀測(cè)定。波長(zhǎng)掃描范圍為4 000 cm-1~500 cm-1。
1.3.2.3 粒徑分析
用馬爾文激光粒度儀進(jìn)行粒徑的檢測(cè)。
1.3.2.4 掃描電鏡分析
將少量沙棘果渣多糖-納米銀溶液滴于硅片表面,待樣品干燥后,使用MIRA4掃描電鏡觀(guān)察顆粒形態(tài)。
1.3.3 抑菌試驗(yàn)
1.3.3.1 制備方法
參考李琴琴[16]的方法制備納米銀,將0.02 mol/L硝酸銀溶液和3%聚乙烯吡咯烷酮溶液1∶1(體積比)混合,然后室溫24℃攪拌2 h,最后在攪拌的同時(shí),逐滴滴加10 mL的0.01%硼氫化鈉溶液,即得到納米銀溶液。
用無(wú)菌水將沙棘果渣多糖、化學(xué)法制得的納米銀和單因素試驗(yàn)制得粒徑最小的沙棘果渣多糖-納米銀這3種樣品稀釋成不同濃度。
1.3.3.2 抑菌試驗(yàn)方法
抑菌試驗(yàn)采用牛津杯瓊脂板擴(kuò)散法[17]。本試驗(yàn)以白色葡萄球菌和大腸桿菌為試驗(yàn)菌株。取適量菌液在固體培養(yǎng)基表面涂勻,將牛津杯(內(nèi)徑7.8mm)放置在平板上,然后添加 100 μL 不同濃度(5、10、15、20 μg/mL)的沙棘果渣多糖溶液、納米銀溶液和沙棘果渣多糖-納米銀溶液,置于37℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),24 h后觀(guān)察測(cè)量抑菌圈直徑并記錄結(jié)果。
1.3.4 最低抑菌濃度(minimum inhibitory concentration,MIC)的確定
在96孔板中分別添加100 μL的大腸桿菌和白色葡萄球菌菌懸液,再分別添加100 μL不同濃度(1、2、3、4、5、6 μg/mL)的沙棘果渣多糖-納米銀溶液。將 96孔板置于37℃下培養(yǎng)24 h,每間隔1 h通過(guò)酶標(biāo)儀測(cè)每孔在600 nm處的吸光值。每孔的最大吸光值和最小吸光值之差(陽(yáng)性對(duì)照組的吸光值差值是最大的)可直接反映出細(xì)菌生長(zhǎng)的情況,吸光值差值在負(fù)值區(qū)域表明其對(duì)應(yīng)的處理能完全抑制供試菌的生長(zhǎng),吸光值差值為0時(shí)對(duì)應(yīng)的抑菌劑濃度為最低抑菌濃度。根據(jù)公式(1)計(jì)算吸光值差值(ΔOD)。
式中:ODmax為最大吸光值;ODmin為最小吸光值。
采用SPSS 2019對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,Origin 2019進(jìn)行繪圖,以上所有試驗(yàn)均重復(fù)3次,結(jié)果取平均值,并以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。
2.1.1 不同反應(yīng)時(shí)間對(duì)沙棘果渣多糖-納米銀形成的影響
當(dāng)反應(yīng)時(shí)間分別為 4、8、12、16、20、24 h 時(shí),對(duì)沙棘果渣多糖-納米銀的紫外可見(jiàn)光譜和粒徑影響見(jiàn)圖1。
圖1 不同反應(yīng)時(shí)間對(duì)復(fù)合顆粒紫外可見(jiàn)光譜和粒徑的影響Fig.1 Effects of different reaction times on UV and particle size of composite particle
如圖1A所示,在波長(zhǎng)為420 nm處出現(xiàn)一個(gè)較強(qiáng)的吸收峰,為納米銀的特征吸收峰,表明在沙棘果渣多糖的還原作用下,硝酸銀被還原成單質(zhì)狀態(tài)的納米銀。隨著反應(yīng)時(shí)間的延長(zhǎng),紫外吸收峰逐漸升高,反應(yīng)16 h后,增加幅度基本不變。這可能是由于反應(yīng)時(shí)間越長(zhǎng),沙棘果渣多糖對(duì)硝酸銀還原反應(yīng)越充分,而當(dāng)反應(yīng)時(shí)間達(dá)到16 h后,還原反應(yīng)基本完成,所以16 h后,峰值的增加幅度基本不變。如圖1B所示,生成的沙棘果渣多糖-納米銀復(fù)合粒子的粒徑隨著反應(yīng)時(shí)間的延長(zhǎng)而減小。這是由于反應(yīng)時(shí)間過(guò)短,反應(yīng)不充分,影響了納米銀復(fù)合粒子成核,造成粒子的粒徑過(guò)大。反應(yīng)時(shí)間越長(zhǎng),反應(yīng)越充分,所以粒子粒徑越來(lái)越小。在反應(yīng)時(shí)間為24 h時(shí)生成的沙棘果渣多糖-納米銀粒徑最小,最小粒徑為32.17 nm。所以選擇反應(yīng)24 h為最佳反應(yīng)時(shí)間。
2.1.2 不同反應(yīng)溫度對(duì)沙棘果渣多糖-納米銀形成的影響
當(dāng)反應(yīng)溫度分別為 25、30、35、40、45 ℃時(shí),對(duì)沙棘果渣多糖-納米銀的紫外可見(jiàn)光譜和粒徑影響見(jiàn)圖2。
圖2 不同反應(yīng)溫度對(duì)復(fù)合顆粒紫外可見(jiàn)光譜和粒徑的影響Fig.2 Effects of different reaction temperatures on UV and particle size of composite particle
如圖2A所示,當(dāng)反應(yīng)溫度為25℃~35℃時(shí),隨著反應(yīng)溫度的增加,紫外吸收峰也在增加,并在35℃時(shí)達(dá)到一個(gè)最大值。當(dāng)反應(yīng)溫度為35℃~45℃時(shí),隨著反應(yīng)溫度的增加峰值逐漸降低。因?yàn)闇囟葧?huì)改變反應(yīng)速度,溫度越高反應(yīng)速度越快,生成的沙棘果渣多糖-納米銀復(fù)合粒子也增加,但溫度過(guò)高可能使硝酸銀轉(zhuǎn)化為氧化銀,所以溫度過(guò)高峰值越低[18-19]。因此,35℃為最佳反應(yīng)溫度。如圖2B所示,沙棘果渣多糖-納米銀的粒徑先減小后增大,但不同反應(yīng)溫度對(duì)粒徑的整體影響不大,在35℃時(shí)生成的沙棘果渣多糖-納米銀的粒徑最小,最小粒徑為76.9 nm。這是由于溫度會(huì)影響粒子布朗運(yùn)動(dòng),溫度過(guò)高布朗運(yùn)動(dòng)加快,會(huì)加速納米銀粒子的團(tuán)聚[20]。結(jié)合紫外-可見(jiàn)吸收光譜以及實(shí)際成本及設(shè)備維修率等問(wèn)題,選擇最佳反應(yīng)時(shí)間為35℃。
2.1.3 不同硝酸銀和沙棘果渣多糖的體積比對(duì)沙棘果渣多糖-納米銀形成的影響
當(dāng)硝酸銀和沙棘果渣多糖的體積比分別為0.5∶1、1.0 ∶1、1.5 ∶1、2.0∶1、2.5 ∶1時(shí),對(duì)沙棘果渣多糖-納米銀的紫外可見(jiàn)光譜和粒徑影響見(jiàn)圖3。
圖3 不同體積比對(duì)復(fù)合顆粒紫外可見(jiàn)光譜和粒徑的影響Fig.3 Effects of different volume ratios on UV and particle size of composite particle
如圖3A所示,隨著硝酸銀溶液體積的增加,紫外吸收峰也在增大,在硝酸銀溶液與沙棘果渣多糖溶液體積比為1.0∶1時(shí)峰值達(dá)到最大值,之后隨著硝酸銀溶液體積的增加,峰值逐漸減小。所以硝酸銀溶液與沙棘果渣多糖溶液體積比為1.0∶1為最佳反應(yīng)條件。如圖3B所示,以0.5∶1的體積比制備的沙棘渣多糖-納米銀顆粒尺寸最小,其最小顆粒直徑為55.3 nm。當(dāng)硝酸銀溶液與沙棘果渣多糖溶液的體積比為1.0∶1時(shí)的粒徑與體積比為0.5∶1時(shí)的粒徑大小相差甚微。研究表明,硝酸銀的含量會(huì)影響粒徑的大小,硝酸銀含量過(guò)多,生成的粒子容易聚集,造成粒子粒徑過(guò)大;而硝酸銀含量低,生成的粒子逐漸變成球形,且粒徑逐漸變小[21]。所以硝酸銀含量越低,所生成沙棘果渣多糖-納米銀的粒徑越小。結(jié)合圖3A結(jié)果,選擇體積比1.0∶1為最佳反應(yīng)條件。
2.1.4 不同pH值對(duì)沙棘果渣多糖-納米銀形成的影響
當(dāng) pH 值分別為 7、8、9、10、11 時(shí),對(duì)沙棘果渣多糖-納米銀的紫外可見(jiàn)光譜和粒徑影響見(jiàn)圖4。
圖4 不同pH值對(duì)復(fù)合顆粒紫外可見(jiàn)光譜和粒徑的影響Fig.4 Effect of different pH values on UV and particle size of composite particle
如圖4A所示,隨著pH值的增加,紫外吸收峰也在增大,在pH9時(shí)峰值達(dá)到最大值,隨后隨著pH值的增加峰值減小??赡苁且?yàn)殡S著pH值的升高,沙棘果渣多糖的還原性增強(qiáng),促使Ag+還原成單質(zhì)銀。但pH值過(guò)高導(dǎo)致單質(zhì)銀過(guò)多,造成納米銀含量低,進(jìn)而峰值下降。同時(shí)可看出,強(qiáng)堿性條件下峰值更高,弱堿性條件下峰值較低。如圖4B所示,在反應(yīng)溶液pH9時(shí)生成的沙棘果渣多糖-納米銀的粒徑最小,最小粒徑為96.78nm。不同pH值反應(yīng)溶液所制得的沙棘果渣多糖-納米銀的粒徑相比于其他單因素條件下所制得的沙棘果渣多糖-納米銀的粒徑較大,原因可能是在調(diào)節(jié)pH值時(shí),由于硝酸銀在堿性條件下容易生成氧化銀,導(dǎo)致反應(yīng)液不穩(wěn)定。綜上所述,pH9為最佳反應(yīng)條件。
2.1.5 不同紫外照射時(shí)間對(duì)沙棘果渣多糖-納米銀形成的影響
當(dāng)紫外照射時(shí)間分別為 10、20、30、40、50、60 min時(shí),對(duì)沙棘果渣多糖-納米銀的紫外可見(jiàn)光譜和粒徑影響見(jiàn)圖5。
圖5 不同紫外照射時(shí)間對(duì)復(fù)合顆粒紫外可見(jiàn)光譜和粒徑的影響Fig.5 Effect of different UV irradiation times on UV and particle size of composite particle
如圖5A所示,隨著紫外照射時(shí)間的延長(zhǎng),紫外吸收峰也隨之增加。如圖5B所示,紫外照射時(shí)間越長(zhǎng),所制得的沙棘果渣多糖-納米銀的粒徑越小,當(dāng)紫外照射時(shí)間達(dá)到40 min后,納米銀粒徑幾乎不變。當(dāng)紫外照射60 min時(shí),其粒徑最小,為44.54 nm。結(jié)合紫外可見(jiàn)吸收光譜,在紫外照射時(shí)間為60 min時(shí),峰值最高。因此,選擇紫外照射60 min為最佳反應(yīng)條件。
2.2.1 粒徑和掃描電鏡分析
通過(guò)單因素試驗(yàn)結(jié)果,確定反應(yīng)溫度35℃、pH9、硝酸銀溶液與多糖溶液的體積比1.0∶1、反應(yīng)時(shí)間24h、紫外照射60 min條件下反應(yīng)制得的納米銀粒徑最小,將該條件下制得的沙棘果渣多糖-納米銀用于掃描電鏡和粒徑表征,結(jié)果如圖6所示。
圖6 沙棘果渣多糖-納米銀的掃描電鏡和粒徑分析圖Fig.6 SEM image and particle size image of seabuckthorn pomace polysaccharide-silver nanoparticle
由圖6可知,沙棘果渣多糖-納米銀粒子的粒徑平均粒徑為31.77 nm,其形狀多呈類(lèi)球狀。圖6B中峰(1)的平均粒徑在69.14 nm,相對(duì)強(qiáng)度為80.3%,表明在沙棘果渣多糖-納米銀溶液中,更多顆粒呈單分散分布。然而,峰(2)的相對(duì)強(qiáng)度為19.7%,表明很少有顆粒是多分散的,并且在某些地方出現(xiàn)團(tuán)聚。
2.2.2 紅外光譜分析
將沙棘果渣多糖和沙棘果渣多糖-納米銀進(jìn)行紅外表征,旨在找出沙棘果渣多糖中參與還原納米銀的相關(guān)有機(jī)基團(tuán)。沙棘果渣多糖和沙棘果渣多糖-納米銀的紅外光譜見(jiàn)圖7。
圖7 沙棘果渣多糖和沙棘果渣多糖-納米銀的紅外光譜Fig.7 Infrared spectrogram of seabuckthorn pomace polysaccharides and seabuckthorn pomace polysaccharide-silver nanoparticle
如圖7所示,在3 312 cm-1附近的特征寬吸收帶為沙棘果渣多糖中羥基的拉伸振動(dòng),在形成沙棘果渣多糖-納米銀后特征峰紅移至3 296 cm-1處,并且特征峰面積有所降低,這可能由納米銀和沙棘果渣多糖結(jié)構(gòu)中羥基之間的相互作用引起的[22]。在沙棘果渣多糖的紅外光譜中,在2 918 cm-1處對(duì)應(yīng)于C-H的對(duì)稱(chēng)和非對(duì)稱(chēng)伸縮振動(dòng),該峰在沙棘果渣多糖-納米銀的紅外光譜中明顯減弱,且1 543 cm-1處出現(xiàn)一個(gè)代表C=C伸縮振動(dòng)的新峰,說(shuō)明納米銀的生成過(guò)程與沙棘果渣多糖中亞甲基有關(guān)[14]。在1 632 cm-1處可能是酰胺的羰基拉伸模式。在1 308 cm-1和1 297 cm-1處的尖峰是由于沙棘果渣多糖和沙棘果渣多糖-納米銀中羧基功能的對(duì)稱(chēng)拉伸所致。1 014 cm-1和1 002 cm-1處的峰值歸因于醇和醚鍵的C-O-C拉伸[23-24]。
不同濃度的沙棘果渣多糖、納米銀和沙棘果渣多糖-納米銀對(duì)大腸桿菌和白色葡萄球菌進(jìn)行牛津杯抑菌試驗(yàn),結(jié)果如圖8所示。
圖8 沙棘果渣多糖、納米銀和沙棘果渣多糖-納米銀對(duì)大腸桿菌和白色葡萄球菌的抑菌圈直徑Fig.8 Inhibition zone diameter of seabuckthorn pomace polysaccharides,nano silver,and seabuckthorn pomace polysaccharide-silver nanoparticle against Escherichia coli and Staphylococcus albus
由圖 8 可知,當(dāng)濃度在 5 μg/mL~20 μg/mL 時(shí),化學(xué)法制成的納米銀和沙棘果渣多糖-納米銀對(duì)大腸桿菌有很好的抑制作用,且沙棘果渣多糖-納米銀的抑制效果最好。兩種納米銀抑菌作用都隨著濃度的增加而增強(qiáng),且整體對(duì)大腸桿菌的抑制作用強(qiáng)于白色葡萄球菌。Kvítek等[25]研究表明納米銀具有很強(qiáng)的抑菌活性,特別是對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌,這可能是由于細(xì)菌細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)和化學(xué)組成的不同。但在此濃度下,沙棘果渣多糖對(duì)兩種供試菌均沒(méi)有呈現(xiàn)抑制區(qū)域。
通過(guò)文獻(xiàn)[26]可知,尺寸更小、表面積更大的納米銀顆粒具有更高的殺菌性能,因其可以增大細(xì)菌細(xì)胞膜的通透性從而導(dǎo)致細(xì)胞死亡。所以本試驗(yàn)測(cè)定31.77 nm粒徑的沙棘果渣多糖-納米銀對(duì)兩種供試菌的MIC值,結(jié)果見(jiàn)圖9。
圖9 沙棘果渣多糖-納米銀對(duì)兩種供試菌的MICFig.9 MICs of seabuckthorn pomace polysaccharide-silver nanoparticle against the two strains
由圖9可知,沙棘果渣多糖-納米銀能明顯抑制影響大腸桿菌和白色葡萄球菌的生長(zhǎng),且抑菌性隨著復(fù)合納米顆粒的濃度升高而增強(qiáng),ΔOD值在負(fù)值區(qū)域表明能完全抑制供試菌的生長(zhǎng)。在相同濃度下,沙棘果渣多糖-納米銀對(duì)大腸桿菌的抑制作用比對(duì)白色葡萄球菌的抑制作用強(qiáng)。大腸桿菌的最小抑制濃度為4 μg/mL,白色葡萄球菌的最小抑制濃度為6 μg/mL。
本文采用沙棘果渣多糖還原硝酸銀中的銀單質(zhì),以制備沙棘果渣多糖-納米銀,并通過(guò)單因素試驗(yàn)得出,1 mg/mL沙棘果渣多糖溶液和50 mmol/L硝酸銀溶液,在硝酸銀和沙棘果渣多糖體積比1.0∶1、反應(yīng)溫度35℃、pH9時(shí)反應(yīng)24 h后,在365 nm紫外燈下照射60 min條件下,生成的沙棘果渣多糖-納米銀含量最高,粒徑最小。經(jīng)粒度儀和SEM分析可知沙棘果渣多糖-納米銀多為球形,最小平均粒徑為31.77 nm。對(duì)比分析沙棘果渣多糖、化學(xué)法制備的納米銀和沙棘果渣多糖-納米銀三者對(duì)大腸桿菌和白色葡萄球菌的抑菌效果,結(jié)果表明在較低濃度下,沙棘果渣多糖-納米銀的抑菌效果優(yōu)于化學(xué)法制的納米銀,而沙棘果渣多糖對(duì)白色葡萄球菌沒(méi)有明顯抑制作用。兩種納米銀對(duì)大腸桿菌的抑菌圈直徑均大于白色葡萄球菌的抑菌圈直徑,這說(shuō)明大腸桿菌比白色葡萄球菌對(duì)兩種納米銀更敏感。沙棘果渣多糖-納米銀的最低抑菌濃度測(cè)定試驗(yàn)得出對(duì)大腸桿菌的MIC為4 μg/mL,對(duì)白色葡萄球菌的MIC為6 μg/mL。因此該法成功制備的沙棘果渣多糖-納米銀具有良好的抑菌性能,可以為新型抑菌劑在食品行業(yè)中的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用提供參考。