中草藥制劑對草魚機體免疫力的影響

郭婷萍 趙常山 張志軍

摘要：該試驗研究不同劑量的復(fù)方中草藥制劑對草魚（Ctenopharyngodon idella）機體非特異免疫的影響。研究選擇體重約5g的健康草魚320尾，隨機分成4組，每組80尾。各組草魚依次飼喂在基礎(chǔ)餌料添加0%、0.1%、0.2%、0.4%的復(fù)方中草藥制劑的試驗餌料。試驗周期為8周，馴養(yǎng)1周。試驗結(jié)束，采集各組草魚血液，檢測血清非特異性免疫指標。結(jié)果表明，與對照組比較，草魚餌料中添加0.2%和0.4%的復(fù)方中草藥制劑的草魚血清中的溶菌酶活性顯著提高了17.28%、19.8%（P<0.05）；添加0.2%的復(fù)方中草藥制劑使草魚血清中堿性磷酸酶活性降低了14.02%，超氧化物歧化酶活性提高了34.19%（P<0.05）。研究表明，在草魚養(yǎng)殖中使用0.2%和0.4%的復(fù)方中草藥制劑可以增強草魚機體的非特異性免疫力，綜合各項數(shù)據(jù)考慮，復(fù)方中草藥制劑最適添加量為0.2%。

關(guān)鍵詞：復(fù)方中草藥；非特異性免疫；草魚（Ctenopharyngodon idella）

中圖分類號：S965.112文獻標志碼：A

草魚（Ctenopharyngodon idella）是中國主要淡水魚養(yǎng)殖品種之一，具有生長快、營養(yǎng)價值高、耐粗飼等特點^[1-2]。但隨草魚養(yǎng)殖規(guī)模及養(yǎng)殖密度的增大，導(dǎo)致水質(zhì)污染、病害頻發(fā)，進而影響草魚機體的免疫力及生產(chǎn)性能，致使養(yǎng)殖生產(chǎn)及經(jīng)濟效益受到影響^[3-4]。目前，飼料端禁抗政策實施以來，養(yǎng)殖行業(yè)尋找安全、高效的替抗產(chǎn)品迫在眉睫。近幾年，中草藥作為一種來源廣泛、種類品種繁多、天然綠色的一種飼料添加劑在養(yǎng)殖行業(yè)逐漸推廣應(yīng)用^[5-6]。中草藥既具有藥理價值，也具有營養(yǎng)價值，具有雙重作用，在養(yǎng)殖行業(yè)中的應(yīng)用具有廣泛的應(yīng)用前景^[7]。部分研究發(fā)現(xiàn)，中草藥在動物生產(chǎn)中具有很好的免疫調(diào)節(jié)作用。在奶牛生產(chǎn)中，使用54g/（d·頭）的中草藥提取物可以有效提高血清中免疫球蛋白和干擾素含量，降低促炎因子腫瘤壞死因子-α水平^[8]。在大菱鲆幼魚生產(chǎn)中使用2%的中草藥湯藥，可以提高大菱鲆體內(nèi)相關(guān)的非特異性免疫指標的數(shù)值（溶菌酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽過氧化物酶）^[9]。蔡巖^[10]研究發(fā)現(xiàn)，中草藥可以通過調(diào)節(jié)石斑魚體內(nèi)與免疫相關(guān)的通路及基因來改善石斑魚機體的免疫功能。該試驗中，以草魚幼魚為研究對象，探究不同劑量的復(fù)方中草藥制劑對其機體非特異性免疫的影響，為中草藥在草魚養(yǎng)殖的高效推廣與利用提供數(shù)據(jù)資料。

1 試驗材料

1.1 中草藥制劑

復(fù)方中草藥制劑主要有五味子、山楂、甘草、黨參、黃芪等組成，購自當(dāng)?shù)刂兴幉拇笫袌?。以上中草藥粉碎后過40目篩，按照等比例混勻，備用。

1.2 草魚

試驗草魚購買于當(dāng)?shù)厮a(chǎn)養(yǎng)殖公司，平均體重為5.0±0.2 g，體質(zhì)健壯，無外傷。

1.3 免疫指標試劑盒

溶菌酶、堿性磷酸酶、超氧化物歧化酶、過氧化氫酶、丙二醛等非特異性免疫指標檢測試劑盒由南京建成生物工程研究所生產(chǎn)。

2 試驗方法

2.1 試驗分組及草魚餌料

研究選擇體重約5g的健康草魚320尾，隨機分成4組，每組80尾。各組草魚依次飼喂在基礎(chǔ)餌料添加0%、0.1%、0.2%、0.4%的復(fù)方中草藥制劑的試驗餌料。試驗周期為8周，馴養(yǎng)1周。試驗結(jié)束，采集各組草魚血液，檢測血清非特異性免疫指標。試驗處理見表1。試驗草魚餌料配方見表2。

2.2 草魚養(yǎng)殖管理

試驗草魚在進行正式試驗之前，先使用基礎(chǔ)餌料馴養(yǎng)1周，適應(yīng)養(yǎng)殖環(huán)境。草魚每日投喂3次（8：00、13：00、17：00），每天餌料投喂量約為草魚體重的3.5%。養(yǎng)殖期間，不間斷供氧，每3d換水一次，每次換水量約為1/3。水溫約27.5℃左右，pH值約7.5左右，氨氮含量低于0.18mg/L，溶解氧含量大于5.5mg/L。

2.3 免疫指標檢測方法

試驗結(jié)束當(dāng)天，所有草魚禁食12hrs，之后每組挑選8尾草魚，采集血液，經(jīng)離心后收集血清用于溶菌酶、堿性磷酸酶、超氧化物歧化酶、過氧化氫酶、丙二醛等非特異性免疫指標的測定。

3 試驗結(jié)果

不同劑量的復(fù)方中草藥制劑對草魚免疫指標的影響見表3，與對照組比較，草魚餌料中添加0.2%和0.4%的復(fù)方中草藥制劑的草魚血清中的溶菌酶活性顯著提高了17.28%、19.8%（P<0.05）；添加0.2%的復(fù)方中草藥制劑使草魚血清中堿性磷酸酶活性降低了14.02%（P<0.05）；添加0.2%的復(fù)方中草藥制劑使草魚血清中的超氧化物歧化酶活性提高了34.19%（P<0.05）；而復(fù)方中草藥制劑對草魚血清中的過氧化氫酶和丙二醛含量未產(chǎn)生顯著性影響。研究表明，在草魚養(yǎng)殖中使用0.2%和0.4%的復(fù)方中草藥制劑可以增強草魚機體的非特異性免疫力，綜合各項數(shù)據(jù)考慮，復(fù)方中草藥制劑最適添加量為0.2%。

4 討論

溶菌酶是動物機體內(nèi)非特異性免疫因子，可以抵御養(yǎng)殖過程中病害對機體的危害；堿性磷酸酶是一種比較重要的生化指標；超氧化物歧化酶和過氧化氫酶是機體內(nèi)重要的抗氧化酶，具有清除機體內(nèi)多余自由基的功能；丙二醛是脂質(zhì)氧化產(chǎn)生的物質(zhì)，可以預(yù)示機體的氧化程度。以上指標在魚類機體非特異性免疫功能方面起著重要的作用。本試驗中，與對照組比較，草魚餌料中添加0.2%和0.4%的復(fù)方中草藥制劑的草魚血清中的溶菌酶活性顯著提高了17.28%、19.8%；添加0.2%的復(fù)方中草藥制劑使草魚血清中堿性磷酸酶活性降低了14.02%，超氧化物歧化酶活性提高了34.19%，表明在草魚養(yǎng)殖中使用0.2%和0.4%的復(fù)方中草藥制劑可以增強草魚機體的非特異性免疫力，綜合各項數(shù)據(jù)考慮，復(fù)方中草藥制劑最適添加量為0.2%。鄭善堅等^[11]研究發(fā)現(xiàn)，在草魚生產(chǎn)中添加1%的復(fù)方中草藥可以提高草魚機體的超氧化物歧化酶水平，增加了MHCⅠ免疫基因的表達。邢玉娟等^[12]研究表明，在草魚養(yǎng)殖中使用適量的復(fù)方中草藥可以提高草魚體內(nèi)白細胞的吞噬能力，增強了超氧化物歧化酶活性及溶菌酶活性。以上研究均表明，草魚養(yǎng)殖中使用適量的中草藥可以增強機體的非特異性免疫功能，主要是因為中草藥中的各種活性成分具有調(diào)節(jié)機體免疫的功能。

5 結(jié)論

該試驗研究表明，在草魚養(yǎng)殖中使用適量的復(fù)方中草藥制劑可以增強草魚血清中超氧化物歧化酶、溶菌酶活性，降低堿性磷酸酶活性，增強了機體的非特異性免疫力，綜合各項數(shù)據(jù)考慮，復(fù)方中草藥制劑最適添加量為0.2%。

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Effect of herbal preparations on the immunity of Ctenopharyngodon idella organism

GUO Tingping， ZHAO Changshan， ZHANG Zhijun

（Zhongwei City Shapotou District Animal Husbandry and Aquatic Technology Extension Service Center， Zhongwei 755000， Ningxia China）

Abstract：This experiment investigated the effect of different doses of compound herbal preparations on the non-specific immunity of grass carp （Ctenopharyngodon idella） organism. The study selected 320 healthy grass carp weighing about 5g and randomly divided into 4 groups of 80 fish each. Each group was fed in turn a test bait with 0%， 0.1%， 0.2% and 0.4% of a compound herbal preparation added to the basal bait. The test period was 8 weeks， with 1 week of domestication. At the end of the test， blood was collected from each group of grass carp and serum non-specific immune indexes were tested. The results showed that compared with the control group， the lysozyme activity in the serum of grass carp baits supplemented with 0.2% and 0.4% of the compound herbal preparation significantly increased by 17.28% and 19.8% （P<0.05）; the addition of 0.2% of the compound herbal preparation reduced the alkaline phosphatase activity in the serum of grass carp by 14.02% and increased the superoxide dismutase activity by 34.19% （P<0.05）. The study showed that the use of 0.2% and 0.4% of the compound herbal preparations in grass carp culture could enhance the non-specific immunity of the grass carp organism， and considering all the data， the optimum amount of the compound herbal preparations was 0.2%.

Keywords：Compound herbal medicine; Non-specific immunity; Grass carp （Ctenopharyngodon idella）