楊 楠,譚雪蓮,郭天文,3,張平良,劉曉偉

(1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 資源與環(huán)境學(xué)院,蘭州 730070; 2.甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 旱地農(nóng)業(yè)研究所,蘭州 730070; 3.甘肅省農(nóng)業(yè)科學(xué)院,蘭州 730070)

甘肅省是中國(guó)馬鈴薯的主產(chǎn)區(qū),面積和產(chǎn)量均居全國(guó)第三位[1]。近年來,規(guī)?；图s化的種植模式以及化肥的不合理使用,導(dǎo)致馬鈴薯產(chǎn)量和品質(zhì)下降、土壤微生物多樣性降低、土壤生態(tài)系統(tǒng)失衡等問題日益突出[2],制約甘肅省馬鈴薯產(chǎn)業(yè)健康發(fā)展。因此,研究新型環(huán)保肥料對(duì)土壤生態(tài)環(huán)境具有重要的意義。微生物菌劑作為一種新型環(huán)保肥料,含有大量有效活菌,可以分解土壤有機(jī)質(zhì)[3],促進(jìn)土壤中難溶性養(yǎng)分的溶解和釋放[4-5];此外,這些有效菌在生命活動(dòng)過程中,能夠分泌植物激素和抗生素等活性物質(zhì),刺激作物生長(zhǎng)[6];微生物菌劑還含有大量營(yíng)養(yǎng)成分,其特定的肥料效應(yīng)能夠提供作物生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)元素[7]。微生物菌劑具有改善土壤結(jié)構(gòu)[8-9]、提高土壤微生物豐富度[10]、減輕病蟲害[11]等作用,可實(shí)現(xiàn)農(nóng)業(yè)的持續(xù)發(fā)展。前人研究表明,哈茨木霉菌在提高枸杞幼苗成活率的同時(shí),提高了果實(shí)內(nèi)含物多糖、甜菜堿、總黃酮含量和胡蘿卜素[12];施用菌劑可有效降低連作棉田棉花黃萎病的發(fā)病率,并增產(chǎn)9.64%～26.21%,緩解連作障礙的同時(shí),顯著降低棉花根系丙二醛的含量,提高根系活力,減輕作物的自毒作用,也可顯著提高連作土壤堿解氮、有效磷和速效鉀含量,較不施菌劑處理分別增加15.4%、36.8%、19.8%[13];復(fù)合微生物菌劑與氨基酸水溶肥組合施用顯著提高了香蕉土壤有益菌鞘氨醇單胞菌屬的物種豐度,且顯著降低了土壤致病真菌炭疽菌屬的物種豐度,降低香蕉發(fā)病率[14]。目前,微生物菌劑對(duì)馬鈴薯土壤微生物多樣性的研究鮮有報(bào)道。本研究采用高通量測(cè)序?qū)︸R鈴薯土壤微生物多樣性進(jìn)行研究,從微生物生態(tài)學(xué)的角度探討施用不同劑量微生物菌劑馬鈴薯根際土壤細(xì)菌群落組成和多樣性,為土壤可持續(xù)發(fā)展作理論支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況

試驗(yàn)于2020年在甘肅省定西市團(tuán)結(jié)鎮(zhèn)高泉山上進(jìn)行。該地區(qū)位于北緯35°24′21″,東經(jīng) 104°34′94″,海拔2 155 m,年平均氣溫較低,年平均降水量500～550 mm,屬干旱、半干旱地區(qū)。試驗(yàn)地前茬作物是柴胡,土壤肥力良好,0～20 cm土層的有機(jī)質(zhì)、全氮、全磷、全鉀、速效氮、速效鉀分別為7.5 g·kg-1、0.73 g·kg-1、0.67 g·kg-1、19.9 g·kg-1、15.12 mg·kg-1、 174.81 mg·kg-1,pH為8.21。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

供試馬鈴薯品種為‘隴薯10號(hào)’,試驗(yàn)所用菌劑為黑沃土酸性微生物顆粒菌劑(有效活菌數(shù)≥5 億/g),功能菌為枯草、地衣、解淀粉芽孢桿菌以及哈茨木霉菌等多種復(fù)合菌,總養(yǎng)分≥15%( N:10%,P2O5:2%,K2O:3%),定殖率為37.8%,由黑沃土生物科技有限公司提供。大田試驗(yàn)共設(shè)計(jì)6個(gè)處理,分別為:不施肥對(duì)照處理CK;單施化肥對(duì)照處理F(N:180 kg·hm-2,P2O5:90 kg·hm-2,K2O:90 kg·hm-2);處理T1(化肥+顆粒菌劑 75 kg·hm-2);處理T2(化肥+顆粒菌劑 150 kg·hm-2);處理T3(化肥+顆粒菌劑225 kg·hm-2);處理T4(化肥+顆粒菌劑300 kg·hm-2),其中施菌劑處理所施用的化肥量均與單施化肥相同,化肥全部一次性在播前基施,黑沃土酸性微生物顆粒菌劑采用穴施。試驗(yàn)共18個(gè)小區(qū),長(zhǎng)8 m,寬6 m,面積48 m2,試驗(yàn)地四周均設(shè)有4行保護(hù)行。馬鈴薯采用全膜覆蓋壟播栽培,壟高30 cm、行距60 cm、株距30 cm,播種密度:52 500穴·hm-2。試驗(yàn)于2020年4月20日播種,于10月20日成熟收獲。

1.3 田間管理及樣品采集

播前撒施毒死蜱殺蟲藥75 kg·hm-2,預(yù)防蟲害。苗高8～10 cm時(shí)結(jié)合鋤草適時(shí)中耕培土提高地溫,疏松土壤。樣品于2020年8月采集各試驗(yàn)小區(qū)耕層(0～20 cm)土壤新鮮樣品,將植株和周圍的土體取出,輕輕抖落掉根系外圍土,取其表層土壤,將取到的土樣混合均勻,土樣裝到無菌袋密封,放入冰盒帶回實(shí)驗(yàn)室,并在-80 ℃的冰箱儲(chǔ)存,土樣用于后續(xù)土壤微生物DNA提取及微生物多樣性分析。

1.4 根際土壤總DNA提取及PCR擴(kuò)增

土壤樣品利用CTAB方法對(duì)基因組DNA進(jìn)行提取,提取后的DNA使用 Qbiut(廠家 invitrogen,試劑 Qubit TM dsDNA HS Assay Kit)進(jìn)行濃度檢測(cè),使用10 g·L-1瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)提取DNA的完整性。PCR擴(kuò)增采用細(xì)菌通用引物338F(ACTCCTACGGGAGGCAGCA)和806R(GGACTACHVGGGTWTCTAAT)進(jìn)行擴(kuò)增,PCR反應(yīng)用10 μL體系:KOD FX Neo Buffer 5 μL,2 mmol·L-1dNTPs 2 μL,正向引物(10 μmol·L-1)0.3 μL,反向引物(10 μmol·L-1)0.3 μL,KOD FX Neo 0.2 μL,Template DNA 5～50 ng,補(bǔ)ddH2O至10 μL。擴(kuò)增條件為95 ℃預(yù)變性5 min,95 ℃變性30 s,50 ℃退火30 s,72 ℃延伸40 s,共25個(gè)循環(huán),72 ℃延伸7 min,4 ℃保存?zhèn)溆谩；贗llumina Novaseq測(cè)序平臺(tái)構(gòu)建小片段文庫進(jìn)行雙末端測(cè)序,委托北京百邁客生物科技有限公司完成。

1.5 數(shù)據(jù)分析與處理

高通量測(cè)序得到的原始數(shù)據(jù)通過拼接過濾最后保留高質(zhì)量序列用于分析,符合的序列進(jìn)行OTU聚類分析,基于聚類結(jié)果進(jìn)行多樣性分析;分析不同分類水平下土壤細(xì)菌在群落結(jié)構(gòu)上的相似性。采用Microsoft Excel 2016對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理與作圖,采用DPS 9.01進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,LSD法進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)。使用QIIME2(Version 2020.6)計(jì)算Chao1、ACE、Shannon指數(shù),采用基于Binary-Jaccard距離矩陣對(duì)細(xì)菌群落進(jìn)行β多樣性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 測(cè)序數(shù)據(jù)質(zhì)量評(píng)估及OTU聚類分析

由表1可知,6個(gè)樣品共獲得原始序列 946 008條,通過質(zhì)控后獲得高質(zhì)量序列849 727條,有效序列數(shù)共797 583條,平均序列長(zhǎng)度為 417.67 bp。其中,土壤樣本CK、F、T1、T2、T3、T4分別讀取了142 137、143 102、145 191、 144 629、144 456、130 212條優(yōu)化序列,T4與其他處理差異顯著。

表1 樣本測(cè)序數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)結(jié)果Table 1 Statistical results of sample sequencing data

依據(jù)0.97的序列相似性在6個(gè)土壤樣本中共檢測(cè)出9 939個(gè)OTU,每一個(gè)OTU被視為一個(gè)微生物物種。所有的OTU數(shù)量可分為30門、85綱、180目、266科、426屬、463種。各土壤樣本CK、F、T1、T2、T3、T4所含的OTU數(shù)分別為1 666、1 657、1 653、1 676、1 656、1 631,其中共有的OTU數(shù)為1 558。各處理所含OTU數(shù)排序?yàn)門2>CK>F>T3>T1>T4,其中F與T2差異顯著,T2較F增加1.15%;隨著菌劑用量的增加,OTU數(shù)量呈現(xiàn)出先增加后降低的趨勢(shì),在菌劑用量增加到150 kg·hm-2(T2)時(shí)達(dá)到最大值,T2與T4差異顯著,較T4增加2.76%。由此表明施用化肥+顆粒菌劑150 kg·hm-2可顯著提高OTU數(shù)量。

圖1是相似度在0.97條件下各土壤樣品的稀釋曲線,細(xì)菌豐富度稀釋曲線呈現(xiàn)出的趨勢(shì)為先升高后趨于平緩,逐漸達(dá)到飽和狀態(tài),表明所測(cè)的樣品序列很充分,環(huán)境中的物種數(shù)目不會(huì)因?yàn)樗鶞y(cè)序列的增加而一直增加,可以真實(shí)的反映樣品中的細(xì)菌群落。

圖1 相似度為0.97條件下各土壤樣品的稀釋曲線Fig.1 Dilution curve of each soil sample with similarity of 0.97

2.2 根際土壤細(xì)菌的多樣性分析

2.2.1 土壤α多樣性分析 在供試土壤樣品Alpha多樣性指數(shù)中,Chao1指數(shù)和ACE指數(shù)越大表明土壤樣品中細(xì)菌的含量越高,土壤菌種的豐富度越高。Shannon指數(shù)代表了菌群的多樣性,指數(shù)大小與菌群多樣性高低成正比。由表2可知,Chao1指數(shù)在各處理中的大小依次為T2>CK>T1>T4>T3>F,與F相比,T2、T3分別增加1.33%、0.11%,兩者間差異顯著;在不同菌劑用量之間,T1與T2差異顯著,T2較T1增加 0.65%。ACE指數(shù)排序?yàn)門2>CK>T1>F>T3>T4,F與T2有極顯著差異,T2較F增加 1.14%。Shannon指數(shù)大小依次表現(xiàn)為F>T2>CK>T4>T1>T3,在不同菌劑用量之間,T2與T3差異顯著,T2較T3增加2.15%,施用菌劑處理與對(duì)照無顯著差異。結(jié)果表明,較單施化肥,微生物菌劑可以顯著增加土壤細(xì)菌的豐富度,尤以菌劑用量為150 kg·hm-2時(shí)作用最明顯;與不同菌劑用量相比,菌劑用量為150 kg·hm-2可以提高土壤細(xì)菌的多樣性。

表2 不同處理馬鈴薯根際土壤細(xì)菌群落多樣性Table 2 Diversity of bacterial community in potato rhizosphere soil under different treatments

2.2.2 土壤β多樣性分析 圖2為OTU水平下采用樣品間jaccard距離矩陣?yán)L制的聚類熱圖,樣品距離熱圖的顏色可以反映樣品間土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)與多樣性的差異,顏色越藍(lán)表示樣品間距離越近,細(xì)菌群落相似度越高,越紅則距離越遠(yuǎn)。T4與CK、F、T1的土壤細(xì)菌群落之間具有差異,其中T4和F、T1的細(xì)菌群落之間的差異顯著。說明施用菌劑的用量越高對(duì)土壤細(xì)菌群落的影響越大。

圖2 OTU水平下土壤細(xì)菌距離熱圖Fig.2 Heatmap of soil bacteria distance at OTU level

2.3 根際土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)多樣性分析

2.3.1 門水平根際土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)變化 圖3為供試土壤細(xì)菌門水平上的分類,其中相對(duì)豐度較高的分別是變形菌門(Proteobacteria)、放線菌門(Actinobacteria)、酸桿菌門(Acidobacteria)、芽單胞菌門(Gemmatimonadetes)、綠彎菌門(Chloroflexi)、擬桿菌門(Bacteroidetes)、疣微菌門(Verrucomicrobia)。土壤細(xì)菌各處理在組成上沒有區(qū)別,但在菌群結(jié)構(gòu)和相對(duì)豐度上有一定差異。變形菌門是各供試土壤的優(yōu)勢(shì)菌門(占比為31.40%～34.78%),相對(duì)豐度最高,各處理間差異不顯著。放線菌門在土壤中分布較廣,是本研究的第二大優(yōu)勢(shì)菌門,與F相比,T4放線菌門相對(duì)豐度增加4.59%,CK、T1、T2、T3分別降低29.19%、17.08%、8.26%、0.77%,其中F與其余各處理均達(dá)到顯著水平,且與CK、T1、T2達(dá)到極顯著水平,T4放線菌門相對(duì)豐度最高,較CK增加35.10%。酸桿菌門菌劑用量為300 kg·hm-2(T4)時(shí)土壤菌群豐度最高,在不施肥土壤中豐度最低,與CK相比,T2、T3、T4分別降低27.38%、22.17%、33.24%,兩者之間均有顯著差異,且CK與T4達(dá)到極顯著水平;與F相比,T4酸桿菌門相對(duì)豐度降低29.33%,兩者差異顯著;隨著菌劑用量增加,酸桿菌門在土壤中的相對(duì)豐度呈現(xiàn)先降低再增加后降低的趨勢(shì),菌劑用量增加到300 kg·hm-2(T4)時(shí)達(dá)到最低值,其中T1與T4差異顯著,T4較T1降低 26.81%。與CK、F相比,T4芽單胞菌門相對(duì)豐度分別降低25.16%、 21.01%,兩者之間均有顯著差異,且CK與T4達(dá)到極顯著水平;隨著菌劑用量增加,芽單胞菌門在土壤中相對(duì)豐度變化趨勢(shì)與酸桿菌門相同,T4較T1、T3分別降低21.01%、 17.73%,兩者之間有顯著差異。由此可見,施用微生物菌劑可顯著引起馬鈴薯根際土壤細(xì)菌門水平群落組成的變化,較不施肥和單施化肥,施用微生物菌劑會(huì)顯著降低酸桿菌門、芽單胞菌門的相對(duì)豐度,且以菌劑用量300 kg·hm-2時(shí)最為顯著。較單施化肥,菌劑用量為300 kg·hm-2時(shí)可以顯著提高放線菌門的相對(duì)豐度,其余處理則會(huì)降低放線菌門的相對(duì)豐度。

圖3 供試土壤細(xì)菌門水平分類Fig.3 Classification of bacterial phylum level in tested soil

2.3.2 綱水平根際土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)變化 由圖4可知,供試土壤細(xì)菌在綱水平上主要有α-變形菌綱(Alphaproteobacteria)、γ-變形菌綱(Gammaproteobacteria)、芽單胞菌綱(Gemmatimonadetes)、Subgroup_6、放線菌綱(Actinobacteria)、擬桿菌綱(Bacteroidia)、酸微菌綱(Acidimicrobiia)、δ-變形菌綱(Deltaproteobacteria)、母鏈菌綱(Blastocatellia_Subgroup_4)、綠彎菌綱(Chloroflexia)。平均豐度小于1.50%的部分(others)未在圖中顯示。通過細(xì)菌群落豐度比例可知,α-變形菌綱(17.54%～19.56%)和γ-變形菌綱 (10.24%～13.62%)在土壤細(xì)菌結(jié)構(gòu)中所占比例最大,α-變形菌綱是各處理的優(yōu)勢(shì)菌綱,各處理間差異不顯著。γ-變形菌綱是第二大優(yōu)勢(shì)菌綱,其相對(duì)豐度大小依次為:T4>T2>T3>T1>CK>F,與CK相比,T4 γ-變形菌綱相對(duì)豐度增加32.04%,兩者有顯著差異。與CK相比,T4芽單胞菌綱相對(duì)豐度降低了26.91%,兩者達(dá)到極顯著水平;隨著菌劑用量增加,其相對(duì)豐度呈現(xiàn)出先降低后增加再降低的趨勢(shì),T2、T3、T4較T1分別降低 14.38%、11.94%、32.45%。與CK、F相比,T3放線菌綱相對(duì)豐度分別增加129.11%、 59.48%,T4分別增加169.68%、87.72%,T3、T4和CK、F差異顯著,其中CK和T3、T4達(dá)到了極顯著水平;在不同菌劑用量中T3、T4較T1分別增加 93.39%、127.63%,且兩者之間差異顯著。與F相比,T2、T3、T4擬桿菌綱相對(duì)豐度分別增加74.19%、73.52%、124.49%,且兩者間達(dá)到極顯著水平;與CK相比,T4擬桿菌綱相對(duì)豐度增加了59.73%,兩者間有顯著差異;在不同菌劑用量之間,T1與T2、T3、T4有顯著差異,T2、T3、T4較T1分別增加46.80%、46.24%、 89.20%。與F相比,T3、T4酸微菌綱相對(duì)豐度分別降低 21.38%、24.04%,兩者間均有顯著差異。與CK相比,T2、T3、T4母鏈菌綱相對(duì)豐度分別降低 32.25%、29.20%、38.10%,兩者間均有顯著差異,且CK與T4達(dá)到極顯著水平。綠彎菌屬于光合細(xì)菌類群,能夠利用光合作用來維持生存。與F相比,T1、T2綠彎菌綱相對(duì)豐度分別降低了39.38%、40.45%,兩者間有顯著差異。由此可見,施用微生物菌劑可顯著引起馬鈴薯根際土壤細(xì)菌綱水平群落組成的變化,較不施肥,微生物菌劑可以顯著提高γ-變形菌綱相對(duì)豐度,可以顯著降低芽單胞菌綱、母鏈菌綱相對(duì)豐度,且都以菌劑用量為300 kg·hm-2時(shí)最顯著。較單施化肥,微生物菌劑可以顯著降低酸微菌綱、綠彎菌綱相對(duì)豐度。較對(duì)照,菌劑用量為300 kg·hm-2可以顯著提高放線菌綱和擬桿菌綱相對(duì)豐度。

圖4 供試土壤細(xì)菌綱水平分類Fig.4 Classification of bacterial class level in tested soil

3 討 論

土壤中大量的細(xì)菌會(huì)抑制病原菌的生長(zhǎng)繁殖,土壤細(xì)菌的豐富度與土壤健康息息相關(guān)[15]。本研究基于高通量測(cè)序平臺(tái)Illumina Novaseq對(duì)不同用量微生物菌劑的馬鈴薯根際土壤細(xì)菌的多樣性進(jìn)行了分析,結(jié)果表明,馬鈴薯施用微生物菌劑后土壤細(xì)菌多樣性發(fā)生顯著變化,單施化肥與菌劑用量為150 kg·hm-2兩者差異顯著,說明施用菌劑可以顯著增加土壤細(xì)菌的Chao1指數(shù)和ACE指數(shù)。前人研究結(jié)果也證明,復(fù)合木霉菌菌劑處理后的小麥根際土壤細(xì)菌Shannon指數(shù)及Chao1指數(shù)顯著增加[16];枯草芽胞桿菌菌肥會(huì)在一定程度上提高土壤細(xì)菌種群多樣性,使土壤細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)更加豐富[17];黃腐酸與微生物菌劑協(xié)同處理后可顯著提高煙草根際土壤細(xì)菌群落Shannon指數(shù)和辛普森指數(shù),有效改善了根際土壤細(xì)菌的生態(tài)環(huán)境[18]。

在門、綱水平上,馬鈴薯根際土壤的優(yōu)勢(shì)菌門有變形菌門、放線菌門、酸桿菌門,本研究中變形菌門是存在于土壤中最為廣泛的優(yōu)勢(shì)菌門,此結(jié)果與前人研究結(jié)果一致[19-24]。主要原因可能是微生物菌劑的施用影響了原有土壤微生物菌群結(jié)構(gòu),并形成了一種特定的微生態(tài)環(huán)境。本研究表明,在單施化肥的基礎(chǔ)上,增施300 kg·hm-2的微生物菌劑可顯著增加有益菌群放線菌門相對(duì)豐度,這與前人研究結(jié)果一致[25]。放線菌具有解磷固氮的作用,其代謝產(chǎn)物中產(chǎn)生的一些物質(zhì)不僅對(duì)病原菌有拮抗作用[26],還可以降解一些有毒有害物質(zhì)[27-28],說明微生物菌劑會(huì)明顯減輕病原菌和有害物質(zhì)對(duì)土壤的侵害,使土壤生態(tài)系統(tǒng)向著健康的方向發(fā)展。酸桿菌門是本研究中的第三大優(yōu)勢(shì)菌門,酸桿菌門適宜在較貧瘠的土壤上生存[29],其相對(duì)豐度與土壤肥力成反比,可以作為土壤養(yǎng)分狀況的指示菌[30]。本研究中不施肥處理中酸桿菌門的相對(duì)豐度最低,單施化肥次之,而菌劑用量為300 kg·hm-2相對(duì)豐度最高,說明微生物菌劑可以有效活化土壤養(yǎng)分、提高土壤肥力。綱水平上,本研究發(fā)現(xiàn),較不施肥,菌劑用量為300 kg·hm-2會(huì)顯著提高γ-變形菌綱的相對(duì)豐度,這與李金花等[31]、譚雪蓮[32]的研究結(jié)果相反,原因可能是菌劑用量為300 kg·hm-2的土壤處于高營(yíng)養(yǎng)狀態(tài),γ-變形菌綱在土壤養(yǎng)分含量較高的環(huán)境中含量豐富,且含有一些優(yōu)勢(shì)菌,例如:氨氧化細(xì)菌,說明高養(yǎng)分含量對(duì)γ-變形菌綱的相對(duì)豐度有促進(jìn)作用。此外,研究發(fā)現(xiàn)較不施肥與單施化肥,施用菌劑也會(huì)顯著提高擬桿菌綱、放線菌綱的相對(duì)豐度。擬桿菌具有溶磷作用,其相對(duì)豐度和速效磷含量成正比[25],擬桿菌不僅對(duì)土壤有機(jī)碳轉(zhuǎn)化為無機(jī)碳的過程起到重要作用[30],而且還可以分解高分子物質(zhì)達(dá)到降解的目的[33]。酸微菌綱、放線菌綱均屬于放線菌門,以往研究表明,放線菌綱對(duì)增加土壤有機(jī)碳、氮磷比、碳氮比上有極顯著的作用,但會(huì)降低土壤pH,而酸微菌綱與土壤pH呈顯著正相關(guān)關(guān)系[34],本研究供試土壤為堿性土壤,施用菌劑使酸微菌綱顯著降低,說明菌劑有中和土壤酸堿度的作用,放線菌綱在施用菌劑后顯著增加,說明施用菌劑會(huì)促進(jìn)土壤營(yíng)養(yǎng)元素的流動(dòng),這與前人研究結(jié)果一致[35]。本研究中菌劑用量為300 kg·hm-2較不施肥會(huì)顯著降低芽單胞菌綱的相對(duì)豐度,這與前人研究結(jié)果一致[14,36]。芽單胞菌綱中含有很多病原菌,如腸桿菌科、假單胞菌科,說明菌劑可以通過降低芽單胞菌綱的相對(duì)豐度,從而降低馬鈴薯的發(fā)病幾率。

4 結(jié) 論

較單施化肥,菌劑用量為150 kg·hm-2時(shí)會(huì)顯著提高土壤細(xì)菌OTU數(shù)量和豐富度。施用微生物菌劑對(duì)土壤細(xì)菌結(jié)構(gòu)有很大的影響,與對(duì)照相比,菌劑用量為300 kg·hm-2時(shí)可以顯著降低酸桿菌門、芽單胞菌門相對(duì)豐度,顯著提高放線菌綱、擬桿菌綱相對(duì)豐度;較單施化肥,菌劑用量為300 kg·hm-2時(shí)可以顯著提高放線菌門的相對(duì)豐度,顯著降低酸微菌綱相對(duì)豐度;較不施肥,菌劑用量為300 kg·hm-2時(shí)可顯著提高γ-變形菌綱相對(duì)豐度,降低芽單胞菌綱相對(duì)豐度。微生物菌劑顯著改善了土壤細(xì)菌菌群結(jié)構(gòu),增加了有益菌的豐度,進(jìn)而改善了馬鈴薯土壤微環(huán)境。