朱衛(wèi)萍 潘韜文 饒高雄

【摘 要】 目的：對(duì)滇龍膽花的化學(xué)成分進(jìn)行了初步研究，明確滇龍膽花的化學(xué)成分并加以充分利用，為最大限度地提高滇龍膽種植產(chǎn)業(yè)效益提供科學(xué)依據(jù)。方法：采用硅膠、葡聚糖凝膠LH-20等色譜法分離化合物，并通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)品TLC對(duì)照、核磁共振、 質(zhì)譜數(shù)據(jù)鑒定化合物的結(jié)構(gòu)。結(jié)果：從滇龍膽花體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇溶液提取物中分離鑒定了12個(gè)化合物，主要為小極性的三萜脂肪酸酯酸，含量最大的是烏蘇烷型三萜。分別鑒定為軟脂酸（[STHZ]1）、古柯二醇-3-棕櫚酸酯（[STHZ]2[STBZ]）、羽扇豆醇棕櫚酸酯（[STHZ]3[STBZ]）、α-香樹(shù)脂醇（[STHZ]4[STBZ]）、熊果醇-3-棕櫚酸酯（[STHZ]5[STBZ]）、β-谷甾醇（[STHZ]6[STBZ]）、熊果酸（[STHZ]7[STBZ]）、胡蘿卜苷（[STHZ]8[STBZ]）、2α-羥基-熊果酸（[STHZ]9[STBZ]）、β-香樹(shù)脂醇棕櫚酸酯（[STHZ]10[STBZ]）、α-香樹(shù)脂醇棕櫚酸酯（[STHZ]11[STBZ]）、β-香樹(shù)脂醇（[STHZ]12[STBZ]）。結(jié)論：對(duì)滇龍膽花化學(xué)成分進(jìn)行研究，分離鑒定了12個(gè)單體化合物，化合物[STHZ]1～6、8～12[STBZ]均為首次從龍膽花中分離得到。

【關(guān)鍵詞】滇龍膽花；化學(xué)成分；結(jié)構(gòu)鑒定

【中圖分類號(hào)】R284.2 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號(hào)】1007-8517（2023）11-0035-05

Abstract：Objective This researchstuied the chemical constituents of the flowers of cultivated Gentiana rigescens Franch.，in order to identify the chemical compositions of Gentiana rigescens Franch.and use it，to improve the value.Methods the compounds were isolated by chromatography such as Silica gel，Dextran gel LH-20，and identified the structure by the physicochem-ical property and spectral data.Results 12 compounds were isolated from the alcoholic extracts of the flowers of cultivated Gentiana rigescens Franch..They were identified as：palmitic acid （[STHZ]1[STBZ]），Erythrodiol-3-palmitate （[STHZ]2[STBZ]），Lupeol palmitate （[STHZ]3[STBZ]），α-Amyrin （[STHZ]4[STBZ]），Uvaol-3-palmitate （[STHZ]5[STBZ]），β-Sitosterol （[STHZ]6[STBZ]），Ursolic acid （[STHZ]7[STBZ]），Daucosterol （[STHZ]8d），2α-hydroxyl- ursolic acid （[STHZ]9[STBZ]），β-Amyrin palmitate （[STHZ]10[STBZ]），α-Amyrin palmitate （[STHZ]11[STBZ]） and β-Amyrin （[STHZ]12[STBZ]）.Conclusion The compounds of [STHZ]1-6、8-12[STBZ] were isolated from the flowers of Gentiana for the first time.

Keywords：The Flowers of Cultivated Gentiana rigescens Franch.;Chemical Constituents；StructuralIdentification

龍膽花為藏醫(yī)常用藥材，龍膽花收載于《中國(guó)藏藥》［1］，主要來(lái)源于藍(lán)玉簪龍膽Gentiana veitchiorum Hemsl.和高山龍膽Gentiana algida Pall.，的干燥花。其性寒、味苦，具有清熱解毒、利膽之功，藏醫(yī)常用于治療肺熱、時(shí)疫熱病、咽喉腫痛等［2］。滇龍膽花來(lái)源于Gentiana rigescens Franch.的干燥花，雖非藏藥所用龍膽花的正品來(lái)源但可作為替代品使用。目前，藏藥龍膽花資源相對(duì)稀少，而栽培滇龍膽花資源相對(duì)較為豐富。對(duì)于龍膽花的化學(xué)成分極少，迄今為止，僅有徐傳梅等［3］從藏藥提宗龍膽花中分離得到熊果酸（ursolic acid），日本獐牙菜素（isooreintin）、異葒草素（swertiajaponin）3個(gè)成分。為明確滇龍膽花的化學(xué)成分及其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)并加以充分利用，最大限度地提高種植產(chǎn)業(yè)效益，開(kāi)發(fā)龍膽花藥用價(jià)值。本實(shí)驗(yàn)對(duì)栽培滇龍膽花進(jìn)行提取，并運(yùn)用各種色譜法進(jìn)行分離，輔以重結(jié)晶等常規(guī)方法純化處理，對(duì)得到單體化合物進(jìn)行結(jié)構(gòu)分析，從滇龍膽花得到12個(gè)單體化合物，均為首次從龍膽花中分離得到。

1 儀器與材料

Yanaco顯微熔點(diǎn)儀、島津IR P-21型紅外光譜儀、Finnigan MAT-95質(zhì)譜儀測(cè)定、NMR用Bruker AM-400或DRX-500核磁共振波譜儀。正相柱色譜用硅膠（75～150μm）、薄層色譜硅膠GF254板（青島海洋化工廠）；樹(shù)脂MCI Gel CHP-20P（日本三棱化工）；葡聚糖凝膠LH-20（Pharmacia公司）；AB-8型大孔樹(shù)脂為（南開(kāi)大學(xué)產(chǎn)品）。提取分離所用甲醇，乙醇，乙酸乙酯，環(huán)己烷，氯仿，丙酮等化學(xué)試劑，溶劑為普通工業(yè)級(jí)或化學(xué)純級(jí)溶劑；

實(shí)驗(yàn)所用滇龍膽花樣品產(chǎn)于云南省臨滄市云縣，經(jīng)原云南中醫(yī)藥大學(xué)楊樹(shù)德教授鑒定為Gentiana rigescens Franch.的干燥花，標(biāo)本保存于云南中醫(yī)藥大學(xué)。

2 提取與分離

栽培滇龍膽花1.55 kg用10倍量95%乙醇加熱回流提取2次，每次1 h，減壓回收乙醇后得龍膽花乙醇浸膏266.5 g。浸膏混懸于水中依次用乙酸乙酯和正丁醇萃取，萃取液分別減壓回收溶劑得到乙酸乙酯部分103 g（Fr-A）、正丁醇部分60.8 g（Fr- B）。

取Fr-A（103 g）經(jīng)硅膠柱層析，以三氯甲烷-甲醇（體積比為99∶1→1∶1）進(jìn)行梯度洗脫，葡聚糖凝LH-20（三氯甲烷-甲醇=1∶1）純化，經(jīng)薄層色譜分析，合并相同部分，再輔以重結(jié)晶，最后從該部分分離得到9個(gè)化合物：化合物[STHZ]1[STBZ]（573 mg）、化合物[STHZ]2[STBZ]（253 mg）、化合物[STHZ]3[STBZ]（403 mg）、化合物[STHZ]4[STBZ]（352 mg）、化合物[STHZ]5[STBZ]（80 mg）、化合物[STHZ]6[STBZ]（1017 mg）、化合物[STHZ]10[STBZ]（153 mg）、化合物[STHZ]11[STBZ]（15 mg）、化合物[STHZ]12[STBZ]（20 mg）。

取Fr-B（60.8g）經(jīng)硅膠柱層析，以三氯甲烷-甲醇（體積比為6∶1→1∶2）梯度洗脫，在經(jīng)葡聚糖凝LH-20（甲醇），RP-18柱色譜（水-甲醇）等柱色譜多次分離純化，輔以重結(jié)晶等常規(guī)方法，最后從該部分得到3個(gè)化合物：化合物[STHZ]7[STBZ]（4.4 g）、化合物[STHZ]8[STBZ]（400 mg）、化合物[STHZ]9[STBZ]（432 mg）。

各化合物架構(gòu)如圖1所示。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物[STHZ]1[STBZ]：白色粉末（乙酸乙酯）。10%硫酸乙醇不顯色、有油性斑點(diǎn)，mp.54.2～55.4 ℃。IR（KBr）顯示有長(zhǎng)鏈烷烴（2927 cm-1、2918 cm-1、2849 cm-1）。與軟脂酸（Palmitic acid）標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照，TLC的Rf值和顯色一致，由此確定為軟脂酸（Palmitic acid）。

化合物[STHZ]2[STBZ]：白色粉末（甲醇）。10%硫酸乙醇顯紫色，mp.92.4～93.5 ℃。IR（KBr） cm-1：2924、2854、1735、1457、1378。與古柯二醇-3-棕櫚酸酯（Erythrodiol-3-palmitate）標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照，TLC的Rf值和顯色一致，故確定為古柯二醇-3-棕櫚酸酯（Erythrodiol-3-palmitate）。

化合物[STHZ]3[STBZ]：白色脂狀固體（丙酮）。10%硫酸乙醇顯紫色，mp.56～57 ℃。IR（KBr） cm-1：3478、2924、2852、1732、1705、1465，顯示有羥基（3478cm-1），飽和烴基（2924、2852cm-1）、羰基（1732cm-1）。1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ H：4.99（1H，br.s，H-29a）、4.70（1H，br.s，H-29b）、3.19（1H，dd，J=11.2，5.0Hz，H-3a）、0.77～0.97（各3H，s，H-23、24、25、26、27、28）；13C NMR（100 MHz，CDCl3）δ C：37.9（t，C-1）、25.7（t，C-2）、80.0（d，C-3）、37.0（s，C-4）、55.6（d，C-5）、18.0（t，C-6）、34.2（t，C-7）、40.2（s，C-8）、50.3（d，C-9）、36.9（s，C-10）、20.9（t，C-11）、24.9（t，C-12）、37.8（d，C-13）、42.5（s，C-14）、26.7（t，C-15）、35.6（t，C-16）、42.5（s，C-17）、26.9（d，C-18）、47.7（d，C-19）、150.7（s，C-20）、29.7（t，C-21）、39.9（t，C-22）、27.5（q，C-23）、15.0（q，C-24）、15.8（q，C-25）、15.96（q，C-26）、14.2（q，C-27）、17.4（q，C-28）、109.4（d，C-29）、18.9（q，C-30）、173.4（s，C-1′）、33.6（t，C-2′）、25.4（t，C-3′）、29.6～28.7（t，C-4′～14′）、22.7（t，C-15′）、14.4（t，C-16′）。上述1H NMR、13C NMR譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［4］對(duì)照，鑒定為羽扇豆醇棕櫚酸酯（Lupeol palmitate）。

化合物[STHZ]4[STBZ]：白色，薄片狀（甲醇）。10%硫酸乙醇顯紫色，mp.135.8～136.7 ℃。IR（KBr） cm-1：3400、2946、2920、2854、1471、1387，顯示羥基（3400cm-1）、雙鍵（1639 cm-1、1463 cm-1）等官能團(tuán)。1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ：5.16（1H，t，J=3.6Hz，H-12）、3.24（1H，dd，J=5.2、11.0 Hz，H-3），1.06、1.02、1.01、1.00、0.95、0.81、0.80、0.79（s，8×CH3）；13C NMR（100MHz，CDCl3）δ C：39.7（t，C-1）、28.0（t，C-2）、79.9（d，C-3）、39.3（s，C-4）、55.7（d，C-5）、19.1（t，C-6）、33.5（t，C-7）、40.6（s，C- 8）、48.6（d，C-9）、37.9（s，C-10）、24.0（t，C-11）、123.4（d，C-12）、139.5（s，C-13）、42.8（s，C-14）、29.7（t，C-15）、27.6（t，C-16）、34.7（s，C-17）、59.7（d，C-18）、40.5（d，C-19）、40.6（d，C-20）、32.2（t，C-21）、42.6（t，C-22）、29.0（q，C-23）、16.6（q，C-24）、16.6（q，C-25）、17.0（q，C-26）、24.2（q，C-27）、29.0（q，C-28）、 18.3（q，C-29）、22.5（q，C-30）。上述1H NMR、13C NMR譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［5］對(duì)照，鑒定該化合物確定為α-香樹(shù)脂醇（α-Amyrin）。

化合物[STHZ]5[STBZ]：白色脂狀固體（甲醇）。10%硫酸乙醇顯紫色，mp.137～140 ℃。IR（KBr） cm-1：3444、2924、2852、1719、1462、1377。與熊果醇-3-棕櫚酸酯（Uvaol-3-palmitate）標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照，TLC的Rf值和顯色一致，由此確定為熊果醇-3-棕櫚酸酯（Uvaol-3-palmitate）。

化合物[STHZ]6[STBZ]：白色針晶（乙酸乙酯）。與β-谷甾醇標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照［6］在不同系統(tǒng)中展開(kāi)，Rf值和顯色現(xiàn)象相同，故鑒定為β-谷甾醇（β-Sitosterol）。

化合物[STHZ]7[STBZ]：白色粉末（甲醇）。10%硫酸乙醇顯紫色，mp.215.5～217.8 ℃。IR（KBr） cm-1：3440、2926、2857、1693、1458、1388、1274，顯示有羥基（3440cm-1）、羰基（1693cm-1）等官能團(tuán)。1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ H：5.24（1H，t，J=3.4Hz，H-12）、3.33（1H，dd，J=14.3Hz，7.2Hz，H-3）、2.69（1H，d，J=9.5Hz，H-19）、1.53（3H，H-27）、1.28（3H，H-23）、1.11（3H，H-25）、0.99（3H，H-30）、0.96（3H，H-24）、0.84（3H，H-29）、0.78（3H，H-26）； 13C NMR（100 MHz，CDCl3）δ C：181.8（s，C-28）、139.6（s，C-13）、126.9（d，C-12）、78.8（d，C-3）、56.7（d，C-5）、54.3（d，C-18）、48.1（s，C-17）、47.8（d，C-9）、40.8（s，C-14）、40.1（s，C-8）、34.4（s，C-10）、39.9（d，C-19）、38.7（d，C-20）、38.2（t，C-22）、30.9（s，C-4）、31.9（t，C-7）、30.7（t，C-1）、30.5（t，C-21）、30.9（t，C-15）、29.0（t，C-2）、27.9（q，C-23）、26.6（t，C-16）、24.5（t，C-11）、24.4（q，C-27）、21.9（q，C-30）、19.6（t，C-6）、18.0（q，C-29）、17.9（q，C-26）、26.3（q，C-24）、16.6（q，C-25）。上述1H NMR、13C NMR譜數(shù)據(jù)和文獻(xiàn)報(bào)道［7］對(duì)照，鑒定為熊果酸（Ursolic acid）。

化合物[STHZ]8[STBZ]：白色粉末（甲醇）。mp.254～256 ℃。IR（KBr）：3530～3260 cm-1、2940 cm-1、2866 cm-1、1644 cm-1、1463 cm-1、1378 cm-1、1106～1050 cm-1、806 cm-1。與胡蘿卜苷對(duì)照品［6］在不同系統(tǒng)中展開(kāi)，Rf值和顯色現(xiàn)象相同，故鑒定為胡蘿卜苷（Daucosterol）。

化合物[STHZ]9[STBZ]：白色粉末（甲醇）。10%硫酸乙醇顯藍(lán)色；mp.235.7～237.9 ℃；IR（KBr） cm-1：3451、2926、2856、1700、1456、1387、1050，顯示有羥基（3450cm-1）、羰基（1700cm-1）；1H NMR（400 MHz，CDCl3）δ H：5.24（1H，t，J=3.4Hz，H-12）、3.34（1H，dd，J=14.3Hz，7.2Hz，H-3）、2.97（1H，d，J=9.6Hz，H-19）、1.53（3H，H-27）、1.34（3H，H-23）、1.11（3H，H-25）、1.05（3H，H-30）、0.98（3H，H-24）、0.89（3H，H-29）、0.83（3H，H-26）；13C NMR（100MHz，CDCl3）δ C：181.6（s，C-28）、139.6（s，C-13）、124.7（d，C-12）、84.5（d，C-3）、58.7（d，C-5）、54.3（d，C-18）、48.6（s，C-17）、48.7（d，C-9）、43.4（s，C-14）、39.3（s，C-8）、40.4（s，C-10）、40.7（d，C-19）、40.9（d，C-20）、38.2（t，C-22）、40.7（s，C-4）、34.3（t，C-7）、48.3（t，C-1）、31.9（t，C-21）、29.3（t，C-15）、69.9（d，C-2）、31.9（q，C-23）、24.5（t，C-16）、25.4（t，C-11）、29.9（q，C-27）、21.9（q，C-30）、19.6（t，C-6）、17.5（q，C-29）、17.8（q，C-26）、17.9（q，C-24）、18.0（q，C-25）。上述1H NMR、13C NMR譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［8］報(bào)道對(duì)照，鑒定為2α-羥基-熊果酸（2α-hydroxyl- ursolic acid）。

化合物[STHZ]10[STBZ]：白色脂狀固體（乙酸乙酯）。10%硫酸乙醇顯紫色；mp.56～57 ℃；IR（KBr） cm-1：2927、2854、1731、1455，顯示有羰基（1731cm-1）；1H NMR（500 MHz，CDCl3）δ H：5.17（1H，t，J=3.5Hz，H-12）、4.55（1H，dd，J=9.0、6.0Hz，H-3α）、1.02、1.01、0.98、0.93、0.91、0.85、0.83（各3H，s，H-30、29、27、26、25、24、23），2.30（2H，t，J=7.2Hz，H-2′）、0.85（3H，t，J=7.0Hz，H-30′）；13C NMR（125 MHz，CDCl3）δ C：38.6（t，C-1）、23.9（t，C-2）、80.6（d，C-3）、36.8（s，C-4）、55.7（d，C-5）、18.6（t，C-6）、32.5（t，C-7）、40.0（s，C-8）、47.8（d，C-9）、36.9（s，C-10）、23.5（t，C-11）、121.6（d，C-12）、145.5（s，C-13）、41.9（s，C-14）、26.0（t，C-15）、27.0（t，C-16）、32.9（s，C-17）、47.8（d，C-18）、47.0（t，C-19）、31.0（s，C-20）、34.9（t，C-21）、37.0（t，C-22）、28.0（q，C-23）、16.9（q，C-24）、15.6（q，C-25）、16.8（q，C-26）、26.1（q，C-27）、28.5（q，C-28）、33.5（q，C-29）、23.0（q，C-30），棕櫚?；?C： 173.5（s，C-1′）、35.0（t，C-2′）、25.4（t，C-3′）、29.0～30.0（s，C-4′～C-13′）、31.8（t，C-14′）、22.9（t，C-15′）、14.5（q，C-16′），上述1H NMR、13C NMR譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)報(bào)道［9］項(xiàng)對(duì)照，鑒定為β-香樹(shù)脂醇棕櫚酸酯（β-Amyrin palmitate）。

化合物[STHZ]11[STBZ]：白色脂狀固體（甲醇）。mp.114～116 ℃；10%硫酸乙醇顯紫色；IR（KBr） cm-1：3458、2923、1730、1465，顯示有羰基（3458cm-1）、羥基有飽和烴基（2923 cm-1、2852cm-1）、羰基（1731cm-1）；1H NMR（500 MHz，CDCl3）δ H：5.10（1H，t，J=3.6Hz，H-12）、4.81（1H，dd，J=6.4、9.0Hz，H-3α）、0.96（3H，d，J=4.5Hz，H-30）、0.92（3H，d，J=5.5Hz，H-29）、1.05、1.02、0.85、0.87、0.80（各3H，s，H-27、26、24、23、25）、2.31（2H，t，J=7.1Hz，H-2′）、0.85（3H，t，J=7.0Hz，H-30′）；13C NMR（125 MHz，CDCl3）δ C：38.7（t，C-1）、26.0（t，C-2）、79.2（d，C-3）、38.5（s，C-4）、55.2（d，C-5）、18.0（t，C-6）、32.9（t，C-7）、39.9（s，C-8）、47.6（d，C-9）、36.7（s，C-10）、23.6（t，C-11）、124.2（d，C-12）、139.6（s，C-13）、42.4（s，C-14）、28.5（t，C-15）、26.7（t，C-16）、33.7（s，C-17）、59.0（d，C-18）、39.5（d，C-19）、39.6（d，C-20）、31.0（t，C-21）、41.7（t，C-22）、28.2（q，C-23）、16.8（q，C-24）、15.8（q，C-25）、17.0（q，C-26）、23.1（q，C-27）、28.5（q，C-28）、17.7（q，C-29）、21.6（q，C-30），棕櫚?；?C：173.6（s，C-1′）、34.7（t，C-2′）、25.1（t，C-3′）、29.2～29.5（s，C-4′～C-13′）、31.7（t，C-14′）、22.8（t，C-15′）、14.1（q，C-16′）。以上1H NMR、13C NMR譜數(shù)據(jù)和文獻(xiàn)報(bào)道［10］對(duì)照，鑒定為α-香樹(shù)脂醇棕櫚酸酯（α-Amyrin palmitate）。

化合物[STHZ]12[STBZ]：白色粉末（環(huán)己烷-乙酸乙酯）。mp.142～144 ℃；IR（KBr） cm-1：3450、2928、2857、1645、1460、1385、1250、977，顯示分子中有羥基（3450 cm-1）、雙鍵（1645 cm-1、1460 cm-1）等官能團(tuán)；1H NMR（500 MHz，CDCl3）δ H：0.76、0.80、0.86、0.90、0.94、1.01、1.07（8×3H，s）、3.23（1H，dd，J=11.4，4.4Hz，H-3）、5.15（1H，t，J=6.0Hz，H-12）；13C NMR（125 MHz，CDCl3）δ C：39.5（t，C-1）、27.7（t，C-2）、79.9（d，C-3）、39.1（s，C-4）、55.9（d，C-5）、19.7（t，C-6）、33.6（t，C-7）、40.4（s，C-8）、48.7（d，C-9）、37.9（s，C-10）、24.6（t，C-11）、125.0（d，C-12）、140.7（s，C-13）、42.9（s，C-14）、27.0（t，C-15）、27.8（t，C-16）、33.9（s，C-17）、48.1（d，C-18）、47.7（t，C-19）、31.9（s，C-20）、35.1（t，C-21）、37.8（t，C-22）、29.0（q，C-23）、16.5（q，C-24）、17.5（q，C-25）、17.8（q，C-26）、24.7（q，C-27）、29.5（q，C-28）、34.3（q，C-29）、24.3（q，C-30）。上述1H-NMＲ、13C NMＲ譜數(shù)據(jù)文獻(xiàn)［11］對(duì)照，鑒定為β-香樹(shù)脂醇（β-Amyrin）。

4 討論

作者應(yīng)用多種色譜法對(duì)栽培滇龍膽花的化學(xué)成分進(jìn)行了系統(tǒng)的分離制備， 并結(jié)合多種波譜法鑒定了12個(gè)化合物，主要為五環(huán)三萜類化合物，其中分離純化得到單體化合物量最大為烏蘇烷型三萜，即熊果酸（化合物[STHZ]7[STBZ]）和2α-羥基-熊果酸（化合物[STHZ]9[STBZ]）?；衔颷STHZ]1～6、8～12[STBZ]均為首次從龍膽花中分離得到。

文獻(xiàn)［12］報(bào)道，熊果酸有較強(qiáng)的抑菌抗炎作用，可能是龍膽花主要有效成分之一。但人們?nèi)云毡檎J(rèn)為龍膽苦苷是龍膽花發(fā)揮療效的最主要物質(zhì)基礎(chǔ)，且在含量測(cè)定的文獻(xiàn)［13-14］報(bào)道龍膽花中含有一定量的龍膽苦苷，但在其化學(xué)成分研究中均未分離得到該成分。經(jīng)查閱龍膽苦苷穩(wěn)定性相關(guān)文獻(xiàn)，李小芳等［15］發(fā)現(xiàn)長(zhǎng)時(shí)間高溫度提取不利于龍膽苦苷的穩(wěn)定性，酒龍膽在“100 ℃，10 min”炮制條件下龍膽苦苷的含量最高，而本實(shí)驗(yàn)采用“95%乙醇加熱回流提取2次，每次1 h”的提取方法，高溫提取時(shí)間遠(yuǎn)超文獻(xiàn)報(bào)道最佳時(shí)間的12倍，是否因長(zhǎng)時(shí)間加熱回流導(dǎo)致本實(shí)驗(yàn)最終未分離得到龍膽苦苷有待進(jìn)一步深入研究。

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（收稿日期：2022-09-29 編輯：陶希睿）