孟祥紹,黨斌*,張文剛,張杰,董海宴,白卡
1. 青海大學(xué)農(nóng)林科學(xué)院/青海省農(nóng)林科學(xué)院,青海省青藏高原農(nóng)產(chǎn)品加工重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(西寧 810016);2. 玉樹藏族自治州農(nóng)牧業(yè)綜合服務(wù)中心(玉樹 815000);3. 玉樹市牧女工貿(mào)有限公司(玉樹 815000)
蕁麻,俗稱藿麻。蕁麻全草可以入藥,其味苦、辛,性溫,具有祛風(fēng)定驚、消食通便之功效,對風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、高血壓、消化不良都有很好效果[1-4]。蕁麻主要分布在我國的青海、西藏、云南等地[5]。研究報道表明,新鮮蕁麻葉含有豐富的酚類化合物[6-7]、蛋白質(zhì)及膳食纖維[8],同時也是鈣、鐵、鎂、錳等礦物質(zhì)的良好來源[9]。
在我國部分地區(qū),新鮮的蕁麻嫩葉有作為蔬菜食用的傳統(tǒng)[10]。但是新鮮蕁麻含水量高,易腐敗變質(zhì),冬季經(jīng)常將蕁麻葉干燥后儲存食用。因此干燥技術(shù)是提升其經(jīng)濟(jì)價值的重要手段。但是不同的干燥方法會影響蕁麻葉的品質(zhì)[11],常用的蕁麻葉干燥方式為曬干[12],但該方法會導(dǎo)致葉片顏色褐變和部分營養(yǎng)素?fù)p失[13]。因此,篩選適宜于保留蕁麻葉中營養(yǎng)品質(zhì)的干燥方式,是延長蕁麻葉保質(zhì)期、引導(dǎo)蕁麻葉正確消費(fèi)和加工利用的重要手段。試驗(yàn)通過比較鮮樣(RAW)和曬干(SD)、真空干燥(VD)、微波干燥(MD)、炒制干燥(FD)、真空冷凍干燥(VFD)和熱風(fēng)干燥(HAD)等6種不同干燥方式處理后蕁麻的基本營養(yǎng)功能成分的差異,以期篩選出適合蕁麻葉干燥的方式,為蕁麻葉的儲存和加工利用提供科學(xué)依據(jù)。
新鮮蕁麻葉:2022年7月份采摘于青海省玉樹州,玉樹市牧女工貿(mào)有限公司提供。
甲醇、乙醇、正丁醇、丙酮、乙酸乙酯、亞硝酸鈉、硝酸鋁、檸檬酸(分析純,天津市百世化工有限公司);甲酸、鹽酸、硝酸、硫酸(優(yōu)級純,天津市津科精細(xì)化工研究所);葡萄糖、沒食子酸、蘆?。兌取?8.0%,上海源葉生物科技有限公司);福林-酚試劑(北京索萊寶科技有限公司)。試驗(yàn)用水均為去離子水。
電子天平(AL204型,梅特勒-托利多儀器有限公司);超聲波清洗器(KQ-500DE型,昆山市超聲波儀器有限公司);低速冷凍離心機(jī)(DL-5M型,湖南長沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司);鼓風(fēng)干燥箱(DHG-9240A型,上海一恒科學(xué)儀器有限公司);旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(Retavapor R-215型,瑞士布奇有限公司);真空冷凍干燥機(jī)(Alpha 1-4 LDplus型,北京博勱行儀器有限公司);氨基酸分析儀(S433D型,德國賽卡姆公司。
1.3.1 蕁麻干燥工藝處理
曬干:室外溫度31.5±2 ℃,干燥處理3.5 h。真空干燥:溫度55 ℃,真空度-0.08 MPa,干燥處理3 h。微波干燥:微波功率480 W,干燥處理8 min。炒制:炒茶鍋溫度90 ℃,炒制時間20 min,炒制結(jié)束后均勻攤開室內(nèi)陰涼通風(fēng)處進(jìn)一步晾干。真空冷凍干燥:溫度-49 ℃,干燥處理16 h。熱風(fēng)干燥:空氣流量1.5 m/s,溫度55 ℃,干燥處理4 h。試驗(yàn)工藝參數(shù)在前期試驗(yàn)優(yōu)化的基礎(chǔ)上進(jìn)行設(shè)定。所有樣品干燥后粉碎成粉末,均保持冷凍(-18 ℃)條件下儲存。
1.3.2 指標(biāo)測定
1.3.2.1 蕁麻營養(yǎng)成分測定
水分含量測定:采用GB 5009.3—2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中水分的測定》中的直接干燥法;灰分含量測定:采用GB 5009.4—2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中灰分的測定》中的食品中總灰分的測定法;脂肪含量測定:采用GB/T 5009.6—2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中脂肪的測定》中的索氏抽提法測定;粗纖維含量測定:采用DB12/T 963—2020《植源性農(nóng)產(chǎn)品中粗纖維的測定 濾袋法》進(jìn)行測定;蛋白質(zhì)含量測定:采用GB 5009.5—2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中蛋白質(zhì)的測定》中的凱氏定氮法;氨基酸含量測定:采用GB 5009.124—2016《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中氨基酸的測定》中的方法測定。
1.3.2.2 蕁麻功能成分測定
多糖的測定根據(jù)文獻(xiàn)[14],采用苯酚硫酸法,以葡萄糖為標(biāo)準(zhǔn)品,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算多糖含量。多酚含量的測定根據(jù)文獻(xiàn)[15],采用Folin-Ciocalteu法,以沒食子酸為標(biāo)準(zhǔn)品制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算多酚含量。黃酮含量的測定根據(jù)文獻(xiàn)[16],采用硝酸鋁比色法,以蘆丁為標(biāo)準(zhǔn)品制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算黃酮含量。
1.3.2.3 氨基酸品質(zhì)評價
氨基酸品質(zhì)的評價參照1973年世界衛(wèi)生組織/聯(lián)合國糧食及農(nóng)業(yè)組織(WHO/FAO)建議的理想蛋白質(zhì)氨基酸組成模式和中國預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院營養(yǎng)與食品衛(wèi)生研究所提供的雞蛋蛋白模式,分別評價不同干燥方式蕁麻蛋白質(zhì)的必需氨基酸含量(EAA)、氨基酸比值(RAA)、氨基酸比值系數(shù)(RC)、氨基酸比值系數(shù)分(SRC)、氨基酸評分(AAS)、生物價(BV)、必需氨基酸指數(shù)(EAAI)、必需氨基酸占氨基酸總量的百分比(E/T)。
1.3.2.4 體外抗氧化活性測定
DPPH自由基清除能力測定根據(jù)文獻(xiàn)[17]稍作修改。取1 mL樣品液,加入4.5 mL DPPH工作液(0.1 mmol/L),搖勻后室溫避光放置30 min,測定517 nm波長處的吸光度,重復(fù)測定3次。
ABTS自由基清除能力測定根據(jù)文獻(xiàn)[18]稍作修改。取50 μL樣品液,加入4.5 mL ABTS工作液,搖勻后室溫避光放置30 min,測定593 nm波長處的吸光度,重復(fù)測3次。
FRAP還原能力測定根據(jù)文獻(xiàn)[19]稍作修改。取200 μL樣品液,加入4 mL FRAP工作液,搖勻后室溫避光放置30 min,測定734 nm波長處的吸光度,重復(fù)測定3次。
1.3.3 數(shù)據(jù)分析
試驗(yàn)數(shù)據(jù)均為3次重復(fù)平均值。采用Microsoft Excel 2010、Origin 2021和SPSS 26軟件處理,應(yīng)用方差分析與鄧肯氏法進(jìn)行顯著性分析,以P<0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義,試驗(yàn)結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。
由表1可知,除了炒制以外,其他干燥方式均顯著提高蕁麻葉中粗纖維含量(P<0.05),其中微波干燥蕁麻葉中粗纖維含量最高。微波干燥和熱風(fēng)干燥顯著提高蕁麻葉中的脂肪含量。真空干燥和炒制顯著提高蕁麻葉中多糖含量(P<0.05),其原因?yàn)樵诟邷睾驼婵諚l件下,糖類物質(zhì)無法被氧化,而溫度升高,干燥時間都相對較短,糖類物質(zhì)損失都比較少[20]。此外,不同干燥方式均使蕁麻葉蛋白含量降低,這是因?yàn)楦稍锕に嚳赡軙Φ鞍捉Y(jié)構(gòu)和蛋白分解造成影響[21],表現(xiàn)出干燥蕁麻葉蛋白質(zhì)含量低于鮮樣。其中,熱風(fēng)干燥對其蛋白質(zhì)保留率最高,為95.92%,其次為真空冷凍干燥(94.18%)和微波干燥方式(92.69%)。一般日推薦值(DV)為6%~9%被認(rèn)為是特定營養(yǎng)素的一種來源,11%~19%被認(rèn)為是一種良好來源,20%以上表示為豐富來源[11]。因此,試驗(yàn)表明新鮮或干制的蕁麻葉(%DV=6.04~9.84)可作為蛋白質(zhì)的重要來源。
表1 不同干燥方式蕁麻的基本營養(yǎng)功能成分含量 單位:g/100 g干基
2.2.1 不同干燥方式蕁麻葉中酚類和黃酮物質(zhì)含量分析
由圖1和圖2可知,不同干燥方式蕁麻葉酚類和黃酮物質(zhì)均有顯著性差異(P<0.05)。蕁麻葉中游離多酚、結(jié)合多酚含量占總酚的含量的6.16%和93.84%,游離黃酮、結(jié)合黃酮占總黃酮含量的33.14%和66.86%,說明蕁麻葉的多酚及黃酮均以結(jié)合態(tài)存在。其中,真空干燥蕁麻葉總酚含量達(dá)54.25 mg/g,其原因是多酚類化合物屬于生物活性物質(zhì),化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定,在受到高溫、O2和光照等條件下都易分解,但在適當(dāng)加熱的過程中,酚類的前體酚醛分子的非酶轉(zhuǎn)化導(dǎo)致酚類物質(zhì)的生成[24],在干燥過程中氧氣對總酚含量的變化起著重要作用[25],而真空干燥在無氧狀態(tài)下,酚類物質(zhì)氧化損失少,因此真空干燥得到的蕁麻葉總酚含量最高??傸S酮含量最高的干燥方式為微波干燥,其次為曬干,最低的為炒制,美拉德反應(yīng)會生成類黃酮化合物[26],王國錠等[27]認(rèn)為微波干燥過程中美拉德反應(yīng)程度高,試驗(yàn)結(jié)果與其一致。
圖1 不同干燥方式蕁麻葉多酚含量分析
圖2 不同干燥方式蕁麻葉黃酮含量分析
2.2.2 不同干燥方式蕁麻葉體外抗氧化活性分析
由圖3可知,真空干燥和炒制均有較高的DPPH自由基清除能力,熱風(fēng)干燥的DPPH自由基清除能力最低,其原因?yàn)槭n麻多糖有較強(qiáng)的DPPH自由基清除能力[28-29],且其含量越高,清除能力越強(qiáng)。由圖4和圖5可知,經(jīng)不同干燥方式處理后蕁麻葉的FRAP還原能力提高,F(xiàn)RAP還原能力變化趨勢與DPPH自由基清除能力變化趨勢基本一致,真空干燥FRAP還原能力最高其次為炒制,不同干燥方式蕁麻葉ABTS自由基清除能力最強(qiáng)的為真空干燥,其次為炒制,且顯著(P<0.05)高于新鮮蕁麻,秦丹丹等[30]研究發(fā)現(xiàn)真空干燥的無花果抗氧化活性最高,跟試驗(yàn)結(jié)果一致??梢?,經(jīng)過干燥處理后能提高蕁麻葉的抗氧化能力。且真空干燥蕁麻葉的DPPH自由基清除能力、FRAP還原能力、ABTS自由基清除能力均最高,因此,真空干燥可作為開發(fā)高抗氧化活性蕁麻產(chǎn)品的干燥方式。
圖3 不同干燥方式蕁麻葉DPPH自由基清除能力
圖4 不同干燥方式蕁麻葉FRAP還原能力
圖5 不同干燥方式蕁麻葉ABTS自由基清除能力
2.2.3 不同干燥方式蕁麻葉的必需氨基酸組成
由表2可知,除了蛋氨酸+胱氨酸外,不同干燥方式的蕁麻葉中其余氨基酸含量變異系數(shù)均較小。每克供試蕁麻葉蛋白中必需氨基酸總和為454.43 mg。與新鮮蕁麻葉相比,不同加工方式處理后蕁麻葉中必需氨基酸含量均有不同程度降低。其中,曬干、真空干燥、微波干燥、炒制、真空冷凍干燥和熱風(fēng)干燥處理后的蕁麻葉中必需氨基酸總和分別為464.55,452.59,453.15,456.43,453.83和446.05 mg,均低于新鮮蕁麻葉中必需氨基酸總和(467.22 mg)。
表2 不同干燥方式蕁麻葉中必需氨基酸組成
由圖6可知,提主成分1(PC1)為44.0%,主成分2(PC2)為24.7%,主成分3(PC3)為12.7%,累計可解釋變量81.4%的信息。由表3可知:在PC1中,F(xiàn)RAP、DPPH、脂肪和多糖具有較大的系數(shù)值,構(gòu)成PC1方差變異的主要因素;在PC2中,酪氨酸+苯丙氨酸、纖維和蛋氨酸+胱氨酸具有較大的系數(shù)值,構(gòu)成PC2方差變異的主要因素;在PC3中,灰分、纈氨酸和總多酚有著較大的系數(shù)值,構(gòu)成PC3方差變異的主要因素。
圖6 不同干燥方式蕁麻葉主成分分析載荷得分圖
表3 主成分分析的載荷矩陣
由表4可知,根據(jù)得分情況對其進(jìn)行排序,得分越高,相應(yīng)的干燥蕁麻品質(zhì)越好。以第1主成分排序,炒制后蕁麻品質(zhì)較好;以第2主成分排序,真空干燥后蕁麻品質(zhì)較好;以第3主成分排序,曬干后蕁麻品質(zhì)較好。由于各主成分的方差貢獻(xiàn)率不同,評價時以各個主成分的貢獻(xiàn)率為權(quán)重,由主成分得分和對應(yīng)的權(quán)重相乘求和構(gòu)建綜合評價函數(shù):F=0.440 02F1+0.246 59F2+0.127 39F3。式中,F(xiàn)為每種不同干燥方式蕁麻葉品質(zhì)的綜合評價得分,綜合得分排在前3位的干燥方式依次是真空干燥、炒制、曬干,且均高于鮮樣。
表4 不同干燥方式的主成分得分
在蕁麻葉的干制加工過程中,不同干燥方式對蕁麻葉中的基本營養(yǎng)功能成分及體外抗氧化活性均存在著顯著差異(P<0.05)。真空干燥的多糖、總多酚明顯高于鮮樣和其他干燥方式,且真空干燥體外抗氧化活性均顯著高于鮮樣和其他干燥方式。與微波干燥相比,其營養(yǎng)品質(zhì)損失較少;與曬干相比,真空干燥不受天氣和環(huán)境的影響,且品質(zhì)可控;與熱風(fēng)干燥和炒制相比,能夠克服熱風(fēng)干燥和炒制的不均勻性,提高干燥后蕁麻的品質(zhì),減少營養(yǎng)損耗。利用主成分分析比較不同干燥條件下蕁麻的品質(zhì)差異,得到真空干燥綜合評分最高,說明其干制蕁麻葉品質(zhì)較好。綜合考慮蕁麻干燥效率和干燥品質(zhì),真空干燥效率高、蕁麻營養(yǎng)功能成分損失較小,更適于新鮮蕁麻的干燥。由于不同的干燥方式對蕁麻的營養(yǎng)功能成分影響不盡相同,因此,在實(shí)際生產(chǎn)中,可以根據(jù)干制蕁麻的用途,選擇適合蕁麻的干燥方式。