趙婭通，吳 丹，周會明，梁 婷，沈清林，谷朝政，陳雪雯，寧亞娟

（滇西科技師范學(xué)院生物技術(shù)與工程學(xué)院 云南臨滄 677000）

星孢寄生菇隸屬于真菌門（Eumycota）、擔(dān)子菌綱（Basidiomycota）、傘菌目（Agaricales）、離褶傘科（Lyophyllaceae）、寄生菇屬（Asterophora），主要分布于我國的云南、貴州、四川等地區(qū)[1]。該菇是一種兼有寄生與腐生的菌寄生菇，有著獨(dú)特的營養(yǎng)方式。在人工培養(yǎng)基上，星孢寄生菇的菌絲體與一般食用菌相比具有生長速度快、出菇迅速的特點(diǎn)[2]。因此，研究其出菇機(jī)制與遺傳學(xué)原理對推動(dòng)名貴食藥用真菌人工栽培進(jìn)程具有重要意義。

適宜的環(huán)境因子是眾多野生菇類得以出菇的必備條件，而個(gè)體發(fā)育是菇類在環(huán)境因子影響下遺傳基因的外在表達(dá)，也是菇類對環(huán)境因子的最終響應(yīng)。然而，目前絕大多數(shù)野生菇類仍無法有效地人工栽培，其子實(shí)體發(fā)育機(jī)制也難以解釋，馴化模式仍受內(nèi)在因素與環(huán)境因素的影響[3]。筆者以獨(dú)特的星孢寄生菇為研究對象，探究其個(gè)體發(fā)育與可控環(huán)境因子的關(guān)系，對于闡釋其出菇機(jī)制、遺傳學(xué)原理及其應(yīng)用具有重要的意義。

目前，國內(nèi)外有關(guān)星孢寄生菇的研究主要集中于形態(tài)學(xué)[4]、種質(zhì)資源[5-6]、親緣關(guān)系[7]等方面。王建東等[2]對該菇個(gè)體發(fā)育所需的基礎(chǔ)培養(yǎng)基、碳源、氮源、溫度以及pH 行了初步篩選，但除此之外，關(guān)于該菇的生理學(xué)研究未見其他報(bào)道，導(dǎo)致野生星孢寄生菇的開發(fā)與利用嚴(yán)重滯后，因此有必要對該菇進(jìn)行更深入的研究。

環(huán)境因子能夠影響菇類的生理代謝過程[8]，從而影響其生長發(fā)育全過程。因此，厘清不同環(huán)境因子脅迫下菇類個(gè)體的發(fā)育規(guī)律與特點(diǎn)，是野生菇類人工馴化的基礎(chǔ)[9]。與此同時(shí)，隨著人們生活水平的提高，菇類的消費(fèi)需求呈快速增長趨勢，而野生菇類馴化的速度卻緩慢滯后[10]，這種矛盾日益凸顯。因此，探究該菇個(gè)體發(fā)育對可控環(huán)境因子的響應(yīng)對突破野生菇類資源人工化難度大這一瓶頸意義重大。

筆者的研究從星孢寄生菇菌種的活化入手，重點(diǎn)探究不同溫度、瓊脂濃度、酸堿度、氧氣含量、光照時(shí)長等可控環(huán)境因子單因素及其正交組合對該菇菌絲生長、原基分化及子實(shí)體發(fā)育的影響，旨在篩選該菇個(gè)體發(fā)育的最佳可控環(huán)境因子組合，厘清該菇生長發(fā)育過程中的主要影響因素，并為其進(jìn)一步開發(fā)與利用提供一定的理論參考。

1 材料和方法

1.1 材料

1.1.1 供試菌株 星孢寄生菇菌株YAASM4665由云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)與種質(zhì)資源研究所鑒定、提供及保存。

1.1.2 培養(yǎng)基 母種培養(yǎng)基（PDA）：馬鈴薯濃度（w，后同）20%、葡萄糖濃度2%、瓊脂濃度1.5%、蒸餾水1 L、pH 自然?；A(chǔ)培養(yǎng)基（PSA）：馬鈴薯濃度20%、蔗糖濃度2%、瓊脂濃度1.5%、蒸餾水1 L、pH 自然。

1.2 方法

1.2.1 培養(yǎng)基的制作 試驗(yàn)于2021 年5 月在滇西科技師范學(xué)院食用菌實(shí)訓(xùn)室內(nèi)進(jìn)行。馬鈴薯去皮、棄芽眼并清洗干凈，將其切成1 cm3的小塊，用蒸餾水對其煮沸10 min，并經(jīng)4 層紗布過濾后取濾液，再加入蔗糖和瓊脂，待上述藥品完全溶解后用蒸餾水定容，將培養(yǎng)基分裝于250 mL 的錐形瓶內(nèi)，在121 ℃下滅菌30 min。滅菌結(jié)束后，趁熱倒平板并將其放入自制的緩慢降溫容器中，以防止平板內(nèi)產(chǎn)生小水珠[11]。

1.2.2 菌種的活化、接菌、培養(yǎng)及測定 取4 ℃冰箱內(nèi)保存的菌株YAASM4665，將其置于培養(yǎng)室常溫下活化培養(yǎng)3～5 d。在無菌操作條件下，取黃豆大小的菌塊接種于母種培養(yǎng)基平板中央，將其25 ℃下倒置培養(yǎng)7 d，備用。用上述同樣的方法，將直徑為5 mm 的菌塊接入培養(yǎng)基平板中央，用保鮮膜密封，記錄菌絲萌發(fā)時(shí)間（d）、菌絲與子實(shí)體顏色、原基分化時(shí)間（d）。待同一因素下最大菌落直徑長到平板2/3 時(shí)，測定菌絲生長勢（“+++及以上”表示濃密健壯，“++”表示較濃密，“+”表示生長稀疏、“─”表示不生長）[12]、菌落直徑（mm）、生長速度（mm·d-1）[13]、原基分化數(shù)量（個(gè)·皿-1）、菌蓋直徑（mm）、菌柄 直 徑（mm）、菌柄長度（mm）以及子實(shí)體數(shù)量（個(gè)·皿-1）。

1.2.3 溫度試驗(yàn) 在基礎(chǔ)培養(yǎng)基平板上設(shè)置9 個(gè)梯度的5 ℃溫差（0、5、10、15、20、25、30、35、40 ℃）進(jìn)行初試。根據(jù)初試最佳溫度范圍設(shè)計(jì)2 ℃溫差試驗(yàn)。菌絲在遮光下培養(yǎng)，下同。

1.2.4 瓊脂濃度試驗(yàn) 通過控制瓊脂濃度來改變基礎(chǔ)培養(yǎng)基的含水量，設(shè)計(jì)瓊脂濃度為0.2%、0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%的7 個(gè)梯度試驗(yàn)。在菌絲生長最佳溫度下培養(yǎng)，下同。

1.2.5 pH 試驗(yàn) 使用1 mol·L-1HCl 溶液和1 mol·L-1NaOH 溶液調(diào)節(jié)基礎(chǔ)培養(yǎng)基的pH 值，設(shè)置19 個(gè)pH 梯度試驗(yàn)[14]，分別為4.0、4.5、5.0、5.2、5.4、5.6、5.8、6.0、6.2、6.4、6.6、6.8、7.0、7.5、8.0、8.5、9.0、9.5、10.0。在菌絲生長最佳瓊脂濃度下培養(yǎng)，下同。

1.2.6 氧氣含量試驗(yàn) 通過改變培養(yǎng)皿直徑的大小控制氧氣含量，設(shè)計(jì)培養(yǎng)皿直徑為60、70、90、100 mm 的4 種基礎(chǔ)培養(yǎng)基平板試驗(yàn)。在菌絲生長最佳pH 值下進(jìn)行培養(yǎng)，下同。

1.2.7 光照時(shí)長試驗(yàn) 在基礎(chǔ)培養(yǎng)基平板上，設(shè)置光照時(shí)間分別為0、12、24 h·d-1的3 組處理試驗(yàn)[15]。除氧氣試驗(yàn)外，上述研究培養(yǎng)皿直徑均為60 mm。

1.2.8 正交試驗(yàn) 以溫度、瓊脂濃度、pH、光照和含氧量5 個(gè)單因素進(jìn)行設(shè)計(jì)，分別以菌絲體生長速度（表1）、原基分化數(shù)量（表2）及子實(shí)體發(fā)育數(shù)量（表3）為指標(biāo)，進(jìn)行L16（45）正交試驗(yàn)。

表1 基于菌絲體生長速度的正交試驗(yàn)因素與水平表Table 1 The orthogonal test factors and levels based on mycelium growth rate

表2 基于原基分化數(shù)量的正交試驗(yàn)因素與水平Table 2 The orthogonal test factors and levels based on number of primordial differentiation

表3 基于子實(shí)體發(fā)育數(shù)量的正交試驗(yàn)因素與水平Table 3 The orthogonal test factors and levels based on number of fruiting body development

1.2.9 數(shù)據(jù)分析 所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)均為3 次重復(fù)，采用SPSS 22.0 軟件進(jìn)行處理分析[16]。

2 結(jié)果與分析

2.1 溫度對菌株YAASM4665生長發(fā)育的影響

2.1.1 5 ℃溫差試驗(yàn) 由表4 可知，當(dāng)溫度≤10 ℃或≥35 ℃時(shí)，該菇菌絲不萌發(fā)，而在15～30 ℃范圍內(nèi)，均能生長且為白色（圖1）。當(dāng)溫度為25 ℃時(shí)，其菌絲萌發(fā)時(shí)間最短，濃密健壯，菌落直徑最大，生長速度最快，達(dá)到（6.33±0.06）mm·d-1，與其他處理呈極顯著差異，而30 ℃處理其菌絲生長情況最差?？傊?，該菇菌絲生長受溫度的影響較大，25 ℃是該菇菌絲生長的最適溫度。

圖1 5 ℃溫度梯度下菌株YAASM4665 在PSA 平板中的培養(yǎng)情況Fig.1 The cultivation of bacterial strain YAASM4665 in PSA slab at 5 ℃temperature gradient

表4 5 ℃溫度梯度下菌絲體生長情況Table 4 The mycelium growth at 5 ℃temperature gradient

該菇在溫度為15～25 ℃范圍內(nèi)，原基分化與子實(shí)體均能正常發(fā)育，而溫度≤10 ℃或≥30 ℃時(shí)，該菇無法形成原基和子實(shí)體（表5）。當(dāng)溫度為25 ℃時(shí)，該菇的原基分化與子實(shí)體發(fā)育各項(xiàng)指標(biāo)綜合表現(xiàn)最佳，與其他處理均呈極顯著差異，而15 ℃處理該菇生長發(fā)育情況最差?？傊?，溫度較高或較低時(shí)，該菇的原基分化與子實(shí)體發(fā)育受到限制，25 ℃是該菇原基分化與子實(shí)體發(fā)育的最適溫度。

表5 5 ℃溫度梯度下原基分化與子實(shí)體發(fā)育情況Table 5 The primordial differentiation and fruiting body development at 5 ℃temperature gradient

2.1.2 2 ℃溫差試驗(yàn) 由表6 可知，在19～29 ℃范圍內(nèi)，該菇菌絲為白色且均能生長（圖2）。25 ℃的溫度處理下其菌絲生長情況各項(xiàng)參數(shù)表現(xiàn)最佳，該結(jié)果與5 ℃溫差試驗(yàn)結(jié)果相符。

圖2 2 ℃溫度梯度下菌株YAASM4665 在PSA 平板中的培養(yǎng)情況Fig.2 The cultivation of bacterial strain YAASM4665 in PSA slab at 2 ℃temperature gradient

表6 2 ℃溫度梯度下菌絲體生長情況Table 6 The mycelium growth at 2 ℃temperature gradient

由表7 可知，19～27 ℃是該菇原基分化與子實(shí)體發(fā)育正常進(jìn)行的溫度范圍，而溫度≥29 ℃時(shí)，該菇停止發(fā)育。在25 ℃的溫度處理下，該菇原基分化與子實(shí)體發(fā)育的各項(xiàng)指標(biāo)也表現(xiàn)最佳，與上述5 ℃溫差試驗(yàn)結(jié)果相符。

表7 2 ℃溫度梯度下原基分化與子實(shí)體發(fā)育情況Table 7 The primordial differentiation and fruiting body development at 2 ℃temperature gradient

2.2 瓊脂濃度對菌株YAASM4665 生長發(fā)育的影響

由表8 可知，在培養(yǎng)基瓊脂濃度0.2%～3.0%的范圍內(nèi)，該菇菌絲均能正常生長，呈白色，萌發(fā)時(shí)間均為2 d。當(dāng)瓊脂濃度為3.0%時(shí)，菌絲較濃密（圖3），菌落直徑最大，生長速度最快[（7.17±0.10）mm·d-1]，與其他處理呈極顯著差異，而瓊脂濃度為0.2%時(shí)，菌絲長勢稀疏，生長速度最慢[（5.51±0.10）mm·d-1]?？傊?，不同的培養(yǎng)基瓊脂濃度對該菇菌絲生長影響較大，3.0%是其菌絲生長最佳瓊脂濃度。

圖3 不同瓊脂濃度下菌株YAASM4665 在PSA平板中的培養(yǎng)情況Fig.3 The cultivation of bacterial strain YAASM4665 in PSA slab at different agarose gel concentration

表8 不同瓊脂濃度下菌絲體生長情況Table 8 The mycelium growth at different agarose gel concentration

由表9 可知，該菇在所有瓊脂濃度處理下均能正常生長發(fā)育，其中原基分化時(shí)間均為3 d。而瓊脂濃度為2.5%時(shí)，該菇的原基分化數(shù)量最多[（106±7.13）個(gè)·皿-1]，與其他處理相比，達(dá)到極顯著差異，而1.0%的瓊脂濃度處理，該菇原基分化情況最差。當(dāng)瓊脂濃度為1.5%時(shí)，該菇子實(shí)體呈灰白色，農(nóng)藝性狀綜合表現(xiàn)最佳，發(fā)育數(shù)量最多[（8.67±0.58）個(gè)·皿-1]，與其他處理呈顯著差異，而0.2%的瓊脂濃度處理，該菇子實(shí)體發(fā)育情況較差，數(shù)量最少。總之，培養(yǎng)基瓊脂濃度的大小影響該菇的生長發(fā)育情況，其原基分化與子實(shí)體發(fā)育的最適瓊脂濃度依次為2.5%、1.5%。

表9 不同瓊脂濃度下原基分化與子實(shí)體發(fā)育情況Table 9 The primordial differentiation and fruiting body development at different agarose gel concentration

2.3 pH值對菌株YAASM4665生長發(fā)育的影響

由表10 可知，在培養(yǎng)基pH 4.0～10.0 的范圍內(nèi)，該菇菌絲均能正常生長，萌發(fā)時(shí)間均為2 d（圖4）。當(dāng)培養(yǎng)基pH 6.6 時(shí)，該菇菌絲較濃密，菌落直徑最大，生長速度最快[（6.89±0.15）mm·d-1]，除與培養(yǎng)基pH 6.8 的處理相比差異不顯著外，與其他處理呈極顯著差異。而培養(yǎng)基pH 4.0 時(shí)，該菇菌落直徑最小，生長速度最慢[（4.48±0.54）mm·d-1]?？傊?，該菇在不同酸堿度的培養(yǎng)基上菌絲生長差異較大且最佳pH 為6.6～6.8。

圖4 不同pH 值下菌株YAASM4665 在PSA 平板中的培養(yǎng)情況Fig.4 The cultivation of bacterial strain YAASM 4665 in PSA slab at different pH

表10 不同pH 值下菌絲體生長情況Table 10 The mycelium growth at different pH

在培養(yǎng)基pH 4.5～10.0 的范圍內(nèi)，該菇均能生長發(fā)育（表11）。當(dāng)培養(yǎng)基pH 4.0 時(shí)，該菇無法形成原基，pH 10.0 時(shí)，子實(shí)體發(fā)育情況最差。在pH 5.4 的培養(yǎng)基上，該菇原基分化時(shí)間短（3 d），數(shù)量最多[（214±13.04）個(gè)·皿-1]，與其他處理呈極顯著差異。當(dāng)培養(yǎng)基pH 為6.2 時(shí)，該菇子實(shí)體呈乳白色，農(nóng)藝性狀綜合表現(xiàn)較佳，發(fā)育數(shù)量最多[（8.00±0.94）個(gè)·皿-1]，除與培養(yǎng)基pH 6.0、6.4、6.6 的處理相比差異不顯著外，與其他處理呈極顯著差異。總之，該菇的生長發(fā)育受酸堿度影響較大，其原基分化與子實(shí)體發(fā)育的最適pH 值依次為5.4、6.0～6.6。

表11 不同pH 值下原基分化與子實(shí)體發(fā)育情況Table 11 The primordial differentiation and fruiting body development at different pH

2.4 氧氣對菌株YAASM4665生長發(fā)育的影響

由表12 可知，該菇在所有型號的培養(yǎng)皿平板上均能生長，菌絲呈白色（圖5），且萌發(fā)時(shí)間均為1 d。然而，隨著培養(yǎng)皿直徑的增大，該菇菌落的生長勢逐漸減弱，其菌絲生長速度在各處理下無顯著差異。因此，氧氣對菌絲生長的影響較小。

圖5 不同含氧量下菌株YAASM4665 在PSA 平板中的培養(yǎng)情況Fig.5 The cultivation of bacterial strain YAASM4665 in PSA slab at different oxygen content

表12 不同含氧量下菌絲體生長情況Table 12 The mycelium growth at different oxygen content

由表13 可知，該菇在各種型號的培養(yǎng)皿處理下均能生長發(fā)育，且原基分化時(shí)間均為2 d，子實(shí)體呈胡粉色。在培養(yǎng)皿直徑為70 mm 的條件下，該菇的原基分化數(shù)量最多[（19.67±0.58）個(gè)·皿-1]，且與其他處理呈極顯著差異。而培養(yǎng)皿直徑為100 mm時(shí)，該菇的子實(shí)體農(nóng)藝性狀綜合表現(xiàn)較佳，發(fā)育數(shù)量最多[（4.33±0.58）個(gè)·皿-1]，并且與培養(yǎng)皿直徑為60 mm 的處理相比達(dá)到顯著差異?？傊黝愋吞柵囵B(yǎng)皿對該菇生長發(fā)育具有一定程度的影響，其原基分化與子實(shí)體發(fā)育的最適培養(yǎng)皿直徑依次為70、70～100 mm。

表13 不同含氧量下原基分化與子實(shí)體發(fā)育情況Table 13 The primordial differentiation and fruiting body development at different oxygen content

2.5 光照時(shí)長對菌株YAASM4665 生長發(fā)育的影響

由表14 可知，該菇菌絲在不同光照時(shí)長處理下均能生長，呈白色（圖6），且萌發(fā)時(shí)間均為2 d。在0 h·d-1的光照處理下該菇菌絲生長濃密健壯，菌落直徑最大，菌絲生長速度最快[（7.15±0.25）mm·d-1]，與24 h·d-1的光照時(shí)長處理相比差異顯著，但與12 h·d-1的光照時(shí)長處理相比差異不顯著。總之，黑暗處理組下該菇菌絲生長情況優(yōu)于光照組。

圖6 不同光照時(shí)長的菌株YAASM4665 在PSA 平板中的培養(yǎng)情況Fig.6 The cultivation of bacterial strain YAASM4665 in PSA slab at different light time

表14 不同光照時(shí)長的菌絲體生長情況Table 14 The mycelium growth at different light time

該菇在不同光照時(shí)長下均能生長發(fā)育，其原基分化時(shí)間均為3 d（表15）。在12 h·d-1的光照下，該菇的原基分化數(shù)量最多[（16±3.14）個(gè)·皿-1]，與其他處理相比有極顯著差異，而24 h·d-1的光照處理下原基分化情況最差。當(dāng)光照時(shí)間為24 h·d-1時(shí)，該菇的子實(shí)體呈生成色，其農(nóng)藝性狀綜合表現(xiàn)最好，發(fā)育數(shù)量最多[（7.75±0.71）個(gè)·皿-1]，與12 h·d-1的光照處理相比差異不顯著，與0 h·d-1的光照時(shí)長處理呈極顯著差異?？傊?，適宜的散射光有利于該菇原基的分化與子實(shí)體發(fā)育，其最適光照時(shí)間依次為12、12～24 h·d-1。

表15 不同光照時(shí)間下原基分化與子實(shí)體發(fā)育情況Table 15 The primordial differentiation and fruiting body development at different light time

2.6 正交試驗(yàn)

2.6.1 以菌絲體生長速度為指標(biāo)的正交試驗(yàn) 由表16 可知，在16 種正交組合下，該菇菌絲呈白色且均能生長。在組合8 上菌絲萌發(fā)時(shí)間短，菌絲濃密健壯，生長速度最快[（9.72±0.38）mm·d-1]（表17），與其他處理相比呈極顯著差異，而組合9 和11 上菌絲生長情況最差。

表16 不同正交組合下菌絲體生長情況Table 16 The mycelium growth at different orthogonal combination

表17 以菌絲體生長速度為指標(biāo)的極差分析Table 17 The range analysis based on mycelium growth rate

極差分析表明，各列極差大小順序?yàn)镽1＞R3＞R2＞R4＞R5，試驗(yàn)因素的主次順序?yàn)锳＞C＞B＞D＞E，即瓊脂濃度對菌絲生長速度影響最大，其最優(yōu)組合為 A1B4C3D2E4，該組合與顯著性分析結(jié)果（A2B4C3D2E1）不一致。經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證，在組合A2B4C3D2E1培養(yǎng)基上，該菇菌絲生長速度最快[（9.02±0.18）mm·d-1]。因此，最優(yōu)組合為瓊脂濃度2%、pH 7.0、溫度25 ℃、培養(yǎng)皿直徑70 mm、0 h·d-1光照。

2.6.2 以原基數(shù)量為指標(biāo)的正交試驗(yàn) 由表18 可知，在16 種正交組合條件下，該菇原基均能分化，在組合8 條件下，該菇原基分化數(shù)量最多[（17.67±1.06）個(gè)·皿-1]，與其他處理相比有極顯著差異。

表18 以原基數(shù)量為指標(biāo)的極差分析Table 18 The range analysis based on number of primordial

極差分析表明，各列極差大小順序?yàn)镽1＞R2＞R5＞R4＞R3，試驗(yàn)因素的主次順序?yàn)锳＞B＞E＞D＞C，即瓊脂濃度對原基分化影響最大，其最優(yōu)組合為A2B3C3D1E1，該組合與顯著性分析結(jié)果（A2B4C3D2E1）不一致。經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證，在組合A2B3C3D1E1培養(yǎng)基上，該菇的原基分化時(shí)間短（3 d），數(shù)量最多[（20.75±3.31）個(gè)·皿-1]。因此，最優(yōu)組合為：瓊脂濃度2%、pH 5.6、溫度25 ℃、培養(yǎng)皿直徑60 mm、0 h·d-1光照。

2.6.3 以子實(shí)體數(shù)量為指標(biāo)的正交試驗(yàn) 由表19可知，在16 種正交組合條件下，該菇子實(shí)體均能發(fā)育。在組合10 條件下，該菇子實(shí)體呈白色，其農(nóng)藝性狀綜合良好，發(fā)育數(shù)量最多[（5.25±0.71）個(gè)·皿-1]（表20），與其他處理相比有顯著差異。

表19 不同正交組合條件下子實(shí)體發(fā)育情況Table 19 The fruiting body development at different orthogonal combination

表20 以子實(shí)體數(shù)量為指標(biāo)的極差分析Table 20 The range analysis based on number of fruiting body

極差分析表明，各列極差大小順序?yàn)镽3＞R4＞R5＞R2＞R1，試驗(yàn)因素的主次順序?yàn)镃＞D＞E＞B＞A，即溫度對子實(shí)體發(fā)育影響最大，其最優(yōu)組合 A3B2C3D4E3，該組合與顯著性分析結(jié)果（A3B2C4D3E1）不一致。經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證，在組合A3B2C3D4E3培養(yǎng)基上，該菇子實(shí)體發(fā)育數(shù)量最多[（5.50±0.58）個(gè)·皿-1]。因此，最優(yōu)組合為：瓊脂濃度2%、pH 6.2、溫度25 ℃、培養(yǎng)皿直徑100 mm、14 h·d-1光照。

3 討論與結(jié)論

環(huán)境因子與個(gè)體發(fā)育的關(guān)系是菇類研究的熱點(diǎn)和難點(diǎn)問題，也是野生菇類馴化栽培的研究基礎(chǔ)[18]。通過對菇類生長的環(huán)境因子進(jìn)行人為控制，能有效提高農(nóng)業(yè)生產(chǎn)方面的經(jīng)濟(jì)效益[19]。

研究表明，星孢寄生菇在溫度15～27 ℃、培養(yǎng)基pH 4.5～10.0 以及其他可控環(huán)境條件所有處理下均能生長發(fā)育，以25 ℃為最適溫度。單因素試驗(yàn)條件下，在瓊脂濃度3%、pH 6.6～6.8、光照時(shí)間0 h·d-1各處理下，該菇菌絲生長最快且培養(yǎng)皿直徑大小對其無顯著影響；在瓊脂濃度2.5%、pH 5.4、培養(yǎng)皿直徑70 mm、光照時(shí)間12 h·d-1各處理下，該菇原基數(shù)量最多。在瓊脂濃度1.5%、pH 6.2、培養(yǎng)皿直徑70～100 mm、光照時(shí)間12～24 h·d-1處理下該菇子實(shí)體數(shù)量最多。然而，除溫度外，該菇生長發(fā)育的單因素最佳水平與最佳可控環(huán)境因子組合均不相符，其中瓊脂濃度、溫度是該菇關(guān)鍵的環(huán)境因素。

上述結(jié)果驗(yàn)證了適宜溫度范圍是菇類細(xì)胞正常代謝的基礎(chǔ)[20]，且不同菇類或同一菇類的不同品種，甚至同一品種在不同生長階段其菌絲生長發(fā)育所需的溫度也有所不同[21]，該菇生長發(fā)育的溫度以及pH 范圍與王建東等[2]研究結(jié)果基本相同。前人也充分證明了菇類在整個(gè)發(fā)育過程中均依賴細(xì)胞儲存的水分[22]；酸堿度決定營養(yǎng)物質(zhì)吸收的快慢進(jìn)而影響菇類的農(nóng)藝性狀[23-24]；多數(shù)菇類菌絲生長不需要光照，而子實(shí)體發(fā)育需要光的刺激；大多數(shù)菇類是好氧型真菌，O2的含量會影響菇類菌絲萌發(fā)和子實(shí)體發(fā)育[25]。同時(shí)，該菇的個(gè)體發(fā)育除與可控環(huán)境因子有關(guān)外，有必要進(jìn)一步探究營養(yǎng)條件[26]、胞外酶活性[27]、基因轉(zhuǎn)錄組學(xué)[28]等與該菇個(gè)體發(fā)育的關(guān)系。

總之，星孢寄生菇菌絲生長的最佳組合為：溫度25 ℃、瓊脂濃度2%、pH 7.0、培養(yǎng)皿直徑70 mm、光照時(shí)間0 h·d-1。該菇原基分化的最佳組合為：溫度25 ℃、瓊脂濃度2%、pH 5.6、培養(yǎng)皿直徑60 mm、光照時(shí)間0 h·d-1。該菇子實(shí)體發(fā)育的最佳組合為：溫度25 ℃、瓊脂濃度2%、pH 6.2、培養(yǎng)皿直徑100 mm、光照時(shí)間14 h·d-1。