陳品秋，班瑋康，王文艷，路 娟，陳 曦，楊志宏*

龍血竭及其主要活性成分對腦缺血的藥理作用與機制研究進展

陳品秋1, 2，班瑋康1，王文艷2，路 娟1，陳 曦1，楊志宏1*

1. 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院 藥用植物研究所，北京 100193 2. 煙臺大學藥學院，分子藥理和藥物評價教育部重點實驗室，山東 煙臺 264005

龍血竭具有活血化瘀、消炎鎮(zhèn)痛、生肌斂瘡之功效，作為我國傳統(tǒng)中藥材及民族特色藥材，常被稱為“國產血竭”?，F代研究表明龍血竭具有保護心腦血管系統(tǒng)、神經系統(tǒng)及抗腫瘤、促進組織愈合等藥理作用，化學成分包括酚類、萜類、甾醇類等，活性成分以酚類為主，如紫檀茋、龍血素A、龍血素B、白藜蘆醇等。大量研究已證實龍血竭能有效干預腦、心、腎等重要組織臟器的缺血再灌注損傷，對臨床應用具有重要意義。通過梳理近十年國內外相關研究，總結了龍血竭及其主要酚類活性成分在抗氧化應激、抗炎、神經保護、保護血腦屏障、抗血栓等方面的藥理作用及可能的作用機制，以期為該藥在腦缺血防治領域的深入研發(fā)提供參考借鑒，助力其臨床合理優(yōu)效應用。

龍血竭；腦缺血；缺血再灌注損傷；紫檀茋；龍血素A；龍血素B；白藜蘆醇

龍血竭為百合科龍血樹屬植物劍葉龍血樹(Lour.) S. C. Chen含脂木材提取加工制成的樹脂[1]，主要分布于我國廣西、云南、海南及東南亞國家柬埔寨、老撾等地。血竭以“活血圣藥”著稱，藥用歷史悠久，但我國血竭資源瀕臨匱竭，幸而在20世紀70年代，著名植物學家蔡希淘在云南發(fā)現了珍稀植物劍葉龍血樹，并用該植物研制出首批“國產血竭”[2]。隨后，于1990年以“廣西血竭”為藥材名獲批國家一類新藥材，1999年正式被國家藥品標準［WS3-082（Z-016）-99（Z）］收載，納入部頒標準藥材，并更名為“龍血竭”[3]。龍血竭性溫、平，味甘、辛、咸，無毒，具活血散瘀、消腫止痛、斂瘡生肌等功效?，F代藥理學表明，龍血竭具有抗氧化應激、抗炎、抗血栓/血小板凝集、保護血腦屏障、抗腫瘤等廣泛的藥理活性[4]，在國內外均受到學者的高度重視。

腦缺血/再灌注（ischemia/reperfusion，I/R）損傷是罹患腦缺血的關鍵環(huán)節(jié)，可引發(fā)氧化應激、炎癥反應、細胞凋亡等一系列神經化學過程，成為腦缺血致死致殘的關鍵原因之一。針對治療腦缺血的研究從未停止，而治療手段主要以溶栓為主，現唯一經美國食品藥品監(jiān)督管理局（Food and Drug Administration，FDA）批準的治療藥物組織纖溶酶原激活物仍存在不良反應多、適用人群少、治療時間窗窄等難題。基于病理過程的復雜性及已有藥物的局限性，可供選擇的臨床治療藥物的多元化、豐富性及安全性仍相對欠缺[5]，探尋治療腦缺血及腦I/R損傷的藥物和臨床策略已成為當前研究的熱點與難點。眾多研究表明，龍血竭緩解腦I/R損傷作用良好，且作用特點與腦I/R損傷的復雜病理過程相符，能夠針對腦缺血的發(fā)生發(fā)展過程產生不同療效。目前少有綜述系統(tǒng)地對龍血竭及其活性成分在腦缺血疾病中的藥理作用進行總結。含有龍血竭酚類成分如龍血通絡膠囊（Longxue Tongluo Capsule，LTC）與龍血竭滴丸等藥物在臨床上治療腦缺血均呈現出一定的療效，但目前的研究僅局限于實際療效觀察，而藥物機制研究方面相對模糊?；诖?，本文將著重梳理歸納龍血竭及其主要活性成分抗腦缺血的相關藥理作用及其可能的作用機制，尤其關注其活性化合物的抗腦缺血作用，對龍血竭的綜合利用與進一步科學研發(fā)具有重要意義。

1 化學成分及含量概述

現代研究表明，酚類、萜類、甾體類等成分是龍血竭的主要化學成分，而其主要的活性成分以酚類化合物為特征。迄今，已從龍血樹屬植物中分離檢測出17種萜類、甾體及甾體皂苷類成分物質，如4-烯-3-膽甾酮、膽甾醇、豆甾醇等[6]，以及180多種酚類化合物[7]，以類黃酮、二苯乙烯為母核的化合物是其含量較為豐富和主要的藥效成分，類黃酮占龍血竭總量的50%～80%[7-9]，其中分離鑒定出黃酮類80余種，包括二氫查耳酮類化合物（龍血素A、龍血素B）、查耳酮類化合物（2,4,4′-三羥基查耳酮、2′-甲氧基-4,4′-二羥基查耳酮）、黃烷類（4′,7-二羥基- 3′-甲氧基黃烷、7-羥基-4′-甲氧基黃烷）、聚合黃酮類（劍葉血竭素）等[6,10]。提取出的多個活性物質（化學結構見圖1），如黃酮類成分龍血素A（1）、龍血素B（2）、7,4′-二羥基黃酮（3）、二苯乙烯類成分白藜蘆醇（4）、紫檀茋（5）[11]，具有抗氧化、抗炎、神經保護、抗腫瘤和抗血栓等作用。

不同地域來源的龍血竭中主要成分含量存在一定差異，見表1。此前，有研究系統(tǒng)地對來源于中國廣西、中國云南和老撾、越南4個產地多批次龍血竭藥材中總黃酮、龍血素A及龍血素B的含量進行測定，發(fā)現三者含量相對較高的藥材產地分別為中國云南、中國廣西及老撾[12]。另采用代替對照品法測定發(fā)現中國云南、老撾產龍血竭藥材中龍血素A與龍血素B含量比為（3～9）∶1，龍血素A含量較高但存在一定差異，使不同產地的龍血竭藥材易于辨識[13]。新近研究對源于劍葉龍血樹及巖棕2種基原龍血竭43份樣品中5種活性成分進行含量測定，各成分含量變化范圍為龍血素A（0.41%～8.92%）、紫檀茋（0～3.96%）、龍血素B（0～2.18%）、白藜蘆醇（0～1.10%）、7-4-二羥基黃酮（0.04%～0.56%），龍血素B在2種基原龍血竭中含量差異極為明顯，巖棕龍血竭中龍血素B質量分數（1.039 4±0.495 5）%約為劍葉龍血竭中龍血素B質量分數（0.110 5±0.150 7）%的9.4倍[11]。以上研究提示龍血竭各活性成分含量存在一定差異。各產地間含量差異較大。另外，研究比較廣西、云南產9個批次龍血竭中龍血素A與龍血素B的質量分數差異，發(fā)現平均質量分數分別為0.47%和0.96%[14]。經反相高效液相色譜法測定發(fā)現2個不同廠家龍血竭產品中紫檀茋質量分數分別為5.50、14.72 μg/mg[15]，差異明顯。不同地域、基原、廠家的龍血竭中總黃酮含量無顯著性差異，但其活性成分含量均有明顯差異，尤其是龍血素A、龍血素B、紫檀茋等，說明不同基原植物中龍血竭的品質間存在明顯差異[16-17]。

圖1 龍血竭治療腦缺血主要化合物結構信息

表1 不同地區(qū)龍血竭原料中總黃酮、龍血素A和龍血素B的含量[12]

Table 1 Contents of total flavonoids, loureirin A and loureirin B in Resina Draconis from different regions[12]

來源總黃酮/%龍血素A/%龍血素B/% 中國云南6.946～8.6730.083～0.1360.045～0.065 中國廣西4.287～8.5310.021～0.1770.018～0.070 老撾5.138～5.2940.075～0.1540.046～0.075 越南5.425～6.9970.035～0.0960.027～0.052

2 抗腦缺血藥理作用

龍血竭對多器官I/R損傷有較好的保護作用，能改善新西蘭兔、樹鼩、大鼠心肌以及大鼠腎臟I/R損傷后的組織結構損傷[18-21]。研究表明，龍血竭及其活性成分具有抗氧化、抗炎、保護血腦屏障及改善血流狀態(tài)等作用，能夠影響腦缺血病理過程中的氧化應激、炎癥、血腦屏障破壞、能量代謝等多個環(huán)節(jié)，藥理作用見表2、圖2。

2.1 抗氧化應激

近年，多項研究報道龍血竭及其主要活性成分在抗氧化應激方面表現出良好的作用。紫檀茋、白藜蘆醇、龍血素B、龍血素A等均能夠通過改善氧化應激標志物并調節(jié)過氧化物酶活性途徑發(fā)揮抗氧化損傷作用從而保護腦組織。

表2 龍血竭主要活性成分對腦缺血疾病的調節(jié)作用

Table 2 Regulatory effects of main active components of Resina Draconis on cerebral ischemic

活性成分模型（細胞/動物）藥理作用作用機制文獻 龍血素A（C17H18O4）SD大鼠，右側頸動脈結扎誘導MCAO/R模型抗氧化，緩解出現的神經缺陷癥狀、減少梗死面積丙二醛↓，SOD↑，CAT↑、GSH-Px↑22 SD大鼠，右側頸動脈結扎誘導MCAO/R模型保護血腦屏障，降低腦含水量，緩解腦水腫程度水通道蛋白-4↓22 Wistar大鼠，急性血瘀大鼠模型抗血栓，延長凝血時間，降低全血黏度、紅細胞壓積和纖維蛋白原含量，抑制血小板聚集Akt磷酸化↓，PI3K/Akt信號通路↓23-25 龍血素B（C18H20O5）PC12細胞，OGD/R損傷模型抗氧化，增強細胞活力、細胞存活率激活Nrf2通路，HO-1↑，Bcl-2↑26 FeCl3誘導小鼠血栓形成模型抗凝、抗血栓，延長凝血時間，降低血栓質量、血栓面積抑制PAI-1/uPA復合物24 7,4'-二羥基黃酮（C15H10O4）BV2細胞抗炎抑制iNOS mRNA，TNF-α↓，IL-6↓，NO↓22,27

續(xù)表2

活性成分模型（細胞/動物）藥理作用作用機制文獻 紫檀茋（C16H16O3）SD大鼠，雙側頸總動脈閉塞再灌注誘導MCAO/R模型；脊髓神經元細胞抗氧化，改善腦I/R神經行為學，降低脂質過氧化反應NLRP3↓，LC3-II↑，活性氧↓，CAT↑，谷胱甘肽↑；28-29 MCAO/R小鼠模型OGD/R的HT22/U251共培養(yǎng)模型抗炎，減輕腦I/R損傷后星形膠質細胞活化NF-κB磷酸化↓，COX-2↓，iNOS↓，MMPs↓，TNF-α↓、IL-1β↓、IL-6↓、iNOS↓30-31 斑馬魚、SD大鼠、異煙肼誘導神經損傷的斑馬魚；小鼠海馬神經元細胞（HT22）OGD/R模型神經保護，腦內神經元存活率明顯增加Bax/Bcl-2↓32-34 IR模型小鼠血腦屏障保護，降低小鼠腦水腫程度Na+↓35 白藜蘆醇（C14H12O3）Wistar大鼠，MCAO模型抗氧化，降低梗死面積，改善運動和認知功能谷胱甘肽↑，調節(jié)GPx、GR、GST、SOD、CAT活性，Nrf2↑，丙二醛↓，HO-1↑36-37 大鼠/C57/BL小鼠MCAO模型抗炎，抑制星形膠質細胞化，減少腦損傷并改善神經功能，減少神經炎癥TNF-α↓、IL-1β↓、NLRP3↓，IL-1↓，IL-6↓，COX-2↓，IL-10↑、IFN-β↑、IL-4↑，CD147/MMP-9↓38-39,40-42 SD大鼠，MCAO模型神經保護，改善大鼠神經功能評分、腦組織損傷程度、神經元結構破壞程度、神經元數量、梗死側神經元凋亡調節(jié)BDNF/Akt/CREB1TREM1/2；ERK↓，p38↓，JAK↓，Caspase-3↓，STAT↓，Bax/Bcl-2↓，p-JNK↓，JNK↓43-49 SD大鼠，MCAO模型；OGD/R損傷HUVEC模型血腦屏障保護，降低大分子滲透標志物髓過氧化物酶活性、降低缺血側腦組織含水量，提高細胞的存活率，降低血腦屏障的通透性抑制ERK1/2-VEGFA、CAV-1、ICAM-1↓、VCAM-1↓、TIMP-1↑抑制線粒體相關Caspase3/9通路、激活Akt/GSK-3β、抑制MMP-950-55

↓-下調/下降，↑-上調/升高；MCAO-大腦中動脈栓塞 SOD-超氧化物歧化酶 GSH-Px-谷胱甘肽過氧化物酶 CAT-過氧化氫酶 iNOS-誘導型一氧化氮合酶 NLRP3-核苷酸結合寡聚化結構域樣受體蛋白3 LC3-微管相關蛋白輕鏈3 Nrf2-核因子E2相關因子2 HO-1-血紅素加氧酶1 Bcl-2-B淋巴細胞瘤-2 OGD/R-氧糖剝奪復氧 TNF-α-腫瘤壞死因子α IL-6-白細胞介素-6 NF-κB-核因子-κB COX-2-環(huán)氧化酶-2 MMPs-金屬蛋白酶 Bax-Bcl-2相關X蛋白基因 Caspase-3/9-半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3/9 PAI-1-纖溶酶原激活物抑制劑-1 uPA-尿激酶型纖溶酶原激活物 JNK-應激活化蛋白激酶 CD147-細胞外基質膜蛋白 MMP-9-基質金屬蛋白酶-9 BDNF-腦源性神經營養(yǎng)因子 Akt-蛋白激酶B CREB1-環(huán)腺苷酸反應元件結合蛋白 TREM1/2-髓系細胞上表達的觸發(fā)受體1/2 ERK-細胞外信號調節(jié)激酶 p38-p38絲裂原活化蛋白激酶 JAK-Janus激酶 STAT-信號轉導和轉錄激活因子 ERK1/2-VEGFA-ERK1/2-血管內皮生長因子A信號通路 CAV-1-窖蛋白-1 ICAM-1-細胞間粘附分子-1 VCAM-1-血管細胞黏附分子-1 TIMP-1-組織金屬蛋白酶抑制劑-1

↓-downregulation/decrease, ↑-upregulation/rising; MCAO-middle cerebral artery occlusion SOD-superoxide dismutase GSH-Px-glutathione peroxidase CAT-catalase iNOS-inducible nitric oxide synthase NLRP3-nucleotide binding oligomerization domain-like receptor protein 3 LC3-microtubule-associated protein light chain 3 Nrf2-nuclear factor erythroid-2 related factor 2 HO-1-heme oxygenase 1 Bcl-2-B-cell lymphoma-2 OGD/R-oxygen-glucose deprivation/reoxygenation TNF-α-tumor necrosis factor-α IL-6-interleukin-6 NF-κB-nuclear factor-κB COX-2-cyclooxygenase-2 MMPs-matrix metalloproteinase Bax-Bcl-2 associated X protein Caspase-3/9-cysteine-3/9 aspartate protease PAI-1-plasminogen activator inhibitor-1 uPA-urokinase-type plasminogen activator JNK-c-jun-terminal kinase CD-147-extracellular matrix membrane protein MMP-9-matrix metalloproteinase-9 BDNF-brain-derived veurotrophic factor Akt-protein kinase B CREB1-cyclic adenosine monophosphate response element-binding protein TREM1/2-triggering receptor expressed on myeloid cells 1/2 ERK-extracellular signal-regulated kinase p38-p38 mitogen-activated protein kinase JAK-janus kinase STAT-signal transducer and activator of transcription ERK1/2-VEGFA-ERK1/2-vascular endothelial growth factor A (VEGFA) signaling pathway CAV-1-caveolin-1 ICAM-1-intercellular adhesion molecule-1 VCAM-1-vascular cell adhesion molecule-1 TIMP-1-tissue inhibitor of metalloproteinases-1

圖2 龍血竭及其活性成分抗腦缺血藥理作用概括示意圖

龍血竭滴丸、龍血竭片及LTC均以改善氧化應激標志物和過氧化物酶活性的方式調節(jié)氧化應激[60-62]。包括顯著升高SOD、GSH-Px、CAT、乳酸脫氫酶水平，以及降低丙二醛、iNOS、NOS、一氧化氮含量，以此提高大腦MCAO大鼠的抗氧化能力，改善局灶性腦缺血大鼠神經功能，發(fā)揮腦保護作用。其中二苯乙烯類化合物紫檀茋發(fā)揮抗氧化應激作用已被證實[35,63]，其具有抗氧化、清除自由基的特性，能顯著調節(jié)腦組織中抗氧化酶的表達并降低氧化應激水平，以消除體內缺血性損傷引起的氧化應激[64]。Khan等[65]對雄性SD大鼠（180～220 g）采用雙側頸總動脈閉塞30 min再灌注60 min制備腦損傷模型，隨后ig給予紫檀茋（400 mg/kg）干預10 d，發(fā)現紫檀茋可顯著改善腦I/R大鼠的神經行為學，降低脂質過氧化反應、谷胱甘肽、亞硝酸鹽濃度，以及恢復CAT活性，顯著減輕氧化損傷。進一步研究發(fā)現其機制與抑制NLRP3炎性小體和催化亞基gp91phox相關的氧化應激有關[28]。紫檀茋（20 μmol/L）能夠增加過氧化氫（hydrogen peroxide，H2O2）處理后脊髓神經元細胞中的LC3-II蛋白質表達水平與自噬體數量，從而抑制細胞活性氧產生，發(fā)揮抗氧化應激作用[29]。體外細胞實驗和在體缺血再灌注動物實驗均顯示紫檀茋具有較好的抗氧化應激能力。

研究證實白藜蘆醇對腦I/R具有防御治療作用與抗氧化應激特性有關[66-67]。給予雄性Wistar（280～300 g）大鼠白藜蘆醇納米顆粒預處理10 d后（500 μg，ip），可顯著降低MCAO大鼠缺血2 h后的梗死面積（與模型組相比梗死面積下降了68.37%），改善運動和認知功能，提高谷胱甘肽含量，調節(jié)抗氧化酶（GPx、GR、GST、SOD、CAT）的活性[36]。白藜蘆醇還能通過降低I/R大鼠的丙二醛水平，發(fā)揮顯著的抗氧化活性，同時能顯著提高Nrf2和HO-1水平，表明其機制與激活Nrf2/ARE信號通路有關[37]。

龍血素A與龍血素B都具有抗氧化應激活性。龍血素A能透過血腦屏障在大鼠腦組織分布，可能直接作用于中樞神經系統(tǒng)發(fā)揮作用[68]。楊波等[22]采用線栓法建立雄性SD大鼠右側MCAO/R模型，給予龍血素A（60、120 mg/kg）干預后可顯著緩解出現的神經缺陷癥狀，明顯降低水通道蛋白-4、丙二醛水平，提高抗氧化酶（SOD、CAT、GSH-Px）活性，減少梗死面積與腦水腫程度。與其結構相似的龍血素B也具有明顯的抗氧化作用，濃度為10 μmol/L時可明顯改善體外OGD/R對PC12細胞的損傷作用，其機制與Nrf2通路激活、增強HO-1和Bcl-2表達有關[26]。

2.2 抗炎反應

龍血竭抗炎作用效果顯著，在抑制腦、心臟、腸、肝、肺等器官及組織炎癥方面發(fā)揮較好作用[69-71]。據臨床研究，采用龍血竭散聯(lián)合創(chuàng)灼膏或龍血竭乙醇溶液加金黃散外敷治療靜脈炎總有效率均高達100%[72-73]。再者，龍血竭散聯(lián)合美沙拉嗪治療重度潰瘍性結腸炎患者總有效率為72.2%～92.5%[74-77]，龍血竭片聯(lián)合固腸止瀉丸治療總有效率達97%[78]。提示龍血竭具有較強的抗炎活性。研究發(fā)現龍血竭可降低顱腦損傷模型大鼠血清中TNF-α以及IL-6含量，從而減輕炎癥反應，對顱腦損傷起保護作用[79]，龍血竭降低TNF-α、IL-6的作用也在大鼠放射性腦損傷抗炎的研究中得到證實，可緩解內源性神經毒素加重輻射誘導的神經炎癥[80-81]。

腦缺血過程中，過度活化的星形膠質細胞會釋放多種促炎因子，增強神經炎癥反應，加重腦組織損傷[82-83]，因而針對性抑制星形膠質細胞活化可成為減輕炎癥反應的有效手段，進一步緩解腦組織損傷。在體研究表明，白藜蘆醇可明顯抑制MCAO大鼠模型中星形膠質細胞活化，減少腦損傷并改善神經功能[38]，體外研究亦報道[84]，白藜蘆醇預處理24 h可抑制OGD/R后星形膠質細胞增殖活化，進而降低促炎因子TNF-α、IL-1β及增強抗炎因子IL-10、β-干擾素的表達，減輕炎癥反應。在腦I/R的炎癥反應中，NF-κB能通過激活NLRP3炎性小體及星形膠質細胞活化而產生促炎因子，選擇性抑制NF-κB可降低星形膠質細胞活化，可能成為減少中樞神經系統(tǒng)炎癥損傷的有效途徑[39,85]。在MCAO/R小鼠模型及經OGD/R的HT22/U251共培養(yǎng)模型中均發(fā)現紫檀茋能夠減少TNF-α、IL-1β、IL-6、COX-2、iNOS、組胺、前列腺素E2等炎癥細胞因子的產生及下調MMPs，如MMP2和MMP9的表達。進一步對機制研究發(fā)是通過抑制NF-κB磷酸化從而減輕腦I/R損傷后星形膠質細胞活化所誘導的炎癥反應，進而對腦I/R損傷起到抗炎作用[30-31]。

腦內小膠質細胞在缺血性腦損傷神經炎癥中起到關鍵作用，腦缺血導致小膠質細胞過度活化、炎性因子過表達，從而擴大腦梗死范圍，加重腦損傷。研究表明，龍血竭乙醇提取物、龍血竭片及LTC均能明顯減少相關炎性因子釋放（IL-1β、IL-6、一氧化氮）[86]，發(fā)揮抗炎作用改善腦損傷，其機制與調節(jié)脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）誘導的COX-2基因表達抑制小膠質細胞活化有關[87-91]。小膠質細胞的激活可分為M1與M2表型，M1型起促炎作用加重腦損傷，而M2型則發(fā)揮抗炎作用參與修復重構損傷組織。研究已證實MicroRNA-155（miR-155）可促進小膠質細胞的M1極化使神經炎癥反應增加。以C57/BL小鼠構建MCAO模型，在缺血0、8、18 h后腹腔注射白藜蘆醇（100 mg/kg），發(fā)現白藜蘆醇可降低miR-155的表達，從而抑制小膠質細胞M1極化，降低M1特征基因CD32和IL-1β的表達以及IL-1、IL-6含量，促進小膠質細胞M2極化，顯著增加其特征基因CD206和ARG-1的表達與IL-4、IL-10含量，有效減少腦缺血后的神經炎癥[40]。亦有研究表明，MCAO小鼠給藥白藜蘆醇后（1×10?7mol/L），抑制小膠質細胞的過度激活，減少炎癥因子釋放（IL-1β、IL-6、TNF-α），從而減輕缺血性腦損傷相關炎癥反應，進一步機制研究表明可能與下調CD147/MMP-9通路、調節(jié)BDNF/Akt/CREB及TREM1/2的表達失衡有關[41-42]。此外，龍血竭中7,4′-二羥基黃酮對小膠質細胞亦表現出較好的抗炎活性，僅在較低濃度下就能明顯抑制BV2細胞的IL-6分泌，并抑制LPS誘導BV2中一氧化氮的產生，可能通過減少過度激活的小膠質細胞中iNOS、IL-6和TNF-α的表達從而抑制神經炎癥[26-27]。

近期有研究首次從龍血竭中提取出含有3個手性碳的黃酮三聚體化合物（nordracophane），并發(fā)現該化合物能有效抑制LPS刺激RAW264.7細胞釋放一氧化氮 [IC50為（14.9±4.5）μmol/L]，表現出一定的抗炎作用[92]。

龍血竭活性成分紫檀茋與白藜蘆醇均以抑制星形膠質細胞及小膠質細胞活化的方式降低相關炎癥因子釋放，從而發(fā)揮抗炎作用，且現有機制研究提示龍血竭抗腦I/R損傷作用可能與抑制相關細胞活化、NF-κB磷酸化、NLRP3炎性小體激活有關。龍血竭中仍可能具有其他潛在的抗炎新成分，對其進行更深入的挖掘將有助于新型抗炎藥物的研發(fā)，對腦缺疾病相關炎癥反應的治療具有重要意義。

2.3 神經保護作用

龍血竭乙醇提取物（50 μg/mL）能夠明顯降低Bax/Bcl-2的值[93]，增加腦源性神經因子的表達，降低促凋亡Caspase-3的表達，從而抑制60Co-γ射線照射引起的大鼠海馬神經元凋亡，對神經元損傷起到保護作用[81]。體外研究發(fā)現LTC可部分逆轉H2O2誘導的PC12細胞損傷，提高神經細胞存活率，降低神經細胞凋亡率，提示LTC具有一定的神經保護作用[94]。新近研究表明，LTC可降低MCAO大鼠梗死面積、改善腦組織病理狀態(tài)，從而保護腦神經元細胞免受I/R損傷，其機制與減輕內質網應激和MAPK介導的機制最終抑制Caspase依賴的細胞凋亡有關[95]。

研究已證實白藜蘆醇能抑制神經元凋亡[96]，顯著改善腦組織損傷后的神經功能[38]。通過對SD大鼠（250～300 g）采用線栓法制備MCAO模型，I/R 2 h后給予白藜蘆醇（40 mg/kg）干預，發(fā)現干預后大鼠神經功能評分、腦組織損傷程度、神經元結構破壞程度、神經元數量及梗死側神經元凋亡的發(fā)生均有明顯改善，其保護機制與下調p-JNK、p-p38的水平有關[43]。此外，白藜蘆醇能夠增加抗凋亡基因如的mRNA水平及改變相關基因、、的表達從而減少缺血相關細胞死亡達到抗凋亡作用[44]。Akt信號通路在腦、心等器官I/R損傷中發(fā)揮抑制細胞凋亡的作用[45-46]。白藜蘆醇能夠通過調節(jié)miR-223-3p/NLRP3通路減少皮質神經元死亡并激活PI3K/Akt通路抑制內皮細胞凋亡，從而發(fā)揮對神經元及內皮細胞的保護作用[47-48]。另有報道稱[49]，白藜蘆醇通過調節(jié)JAK/ERK/STAT信號通路顯著降低腦I/R誘導的JAK、ERK、STAT和JNK磷酸化水平，保護海馬神經元免受腦I/R損傷。

研究表明給予腦缺血大鼠及異煙肼誘導神經損傷的斑馬魚紫檀茋（0.5 μmol/L、10 mg/kg）后，腦內神經元存活率明顯增加[32-33]。另外，以不同濃度的紫檀茋（1.25、2.50、5.00 μmol/L）對小鼠海馬神經元細胞（HT22）OGD/R損傷的保護作用進行探究，發(fā)現神經元存活率與紫檀茋濃度呈一定的量效關系，各濃度下細胞存活率依次為（55.45±3.62）%、（67.23±4.37）%、（81.87±5.02）%，且免疫印跡試驗結果顯示隨紫檀茋濃度增加，Bax/Bcl-2的值遞次降低，提示紫檀茋對神經元細胞OGD/R損傷有一定的保護作用[34]。龍血竭及其活性成分通過對抗腦缺血誘導的神經元凋亡，提高神經元存活率，有效抑制神經元凋亡，對受損神經元有一定的保護作用。

2.4 血腦屏障保護作用

血腦屏障完整性受損是腦I/R損傷的早期關鍵事件，腦I/R損傷會破壞血腦屏障完整性，從而破壞腦組織正常功能，而血腦屏障功能結構破壞能加劇腦I/R損傷的病程[97]。因此，保護血腦屏障對改善腦I/R損傷具有重要意義。

腦缺血引起血腦屏障高通透性使血液成分、高分子物質外滲而導致血源性水腫及出血性轉化可引起無法逆轉的二次損傷[98]。血腦屏障通透性成為腦缺血治療的重要切入點。已有研究表明，MCAO模型大鼠連續(xù)給藥龍血竭14 d后，高劑量組（2.60 g/kg）腦梗死體積（32.42±2.57）%和腦組織含水量（70.31±1.15）%均顯著降低，神經受損恢復效果最好。龍血竭滴丸與LTC均能明顯降低局灶性腦缺血大鼠的腦含水量，且作用呈劑量相關性趨勢[60-61]。白藜蘆醇對維持血腦屏障功能具有較好的作用[68]，腦缺血模型大鼠ip白藜蘆醇（100 mg/kg）24 h后能夠顯著降低大分子滲透標志物髓過氧化物酶活性及伊文思藍（EB）的含量，同時顯著降低缺血側腦組織含水量。另有研究用干濕質量法證實白藜蘆醇40 mg/kg也能顯著降低MCAO模型大鼠腦組織含水量（77.65±4.02）%[51]。進一步研究發(fā)現白藜蘆醇可通過抑制ERK1/2-VEGFA信號級聯(lián)和減弱CAV-1的上調來抑制細菌滲透和降低血腦屏障通透性，顯著抑制腦膜炎大腸桿菌侵襲血腦屏障，以及下調ICAM-1和VCAM-1，改善MCAO大鼠血腦屏障通透性、血腦屏障超微結構，減輕I/R后腦水腫程度[51-52]。其他活性化合物同樣表現出較好的改善血腦屏障通透性作用，腦IR模型小鼠連續(xù)給予紫檀茋5 d后，發(fā)現小鼠腦水腫程度及Na+濃度均以劑量相關性趨勢減輕，劑量為10 mg/kg時效果最為明顯[35]。其他活性化合物同樣表現出較好的改善血腦屏障通透性作用，腦IR模型小鼠連續(xù)給予紫檀茋5 d后，發(fā)現小鼠腦水腫程度及Na+濃度均以劑量相關性趨勢減輕，劑量為10 mg/kg時效果最為明顯[22]。以上研究表明龍血竭及其活性化合物可通過降低血腦屏障通透性從而使腦組織含水量降低，減輕腦水腫，發(fā)揮保護腦組織作用[70]。

血管內皮細胞作為血腦屏障的基本結構和主要成分，在維持血腦屏障完整性方面發(fā)揮重要作用，是腦缺血治療的關鍵位點。研究已發(fā)現龍血竭酚類提取物能減輕內皮細胞功能障礙，LTC在質量濃度為10 mg/L時可提高OGD/R損傷下人臍靜脈內皮細胞細胞的存活率，有效保護缺氧環(huán)境下的內皮細胞[68]。此外，其對氧化低密度脂蛋白模擬的人臍靜脈內皮細胞損傷也具明顯的保護作用，并發(fā)現機制與抑制OGD/R誘導線粒體相關Caspase3/9通路的激活有關[53-54]?；钚猿煞职邹继J醇（40 mg/kg）給藥后對MCAO模型大鼠的血腦屏障超微結構恢復起到一定作用，其血腦屏障組成成分星形膠質細胞、內皮細胞等細胞結構均較完整，損傷程度比模型組輕[51]。現有研究證實白藜蘆醇對血管內皮細胞的干預能有效激活Wnt/β-catenin信號通路，增加閉合蛋白-5與咬合蛋白的表達，降低血腦屏障的通透性，從而逆轉血腦屏障的破壞[55]。腦I/R后會引起內皮細胞損傷，從而發(fā)生內皮間質轉化，研究發(fā)現紫檀茋（10 mg/kg）可顯著抑制MCAO大鼠內皮間質過度轉化，其作用機制可能與激活Akt/GSK-3β通路有關[99]。內皮細胞外連接的基底膜是血腦屏障的另一個重要屏障，其中細胞外基質與血管基底膜維持血腦屏障完整性的重要結構均為基質MMPs的底物。腦I/R損傷后MMP-9表達明顯增加，會引起閉合蛋白降解，增加微血管通透性進而形成腦水腫。白藜蘆醇能抑制MMP-9的活性，增加TIMP-1活性維持血腦屏障完整性，從而減輕腦水腫緩解腦I/R損傷[100]。

龍血竭對腦缺血后血腦屏障完整性具有保護作用，能通過減輕內皮細胞功能障礙，保護血管基底膜共同維持血腦屏障通透性和完整性。其中，活性物質白藜蘆醇對血腦屏障保護作用較強，能維持血腦屏障組成細胞的結構完整性，并在抗腦水腫方面作用突出，發(fā)揮較強的抗腦缺血作用。

2.5 抗血栓、血小板聚集

抑制血栓形成是針對腦缺血治療中的另一重要方面。龍血竭乙醇提取物在大小鼠血栓模型中已被證實具有良好的抗血栓作用，龍血竭臨床抗血栓作用與低分子肝素相似，對髖部骨折手術患者深靜脈血栓形成的作用效果明顯[23,101]。臨床上聯(lián)合使用龍血竭片與生肌止痛熏洗劑治療血栓性外痔的總有效率達到100%[102]。LTC用于治療腦梗死恢復期血瘀證，在大鼠與比格犬90 d長期毒性試驗研究中未見明顯的毒性，臨床上可有效改善卒中恢復期神經功能缺損和病殘情況[103]。另有研究探討LTC與舒肝解郁膠囊及長春西汀聯(lián)合用藥治療血栓性腦梗死恢復期的臨床效果，發(fā)現能夠促進腦部血液循環(huán)、緩解患者臨床癥狀進而加快康復進程。臨床治療有效率高達93.06%，且無明顯不良反應，治療效果安全可靠[104-105]。此外，龍血竭總酚滴丸可引起局灶性腦缺血損傷大鼠腦血管的血流量明顯增加，顯著減少大腦梗死體積，改善大腦神經功能[106]。梁楠等[107]使用龍血竭總酚滴丸干預麻醉犬也有類似發(fā)現，使得犬麻醉后的腦血流量明顯增加，劑量為35 mg/kg時，在1 h內便可顯著降低犬腦血管阻力，改善腦缺血狀態(tài)，恢復腦梗死的神經功能。PAI-1異常表達會導致體內凝血和抗凝血系統(tǒng)紊亂引發(fā)血栓形成[108]。腦缺血部位通過誘導PAI-1和降低血漿組織型纖維蛋白溶酶原激活物水平從而促進纖維蛋白凝塊形成，加重腦損傷[109]。研究已證實龍血素B為PAI-1抑制劑[24]，能顯著提高血纖維蛋白溶解速率，其與抑制PAI-1/uPA復合物形成呈現一定的量效關系。在FeCl3誘導小鼠血栓形成模型中，龍血素B的干預使得小鼠出血時間延長到原來的50%～90%，血栓質量顯著降低，與此同時血管內血栓形成面積顯著減小，抗血栓作用明顯。

LTC對體外二磷酸腺苷/血小板激活因子誘導的大鼠/兔血小板聚集具有抑制作用，改善血瘀性大鼠血液流變學，對局灶性腦缺血后腦組織損傷有明顯的保護作用[103]。另外，龍血竭-β-環(huán)糊精包合物（500 mg/mL）對水楊酸、二磷酸腺苷、血小板活化因子誘導的兔血小板聚集均呈濃度相關性抑制作用，抑制率均高達99%[110]。龍血素A能抑制大鼠體內、體外血栓的形成并延長大鼠的體外凝血時間，降低全血黏度、紅細胞壓積和纖維蛋白原含量，機制與抑制血小板中PI3K/AKT信號通路的活性有關[23,111]。近期研究發(fā)現，龍血素A抑制膠原蛋白、凝血酶、二磷酸腺苷等活性，從而抑制血小板聚集，其抗血小板活性和改善血流狀態(tài)等機制與消除Akt在Ser473位點磷酸化有關[25]。以凝血酶為受體，發(fā)現在不同濃度下龍血素A體外凝血酶活性高于龍血素B[112]，提示龍血素A及龍血素B對血小板的聚集有著較強的抑制作用，都能從不同程度上緩解腦缺血后造成的血栓形成與血小板聚集。

3 總結與展望

龍血竭因多種藥用功效備受關注，其治療腦缺血具有療效確切、多靶點作用、安全性高等優(yōu)勢。本文從抗氧化應激、抗炎、神經保護、保護血腦屏障、抗血栓等藥理作用5個方面對龍血竭及其主要成分治療腦缺血的最新研究進展進行綜述。酚類成分是龍血竭發(fā)揮抗腦缺血作用的主要藥效物質之一，其中紫檀茋、白藜蘆醇、龍血素B等是其重要的代表性成分。目前的研究提示，龍血竭治療腦缺血特點與腦缺血多因素發(fā)病機制有一定的契合度與相關性，具備良好的潛在優(yōu)勢及開發(fā)價值，具有較好的臨床應用前景。

盡管龍血竭抗腦缺血藥理作用的研究漸趨明朗，但目前的研究尚存不足，尤其機制探究與靶點驗證方面仍需研究者們著力深入研究。多數實驗研究表明龍血竭及其單體化合物可通過信號通路或作用靶點發(fā)揮抗腦缺血作用，且主要集中于單體成分與機體的縱向關聯(lián)，但較少有研究聚焦于各通路之間的協(xié)同或串擾作用的橫向聯(lián)系。改善腦I/R損傷、抗氧化應激、抗炎作用等方面與各成分間相互作用有著緊密聯(lián)系。這就使得研究者們未來可從成分間相互作用角度出發(fā)對龍血竭抗腦缺血作用做進一步探討。另外，其他單體成分是否具有類似作用，以及現有成分的更深入抗腦缺血分子機制，仍需挖掘。

在多種屬動物模型中全面探究龍血竭抗腦缺血成分的作用過程，并于相應細胞模型中驗證其分子機制仍是未來研究方向之一，如轉基因動物、具獨特腦部結構優(yōu)勢的沙鼠、兔、小型豬以及靈長類的獼猴、食蟹猴等。還可通過更完善的體內外腦缺血模型體系，探究龍血竭抗腦缺血復雜病理過程與治療機制之間的聯(lián)系，揭示其抗腦缺血整體效應的科學本質，為更好地把握運用龍血竭治療腦缺血奠定基礎。

利益沖突 所有作者均聲明不存在利益沖突

[1] 張越, 宋美芳, 李海濤, 等. 珍稀名貴藥材龍血竭基原及同屬植物的DNA條形碼鑒定研究 [J]. 中國中藥雜志, 2021, 46(9): 2173-2181.

[2] 趙學敏, 王曉霞, 高善榮, 等. 血竭探源 [J]. 中國現代中藥, 2015, 17(5): 497-501.

[3] 陸小鴻. “活血圣藥”龍血竭 [J]. 廣西林業(yè), 2017(8): 18-19.

[4] Fan J Y, Yi T, Sze-To C M,. A systematic review of the botanical, phytochemical and pharmacological profile of, a plant source of the ethnomedicine “dragon’s blood” [J]., 2014, 19(7): 10650-10669.

[5] Fisher M, Savitz S I. Pharmacological brain cytoprotection in acute ischaemic stroke-Renewed hope in the reperfusion era [J]., 2022, 18(4): 193-202.

[6] 楊敏, 楊瑞, 覃彬華, 等. 民族藥龍血竭研究進展 [J]. 海峽藥學, 2019, 31(11): 49-52.

[7] Sun J, Liu J N, Fan B,Phenolic constituents, pharmacological activities, quality control, and metabolism ofspecies: A review [J]., 2019, 244: 112138.

[8] Lang G Z, Li C J, Gaohu T Y,Bioactive flavonoid dimers from Chinese dragon's blood, the red resin of[J]., 2020, 97: 103659.

[9] 李爽, 楊春勇, 李戈, 等. 國產龍血竭基原植物肉桂酸- 4-羥基化酶基因(C4H) 分離比較 [J/OL]. [2021-11-03]分子植物育種. https://kns.cnki.net/kcms/ detail/46.1068.S.20211102. 1705.006.html.

[10] 林憶龍, 文亦磊, 黃洪, 等. 龍血竭化學成分及藥理作用研究進展 [J]. 中國民族民間醫(yī)藥, 2020, 29(6): 50-55.

[11] 張忠廉. 不同基原龍血竭的分子鑒定及化學成分特征研究 [D]. 北京: 北京協(xié)和醫(yī)學院, 2020.

[12] 唐春風, 陳乾平, 龍海榮, 等. 國產及進口龍血竭原料中總黃酮、龍血素A、龍血素B含量的測定 [J]. 當代化工, 2018, 47(1): 201-204.

[13] 許佳, 金紅宇, 孫磊. 替代對照品法測定龍血竭原料中龍血素A和B的含量 [J]. 藥物分析雜志, 2011, 31(11): 2058-2062.

[14] 李竣, 朱功俊, 陳素, 等. HPLC法同時測定不同產地龍血竭中3種黃酮類成分 [J]. 中南民族大學學報: 自然科學版, 2017, 36(2): 45-48.

[15] 胡迎慶, 韓慧文, 宋月英, 等. 不同工藝提取龍血竭中紫檀茋的含量測定 [J]. 中成藥, 2002, 24(8): 616-618.

[16] 宓鶴鳴, 孫勝利, 姚慶芳, 等. 國產血竭中龍血素A和龍血素B的含量測定及兩者的相關性分析 [J]. 中國藥品標準, 2003, 4(04): 51-54.

[17] 李忠瓊, 向東. HPLC測定龍血竭中龍血素A和龍血素B的含量 [J]. 華西藥學雜志, 2005, 20(04): 348-349.

[18] 梁麗梅, 馮湘玲, 劉燕, 等. 龍血竭總黃酮對心肌缺血再灌注損傷大鼠心肌細胞的保護作用研究 [J]. 中國臨床新醫(yī)學, 2017, 10(9): 857-860.

[19] 程初勇, 潘小妮, 劉文靜, 等. 龍血竭總黃酮對新西蘭兔心肌缺血/再灌注損傷作用的研究 [J]. 心腦血管病防治, 2017, 17(3): 203-204.

[20] 安海文, 李燕林, 李李, 等. 龍血竭膠囊對大鼠腎缺血再灌注損傷的保護作用及其機制研究 [J]. 現代藥物與臨床, 2019, 34(3): 577-582.

[21] 楊天睿, 張海燕, 葉堃, 等. 龍血竭對體外心肌缺血再灌注樹鼩模型細胞凋亡及內質網應激蛋白表達的影響 [J]. 中華中醫(yī)藥雜志, 2021, 36(12): 7037-7042.

[22] 楊波, 郭建恩, 韓俊婷, 等. 龍血素A對大鼠局灶性腦缺血再灌注引起的腦損傷及機制探討 [J]. 中藥新藥與臨床藥理, 2010, 21(2): 103-107.

[23] Xin N, Li Y J, Li Y,. Dragon′s Blood extract has antithrombotic properties, affecting platelet aggregation functions and anticoagulation activities [J]., 2011, 135(2): 510-514.

[24] Jiang Y, Zhang G P, Yan D,. Bioactivity-guided fractionation of the traditional Chinese medicinereveals loureirin B as a PAI-1 inhibitor [J]., 2017, 2017: 942563.

[25] Hao H Z, He A D, Wang D C,. Antiplatelet activity of loureirin A by attenuating Akt phosphorylation:studies [J]., 2015, 746: 63-69.

[26] Jiang M, Su X, Liu J L,. Systems pharmacology-dissection of the molecular mechanisms of dragon's blood in improving ischemic stroke prognosis [J]., 2020, 2020: 1-14.

[27] Tang Y Z, Su G Y, Li N,. Preventive agents for neurodegenerative diseases from resin ofattenuate LPS-induced microglia over-activation [J]., 2019, 73(1): 318-330.

[28] Liu H X, Zhao L, Yue L,. Pterostilbene attenuates early brain injury following subarachnoid hemorrhage via inhibition of the NLRP3 inflammasome and Nox2-related oxidative stress [J]., 2017, 54(8): 5928-5940.

[29] 賀靖瀾, 李宗虎, 董曉輝, 等. 紫檀芪通過激活自噬緩解脊髓神經元細胞氧化應激損傷的作用及其機制 [J]. 中國細胞生物學學報, 2017, 39(8): 991-999.

[30] Liu H X, Wu X, Luo J N,. Pterostilbene attenuates astrocytic inflammation and neuronal oxidative injury after ischemia-reperfusion by inhibiting NF-κB phosphorylation [J]., 2019, 10: 2408.

[31] Viana M N, Leiguez E, Gutiérrez J M,. A representative metalloprotease induces PGE2 synthesis in fibroblast-like synoviocytes via the NF-κB/COX-2 pathway with amplification by IL-1β and the EP4 receptor [J]., 2020, 10: 3269.

[32] 周宇, 張雪梅, 馬昂, 等. 紫檀芪抗小鼠局灶性腦缺血損傷作用 [A] //全國中藥藥理學會聯(lián)合會學術交流大會論文摘要匯編[C]. 南京: 中國藥理學會, 2012: 25.

[33] 楊亞楠, 鄔芳艷, 王西新, 等. 基于斑馬魚模型評價二甲基姜黃素、黃芩苷、紫檀茋對異煙肼導致神經損傷的保護作用 [J]. 藥物評價研究, 2021, 44(7): 1377-1384.

[34] 王甲義, 楊陽, 蔣帥, 等. 紫檀芪對神經元細胞缺氧復氧損傷的保護作用及機制研究 [J]. 中華神經醫(yī)學雜志, 2015, 14(5): 433-437.

[35] 甄恩迪, 張勇, 劉陽陽, 等. 紫檀芪激活血紅素加氧酶- 1減輕小鼠腦缺血再灌注后線粒體氧化損傷 [J]. 神經解剖學雜志, 2017, 33(3): 285-292.

[36] Ashafaq M, Alam M I, Khan A,Nanoparticles of resveratrol attenuates oxidative stress and inflammation after ischemic stroke in rats [J]., 2021, 94: 107494.

[37] Cheng L, Jin Z X, Zhao R,. Resveratrol attenuates inflammation and oxidative stress induced by myocardial ischemia-reperfusion injury: Role of Nrf2/ARE pathway [J]., 2015, 8(7): 10420-10428.

[38] Yu P P, Wang L, Tang F R,. Resveratrol pretreatment decreases ischemic injury and improves neurological function via sonic hedgehog signaling after stroke in rats [J]., 2017, 54(1): 212-226.

[39] Yuan J C, Liu W, Zhu H T,. Curcumin inhibits glial scar formation by suppressing astrocyte-induced inflammation and fibrosisand[J]., 2017, 1655: 90-103.

[40] Ma S, Fan L L, Li J C,. Resveratrol promoted the M2 polarization of microglia and reduced neuroinflammation after cerebral ischemia by inhibiting miR-155 [J]., 2020, 130(8): 817-825.

[41] 徐靜嫻, 劉森, 高欣冉, 等. 白藜蘆醇通過調節(jié)BDNF/Akt/CREB及TREM1/2表達失衡抑制脂多糖誘導的BV2小膠質細胞炎癥反應 [J]. 中國藥理學通報, 2021, 37(10): 1402-1408.

[42] Zhang H F, Zhao W J.atrol alleviates ischemic brain injury by inhibiting the activation of pro-inflammatory microglia via the CD147/MMP-9 pathway [J].2022, 31(4): 106307.

[43] 李世英, 張晉霞, 張志勇, 等. 白藜蘆醇對腦缺血再灌注大鼠JNK、P38和神經元凋亡的影響 [J]. 中國中醫(yī)急癥, 2022, 31(2): 228-232.

[44] 李云. 龍血竭提取物固體分散體及其生物利用度研究 [D]; 南京: 南京中醫(yī)藥大學, 2012.

[45] Liang S, Wang Y, Liu Y. Dexmedetomidine alleviates lung ischemia-reperfusion injury in rats by activating PI3K/Akt pathway [J]., 2019, 23(1): 370-377.

[46] Yu P, Ma S C, Dai X C,. Elabela alleviates myocardial ischemia reperfusion-induced apoptosis, fibrosis and mitochondrial dysfunction through PI3K/AKT signaling [J]., 2020, 12(8): 4467-4477.

[47] Pan S L, Li S L, Hu Y Y,. Resveratrol post-treatment protects against neonatal brain injury after hypoxia-ischemia [J]., 2016, 7(48): 79233-79247.

[48] 高蒙, 黃娟. 白藜蘆醇通過調節(jié)miR-223-3p/NLRP3通路發(fā)揮對幼年大鼠腦膜炎模型皮質神經元的保護作用 [J]. 中國病理生理雜志, 2020, 36(7): 1161-1169.

[49] Chang C, Zhao Y Z, Song G Z,. Resveratrol protects hippocampal neurons against cerebral ischemia- reperfusion injury via modulating JAK/ERK/STAT signaling pathway in rats [J]., 2018, 315: 9-14.

[50] Lei J R, Tu X K, Wang Y,. Resveratrol downregulates the TLR4 signaling pathway to reduce brain damage in a rat model of focal cerebral ischemia [J]., 2019: doi: 10.3892/etm.2019.7324.

[51] 張晉霞, 張志勇, 張蕊, 等. 白藜蘆醇后處理對腦缺血再灌注大鼠血腦屏障和ICAM-1、VCAM-1的影響 [J]. 湖南師范大學學報(醫(yī)學版), 2021, 18(6): 39-41.

[52] Yang R C, Lv Y J, Miao L,. Resveratrol attenuates meningitic-mediated blood-brain barrier disruption [J]., 2021, 7(4): 777-789.

[53] 潘勃, 吳臻, 顧小盼, 等. 龍血通絡膠囊對血管內皮細胞氧糖剝奪/復氧損傷后細胞凋亡的改善作用 [J]. 中國中藥雜志, 2018, 43(10): 2118-2122.

[54] 王紅梅, 周建明, 呂耀中, 等. 龍血通絡膠囊對氧化低密度脂蛋白損傷人臍靜脈內皮細胞的保護作用 [J]. 中國中藥雜志, 2018, 43(6): 1241-1246.

[55] 石鋒, 張其兵, 胡圣陽, 等. 白藜蘆醇調控Wnt/β-catenin/GSK-3β通路保護局灶性腦缺血血腦屏障損傷 [J]. 廣西醫(yī)科大學學報, 2020, 37(9): 1617-1622.

[56] 師梅梅, 楊建雄. 龍血竭膠囊的體外抗氧化研究 [J]. 中成藥, 2007, 29(11): 1591-1594.

[57] 周艷林, 閔建國, 鐘小清, 等. 應用TLC-生物自顯影技術評價龍血竭膠囊抗氧化活性[A] // 首屆全國方劑組成原理高峰論壇論文集[C]. 南寧: 中國實驗方劑學雜志社, 2012: 1-6.

[58] 周艷林, 閔建國, 鄒準, 等. HPLC-DPPH評價劍葉龍血樹中抗氧化活性成分及構效關系 [J]. 中草藥, 2015, 46(12): 1797-1799.

[59] Mikstacka R, Rimando A M, Ignatowicz E. Antioxidant effect of trans-resveratrol, pterostilbene, quercetin and their combinations in human erythrocytes[J]., 2010, 65(1): 57-63.

[60] Xin N, Yang F J, Li Y,. Dragon′s blood dropping pills have protective effects on focal cerebral ischemia rats model [J]., 2013, 21(1): 68-74.

[61] 李睿, 羅勝勇. 龍血通絡膠囊對腦缺血性損傷保護作用的實驗研究 [J]. 中國臨床藥理學與治療學, 2017, 22(11): 1232-1236.

[62] 崔秀平, 閆偉, 何金紅. 龍血竭片聯(lián)合氟比洛芬巴布膏治療急性軟組織挫傷的療效及對氧化應激的影響 [J]. 中國醫(yī)院用藥評價與分析, 2020, 20(9): 1093-1095.

[63] Lange K W, Li S M. Resveratrol, pterostilbene, and dementia [J]., 2018, 44(1): 83-90.

[64] Yan W J, Ren D Q, Feng X X,. Neuroprotective and anti-inflammatory effect of pterostilbene against cerebral ischemia/reperfusion injury via suppression of COX-2 [J]., 2021, 12: 770329.

[65] Khan M M, Badruddeen, Ahmad U,. Cerebroprotective effect of pterostilbene against global cerebral ischemia in rats [J]., 2021, 7(5): e07083.

[66] Barbato D L, Tatulli G, Aquilano K,. Inhibition of age-related cytokines production by ATGL: A mechanism linked to the anti-inflammatory effect of resveratrol [J]., 2014, 2014: 917698.

[67] Wang R, Liu Y Y, Liu X Y,. Resveratrol protects neurons and the myocardium by reducing oxidative stress and ameliorating mitochondria damage in a cerebral ischemia rat model [J]., 2014, 34(3): 854-864.

[68] 孫曉博, 金描真, 李雪, 等. 龍血竭中龍血素A與龍血素B在大鼠體內的組織分布研究 [J]. 廣東藥學院學報, 2008(3): 214-216.

[69] Li C, Zhang Y, Wang Q Y,. Dragon′s Blood exerts cardio-protection against myocardial injury through PI3K-AKT-mTOR signaling pathway in acute myocardial infarction mice model [J]., 2018, 227: 279-289.

[70] 張曉燕, 蔡宇宇, 王玉瑤, 等. 傣藥龍血竭對腦缺血大鼠的腦保護作用 [J]. 糧油食品科技, 2022, 30(3): 148-155.

[71] 鐘鳴, 林憶龍, 李世杰, 等. 龍血竭HP-β-環(huán)糊精包合物的制備、表征及其抗炎作用研究 [J]. 中藥材, 2018, 41(5): 1166-1169.

[72] 張璇, 吳洪, 劉娟, 等. 龍血竭散聯(lián)合創(chuàng)灼膏外敷治療靜脈炎的療效觀察 [J]. 世界最新醫(yī)學信息文摘, 2017, 17(69): 138.

[73] 龍宜伶. 血竭散聯(lián)合創(chuàng)灼膏外敷治療靜脈炎的療效觀察 [J]. 中西醫(yī)結合心血管病電子雜志, 2017, 5(29): 169.

[74] 張寧. 重度潰瘍性結腸炎美沙拉嗪聯(lián)合龍血竭散灌腸治療效果的影響因素 [J]. 基層醫(yī)學論壇, 2023, 27(1): 44-46.

[75] 鄭永潔. 用龍血竭散灌腸療法配合美沙拉嗪治療潰瘍性結腸炎的效果觀察 [J]. 當代醫(yī)藥論叢, 2019, 17(6): 124-125.

[76] 趙敏, 王振軍, 許艷春. 龍血竭散聯(lián)合美沙拉嗪緩釋片灌腸治療潰瘍性結腸炎 [J]. 長春中醫(yī)藥大學學報, 2016, 32(1): 115-117.

[77] 王衛(wèi)國. 龍血竭散灌腸聯(lián)合柳氮磺吡啶腸溶片治療潰瘍性結腸炎的臨床研究 [J]. 現代藥物與臨床, 2018, 33(6): 1419-1423.

[78] 趙希明, 蔡德光, 馬紅英. 龍血竭片聯(lián)合固腸止瀉丸治療潰瘍性結腸炎療效觀察 [J]. 山西醫(yī)藥雜志, 2011, 40(7): 722.

[79] 王夢楠, 李建民. 龍血竭膠囊對顱腦損傷大鼠血清一氧化氮及腫瘤壞死因子-α的影響 [J]. 現代中西醫(yī)結合雜志, 2012, 21(12): 1279-1280.

[80] 張鵬, 王海龍, 馬宏, 等. 龍血竭對輻射誘導的神經炎癥的保護作用 [J]. 生物化學與生物物理進展, 2020, 47(8): 762-767.

[81] Xin N, Li Y J, Li X,. Dragon's blood may have radioprotective effects in radiation-induced rat brain injury [J]., 2012, 178(1): 75-85.

[82] Zhang W, Song J K, Zhang X,. Salvianolic acid A attenuates ischemia reperfusion induced rat brain damage by protecting the blood brain barrier through MMP-9 inhibition and anti-inflammation [J]., 2018, 16(3): 184-193.

[83] Wu Q, Feng Y, Liu L,. Corticotropin-releasing factor aggravates ischemic stroke injury by the inflammatory activation of microglia [J]., 2022, 163(3): bqac013.

[84] 劉菁, 劉杰, 廖鴻雁, 等. 白藜蘆醇預處理對星形膠質細胞氧糖剝奪/再復氧損傷后活化及炎癥反應的影響 [J]. 解剖學報, 2020, 51(3): 313-319.

[85] Guan T, Liu Q, Qian Y S,. Ruscogenin reduces cerebral ischemic injury via NF-κB-mediated inflammatory pathway in the mouse model of experimental stroke [J]., 2013, 714(1/3): 303-311.

[86] 華國花, 林湘濤, 王永杰. 龍血竭片對老年復雜性肛瘺術后創(chuàng)面愈合和炎癥因子的影響 [J]. 中國鄉(xiāng)村醫(yī)藥, 2021, 28(12): 46.

[87] Heo S K, Yi H S, Yun H J,. Ethylacetate extract frominhibits LPS-induced inflammatory responses in vascular smooth muscle cells and macrophages via suppression of ROS production [J]., 2010, 48(5): 1129-1136.

[88] 袁慶. 龍血竭抑制脂多糖誘導小膠質細胞活化的作用研究 [D]. 佳木斯: 佳木斯大學, 2017.

[89] C Choy C S, Hu C M, Chiu W T,. Suppression of lipopolysaccharide-induced of inducible nitric oxide synthase and cyclooxygenase-2 by Sanguis Draconis, a dragon′s blood resin, in RAW264.7 cells [J]., 2008, 115(3): 455-462.

[90] 孫晶, 陳孝男, 劉佳妮, 等. 基于組效關系的龍血通絡膠囊抗缺血性腦損傷活性成分研究 [J]. 中國中藥雜志, 2019, 44(01): 150-157.

[91] Li N, Ma Z, Li M,. Natural potential therapeutic agents of neurodegenerative diseases from the traditional herbal medicine Chinese Dragon’s Blood [J]., 2014, 152(3): 508-521.

[92] 龐道然, 李珊珊, 陳孝男, 等. LC-MS導向分離龍血竭中2個具有抗炎活性的二氫查耳烷環(huán)合型三聚體 [J]. 中國中藥雜志, 2019, 44(13): 2675-2679.

[93] Ran Y Y, Xu B, Wang R,. Dragon′s blood extracts reduce radiation-induced peripheral blood injury and protects human megakaryocyte cells from GM-CSF withdraw-induced apoptosis [J]., 2016, 32(1): 84-93.

[94] 陳孝男, 楊愛琳, 趙亞楠, 等. 龍血通絡膠囊對H2O2誘導PC12細胞損傷的保護作用 [J]. 中國實驗方劑學雜志, 2020, 26(7): 50-56.

[95] Pan B, Sun J, Liu Z,. Longxuetongluo Capsule protects against cerebral ischemia/reperfusion injury through endoplasmic reticulum stress and MAPK- mediated mechanisms [J]., 2021, 33: 215-225.

[96] Zhou X M, Zhou M L, Zhang X S,. Resveratrol prevents neuronal apoptosis in an early brain injury model [J]., 2014, 189(1): 159-165.

[97] Liebner S, Dijkhuizen R M, Reiss Y,. Functional morphology of the blood-brain barrier in health and disease [J]., 2018, 135(3): 311-336.

[98] Brouns R, De Deyn P P. The complexity of neurobiological processes in acute ischemic stroke [J]., 2009, 111(6): 483-495.

[99] 汪寧, 高軍, 白方會, 等. 基于Akt/GSK-3β通路研究紫檀茋對腦缺血再灌注大鼠腦保護作用及血管內皮間質過度轉化的影響 [J]. 中草藥, 2022, 53(8): 2399-2406.

[100] Wei H D, Wang S Q, Zhen L M,. Resveratrol attenuates the blood-brain barrier dysfunction by regulation of the MMP-9/TIMP-1 balance after cerebral ischemia reperfusion in rats [J]., 2015, 55(4): 872-879.

[101] Liang J B, Mei S, Qiao X Y,. A botanical medicine dragon′s blood exhibited clinical antithrombosis efficacy similar to low molecular weight heparin [J]., 2021, 64(10): 1691-1701.

[102] 惠永鋒, 阿衣古麗, 苗憲振. 龍血竭片聯(lián)合生肌止痛熏洗劑治療血栓性外痔的臨床研究 [J]. 新疆中醫(yī)藥, 2019, 37(1): 10-11.

[103] 趙賓江, 王振中, 羅惠平, 等. 龍血通絡膠囊治療動脈粥樣硬化性血栓性腦梗死恢復期血瘀證的隨機、雙盲、安慰劑對照、多中心臨床試驗 [J]. 中國中藥雜志, 2016, 41(18): 3473-3477.

[104] 王春燕, 李文茜, 金妮, 等. 龍血通絡聯(lián)合舒肝解郁膠囊對恢復期腦梗死患者生活質量及運動性失語的影響 [J]. 實用臨床醫(yī)藥雜志, 2019, 23(12): 72-74.

[105] 朱永林. 龍血通絡膠囊聯(lián)合長春西汀治療血栓性腦梗死恢復期的療效觀察 [J]. 現代藥物與臨床, 2020, 35(3): 469-472.

[106] 鄭焱江, 梁楠, 廖詩平, 等. 龍血竭總酚滴丸對大鼠局灶性腦缺血損傷的保護作用 [J]. 華西藥學雜志, 2014, 29(1): 45-47.

[107] 梁楠, 鄭焱江, 吳燕, 等. 龍血竭總酚滴丸對犬腦血流量的影響 [J]. 華西藥學雜志, 2016, 31(6): 587-589.

[108] Griemert E V, Pelz K R, Engelhard K,. PAI-1 but not PAI-2 gene deficiency attenuates ischemic brain injury after experimental stroke [J]., 2019, 10(4): 372-380.

[109] Tuttolomondo A, Di Sciacca R, Di Raimondo D,. Plasma levels of inflammatory and thrombotic/ fibrinolytic markers in acute ischemic strokes: Relationship with TOAST subtype, outcome and infarct site [J]., 2009, 215(1): 84-89.

[110] 韓彬彬, 裴會娜, 孫海松, 等. 龍血竭-環(huán)糊精包合作用研究及其片劑的研制 [J]. 中國中藥雜志, 2008, 33(18): 2066-2070.

[111] 桑玉欣. 龍血素A抗大鼠血栓的作用及機制研究 [D].大連: 大連醫(yī)科大學, 2015.

[112] 劉芳, 戴榮繼, 鄧玉林, 等. 龍血竭總酚活血化瘀活性成分的虛擬篩選及初步活性研究 [J]. 北京理工大學學報, 2015, 35(2): 218-220.

Research progress of pharmacological effects and mechanism ofand its active constituents on cerebral ischemia

CHEN Pin-qiu1, 2, BAN Wei-kang1, WANG Wen-yan2, LU Juan1, CHEN Xi1, YANG Zhi-hong1

1. Institute of Medicinal Plant Development, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Beijing 100193, China 2. Key Laboratory of Molecular Pharmacology and Drug Evaluation, Ministry of Education, School of Pharmacy, Yantai University, Yantai 264005, China

As a traditional Chinese medicine with ethnic characteristics,has the functions of activating blood circulation and removing blood stasis, reducing inflammation and analgesia, promoting muscle and healing sores, also known as “domestic Draconis Sanguis” with a long history of usage. Modern research has shown thathas pharmacological effects in protecting the cardiovascular and nervous systems, anti-tumor activity, and promoting tissue healing. The active ingredients ofare mainly phenols, terpenoids and steroids, such as pterostilbene, loureirin A, loureirin B and resveratrol. A large number of studies have provided substantial evidence thatcan effectively intervene in the ischemia-reperfusion injury of brain, heart, kidneys and other vital organs, which is of great significance for clinical application. In the review, the pharmacological effects and possible mechanisms ofin anti-oxidative stress, anti-inflammatory properties, neuroprotection, protection of the blood-brain barrier, and anti-thrombotic were systematically summarized based on both domestic and foreign studies in recent 10 years. It is expected to provide a reference for the future development ofin the field of cerebral ischemia prevention and treatment to facilitate its clinical application.

; cerebral ischemia; ischemia and reperfusion injury; pterostilbene; loureirin A; loureirin B; resveratrol

R28；R285

A

0253 - 2670(2023)18 - 6172 - 13

10.7501/j.issn.0253-2670.2023.18.034

2023-01-24

國家自然科學基金資助項目（81973744）；中國醫(yī)學科學院醫(yī)學與健康科技創(chuàng)新工程項目（N2022-I2M-2-001，2022-I2M-1-018）；北京市自然科學基金資助項目（7173267）

陳品秋（1997—），女，碩士研究生，研究方向為腦血管藥理及藥物代謝。Tel: (010)57833495 E-mail: 15695197298@163.com

楊志宏（1976—），女，博士，研究生導師，主要從事腦血管藥理及藥物代謝研究。Tel: (010)57833219 E-mail: zhyang@implad.ac.cn

[責任編輯 王文倩]