◎ 吳藝卿 ,趙二霞,朱耀強(qiáng) ,張曉雙
(1.中糧(鄭州)糧油工業(yè)有限公司,河南 鄭州 450016;2.鄭州中糧科研設(shè)計(jì)院有限公司,河南 鄭州 450001)
真菌毒素是真菌在糧食、食品或飼料里生長所產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物。糧食中常見的真菌毒素主要包括黃曲霉毒素B1、黃曲霉毒素M1、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、展青霉素、赭曲霉毒素A 及玉米赤霉烯酮素等。受全球氣候變化等因素的影響,糧食受真菌毒素污染日趨嚴(yán)重,世界各地對于真菌毒素污染的報(bào)道日漸增多,在同一地區(qū)有些作物可同時(shí)檢測出多種真菌毒素,據(jù)世界糧農(nóng)組織(FAO)報(bào)告,全球每年約有25%的農(nóng)作物遭受真菌及其毒素污染,造成的經(jīng)濟(jì)損失每年達(dá)數(shù)千億美元[1]。
小麥作為我國重要的糧食作物,結(jié)合報(bào)告及各實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù),近年我國小麥主要受到脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的污染,不同地區(qū)因季節(jié)氣候等影響,影響程度不同,尤其是在小麥揚(yáng)花期或收割期間遭遇陰冷天氣或者陰雨天氣,極大可能導(dǎo)致脫氧雪腐鐮刀菌烯醇超標(biāo)。據(jù)國家糧食局統(tǒng)計(jì),我國每年有3 000 萬t 糧食在生產(chǎn)、儲(chǔ)存、運(yùn)輸過程中被真菌毒素污染,占糧食年總產(chǎn)量的6.2%[2]。脫氧雪腐鐮刀菌烯醇又稱嘔吐毒素(vomitoxin,DON),由禾谷鐮刀菌產(chǎn)生,常出現(xiàn)在小麥和大麥(赤霉?。┥?,人和動(dòng)物在誤食受DON 污染糧食及其制品后可以產(chǎn)生廣泛的毒性效應(yīng),因敏感性不同,癥狀表現(xiàn)包括嘔吐、厭食、胃腸炎、腹瀉等,因豬對該毒素表現(xiàn)尤為敏感,其食用超過一定脫氧雪腐鐮刀菌烯醇含量的食物或飼料后會(huì)引起豬嘔吐或不進(jìn)食,進(jìn)而得名嘔吐毒素。
小麥在收割后,無論是進(jìn)入倉儲(chǔ)環(huán)節(jié)還是加工環(huán)節(jié),均需要進(jìn)行一定的物理清理,尤其是小麥加工企業(yè),在加工過程配置了相對完備的清理設(shè)備。如常見清理設(shè)備包括振動(dòng)篩、平面回轉(zhuǎn)篩、去石機(jī)、打麥機(jī)、色選機(jī)等,清理效果顯著,通過清理可最大程度地清除小麥雜質(zhì)及異變粒。當(dāng)前,小麥清理工藝技術(shù)已取得一定的發(fā)展,在清理工藝中采用除菌、色選技術(shù),強(qiáng)化風(fēng)選作用可以有效去除有害微生物,為小麥安全衛(wèi)生提供基礎(chǔ)保障[3]。本文通過研究小麥加工過程中各類清理設(shè)備清理出的雜質(zhì)類型及其所含脫氧雪腐鐮刀菌烯醇量,探討清理設(shè)備在小麥脫氧雪腐鐮刀菌烯醇控制中的作用。
小麥加工企業(yè)清理一般分為初清、一清、二清,其中初清主要指小麥?zhǔn)召徣雮}前的清理,該環(huán)節(jié)考慮卸車效率因素,一般配置的清理設(shè)備相對簡單,主要包括滾筒篩、振動(dòng)篩等;一清、二清,主要為生產(chǎn)加工環(huán)節(jié)清理,即從麥倉出倉后進(jìn)行第1 次清理,又稱毛麥清理;后加水潤麥入倉,潤麥完成后,再次出倉進(jìn)行第2 次清理,又稱凈麥清理,2 個(gè)清理環(huán)節(jié)均為深度清理環(huán)節(jié),配置的清理設(shè)備考慮了所有可能帶來的雜質(zhì)類型,設(shè)備相對全且多,配置的設(shè)備包括振動(dòng)篩、平面回轉(zhuǎn)篩、去石機(jī)、打麥機(jī)、色選機(jī)等,以下是某一大型加工企業(yè)的清理工序配置。
小麥出倉→振動(dòng)篩、循環(huán)風(fēng)選器→去石機(jī)→磁選→打麥機(jī)→振動(dòng)篩、循環(huán)風(fēng)選器→潤麥→去石機(jī)→色選機(jī)→磁選→打麥機(jī)→平面回轉(zhuǎn)篩、循環(huán)風(fēng)選器→吸風(fēng)分離器→研磨加工
在生產(chǎn)加工過程中,各清理設(shè)備清理效果的保障是保證小麥粉品質(zhì)的關(guān)鍵要素,對于不同類別的雜質(zhì),選用的清理方法、清理設(shè)備均不同。小麥加工處理的除雜和分級(jí)主要是利用麥粒與雜質(zhì)在大小、形狀、懸浮速度、比重、磁性等方面的差別進(jìn)行清理。包括風(fēng)選法、篩選法、比重分選法、磁選法、色選法、撞擊法等[4]。
(1)清理設(shè)備循環(huán)風(fēng)選器和垂直吸分離器為風(fēng)選法,利用小麥與雜質(zhì)之間的空氣動(dòng)力學(xué)性質(zhì)差異,去除小麥中的灰塵、稻草、空心谷物、輕籽、碎粒等輕雜。主要設(shè)備:振動(dòng)篩。
(2)振動(dòng)篩、圓筒篩、平面回轉(zhuǎn)篩設(shè)備是通過配置合適的篩孔,利用小麥與其他物料之間粒度(長度、寬度、厚度)的差異,篩選出與小麥大小不同的雜質(zhì),或?qū)ξ锪线M(jìn)行分級(jí)的方法,清理出篦麥、碎麥、土灰、麥糠、赤霉病粒、麥毛等雜質(zhì)。主要設(shè)備:振動(dòng)篩、平面回轉(zhuǎn)篩、圓筒篩。
(3)比重去石機(jī)和重力分級(jí)去石機(jī)是根據(jù)物料間比重、容重、摩擦因素及懸浮速度等物料性質(zhì)的不同,物料在運(yùn)動(dòng)過程中產(chǎn)生的自動(dòng)分級(jí),從而分離出比重大于小麥粒的石子和礦渣等無機(jī)物。主要設(shè)備:去石機(jī)。
(4)磁選法是利用小麥與雜質(zhì)的導(dǎo)磁性不同,對混入小麥中磁性金屬雜質(zhì)進(jìn)行分離去除的方法。主要設(shè)備:磁選器。
(5)色選法是利用光學(xué)原理,將小麥中顏色不正常的(生霉、蟲蝕)顆粒以及外來夾雜物檢出并分離出來。主要設(shè)備:色選機(jī)。
(6)撞擊法是根據(jù)小麥和雜質(zhì)的強(qiáng)度不同,在具有一定技術(shù)特性的工作篩筒內(nèi),利用高速旋轉(zhuǎn)的打板對小麥進(jìn)行打擊,使小麥與打板、小麥與篩筒、小麥與小麥之間反復(fù)撞擊和摩擦,從而達(dá)到使小麥表面雜質(zhì)與小麥分離的目的,主要用于清理小麥表面雜質(zhì)(麥灰)。主要設(shè)備:打麥機(jī)。
經(jīng)對各清理設(shè)備具體清理部位收集的雜質(zhì)進(jìn)行辨識(shí),雜質(zhì)類型如表1 所示。
表1 各清理設(shè)備清出雜質(zhì)類型表
真菌毒素現(xiàn)有檢測方法比較多,包括生物分析法、化學(xué)分析法(薄層色譜法、高效液相色譜法)和免疫化學(xué)分析法(酶聯(lián)免疫法、熒光免疫層析法、膠體金免疫層析法)等。其中,膠體金免疫層析法、熒光免疫層析法以及酶聯(lián)免疫法作為真菌毒素快速檢測技術(shù),因其樣品處理簡單、檢測時(shí)間短、成本低等在我國基層企業(yè)被廣泛應(yīng)用,近年國家相關(guān)部門逐步完善了相關(guān)的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)及國家標(biāo)準(zhǔn)。
本次研究測定方法選用酶聯(lián)免疫(ELISA)法,該法出現(xiàn)于20 世紀(jì)70 年代,該技術(shù)準(zhǔn)確、特異、快速,且檢測成本低,在醫(yī)學(xué)臨床診斷和食品安全領(lǐng)域方面應(yīng)用廣泛[5]。其主要原理為采用抗原或抗體的特異反應(yīng)將待測物與酶連接,然后通過酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng),用于定量測定[6]。
(1)在某加工企業(yè)某一生產(chǎn)線,不同批次小麥批量帶麥生產(chǎn)時(shí),小麥連續(xù)經(jīng)過各類清理設(shè)備,收集各清理設(shè)備清出的下腳料,對其辨識(shí)并分別進(jìn)行嘔吐毒素測定;對幾批次小麥加工后產(chǎn)品進(jìn)行收集、檢測;每個(gè)樣品不低于100 g,為減少誤差,每個(gè)出口處間隔20 min 進(jìn)行一次取樣,取樣5 次,綜合混勻后進(jìn)行檢測。
(2)選用幾種小麥,一部分采用旋風(fēng)磨粉碎獲得全麥粉,另一種經(jīng)過布勒實(shí)驗(yàn)?zāi)?,按?5%出率獲得小麥粉。
(1)設(shè)備儀器:美國紐勤,設(shè)備型號(hào):stat fax 4700 ;上海嘉定垂直旋風(fēng)磨。
(2)試劑:紐勤試劑盒(8311)。
(3)測定環(huán)境:溫度25 ℃,濕度60%。
(4)試驗(yàn)方法:①粉碎樣品,對獲得的樣品采用垂直旋風(fēng)磨粉碎(粉碎后的樣品過1~2 mm 試驗(yàn)篩)。②稱取樣品,稱取10 g 樣品,加入100 mL 蒸餾水,振蕩5 min。③制取待測液,靜置5 min 后過濾,取濾液。④向每個(gè)紅色微孔加入100 μL 藍(lán)色標(biāo)簽瓶中的酶標(biāo)抗原溶液。⑤前5 個(gè)紅色微孔再分別加100 μL 標(biāo)準(zhǔn)品,后邊的紅色微孔加入100 μL 的樣品濾液。⑥用12 排槍將混合的樣液混合均勻后,吸取100 μL 至白色微孔中并在避光條件下孵育5 min。⑦將白色微孔中液體傾倒出去,用去離子水清洗5 次后將白色微孔中的水排凈并松板。⑧使用12 排槍向白色微孔中加入100 μL 綠色標(biāo)簽瓶中的底物,并在避光條件下孵育5 min。⑨使用12 排槍向白色微孔中加入100 μL 紅色標(biāo)簽的終止液,若有氣泡必須用槍頭除去。⑩在酶標(biāo)儀上讀取各樣品的吸光值,使用紐勤軟件將讀取的吸光值計(jì)算成嘔吐毒素結(jié)果(確保相關(guān)性系數(shù)≥98%)。
(1)通過對各清理設(shè)備清理后的雜質(zhì)感官分析歸類、整理、挑揀、粉碎、檢測DON,檢測結(jié)果如表2 所示。
表2 各清理設(shè)備清出雜質(zhì)DON 測定統(tǒng)計(jì)表 單位:ppb(μg/kg)
從檢測結(jié)果看,從清理設(shè)備清理出的雜質(zhì)DON 含量普遍偏高,其含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于小麥本身所測定的數(shù)值,說明小麥中的嘔吐毒素主要依附在小麥表層、異變粒以及其隨帶的有機(jī)雜質(zhì)中;其中平面回旋篩、振動(dòng)篩清理出的雜質(zhì)DON 含量最高,打麥機(jī)次之,色選機(jī)及去石頭機(jī)相對低一些;各個(gè)清理設(shè)備雜質(zhì)數(shù)量與當(dāng)批次小麥質(zhì)量情況有關(guān)。
通過清理設(shè)備清理后,小麥DON 值均出現(xiàn)不同程度的降低,下降率11%~59% 不等,清理前小麥DON 值越高,清理后DON 值相對下降趨勢越明顯。
(2)小麥清理后,經(jīng)加工成不同灰分等級(jí)基粉,按照灰分由低到高分別為F1 粉、F2 粉、F3 粉及麩皮,對各基粉進(jìn)行DON 檢測,結(jié)果如表3 所示。
表3 各基粉DON 檢測結(jié)果統(tǒng)計(jì)表 單位:ppb(μg/kg)
從表3 得出,產(chǎn)品越靠近皮層灰分越高,相應(yīng)DON含量越高,說明小麥中DON含量主要聚集在皮層,與皮層部位越接近,DON 含量就越高。
(3)對同一種小麥,全麥粉以及經(jīng)實(shí)驗(yàn)?zāi)ブ偏@得小麥粉進(jìn)行檢測,結(jié)果如表4 所示。
表4 DON 檢測結(jié)果統(tǒng)計(jì)表 單位:ppb(μg/kg)
從表4 得出,全麥粉DON 含量比小麥粉高,經(jīng)過實(shí)驗(yàn)?zāi)トコ砥ず?,DON 含量不同程度降低。
小麥結(jié)構(gòu)主要為皮層、糊粉層、胚乳,經(jīng)過試驗(yàn)測定表明,嘔吐毒素主要分布在小麥的皮層部位。在同一批小麥中,異變粒小麥及雜質(zhì)含量也將導(dǎo)致嘔吐毒素含量提升。小麥通過各清理設(shè)備清理后,DON 值會(huì)有不同程度降低,小麥DON 值越高,清理設(shè)備清理出的雜質(zhì)DON 越高。從檢測值看,從清理設(shè)備打麥機(jī)、振動(dòng)篩循環(huán)風(fēng)(上下出口)雜質(zhì)DON 含量最高,其次為平面回轉(zhuǎn)篩、振動(dòng)篩(下出口)的雜質(zhì)DON 含量,DON 含量的高低與清理設(shè)備清理出的雜質(zhì)類別有密切的關(guān)系。赤霉粒、篦麥、輕雜、麥毛等雜質(zhì)是導(dǎo)致DON 含量升高的直接原因。
在小麥加工過程中,各清理方法及設(shè)備的有效組合,在各清理設(shè)備性能運(yùn)行良好的情況下,各類雜質(zhì)能夠有效地被清理掉,讓小麥中DON 值有效降低。近年,各加工企業(yè)持續(xù)不斷升級(jí)清理設(shè)備設(shè)施,增加清理道數(shù)反復(fù)清理,持續(xù)提高清理效果,進(jìn)而保障小麥粉品質(zhì)穩(wěn)定性,獲得了較好的效果。