• 
    

    
    

      99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

      黑果腺肋花楸花青素理化性質(zhì)及抗氧化活性研究

      2023-11-22 12:19:36楊俊峰沈越張耀丹張卉
      中國(guó)調(diào)味品 2023年11期
      關(guān)鍵詞:腺肋花楸黑果

      楊俊峰,沈越,張耀丹,張卉

      (沈陽(yáng)化工大學(xué) 制藥與生物工程學(xué)院,沈陽(yáng) 110142)

      黑果腺肋花楸(Aroniamelanocarpa)屬于薔薇科腺肋花楸屬植物[1]。其果實(shí)中富含黃酮類成分,主要以花青素、原花青素及其衍生物為主[2—3]。陳彤垚等[4]研究發(fā)現(xiàn),黑果腺肋花楸果實(shí)總花青素含量約為(0.35~15.96) mg/g FW,(12.65~23.31) mg/g DW,高于藍(lán)莓等水果?;ㄇ嗨爻勺鳛槭秤蒙貞?yīng)用于食品領(lǐng)域外,近年來(lái)因發(fā)現(xiàn)其保護(hù)心血管系統(tǒng)、抗衰老和抗癌等生物活性而具有在醫(yī)藥、化妝品等領(lǐng)域廣泛應(yīng)用的潛力[5—7]。

      目前,黑果腺肋花楸花青素在食品行業(yè)主要用于制作果酒、果汁等產(chǎn)品,Gironés-Vilaplana等[8]研究發(fā)現(xiàn)將檸檬汁和黑果腺肋花楸果汁混合,在很大程度上保留了花青素含量并使其抗氧化性增強(qiáng),改善了其風(fēng)味。Witkowska等[9]對(duì)黑果腺肋花楸果酒的成分進(jìn)行分析,其中總抗氧化能力為34.0 mmol/L,總花青素含量最高為1.39 g/L,總酚含量最高為4.10 g/L,表明黑果腺肋花楸果酒具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。但是因花青素的穩(wěn)定性較差,其應(yīng)用還需進(jìn)行穩(wěn)定性及抗氧化活性等方面的深入研究。

      近年來(lái),Drózdz等[10]研究了酸性條件(pH 2.0~6.0)下紅薯花青素的穩(wěn)定性,結(jié)果表明在強(qiáng)酸性(pH 2.0~4.0)條件下比pH 5.0~6.0條件下更穩(wěn)定;孫倩怡等[11]的研究顯示,藍(lán)莓花青素在避光、低溫條件下較穩(wěn)定,當(dāng)溫度高于60 ℃時(shí),共價(jià)鍵發(fā)生破壞,從而導(dǎo)致花青素含量降低。劉軍波等[12]研究了黑果腺肋花楸花青素的穩(wěn)定性,其結(jié)果表明在溫度低于50 ℃、避光條件下,當(dāng)pH值小于4時(shí)該花青素的穩(wěn)定性較好,其中Fe3+、Al3+對(duì)該花青素穩(wěn)定性的影響較大。迄今,關(guān)于黑果腺肋花楸花青素穩(wěn)定性等理化性質(zhì)及生物活性的研究仍然不夠系統(tǒng)。因此,全面探究光照、pH、溫度、金屬離子、常用食品添加劑等對(duì)黑果腺肋花楸花青素穩(wěn)定性的影響,以及進(jìn)行該色素抗氧化活性的深入研究,將為黑果腺肋花楸深加工產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)和資源化利用提供理論基礎(chǔ)和應(yīng)用路徑。

      1 材料與方法

      1.1 實(shí)驗(yàn)材料及儀器

      1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料

      蔗糖、抗壞血酸、氯化鈣、氯化鈉、氯化鎂、硫酸亞鐵、過(guò)硫酸鉀、水楊酸、鐵氰化鉀、無(wú)水乙醇(均為分析純):天津市恒興化學(xué)試劑制造有限公司;硫酸銅、氯化鐵(均為分析純):河南萬(wàn)邦化工科技有限公司;檸檬酸(分析純):天津永大化學(xué)試劑制造有限公司;山梨酸鉀(分析純):寧波王龍科技股份有限公司;苯甲酸鈉(分析純):天津東大化工集團(tuán)有限公司;葡萄糖(分析純):天津大茂化學(xué)試劑廠;2,2′-聯(lián)氮雙(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二銨鹽(ABTS)、2,2-聯(lián)苯基-1-苦基肼基(DPPH)、雙氧水(均為分析純):上海麥克林生化科技股份有限公司。

      1.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器

      BS-124S分析天平 賽多利斯儀器有限公司;PHS-300 pH計(jì) 上海天達(dá)儀器有限公司;SCIENTZ-Ⅱ型超聲波細(xì)胞粉碎機(jī) 寧波新芝生物科技股份有限公司;HZP-150全溫振蕩培養(yǎng)箱 上海陽(yáng)光實(shí)驗(yàn)儀器有限公司;HHS-S電子恒溫水浴鍋 上??德穬x器設(shè)備有限公司;H1650離心機(jī) 湘儀離心機(jī)儀器有限公司;RE52CS旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 上海亞榮儀器有限公司;FD-1C-50真空冷凍干燥機(jī) 上海喬越電子有限公司;Spark 20M Tecan酶標(biāo)儀 勒菲生物科技(上海)有限公司。

      1.2 實(shí)驗(yàn)方法

      1.2.1 黑果腺肋花楸花青素制備

      黑果腺肋花楸果實(shí)經(jīng)洗凈、勻漿;果漿與體積分?jǐn)?shù)為40%的酸化甲醇按照料液比1∶5比例混勻,50 ℃恒溫振蕩1.2 h后抽濾,得到色素溶液,再將該溶液在真空度-0.09 MPa、50 ℃條件下旋蒸得到花青素粗提液。

      1.2.2 黑果腺肋花楸花青素純化

      將花青素粗提液加入經(jīng)預(yù)處理的HPD-100大孔樹(shù)脂柱中,當(dāng)花青素充分吸附在樹(shù)脂上后,加入蒸餾水沖洗樹(shù)脂柱,除去花青素粗提液中的蛋白質(zhì)、多糖等雜質(zhì)。除雜后,將體積分?jǐn)?shù)60%的乙醇溶液加入到樹(shù)脂柱中進(jìn)行洗脫,收集洗脫流分,50 ℃下旋蒸得到花青素純化液,冷凍干燥后得到花青素純化產(chǎn)物。

      1.2.3 黑果腺肋花楸花青素理化性質(zhì)

      1.2.3.1 黑果腺肋花楸花青素溶解性

      取蒸餾水、無(wú)水乙醇、乙酸乙酯、四氫呋喃、丙酮、氯仿、石油醚各5 mL,分別加入經(jīng)純化的花青素0.05 g,避光靜置30 min,觀察溶解情況。

      1.2.3.2 光照對(duì)黑果腺肋花楸花青素穩(wěn)定性的影響

      配制1 mg/mL花青素純化產(chǎn)物水溶液,根據(jù)參考文獻(xiàn)[13]所述方法進(jìn)行測(cè)定,以避光作為對(duì)照,計(jì)算花青素保留率。

      1.2.3.3 溫度對(duì)黑果腺肋花楸花青素穩(wěn)定性的影響

      同1.2.3.2方法配制花青素水溶液,分別放置在10,20,40,60,80,100 ℃中,在0,1,2,3,4,5 h測(cè)定吸光度,每組重復(fù)3次,以室溫作為對(duì)照,計(jì)算花青素保留率[14]。

      1.2.3.4 pH值對(duì)黑果腺肋花楸花青素穩(wěn)定性的影響

      同1.2.3.2方法配制花青素水溶液,分別取10 mL加入到14支試管中,將pH調(diào)至1~14。避光靜置30 min,測(cè)定吸光度,每組重復(fù)3次,計(jì)算保留率[15],并觀察顏色變化。

      1.2.3.5 金屬離子對(duì)黑果腺肋花楸花青素穩(wěn)定性的影響

      同1.2.3.2方法配制花青素水溶液,分別取10 mL上述水溶液,加入0.1 mol/L Mg2+、Cu2+、Ca2+、K+、Fe3+、Na+各0.3 mL,其中以去離子水作為對(duì)照,避光靜置,在0,1,2,3,4,5 h測(cè)定吸光度,每組重復(fù)3次,計(jì)算花青素保留率[16]。

      1.2.3.6 氧化劑、還原劑對(duì)黑果腺肋花楸花青素穩(wěn)定性的影響

      同1.2.3.2方法配制花青素水溶液,配制2%、4%、6%、8%、10% H2O2和2,4,6,8,10 g/L Na2SO3,各取1 mL分別加入到10 mL上述水溶液中,根據(jù)參考文獻(xiàn)[17]所述方法進(jìn)行測(cè)定。每組重復(fù)3次,以去離子水作為空白對(duì)照,計(jì)算花青素保留率。

      1.2.3.7 食品添加劑對(duì)花青素穩(wěn)定性的影響

      同1.2.3.2方法配制花青素水溶液,取10 mL上述水溶液分別加入蔗糖、葡萄糖、抗壞血酸、檸檬酸、山梨酸鉀、苯甲酸鈉,所加入的添加劑按照GB 2760—2014[18]《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》配制成最大使用濃度,根據(jù)參考文獻(xiàn)[19]所述方法進(jìn)行測(cè)定,以去離子水作為空白對(duì)照,計(jì)算花青素保留率。

      1.2.4 黑果腺肋花楸花青素抗氧化能力測(cè)定

      1.2.4.1 DPPH自由基清除率測(cè)定

      配制濃度為0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0 mg/mL的花青素水溶液,根據(jù)參考文獻(xiàn)[20]所述方法進(jìn)行測(cè)定,以抗壞血酸為陽(yáng)性對(duì)照,每個(gè)濃度重復(fù)3次。

      1.2.4.2 ABTS自由基清除率測(cè)定

      同1.2.4.1方法配制花青素水溶液,根據(jù)參考文獻(xiàn)[21]所述方法進(jìn)行測(cè)定,以抗壞血酸作為陽(yáng)性對(duì)照,每個(gè)濃度重復(fù)3次。

      1.2.4.3 羥基自由基清除率測(cè)定

      同1.2.4.1方法配制花青素水溶液,根據(jù)參考文獻(xiàn)[20]所述方法進(jìn)行測(cè)定,以抗壞血酸作為陽(yáng)性對(duì)照,每個(gè)濃度重復(fù)3次。

      1.2.4.4 總還原力測(cè)定

      同1.2.4.1方法配制花青素水溶液,根據(jù)參考文獻(xiàn)[21]所述方法進(jìn)行測(cè)定,以抗壞血酸作為陽(yáng)性對(duì)照,每個(gè)濃度重復(fù)3次。

      1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

      結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(x±s)表示,利用IBM SPSS Statistics 26進(jìn)行數(shù)據(jù)處理。

      2 結(jié)果與分析

      2.1 黑果腺肋花楸花青素溶解性

      由表1可知,黑果腺肋花楸花青素易溶于水、無(wú)水乙醇、四氫呋喃,微溶于乙酸乙酯、丙酮、氯仿,不溶于石油醚,即其為水溶性色素。

      表1 黑果腺肋花楸花青素在不同溶劑中的溶解性及顏色變化Table 1 Solubility and color change of Aronia melanocarpa anthocyanins in different solvents

      2.2 黑果腺肋花楸花青素穩(wěn)定性分析

      2.2.1 光照對(duì)黑果腺肋花楸花青素穩(wěn)定性的影響

      由圖1可知,隨著光照時(shí)間增加,黑果腺肋花楸花青素的保留率均有所下降。在5 h時(shí),花青素保留率從高到底依次是避光(92.2%)、室內(nèi)自然光(83.3%)、室外自然光(78.7%)。長(zhǎng)時(shí)間光照會(huì)誘導(dǎo)花青素碳骨架結(jié)構(gòu)改變,導(dǎo)致花色苷被降解,花青素含量降低[22],因此,在貯存或使用過(guò)程中應(yīng)避免花青素長(zhǎng)時(shí)間暴露在光照環(huán)境中。

      圖1 光照對(duì)黑果腺肋花楸花青素穩(wěn)定性的影響Fig.1 Effect of light on the stability of Aronia melanocarpa anthocyanins

      2.2.2 溫度對(duì)黑果腺肋花楸花青素穩(wěn)定性的影響

      由圖2可知,溫度越高,花青素保留率越低,在10 ℃條件下,花青素較穩(wěn)定,5 h后保留率在85%以上;在20~40 ℃條件下,5 h后花青素保留率均在85%。當(dāng)溫度升高到60~80 ℃,5 h后花青素保留率下降到80%以下,穩(wěn)定性較差。當(dāng)溫度升高到100 ℃時(shí),花青素保留率大幅度下降,5 h后保留率僅剩35%。相關(guān)研究表明[23],當(dāng)溫度超過(guò)50 ℃時(shí),花青素降解速率加快,促使紅色的黃烊鹽陽(yáng)離子向無(wú)色的假堿或查爾酮方向轉(zhuǎn)化,從而造成花青素降解、褪色。綜上所述,花青素應(yīng)低溫保存。

      圖2 溫度對(duì)黑果腺肋花楸花青素穩(wěn)定性的影響Fig.2 Effect of temperatures on the stability ofAronia melanocarpa anthocyanins

      2.2.3 pH值對(duì)黑果腺肋花楸花青素穩(wěn)定性的影響

      由圖3可知,在酸性條件下,花青素pH值為1~3時(shí),隨著pH值增大,吸光度緩慢增大;在pH值為3時(shí)吸光度達(dá)到最大值,此時(shí)試管溶液呈紅色;當(dāng)pH值為3~4時(shí),吸光度快速下降;當(dāng)pH值大于4時(shí),隨著pH值的增大,吸光度下降趨于平緩,溶液顏色逐漸變淺。在堿性條件下,當(dāng)pH值大于8時(shí),溶液顏色變?yōu)樗{(lán)紫色,且隨pH值增大溶液顏色逐漸加深;而在pH值大于11后吸光度稍有回升,溶液顏色由深綠色逐漸變成深棕色。這是由于花青素在不同的酸堿條件下,結(jié)構(gòu)異構(gòu)化反應(yīng)發(fā)生改變,導(dǎo)致穩(wěn)定性和顏色發(fā)生改變[24—25]。實(shí)驗(yàn)表明,黑果腺肋花楸花青素在pH值小于3時(shí)相對(duì)比較穩(wěn)定。

      圖3 pH值對(duì)黑果腺肋花楸花青素穩(wěn)定性的影響Fig.3 Effect of pH values on the stability of Aronia melanocarpa anthocyanins

      2.2.4 金屬離子對(duì)黑果腺肋花楸花青素穩(wěn)定性的影響

      由圖4可知,添加Mg2+、Na+、Ca2+、K+的花青素水溶液,5 h后保留率分別為75.1%、77.2%、76.9%、75.4%;添加Fe3+的花青素水溶液呈現(xiàn)深紫色,添加Cu2+的花青素水溶液出現(xiàn)沉淀,5 h后保留率分別為71.9%、70.0%。其原因可能是花青素分子結(jié)構(gòu)中存在一個(gè)以上自由的羥基時(shí),易與金屬離子發(fā)生絡(luò)合,Fe3+破壞了花青素結(jié)構(gòu)中的酚羥基,而Cu2+催化花青素結(jié)構(gòu)上的酚羥基發(fā)生氧化反應(yīng),從而產(chǎn)生變化[26—27]。結(jié)果表明,添加Mg2+、Na+、Ca2+、K+對(duì)花青素穩(wěn)定性的影響較小,而添加Fe3+、Cu2+對(duì)花青素穩(wěn)定性的影響較大,故該花青素應(yīng)避免與鐵制品、銅制品接觸。

      圖4 金屬離子對(duì)黑果腺肋花楸花青素穩(wěn)定性的影響Fig.4 Effect of metal ions on the stability of Aronia melanocarpa anthocyanins

      2.2.5 氧化劑、還原劑對(duì)黑果腺肋花楸花青素穩(wěn)定性的影響

      由圖5可知,隨著H2O2濃度的升高,黑果腺肋花楸花青素保留率下降,當(dāng)加入體積分?jǐn)?shù)2% H2O2后,花青素保留率下降至40%。隨著還原劑Na2SO3濃度升高,花青素保留率下降,但下降程度相對(duì)于H2O2低。相較于H2O2,花青素對(duì)Na2SO3稍具有耐受能力。這可能是因?yàn)檠趸瘎┡c還原劑能夠親核攻擊花青素的C位,致使花青素開(kāi)環(huán)生成查爾酮,發(fā)生降解[28]。姚思敏薔等[29]研究發(fā)現(xiàn),氧化劑H2O2能破壞黑果枸杞中的花青素并使花青素水溶液褪色,這與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果基本一致。因此,黑果腺肋花楸花青素應(yīng)該避免接觸氧化劑、還原劑。

      圖5 氧化劑H2O2和還原劑Na2SO3對(duì)黑果腺肋花楸花青素穩(wěn)定性的影響Fig.5 Effect of oxidant H2O2 and reducing agent Na2SO3 on the stability of Aronia melanocarpa anthocyanins

      2.2.6 食品添加劑對(duì)黑果腺肋花楸花青素穩(wěn)定性的影響

      由圖6可知,在相同濃度的抗壞血酸和檸檬酸條件下,抗壞血酸對(duì)黑果腺肋花楸花青素穩(wěn)定性的影響明顯低于檸檬酸;在0~5 h添加山梨酸鉀的花青素保留率下降較小,而添加苯甲酸鈉的花青素保留率下降較大,山梨酸鉀對(duì)黑果腺肋花楸花青素穩(wěn)定性的影響明顯低于苯甲酸鈉;蔗糖與葡萄糖相比,蔗糖對(duì)花青素穩(wěn)定性的影響較小。結(jié)果表明,上述食品添加劑對(duì)黑果腺肋花楸花青素穩(wěn)定性均有影響,應(yīng)加入護(hù)色劑提高其花青素保留率。

      圖6 食品添加劑對(duì)黑果腺肋花楸花青素穩(wěn)定性的影響Fig.6 Effect of food additives on the stability of Aronia melanocarpa anthocyanins

      2.3 黑果腺肋花楸花青素抗氧化活性測(cè)定

      2.3.1 DPPH自由基清除率

      由圖7可知,黑果腺肋花楸花青素和抗壞血酸清除自由基能力均隨著花青素濃度的增大而增大,當(dāng)花青素濃度在1.0 mg/mL時(shí),花青素清除率為94.6%,IC50值為0.398 mg/mL,略低于抗壞血酸(IC50值為0.414 mg/mL)。

      圖7 黑果腺肋花楸花青素對(duì)DPPH自由基清除率的影響Fig.7 Effect of Aronia melanocarpa anthocyanins on the scavenging rate of DPPH radicals

      2.3.2 ABTS自由基清除率

      由圖8可知,黑果腺肋花楸花青素和抗壞血酸對(duì)ABTS自由基的清除率均隨著花青素濃度的增大而增大,當(dāng)花青素濃度在1.0 mg/mL時(shí),ABTS自由基清除率為39.1%,IC50值為0.628 mg/mL,低于抗壞血酸(IC50值為0.832 mg/mL)。

      圖8 黑果腺肋花楸花青素對(duì)ABTS自由基清除率的影響Fig.8 Effect of Aronia melanocarpa anthocyanins on the scavenging rate of ABTS radicals

      2.3.3 羥基自由基清除率

      由圖9可知,黑果腺肋花楸花青素對(duì)羥基自由基的清除率隨著花青素濃度的增大而增大,當(dāng)花青素濃度為1.0 mg/mL處,花青素羥基自由基清除率為31.9%,IC50值為0.718 mg/mL。表明花青素與抗壞血酸(IC50值為0.907 mg/mL)相比其清除羥基自由基的活性相對(duì)較弱。

      圖9 黑果腺肋花楸花青素對(duì)羥基自由基清除率的影響Fig.9 Effect of Aronia melanocarpa anthocyanins on the scavenging rate of hydroxyl radicals

      2.3.4 總還原力的測(cè)定

      鐵離子還原能力作為抗氧化性能的一個(gè)重要指標(biāo),可反映抗氧化劑還原能力的大小,樣品對(duì)鐵離子的還原力越強(qiáng),其抗氧化能力越強(qiáng)[30]。

      由圖10可知,隨著濃度增大,黑果腺肋花楸花青素和抗壞血酸的總還原力增大,且呈一定正相關(guān)。黑果腺肋花楸花青素與抗壞血酸相比總還原力相對(duì)較弱,當(dāng)花青素濃度在1.0 mg/mL時(shí),花青素總還原力為28.6%。

      圖10 黑果腺肋花楸花青素總還原力測(cè)定Fig.10 Determination of total reducing capacity of Aronia melanocarpa anthocyanins

      3 結(jié)論

      黑果腺肋花楸花青素易溶于水、無(wú)水乙醇與四氫呋喃,在溫度低于60 ℃、避光條件下穩(wěn)定性更好;在pH值小于4時(shí),花青素水溶液的穩(wěn)定性較好,溶液呈紅色。隨著pH值增大,花青素水溶液顏色發(fā)生改變,依次為藍(lán)紫色、深綠色、深棕色;食品添加劑蔗糖、葡萄糖、抗壞血酸、檸檬酸、山梨酸鉀、苯甲酸鈉均影響花青素的穩(wěn)定性,其中防腐劑山梨酸鉀和抗氧化劑抗壞血酸對(duì)花青素穩(wěn)定性的影響較小;金屬離子Mg2+、Na+、Ca2+、K+對(duì)花青素穩(wěn)定性的影響較小,金屬離子Fe3+、Cu2+對(duì)花青素穩(wěn)定性的影響較大;該花青素對(duì)DPPH、ABTS、羥基自由基均具有清除能力,總還原力隨其濃度的增大而增強(qiáng)。綜上所述,黑果腺肋花楸花青素在醫(yī)藥、功能食品方面具有良好的應(yīng)用前景。

      猜你喜歡
      腺肋花楸黑果
      25種廣義花楸屬(Sorbus)植物葉脈序特征研究
      歐洲花楸與陜甘花楸的遺傳差異性及其果實(shí)成分分析
      核桃黑果病的發(fā)生與防治
      部分花楸屬植物的花粉形態(tài)特征及聚類分析
      基于文獻(xiàn)計(jì)量的黑果腺肋花楸國(guó)內(nèi)研究現(xiàn)狀分析
      不同產(chǎn)地的黑果腺肋花楸抗氧化活性比較
      超聲波輔助提取黑果腺肋花楸花色苷工藝優(yōu)化及穩(wěn)定性研究
      黑果枸杞化學(xué)成分研究
      黑果枸杞在遼西地區(qū)的栽培技術(shù)
      黑果菝葜根莖化學(xué)成分的研究
      中成藥(2017年3期)2017-05-17 06:09:00
      塔河县| 金沙县| 三亚市| 海安县| 凌云县| 长沙市| 云浮市| 茂名市| 临猗县| 余干县| 石狮市| 绍兴县| 北宁市| 新闻| 个旧市| 城口县| 青岛市| 卓资县| 府谷县| 耒阳市| 湛江市| 上饶县| 贵溪市| 鄂伦春自治旗| 霸州市| 桐梓县| 乌拉特前旗| 太谷县| 宜良县| 调兵山市| 康马县| 阳曲县| 新野县| 清涧县| 韶关市| 仲巴县| 安国市| 大悟县| 华蓥市| 班玛县| 伊川县|