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      規(guī)模羊場與散養(yǎng)戶羊小反芻獸疫抗體水平檢測分析

      2023-12-13 22:50:26楊先富包濤濤吳通奎黃功明袁曉娟莫興虎楊勝紅
      南方農(nóng)業(yè)·上旬 2023年9期
      關(guān)鍵詞:檢測分析

      楊先富 包濤濤 吳通奎 黃功明 袁曉娟 莫興虎 楊勝紅

      摘 要 為了掌握貴州省黔東南州規(guī)模羊場和散養(yǎng)戶羊小反芻獸疫免疫抗體水平,從6個規(guī)模羊場和10個散養(yǎng)戶采集羊血清742份,用小反芻獸疫酶聯(lián)免疫吸附(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)法檢測抗體。結(jié)果表明,規(guī)模羊場、散養(yǎng)戶平均合格率分別為80.83%、68.06%,規(guī)模羊場表現(xiàn)優(yōu)于散養(yǎng)戶;1個規(guī)模羊場和4個散養(yǎng)戶的抗體合格率低于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的合格標(biāo)準(zhǔn)(70%)。建議未達(dá)標(biāo)的規(guī)模羊場開展免疫抗體檢測,根據(jù)抗體變化規(guī)律,制訂適合本場的小反芻獸疫疫苗免疫程序;對未達(dá)標(biāo)散養(yǎng)戶加強宣傳和開展技術(shù)培訓(xùn),改善羊群飼養(yǎng)管理條件、提高羊群體質(zhì),按照免疫程序開展小反芻獸疫疫苗免疫。

      關(guān)鍵詞 羊;小反芻獸疫;抗體水平;檢測分析;貴州省黔東南州

      中圖分類號:S855.3 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:A DOI:10.19415/j.cnki.1673-890x.2023.17.069

      小反芻獸疫通常又被稱為羊瘟,是由小反芻獸疫病毒(Peste des Petits Ruminants Virus,PPRV)引起的一種急性病毒性傳染性疫病[1]。PPRV屬于副黏病毒科麻疹病毒,主要感染山羊、綿羊等小反芻動物[2]。感染PPRV后,羊會出現(xiàn)高熱稽留、眼鼻分泌物增多、口腔黏膜糜爛、腹瀉、肺炎等癥狀,還常常表現(xiàn)出離群獨處、臥地不起、體質(zhì)虛弱、覓食困難、肛門周圍有黑色附著物等[3]。小反芻獸疫主要通過接觸和氣溶膠途徑傳播,一年四季都有可能發(fā)生[4]。該病于1942年在非洲科特迪瓦首次被發(fā)現(xiàn),當(dāng)前在我國周邊的阿富汗、印度、巴基斯坦等國家,小反芻獸疫呈流行性發(fā)生。2007年,小反芻獸疫首次在我國西藏自治區(qū)發(fā)生,2014年小反芻獸疫在我國新疆、西藏、甘肅、山西等20多個省市零星暴發(fā),近5年來我國小反芻獸疫呈現(xiàn)出散發(fā)流行趨勢,如2018年黑龍江省佳木斯市,江蘇省如皋市、海安縣、如東縣,遼寧省調(diào)兵山市,湖南省耒陽市相繼發(fā)生小反芻獸疫疫情。2020年5月至2021年5月,全國共報道18起小反芻獸疫疫情,其中14起涉及地區(qū)包括新疆生產(chǎn)建設(shè)兵團、青海、西藏及內(nèi)蒙古,其余4起疫情分別發(fā)生在遼寧省清原縣,青海省格爾木市,西藏自治區(qū)堆龍德慶區(qū)、尼木縣、當(dāng)雄縣交界處及青海省都蘭縣國家自然保護區(qū)[5]。國內(nèi)也有多起野生動物發(fā)生小反芻獸疫的報道,如青海省都蘭縣國家自然保護區(qū)的野生巖羊,西藏自治區(qū)堆龍德慶區(qū)、尼木縣、當(dāng)雄縣交界處的野生巖羊,新疆維吾爾自治區(qū)烏魯木齊市和庫車市的鵝喉羚種群等,都曾發(fā)生過小反芻獸疫疫情[6]。

      小反芻獸疫在我國被列為一類動物疫病,羊一旦感染PPRV,將很快在羊群中大面積傳播,給養(yǎng)羊業(yè)造成嚴(yán)重的經(jīng)濟損失。因此,防治小反芻獸疫十分重要,而在小反芻獸疫的防控中,疫苗接種是最重要、最常見的防控措施之一[7]。到目前為止,已經(jīng)研究成功的疫苗主要有減毒活疫苗、滅活疫苗、重組疫苗,因此開展小反芻獸疫疫苗免疫,加強對小反芻獸疫疫情的預(yù)防和監(jiān)測,掌握規(guī)模場和散養(yǎng)戶羊小反芻獸疫疫苗的免疫效果,不僅能有效保障黔東南州羊及羊類產(chǎn)品質(zhì)量安全,有效控制小反芻獸疫的發(fā)生,還能為小反芻獸疫的防控提供重要依據(jù)。基于此,2023年上半年本團隊在貴州省黔東南州的6個規(guī)模羊場和10個散養(yǎng)戶采集羊血清樣品共計742份,進行小反芻獸疫抗體檢測,并對檢測結(jié)果進行分析,現(xiàn)將情況報道如下。

      1? 材料與方法

      1.1? 羊血清樣品與檢測試劑

      羊血清采集于黔東南州6個規(guī)模羊場、10個散養(yǎng)戶,共計742份(其中規(guī)模羊場360份、散養(yǎng)戶382份)。小反芻獸疫酶聯(lián)免疫吸附(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)抗體檢測試劑盒(批號:20221116),由深圳市萊孚生物科技有限公司生產(chǎn)。

      1.2? 免疫抗體檢測與結(jié)果判定

      1.2.1? 抗體檢測

      1)洗滌液配制。用蒸餾水將洗滌液10×(2號液)按1∶10體積稀釋為工作濃度洗滌液。

      2)樣品稀釋及加樣。用樣品稀釋液(5號液)將待檢血清按1∶100體積稀釋,每個樣品孔加100 μL。

      3)加陰、陽性對照品。陰性對照2孔,每個孔陰性對照品(試劑盒內(nèi)提供)加入100 μL;陽性對照2孔,每個孔加陽性對照品(試劑盒內(nèi)提供)100 μL,蓋好封板膜,37 ℃避光反應(yīng)30 min。

      4)洗板。甩去孔內(nèi)液體,每孔注滿工作濃度洗滌液洗滌3次,每次均需停留1 min,最后1次甩凈,拍干。

      5)加酶反應(yīng)。每孔加酶標(biāo)結(jié)合物(1號液)100 μL,蓋好封板膜,37 ℃避光反應(yīng)30 min。后面操作同前述洗板方法。

      6)顯色反應(yīng)。按所需用量,臨用前取等體積底物溶液(3號液)和顯色液(4號液)充分混勻,每孔加100 μL,蓋好封板膜,37 ℃避光反應(yīng)15 min。

      7)終止反應(yīng)。加終止液(6號液)50 μL,用酶標(biāo)儀于450 nm波長讀取OD值。

      1.2.2? 有效性判定

      陰性對照孔OD450值不應(yīng)大于0.20,否則小反芻獸疫抗體檢測試驗無效;陽性對照孔OD450值不應(yīng)小于0.50,否則小反芻獸疫抗體檢測試驗無效。

      1.2.3? 檢測結(jié)果判定

      S/P值為樣品OD值與陽性對照平均OD值的比值。S/P≥0.20,判斷為小反芻獸疫抗體陽性;S/P<0.20,判斷為小反芻獸疫抗體陰性。

      2? 結(jié)果與分析

      經(jīng)測定,陰性對照OD450平均值為0.05,小于0.20;陽性對照OD450平均值為0.89,大于0.50。說明此次小反芻獸疫抗體檢測試驗有效。

      2.1? 規(guī)模羊場羊小反芻獸疫免疫抗體合格率

      規(guī)模羊場小反芻獸疫免疫抗體檢測結(jié)果如表1所示,檢測6個規(guī)模羊場羊血清360份,合格數(shù)為291份,平均合格率為80.83%,合格率較高,超過農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的合格標(biāo)準(zhǔn)(70%);但是不同的規(guī)模羊場抗體水平存在差別,抗體合格率最高的是1號場,合格率為90.00%;其次是2號場、3號場,合格率分別是85.71%、85.24%;再次是5號場、4號場,抗體合格率分別是78.18%、77.78%;6號場抗體合格率最低,僅為67.24%,低于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的合格標(biāo)準(zhǔn)。

      2.2? 散養(yǎng)戶羊小反芻獸疫免疫抗體合格率

      散養(yǎng)戶羊小反芻獸疫免疫抗體檢測結(jié)果如表2所示,檢測10個散養(yǎng)戶羊血清382份,合格數(shù)為260份,平均合格率為68.06%,低于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的合格標(biāo)準(zhǔn)(70%)。但是不同散養(yǎng)戶之間羊小反芻獸疫抗體合格率存在差異,抗體合格率較高的有10號、8號、3號,其次是1號、4號、6號,抗體合格率低于農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定合格標(biāo)準(zhǔn)的有5號、7號、2號、9號。

      2.3? 規(guī)模羊場與散養(yǎng)戶羊小反芻獸疫免疫抗體水平比較

      規(guī)模羊場與散養(yǎng)戶羊小反芻獸疫免疫抗體水平存在明顯差別。從平均合格率來看,規(guī)模羊場抗體平均合格率(80.83%)高于散養(yǎng)戶抗體平均合格率(68.06%);從抗體合格場(戶)來看,6個規(guī)模羊場有5個規(guī)模羊場達(dá)到農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的合格標(biāo)準(zhǔn),占比83.33%,10戶散養(yǎng)戶只有6戶達(dá)到農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定的合格標(biāo)準(zhǔn),占比60.00%。可見,規(guī)模羊場羊小反芻獸疫免疫抗體水平明顯高于散養(yǎng)戶羊小反芻獸疫免疫抗體水平。

      2.4? 規(guī)模羊場與散養(yǎng)戶羊小反芻獸免疫抗體S/P值比較

      從表1來看,1號場小反芻獸疫免疫抗體合格率和S/P值最高,6號場小反芻獸疫免疫抗體合格率和S/P值最低;從表2來看,10號養(yǎng)殖戶小反芻獸疫免疫抗體合格率和S/P值最高,9號養(yǎng)殖戶小反芻獸疫免疫抗體合格率和S/P值最低。由此推斷,小反芻獸疫免疫抗體S/P值與合格率呈正相關(guān),即小反芻獸疫免疫抗體合格率越高,S/P值越高,疫情風(fēng)險越低,反之疫情風(fēng)險就越高;6個規(guī)模羊場羊小反芻獸疫免疫抗體S/P值平均為0.49,10戶散養(yǎng)戶羊小反芻獸疫抗體S/P值平均為0.32,規(guī)模羊場S/P值明顯高于散養(yǎng)戶。

      3? 小結(jié)

      在正常情況下,小反芻獸疫疫苗免疫1次,抗體保護期限為3年[8]。這次檢測結(jié)果顯示,在黔東南州6個規(guī)模羊場中,僅有1個規(guī)模羊場小反芻獸疫免疫抗體不合格,占比16.67%;在10戶散養(yǎng)戶中,有4戶小反芻獸疫免疫抗體不合格,占比達(dá)40%。對于羊群小反芻獸疫免疫合格率未達(dá)標(biāo)的情況,經(jīng)過仔細(xì)調(diào)查與分析,歸納出3方面的原因:1)最后一次小反芻獸疫疫苗免疫時間接近或超過3年,導(dǎo)致羊群抗體水平降低。2)飼養(yǎng)管理不當(dāng),致使羊群體質(zhì)變?nèi)?,?dǎo)致羊群免疫應(yīng)答能力下降。3)部分養(yǎng)殖戶不按照小反芻獸疫疫苗免疫程序進行免疫接種。

      為了做好羊群的小反芻獸疫免疫工作,提高小反芻獸疫免疫抗體合格率,杜絕小反芻獸疫的發(fā)生,提出以下建議。1)對于小反芻獸疫免疫抗體未達(dá)標(biāo)的規(guī)模羊場,建議定期開展小反芻獸疫免疫抗體檢測,根據(jù)免疫抗體變化規(guī)律,制訂適合本場的小反芻獸疫疫苗免疫程序。2)對于小反芻獸疫免疫抗體未達(dá)標(biāo)的散養(yǎng)戶,動物防疫部門應(yīng)加強宣傳,或?qū)︷B(yǎng)殖戶進行培訓(xùn),使養(yǎng)殖戶掌握動物疫病防治的基本知識,增強他們的防疫意識,提高養(yǎng)殖戶防疫技術(shù)水平;改善羊群飼養(yǎng)管理條件,提高羊群體質(zhì);嚴(yán)格按照免疫程序開展小反芻獸疫疫苗免疫,提高羊群免疫力。

      參考文獻(xiàn):

      [1] 楊先富,莫興虎,楊勝紅,等.黔東南州規(guī)模羊場小反芻獸疫免疫抗體水平調(diào)查[J].農(nóng)技服務(wù),2021,38(2):52-53.

      [2] 耿懷洋.小反芻獸疫的診斷與防控[J].養(yǎng)殖與飼料,2020(3):116-117.

      [3] 闞威,李雷斌,趙旭陽,等.青海巖羊源小反芻獸疫病毒N、F基因的遺傳進化分析[J].獸類學(xué)報,2023,43(2):171-181.

      [4] 王睿,王巍.小反芻獸疫的防控[J].北方牧業(yè),2023(5):30-31.

      [5] 宋煥堂,江萍,丁劍,等.新疆小反芻獸疫流行現(xiàn)狀及防控措施[J].現(xiàn)代畜牧獸醫(yī),2021(6):84-87.

      [6] 高睿,羅艷,莊向婷,等.以小反芻獸疫防控為例淺談規(guī)?;驁錾锇踩w系建設(shè)[J].吉林畜牧獸醫(yī),2022,43(6):121-124.

      [7] 趙川.小反芻獸疫疫苗研究進展[J].中國動物保健,2023,25(4):125-126.

      [8] 楊先富,廖飛,袁曉娟,等.從一例小反芻獸疫的發(fā)生到撲滅給我們的啟示[J].中國獸醫(yī)雜志,2017,35(5):119-120.

      (責(zé)任編輯:張春雨? 丁志祥)

      收稿日期:2023-07-17

      作者簡介:楊先富(1965—),男,貴州天柱人,碩士,正高級獸醫(yī)師,從事動物疫病防控技術(shù)研究。E-mail:fxy6666yeah.net@163.com。

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