武正瑛

（景泰縣畜牧獸醫(yī)技術(shù)服務中心，甘肅 景泰 730400）

副結(jié)核病，即副結(jié)核性腸炎，也稱約內(nèi)氏病，是一種由禽分枝桿菌副結(jié)核亞種引起羊、牛等反芻動物的慢性潛伏性接觸性傳染病。有研究發(fā)現(xiàn)羊和鳥類屬于禽副結(jié)核分枝桿菌傳播途徑中的重要宿主群落[1]。該病的主要臨床特征表現(xiàn)為頑固性腹瀉、漸進性消瘦和腸黏膜增厚等，且往往呈隱性感染，給畜牧業(yè)造成了重大經(jīng)濟損失[2]。該病的病原菌常分布于患病羊的腸道黏膜與腸系膜淋巴結(jié)中，往往隨糞便排出，易污染飼料及其飲水等。臨床調(diào)查發(fā)現(xiàn)，健康羊往往通過采食被污染的飼料等途徑而感染，其中幼畜易感性最高。疫苗接種是防控羊副結(jié)核病的有效策略之一，為羊的健康及食品安全作出了重要貢獻。本文查閱相關(guān)文獻，分析總結(jié)了羊副結(jié)核病的病原學、流行病學、臨床癥狀和病理變化、診斷與防控措施，旨在為羊副結(jié)核病的防控提供依據(jù)。

1 病原學

副結(jié)核分枝桿菌是分枝桿菌屬中的一員，屬于G+菌，主要寄生在細胞內(nèi)，一般在外界環(huán)境中無繁殖條件[3]，抗酸染色為陽性；該菌的抵抗力較強，在外界環(huán)境中可存活數(shù)月至一年以上[4]；該菌為需氧菌，最佳的培養(yǎng)溫度為37～38 ℃，最適pH為6.6～6.8[5]；副結(jié)核分枝桿菌一般為短粗桿狀，常成縱排列，無鞭毛、無運動力。副結(jié)核分枝桿菌生長緩慢，難以培養(yǎng)，往往需要在培養(yǎng)基中添加草分枝桿菌素提取物進行培養(yǎng)，可延長培養(yǎng)時間。Mizzi等[6]研究發(fā)現(xiàn)遺傳差異與副結(jié)核分枝桿菌特有的流行病學和毒力特征相關(guān)，這對羊副結(jié)核病的防控具有非常重要的意義。

2 流行病學

羊副結(jié)核病的傳染源主要為發(fā)病或潛伏感染的羊，不同階段的羊均可感染，幼齡羊發(fā)病率最高，流行性較強。該病潛伏期較長，可達數(shù)月，有時甚至在2～3年后才會出現(xiàn)臨床癥狀；該病分布范圍較廣，季節(jié)性不明顯，常呈散發(fā)或地方性流行。該病病原主要寄生在病羊腸道中，隨糞便排出，可能通過污染水源、飼料及外界環(huán)境等進行傳播[2,7]，健康羊如果接觸被污染的飼料或水源，可通過消化道感染該病；當飼草料不足導致羊營養(yǎng)不良時，羊感染風險加大[8]。李宇剛等[9]認為，針對該病防治，需要加強飼養(yǎng)管理水平，及時添加干草料，補充微量元素，定期檢疫，并做好隔離工作，在提高羊免疫力的同時，阻斷疾病傳播途徑。

3 臨床癥狀和病理變化

羊副結(jié)核病的主要臨床癥狀表現(xiàn)為患病羊精神狀態(tài)不振，被毛雜亂，可視黏膜蒼白，食欲減退，初期體溫升高，后期趨于正常，逐漸消瘦，有間歇性腹瀉等。患病羊的糞便有腥臭味且含有泡沫，顏色一般呈卵黃色。隨著患病時間的推移，病羊逐漸消瘦，出現(xiàn)貧血等一系列癥狀，最終可能會因臟器衰竭而死亡；還有少數(shù)病羊可能會繼發(fā)肺炎等病癥。另經(jīng)解剖發(fā)現(xiàn)，該病的主要病變部位集中在腸道，而腸黏膜上的最典型病變一般在腸系膜上，腸系膜淋巴結(jié)發(fā)生腫大且質(zhì)地堅硬；解剖還發(fā)現(xiàn)患病羊肺臟有出血點，出現(xiàn)局部氣腫[10-11]。

4 診斷

4.1 病原學檢測

病原學檢測屬于動物活體定性試驗方法，是目前公認的方法之一。Hemati等[12]為鑒定綿羊和山羊群中副結(jié)核病的病原菌，開展了禽副結(jié)核分枝桿菌亞型的病原學檢測。病原學檢測主要包括常規(guī)檢測、變態(tài)反應診斷與PCR檢測。常規(guī)檢測屬于副結(jié)核病診斷的標準之一，主要是通過一系列方法檢測糞便中是否含有副結(jié)核分枝桿菌，此方法敏感性不強，但特異性極高[13]，主要適用于發(fā)病前期，不適合發(fā)病中后期的患病羊檢測。變態(tài)反應診斷是一種適合于大規(guī)模樣本檢測的診斷技術(shù)，操作簡單，易于掌握[14]。PCR檢測屬于副結(jié)核病診斷的另一種常用方法，通過PCR檢測技術(shù)可以鑒定出樣本中的副結(jié)核分枝桿菌。該方法的優(yōu)點是特異性強、敏感性高及檢測迅速等。同時，PCR檢測體系的成功構(gòu)建可為羊副結(jié)核病的病原檢測、診斷等提供有力的技術(shù)支持。

4.2 血清學檢測

用于羊副結(jié)核病的血清學檢測方法主要包括補體結(jié)合檢測、酶聯(lián)免疫吸附檢測等。

4.2.1 補體結(jié)合檢測 補體結(jié)合檢測屬于血清學檢測方法之一，特異性比酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）高，對于一些患病早期的臨床樣本可準確檢測，但操作方法比較復雜，檢測時間比較長，不適用于大規(guī)模樣本檢驗。

4.2.2 酶聯(lián)免疫吸附檢測（ELISA）ELISA是目前羊副結(jié)核病最常用的檢測方法之一。在檢測臨床期感染動物時，敏感性比較高；在檢測亞臨床期感染動物時，其敏感性高于補體結(jié)合試驗。該方法具有操作簡便、成本低等優(yōu)點，但易出現(xiàn)假陽性，必須進行區(qū)分。鄭素琴等[15]認為ELISA是羊副結(jié)核病診斷、凈化較常用的血清學診斷方法。汪天杰等[16]研究表明，澳大利亞進境種羊中羊副結(jié)核病的陽性率為0%～2.92%。其中ELISA試驗檢出的陽性數(shù)量較多。因此在臨床上，建議采用ELISA方法來檢測羊副結(jié)核病。

5 防控措施

5.1 隔離

如果發(fā)現(xiàn)患有或疑似患有羊副結(jié)核病的羊，應及時隔離飼養(yǎng)，并進行診斷。若確診患有羊副結(jié)核病，需及時淘汰處理病羊，且要對飼喂病羊的羊舍、飼槽及其他用具等用消毒藥劑進行多次嚴格消毒，尤其是病羊糞便，必須經(jīng)生物發(fā)酵處理后方可利用。同時，要對假定健康羊群實施2次/年的病原檢測，經(jīng)連續(xù)2次檢測均為陰性的群體即可視為健康羊群。

5.2 凈化與免疫

對臨床癥狀比較明顯的病羊和檢測為陽性的羊應及時淘汰。如果采用的是集約化養(yǎng)殖模式，需要分開使用草場，同時要遵循“自繁自養(yǎng)”原則，引進的種羊需要隔離檢疫，檢測結(jié)果為陰性方可混群。此外要對羊群定期進行免疫接種，通過接種副結(jié)核滅活苗來增強羊群免疫力，預防該病的發(fā)生和流行。

5.3 消毒

巴氏消毒法也是預防該病發(fā)生的重要措施之一，此方法可以消殺初乳或乳汁中的羊副結(jié)核病病原菌，對公共衛(wèi)生安全具有重要意義[17-18]。副結(jié)核分枝桿菌（Mptb）是包括牛、山羊和綿羊在內(nèi)的反芻動物的約翰氏病的病原體。有人認為這種微生物與克羅恩病相關(guān)，而牛奶是人類接觸這種微生物的重要潛在來源之一。巴氏滅菌試驗是根據(jù)加拿大國家乳制品規(guī)范中規(guī)定的時間和溫度標準進行的，其中常規(guī)批次巴氏滅菌方法為63 ℃下30 min，高溫短時間巴氏滅菌試驗（HTST）方法為72 ℃下15 s。Gao等[19]通過18次巴氏滅菌試驗，包括7次常規(guī)試驗和11次高溫短時間巴氏滅菌試驗，發(fā)現(xiàn)在7項常規(guī)批次巴氏消毒試驗中，所有斜面或肉湯培養(yǎng)基中均未檢測到存活者，11項HTST試驗中有2項檢測出Mptb幸存者；且當牛奶中存在≥105 cfu/mL的Mptb時，Mptb可以在HTST巴氏滅菌中存活。

6 總結(jié)

羊副結(jié)核病是一種慢性接觸性傳染病，多呈慢性、隱性感染，給我國乃至全球養(yǎng)羊業(yè)帶來了嚴重的經(jīng)濟損失，也給人類健康帶來了潛在威脅。針對該病的防控措施主要以預防為主，除了制定詳細的檢疫與隔離程序外，須定期對羊圈進行消毒，建議及時采用ELISA方法來開展羊副結(jié)核病的檢測，同時在飼料中添加維生素、微量元素來增強羊的抗病能力，也可以在飼喂過程中添加黃芪、甘草等中草藥增強機體免疫力，以降低羊副結(jié)核病的發(fā)病率與病死率，提高規(guī)模化羊場羊副結(jié)核病的防控水平。