李婉茹 何峰

摘要：本試驗采用分光光度法測定了云南麻栗坡、山東夏津、西藏波密、吉林長白山、云南麗江5個產(chǎn)地的野生桑樹桑黃和西藏波密人工養(yǎng)殖的桑樹桑黃的總黃酮量，經(jīng)測定結(jié)果表明，野生桑樹桑黃的總黃酮量含量較高，其中西藏波密的野生桑樹桑黃的總黃酮量含量最高，并采用電子耦合等離子體發(fā)射光譜法測定了這六個樣品的部分金屬元素含量，結(jié)果得到西藏波密野生桑黃的K和Zn含量較高。

關鍵詞：桑樹桑黃；總黃酮；金屬元素含量

桑黃俗稱桑黃菇、桑臣和桑耳，野生桑樹桑黃的藥用價值極高，具有抗發(fā)炎、止血、治婦女病的功效，在我國已證實的產(chǎn)地有西藏、四川、云南、山東、河南、吉林等地，現(xiàn)代醫(yī)學的研究中，桑黃在治療癌癥領域的真菌中排名第一[1]，桑黃中提取的黃酮具有抗腫瘤的功效[2]，桑黃營養(yǎng)價值豐富[3]，具有保健的功效，被制成茶包[4]等產(chǎn)品，學者們關于桑樹桑黃的分類屬性爭論不休，在近十年來對桑黃這類真菌的分類屬性達成共識，認為它們是擔子菌門（Basidiomycota）蘑菇綱（Agaricomycetes）銹革菌目（Hymenochaetales）銹革菌科（Hymenochaetaceae）的大型多孔菌[5]。

近年來，有學者發(fā)現(xiàn)中藥的藥效與所含微量元素及其含量比值有關。這些微量元素是有著重要的生理功能、營養(yǎng)作用和臨床診斷意義比如Zn能參與多種酶的合成與激活，并直接參與生長發(fā)育、內(nèi)分泌、免疫遺傳功能，還可以參與防衰老抗癌腫[6]?，F(xiàn)已經(jīng)由實驗證實，黃酮與金屬元素所形成的配合物的OH-1自由基清除能力要強于黃酮，同時也表現(xiàn)出黃酮與金屬元素之間的抗活性氧的協(xié)同作用，OH-1自由基清除能力順序為：二價鋅配合物＞三價鐵配合物[7]，現(xiàn)有研究中對桑黃金屬元素含量和黃酮含量的比較分析較少。為研究各產(chǎn)地的桑樹桑黃是否由于地域差異存在差異，本研究比較了云南麻栗坡、山東夏津、西藏波密、吉林長白山、云南麗江5個產(chǎn)地的野生桑樹桑黃的總黃酮量和部位金屬元素含量，同時，桑黃作為一類珍貴的食藥用菌，具有良好的營養(yǎng)價值、藥用價值及保健功效，在抗菌消炎、抑制腫瘤、降血糖等方面均有重要作用[8]，為探討種植桑黃是否與野生桑黃存在差異，選取了西藏波密養(yǎng)殖桑樹桑黃進行比較分析，為更地開發(fā)和利用該資源提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料和試劑

1.1.1 試驗材料

試驗材料為2023年7～11月從各地采購，經(jīng)送樣檢測后，利用PCR法進行測定，1—6號樣品經(jīng)瓊脂糖跑膠鑒定均檢出650 bp大小片段，根據(jù)桑樹桑黃的引物對比較后，確定送檢樣品均為桑樹桑黃。

1.1.2 試驗試劑

蘆丁標樣（合肥博美生物科技有限責任公司），試驗所需硝酸鋁、醋酸鉀、硝酸、高氯酸等均為優(yōu)級純。

1.2 試驗方法

1.2.1 桑黃中總黃酮的提取

桑黃總黃酮量的測定采用分光光度法[9]，將材料經(jīng)過粉碎后，過14目篩，混勻，稱取1.000 g粉碎后的樣品置于燒杯中，加入95%的乙醇約30 mL，65℃水浴加熱45 min攪拌萃取黃酮，冷卻后迅速過濾上清液，殘渣用95%乙醇洗至無色，再用95%乙醇稀釋至50 mL定容，搖勻后取5～10 mL樣品置于50 mL容量瓶中使用95%乙醇定容，搖勻。

1.2.2 桑黃中總黃酮含量的測定

（1）配置濃度為100 g·L－1的硝酸鋁溶液：稱取17.60 g Al（NO3）3·9H2O，加水溶解后定容至

100 mL。

（2）配置濃度為9.8 g·L－1的硝酸鋁溶液：稱取醋酸鉀9.814 g，加水溶解后定容至100 mL。

（3）標準曲線的繪制：準確稱取干燥后的蘆丁

50 mg，加無水乙醇定容至50 mL的容量瓶中，取蘆丁標樣0、1、2、3、5、7、10 mL分別置于50 mL容量瓶中；再用吸量管依次加入配置好的硝酸鋁溶液1 mL，配置好的醋酸鉀溶液1 mL，15 mL 95%乙醇，加水定容后搖勻靜置1 h后待測，使用分光光度計，調(diào)至波長為415 nm處，依次測定吸光度，建立標準曲線。

（4）待測樣品測定：移取1.2.1中的1.0 mL，置于50 mL容量瓶中，再依次加入1 mL硝酸鋁溶液、1 mL醋酸鉀溶液和15 mL 95%乙醇，加水定容。使用分光光度計在415 nm處測量得到待測樣品的吸光值。

（5）根據(jù)式①計算總黃酮量。

式中：

X——總黃酮含量，%；

m——由吸光度值計算出的蘆丁的質(zhì)量，mg；

W——樣品的質(zhì)量，g；

d——稀釋比例。

1.2.3 桑黃金屬含量的測定

金屬元素含量的測定采用電感耦合等離子體發(fā)射光譜法。

（1）樣品處理：使用濕法消解，使用萬分位天平準確稱取0.2～1 g樣品于150 mL高型燒杯中，加入9.0 mL 5%硝酸和1 mL高氯酸，置于電熱板上，控制電熱板溫度為130～150℃，待大量棕色煙消失后，加熱至180℃后繼續(xù)消解，當消解液變?yōu)楹谏蠹尤肷倭康?%硝酸，直至冒白煙，消解液呈透明，冷卻后移入25 mL容量瓶中，多次洗滌合并入容量瓶中，定容，用相同的方法做空白樣。

（2）樣品測定：根據(jù)儀器操作說明，配置待測元素標液后，上機測定各待測的光譜強度，再由標準曲線得到待測金屬元素的含量。

（3）根據(jù)②式計算各元素的含量。

式中：

X——待測元素含量，mg/kg；

ρ——待測元素濃度，μg/mL；

ρ0——待測元素空白濃度，μg/mL；

V——待測樣體積， mL；

N——試樣稀釋倍數(shù)；

m——試樣質(zhì)量，g。

1.3 主要儀器和設備

紫外可見分光光度計（TU-1810），電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀（ICAP7000），分析天平

（ME204E）。

2 結(jié)果分析

2.1 不同產(chǎn)地桑黃的總黃酮量比較

由表1可知，西藏波密產(chǎn)的野生桑黃（編號4）總黃酮含量最高，達到918.2 mg/100 g，是這6種產(chǎn)地中黃酮含量最高的。山東夏津產(chǎn)的野生桑黃（編號5）總黃酮含量為896.5 mg/100 g，居于第二位。吉林長白山產(chǎn)的野生桑黃（編號3）總黃酮含量也很高，達到371.8 mg/100 g，居于第三位。云南麗江產(chǎn)的野生桑黃（編號6）總黃酮含量為159.1 mg/100 g，居于較低水平。云南麻栗坡（編號2）和西藏波密產(chǎn)的人工養(yǎng)殖桑黃（編號1）總黃酮含量較低，分別為37.07 mg/100 g和

60.87 mg/100 g?？梢哉J為野生桑黃的總黃酮含量普遍高于人工養(yǎng)殖的桑黃，而且不同產(chǎn)地的野生桑黃總黃酮含量也存在差異。

2.2 不同產(chǎn)地桑黃的Mg、K、Ga、Fe、Zn含量比較

取樣0.2～0.4 g，樣品編號同表1，濕法消解后定容，經(jīng)測定得到不同金屬含量。各個樣品的Mg含量數(shù)據(jù)見圖1。樣品1和樣品6分別是西藏波密人工養(yǎng)殖桑黃和云南麗江野生桑黃，這兩個樣品的Mg含量較高，吉林長白山（樣品3）的Mg含量最低。

各個樣品的K含量數(shù)據(jù)見圖2。西藏波密野生桑黃（樣品4）的K含量較高，其他樣品的K含量都較低。

各個樣品的Ca含量數(shù)據(jù)見圖3。云南麻栗坡野生桑黃（樣品2）的Ca含量較高。

各個樣品的Fe含量數(shù)據(jù)見圖4。云南麻栗坡野生桑黃（樣品2）的Fe含量較低，其余桑黃的Fe含量差距不大。

各個樣品的Zn含量數(shù)據(jù)見圖5。西藏波密野生桑黃（樣品4）的Zn含量較高。

3 討論

在6個樣品的比價中，種植桑黃與野生桑黃相比，總黃酮含量較低，其余各產(chǎn)地的野生桑黃中，產(chǎn)地為西藏波密的野生桑黃總黃酮量最高。在幾種金屬元素的比價分析中，西藏波密的野生桑黃的含Zn、K量較高，云南麗江的野生桑黃含Mg量較高，云南麗江和云南麻栗坡野生桑黃的Ca含量較高，不同產(chǎn)地桑黃因地域差異總黃酮量和金屬元素含量具有一定的差異。考慮到現(xiàn)有研究中認為形成黃酮與金屬元素形成的配位作用的抗氧化性更強，西藏野生桑黃的藥用價值相較而言更高，而針對抗氧化能力這一指標，則需要通過試驗進一步進行探討。

本研究中，選取了同為西藏波密的野生桑黃和人工養(yǎng)殖桑黃進行了比較，無論是總黃酮量還是金屬含量上都存在較大的差異，而種植方式是否影響桑樹桑黃的藥用效果，種植桑黃經(jīng)過改良種植條件后是否能與野生桑黃具有等同的藥用價值，都是值得進一步研究的問題。

參考文獻

[1] 孫培龍，徐雙陽，楊開，等.珍稀藥用真菌桑黃的國內(nèi)外研究進展[J].微生物學通報，2006（2）：119-123.

[2] 黃羅丹，安春艷，劉德陽，等.液體發(fā)酵桑黃總黃酮對抗腫瘤活性及細胞周期的影響[J].山東理工大學學報（自然科學版），2019，33（2）：65-68+73.

[3] 劉錦程，弓志青，楊鵬，等.桑黃營養(yǎng)成分、活性成分及多糖性質(zhì)分析[J].食品工業(yè)科技，2023（22）：241-248.

[4] 洪文龍，謝春芹，許俊齊，等.桑黃靈芝袋泡茶制作及沖泡工藝研究[J].保鮮與加工，2022，22（4）：52-58.

[5] 吳聲華，黃冠中，陳愉萍，等.桑黃的分類及開發(fā)前景[J].菌物研究，2016，14（4）：187-200+185.

[6] 李倩華，孫淑軍，王洋，等.金屬元素在中醫(yī)藥研究中的現(xiàn)狀[J].世界科學技術-中醫(yī)藥現(xiàn)代化，2015，17（4）：901-906.

[7] 李方.黃酮類有機金屬配合物及其生物構(gòu)效和協(xié)同作用的研究[D].宜賓：四川大學，2004.

[8] 謝存一，周禹佳，張疏雨，等.桑黃活性成分研究及行業(yè)發(fā)展分析[J].食用菌，2023，45（3）：1-5.

[9] 王爍，蔣明蔚，李曉斌，等.蜂膠中總黃酮含量的測定[J].食品與發(fā)酵工業(yè)，2012，38（12）：152-156.