接種根瘤菌對(duì)橡膠樹(shù)‖葛藤模式下土壤氮含量及氮轉(zhuǎn)化相關(guān)酶活性的影響

摘要：探究接種根瘤菌條件下減施氮肥對(duì)橡膠樹(shù)‖葛藤間作模式下土壤無(wú)機(jī)氮含量和氮轉(zhuǎn)化相關(guān)酶活性的影響，以期為橡膠園氮肥減量施用提供技術(shù)支撐。在幼齡橡膠園中，以正常施氮水平下不間作葛藤和間作葛藤不接種根瘤菌分別作為對(duì)照CK1、CK2；以間作接種根瘤菌條件下，施100%、75%、50%氮肥水平分別為試驗(yàn)處理T100、T75、T50。均勻取0～40 cm土壤樣品，采用單因素分析法分析膠園土壤不同土層（0～10、10～20、20～30、30～40、0～40 cm）硝態(tài)氮、銨態(tài)氮含量，以及脲酶、硝酸還原酶、亞硝酸還原酶、羥胺還原酶活性的變化特征。結(jié)果表明，與CK1和CK2相比，T100、T75、T50處理在0～10、10～20 cm土層的銨態(tài)氮含量提高11%以上，硝態(tài)氮含量提高23%以上，其中T50處理提高幅度最大；T50處理在0～10、10～20 cm土層中氮轉(zhuǎn)化相關(guān)的硝酸還原酶、亞硝酸還原酶和脲酶活性均最高，羥胺還原酶活性最低；與CK1和CK2相比，T50處理下的硝酸還原酶和亞硝酸還原酶活性提高9%以上。相關(guān)性分析結(jié)果表明，不同處理下土壤氮含量與硝酸還原酶和亞硝酸還原酶活性呈顯著正相關(guān)，與羥胺還原酶活性呈顯著負(fù)相關(guān)，與脲酶活性相關(guān)不顯著。隸屬函數(shù)綜合分析結(jié)果表明，T50處理的平均隸屬函數(shù)值最大，對(duì)土壤氮含量和氮轉(zhuǎn)化相關(guān)酶活性促進(jìn)效果最佳。綜上，在橡膠樹(shù)‖葛藤間作模式下采用接種根瘤菌和減施50%氮肥的措施處理能顯著提高表層土壤氮素供應(yīng)和周轉(zhuǎn)能力。

關(guān)鍵詞：橡膠；間作；葛藤；土壤氮素；土壤酶活性

中圖分類號(hào)：S344.2 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號(hào)：1002-1302（2024）17-0239-07

收稿日期：2023-10-08

基金項(xiàng)目：海南省自然科學(xué)基金（編號(hào)：320QN349）。

作者簡(jiǎn)介：王桂花（1989—），女，海南昌江人，碩士，助理研究員，主要從事作物營(yíng)養(yǎng)與施肥研究。E-mail：guihuawang77@163.com。

通信作者：吳 敏，博士，副研究員，主要從事土壤資源管理和植物營(yíng)養(yǎng)研究。E-mail：wuminhainan@sina.com。

天然橡膠是重要的戰(zhàn)略物質(zhì)，98%以上來(lái)源于橡膠樹(shù)（Hevea brasiliensis），而橡膠樹(shù)的培育周期可達(dá)70年之久。我國(guó)橡膠樹(shù)種植區(qū)域（簡(jiǎn)稱植膠區(qū)）主要位于熱帶高溫高濕地區(qū)，土壤為磚紅壤，其礦質(zhì)養(yǎng)分少且淋溶作用強(qiáng)，氮損失顯著高于其他區(qū)域。目前，我國(guó)植膠區(qū)主要通過(guò)大量施用氮肥來(lái)保證橡膠產(chǎn)量，該方法成本較高，極易造成環(huán)境污染，且隨著天然橡膠價(jià)格持續(xù)低迷，經(jīng)濟(jì)效益逐年下降，亟須開(kāi)展膠園減肥增效相關(guān)研究。土壤氮素的吸收、轉(zhuǎn)化及含量變化是影響天然橡膠產(chǎn)量的關(guān)鍵因素。Stephen等認(rèn)為，豆科作物能夠與根瘤菌形成共生固氮，為作物生長(zhǎng)和發(fā)育提供氮源，從而提高土壤氮含量，并減少化學(xué)氮肥的施用，降低投入成本［1-2］。因此，探究接種根瘤菌和減施氮肥處理對(duì)橡膠樹(shù)‖豆科作物模式下土壤氮含量及氮轉(zhuǎn)化相關(guān)酶活性的影響，對(duì)實(shí)現(xiàn)膠園減肥增效具有重要意義。葛藤（Pueraria iobata）是常見(jiàn)的豆科作物，通過(guò)在橡膠園行間種植葛藤可提高土壤肥力、調(diào)節(jié)土壤酸堿度、改善土壤環(huán)境，促進(jìn)橡膠樹(shù)生長(zhǎng)和提高天然橡膠產(chǎn)量［3-5］。橡膠‖葛藤間作系統(tǒng)屬于豆科作物‖非豆科作物間作系統(tǒng)的一種，通過(guò)外源接種根瘤菌的方式能使豆科作物與根瘤菌共生后具備較強(qiáng)的固氮能力，進(jìn)而增加作物產(chǎn)量，提高土壤氮含量、土壤酶活性及微生物量［6-9］，并減少豆科作物‖非豆科作物間作系統(tǒng)中化學(xué)氮肥的投入［10-12］。如Mei等在蠶豆與玉米間作系統(tǒng)中接種根瘤菌，不僅實(shí)現(xiàn)了減施50%的氮肥，同時(shí)促進(jìn)了生物固氮量和氮轉(zhuǎn)化率的提升，且蠶豆與玉米產(chǎn)量分別提高50.0%、19.6%［13］；段玉等在豆科作物與灌木間作系統(tǒng)中接種根瘤菌，發(fā)現(xiàn)能夠提高土壤全氮、速效氮、速效磷等含量，其中速效氮含量可增加136%［14］；Chen等認(rèn)為，在花生與玉米間作系統(tǒng)中減施20%～30%的氮處理能顯著提高土壤中的脲酶和磷酸酶活性，還能改善土壤理化性質(zhì)和細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)［15］；章孜亮等認(rèn)為，種植花生接種根瘤菌配合減氮20%時(shí)的促生增產(chǎn)效果最明顯，但減氮50%處理的效果較差［16］。綜上，根瘤菌的促進(jìn)效果受氮肥施用量影響明顯，過(guò)量施氮對(duì)根瘤菌的固氮能力會(huì)產(chǎn)生抑制作用，施氮量過(guò)低也會(huì)影響豆科作物根系生長(zhǎng)，進(jìn)而影響根瘤菌的固氮能力［17］。目前，針對(duì)橡膠樹(shù)‖葛藤間作模式下土壤氮含量及氮轉(zhuǎn)化相關(guān)酶活性等研究已較多，但是均未開(kāi)展接種根瘤菌和減施氮肥措施的影響研究。因此，本研究通過(guò)分析接種根瘤菌和減施氮肥對(duì)橡膠樹(shù)‖葛藤間作模式下不同土層的土壤無(wú)機(jī)氮含量及硝酸還原酶、亞硝酸還原酶、羥胺還原酶、脲酶活性差異，探究其對(duì)橡膠園土壤氮素供應(yīng)和周轉(zhuǎn)能力的作用效果，以期為橡膠園氮肥減量施用提供技術(shù)支撐和理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地概況

本試驗(yàn)地位于中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院試驗(yàn)場(chǎng)三隊(duì)（19°32′55″N，109°28′30″E），為典型熱帶海洋季風(fēng)氣候，年均降水量約1 600 mm，年均氣溫20.8～26.0 ℃。橡膠園于2019年定植，品種為熱研7-33-97，株行距為3 m×7 m。本試驗(yàn)于2022年4月22日開(kāi)始，此時(shí)橡膠樹(shù)齡為4年，屬幼齡橡膠園。試驗(yàn)前土壤基本理化性質(zhì)見(jiàn)表1。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

以葛藤為間種作物，品種為爪哇葛藤，采用隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)。隨機(jī)選定3行橡膠樹(shù)為1個(gè)試驗(yàn)小區(qū)，在行間種植葛藤，株行距為0.4 m×0.4 m，間作小區(qū)面積為156 m2，種植方向與橡膠樹(shù)行向相同（圖1），單作小區(qū)面積為270 m2。試驗(yàn)設(shè)置5個(gè)處理，正常施氮水平下不間作葛藤、間作葛藤但不接種根瘤菌作為對(duì)照（簡(jiǎn)稱CK1、CK2）；間作與接種根瘤菌條件下，分別施氮100%、75%、50%共3個(gè)水平（簡(jiǎn)稱T100、T75、T50）。每個(gè)處理設(shè)置3個(gè)生物學(xué)重復(fù)，共15個(gè)小區(qū)。試驗(yàn)實(shí)施前即4月25日，葛藤種植區(qū)以鈣鎂磷肥、氯化鉀和1/4尿素做底肥隨耕地一起翻入土壤，其余尿素按1 ∶2比例于7月5日和9月23日作為追肥施用。其中，磷肥（P2O5）和鉀肥（K2O）施用量分別為120、100 kg/hm2，氮肥3個(gè)水平施用量分別為150、105、75 kg/hm2（尿素）。

1.3 樣品采集與測(cè)定

1.3.1 土壤樣品采集

于2022年12月22日采集樣品，在葛藤種植區(qū)按照“S”形選取3個(gè)采樣點(diǎn)。將地表葛藤植物及枯枝、石塊等清理干凈，再分別按0～10、10～20、20～30、30～40 cm土層深度采集土壤樣品，每層土壤分2份裝入自封袋，密封備用。其中1份快速過(guò)2 mm孔徑篩網(wǎng)后裝袋貼標(biāo)，保存在4 ℃冰箱，用于土壤銨態(tài)氮和硝態(tài)氮含量的測(cè)定；1份過(guò)1 mm孔徑篩網(wǎng)后裝袋貼標(biāo)，用于測(cè)定土壤酶活性指標(biāo)。

1.3.2 土壤氮含量測(cè)定

土壤銨態(tài)氮、硝態(tài)氮含量采用2 mol/L氯化鉀溶液浸提［18］，待測(cè)液用流動(dòng)分析儀測(cè)定。

1.3.3 土壤酶活性測(cè)定

土壤硝酸還原酶、亞硝酸還原酶和羥胺還原酶活性的測(cè)定參考武志杰等的方法［19-21］；土壤脲酶活性采用苯酚鈉比色法［22］測(cè)定。

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用Microsoft Excel進(jìn)行數(shù)據(jù)整理和圖表繪制；采用DPS 9.0軟件進(jìn)行最小顯著差異法（LSD）分析；采用SPSS 26.0軟件進(jìn)行泊松相關(guān)性分析。

通過(guò)隸屬函數(shù)法綜合評(píng)價(jià)不同施肥處理對(duì)土壤中氮含量及酶活性影響的優(yōu)劣。產(chǎn)生積極影響的指標(biāo)采用隸屬函數(shù)計(jì)算：U（Xi）=（Xi-Xmin）/（Xmax-Xmin）；產(chǎn)生消極影響的指標(biāo)采用反隸屬函數(shù)計(jì)算：U（Xi）=1-（Xi-Xmin）/（Xmax-Xmin）。其中：Xi表示某一指標(biāo)測(cè)定值；Xmin表示所有處理中某一指標(biāo)測(cè)定值的最小值；Xmax表示所有處理中某一指標(biāo)測(cè)定值的最大值。將隸屬函數(shù)值累加后求平均值，平均值越大，說(shuō)明該處理的綜合實(shí)施效果越好［23］。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同處理下銨態(tài)氮和硝態(tài)氮含量變化特征

由圖2-a可知，不同處理下膠園0～40 cm土層銨態(tài)氮含量存在明顯差異。在各種不同處理中，T50處理下0～40 cm土層的銨態(tài)氮含量最高，T75和T100處理次之，CK1和CK2較低；與CK1和CK2相比，T50處理下的銨態(tài)氮含量分別增加21%、55%。不同土層的銨態(tài)氮含量也存在一定差異。在0～10、20～30、30～40 cm土層中，T50處理下的銨態(tài)氮含量最高，比CK2分別提高60%、48%、65%；而在10～20 cm土層，T75處理下的銨態(tài)氮含量最高，比CK2提高59%。另外，在同一處理下銨態(tài)氮含量隨著土層加深呈現(xiàn)下降的趨勢(shì)。其中，在T50處理下，0～10 cm土層的銨態(tài)氮含量最高，分別是10～20、20～30、30～40 cm土層銨態(tài)氮含量的1.22、1.33、1.25倍。

由圖2-b可知，不同處理下膠園0～40 cm土層硝態(tài)氮含量也存在差異。在0～40 cm土層中，T50處理下的硝態(tài)氮含量最高，T75處理次之，CK1處理最低；T50處理下硝態(tài)氮含量分別是CK1、CK2、T100、T75處理的2.30、1.70、1.68、1.46倍。此外，在0～10、10～20、20～30、0～40 cm土層中，T50處理下的硝態(tài)氮含量均最高，比CK1和CK2分別提高113%和98%、183%和107%、121%和54%、105%和22%；在10～20、20～30 cm土層中，T50處理下的硝態(tài)氮含量比T100和T75處理分別提高89%和89%、80%和55%。另外，同一處理下的土壤硝態(tài)氮含量隨著土層深度增加逐漸降低。其中，在T50處理下，0～10、10～20 cm土層的硝態(tài)氮含量較高，30～40 cm土層最低，Rwr6NYuOD4/xaN5alphVuQ==T50處理下0～10、10～20 cm土層的硝態(tài)氮含量分別是30～40 cm土層的1.59、1.70倍。

2.2 不同處理下氮轉(zhuǎn)化相關(guān)酶活性變化特征

由圖3-a可知，在各種不同處理中，T50處理下0～40 cm土層的硝酸還原酶活性最高，而T100和T75處理下的硝酸還原酶活性與CK1和CK2相比差異不顯著。且在0～10、10～20、20～30、30～40 cm土層中，T50處理下的硝酸還原酶活性也最高，Bm+k4RxeYiK83ewZ+Rsdkw==分別是CK1、CK2的1.27、1.26，1.23、1.21，1.07、1.12，1.28、1.20倍。另外，同一處理下0～10 cm 土層的硝酸還原酶活性普遍最高，10～20、20～30 cm土層次之，30～40 cm土層普遍最低。其中，在T50處理下，0～10 cm土層的硝酸還原酶活性分別是10～20、20～30、30～40 cm土層的1.08、1.20、1.20倍?？傮w來(lái)看，在同一處理下土壤硝酸還原酶活性隨土層加深逐漸降低。

由圖3-b可知，在0～40 cm土層，T50處理下的亞硝酸還原酶活性最高，T75處理次之，CK1和CK2最低，T50處理下的亞硝酸還原酶活性比CK1和CK2提高37%以上；此外，在0～10、10～20、20～30、30～40 cm土層中，T50處理的亞硝酸還原酶活性均最高，與CK1、CK2、T100、T75處理相比，亞硝酸還原酶活性分別增加13%～68%、9%～147%、11%～81%、10%～38%。另外，同一處理下在0～20 cm土層的土壤亞硝酸還原酶活性均比 20～40 cm土層高。而T50處理下，在0～10 cm土層的亞硝酸還原酶活性顯著高于其他土層，分別是10～20、20～30、30～40 cm土層的1.12、1.13、1.25倍。

由圖3-c可知，與硝酸和亞硝酸還原酶活性結(jié)果不同，T50、T75、T100等3個(gè)處理下0～40 cm土層的羥胺還原酶活性顯著低于CK1和CK2，且在不同土層中，T50處理下均表現(xiàn)出羥胺還原酶活性最低，CK1和CK2最高；在0～10、10～20、20～30、30～40 cm土層，T50處理下的羥胺還原酶活性分別僅為CK1和CK2的77%和82%、77%和77%、75%和71%、78%和77%。另外，同一處理下不同土層間羥胺還原酶活性并無(wú)顯著差異。在橡膠樹(shù)間作葛藤后接種根瘤菌和減施氮肥處理會(huì)降低土壤羥胺還原酶活性，且不受土層變化的影響。

由圖3-d可知，不同處理下膠園0～40 cm土層脲酶活性無(wú)顯著差異，且在不同土層中，T50、T75、T100等3個(gè)處理與CK1和CK2間脲酶活性差異也不顯著。此外，T50處理下的土壤脲酶活性均隨著土層加深呈下降趨勢(shì)，在0～10 cm土層的脲酶活性最高，分別是20～30、30～40 cm土層的1.33、1.66倍。

2.3 土壤無(wú)機(jī)氮含量與土壤酶活性的相關(guān)性分析

泊松相關(guān)性分析結(jié)果表明，土壤銨態(tài)氮和硝態(tài)氮含量與氮轉(zhuǎn)化相關(guān)酶活性之間相互影響。土壤銨態(tài)氮含量與亞硝酸還原酶活性呈極顯著正相關(guān)（P<0.01），與硝酸還原酶活性呈顯著正相關(guān)（P<0.05）；土壤硝態(tài)氮含量與硝酸還原酶和亞硝酸還原酶活性均呈極顯著正相關(guān)（P<0.01）。土壤銨態(tài)氮和硝態(tài)氮含量與羥胺還原酶活性則呈極顯著負(fù)相關(guān)（P＜0.01），而土壤銨態(tài)氮和硝態(tài)氮含量與脲酶活性無(wú)顯著相關(guān)性（表2）。

2.4 不同處理對(duì)土壤氮含量及酶活性影響的綜合評(píng)價(jià)

本研究進(jìn)一步綜合評(píng)價(jià)分析不同處理對(duì)土壤氮含量和氮轉(zhuǎn)化相關(guān)酶活性的影響。不同處理下的隸屬函數(shù)平均值均大于CK1和CK2，其中，接種根瘤菌和施50%氮肥處理的T50隸屬函數(shù)平均值最大，對(duì)土壤氮含量和相關(guān)酶活性的促進(jìn)作用最有效，其次是接種根瘤菌與施75%氮肥處理的T75和接種根瘤菌與施100%氮肥處理的T100。說(shuō)明接種根瘤菌和減施氮肥處理在提高橡膠樹(shù)‖葛藤間作系統(tǒng)土壤氮含量及酶活性方面具有促進(jìn)作用，其中T50促進(jìn)效果最佳（表3）。

3 討論

3.1 接種根瘤菌對(duì)膠園土壤無(wú)機(jī)氮含量的影響

土壤中硝態(tài)氮和銨態(tài)氮可被作物直接吸收利用［24］，其豐缺程度可直接反映短期內(nèi)土壤中氮素的供應(yīng)情況［25］。豆科作物與非豆科植物間作后接種根瘤菌可減少化學(xué)氮肥的投入，增強(qiáng)共生固氮作用，從而增加土壤氮素含量，提高土壤氮素周轉(zhuǎn)能力［26］。本研究結(jié)果表明，在0～40 cm土層，與CK1和CK2相比，T50和T75處理能夠促進(jìn)土壤中銨態(tài)氮和硝態(tài)氮含量的增加，其中T50處理效果最好。說(shuō)明在橡膠樹(shù)間作葛藤模式下接種根瘤菌后，減氮50%更能促進(jìn)共生固氮效率，可能主要是因?yàn)槲⑸锿ㄟ^(guò)礦化和硝化作用將更多有機(jī)氮轉(zhuǎn)換成無(wú)機(jī)氮，從而提高土壤中的無(wú)機(jī)氮含量［27］。Mei等在分析玉米與蠶豆間作系統(tǒng)時(shí)發(fā)現(xiàn)，通過(guò)接種根瘤菌和減少50%的氮肥量更能促進(jìn)共生固氮效率［13］。但不是施氮量越低，促進(jìn)效果越好，因?yàn)楦鼍拇偕Ч艿秸{(diào)控，施氮量過(guò)高或過(guò)低都會(huì)影響根瘤菌的生長(zhǎng)和固氮效果［28］，如章孜亮等認(rèn)為，花生接種根瘤菌后配合減施20%氮肥比減施50%氮肥促進(jìn)效果更佳［16］。同時(shí)，作物種類、土壤環(huán)境以及菌株等因素都會(huì)影響固氮效果［29-31］，所以氮肥減施量需根據(jù)不同的土壤環(huán)境、不同作物種類以及所接種的根瘤菌菌種等因素而定。本試驗(yàn)減施50%氮肥用量效果最佳。

此外，Huang等認(rèn)為，豆科作物與非豆科植物間作會(huì)顯著降低土壤（120～200 cm）中硝態(tài)氮含量，而銨態(tài)氮含量沒(méi)有顯著變化［32］。T50處理主要提高0～20 cm土層的銨態(tài)氮和硝態(tài)氮含量，與CK1和CK2相比，銨態(tài)氮含量增加24%～60%，硝態(tài)氮含量增加98%～183%，由于葛藤是一種藤蔓類植物，其根系和根瘤主要分布在表層土壤，通過(guò)根瘤共生固定的氮就保留在表層土壤，且根系分泌物和凋落物等有機(jī)物質(zhì)也會(huì)進(jìn)入表層土壤，促使微生物生長(zhǎng)代謝旺盛，促進(jìn)土壤本身氮素礦化，從而增加表層土壤的無(wú)機(jī)氮含量［33］，同時(shí)顯著減少深層土壤硝態(tài)氮含量，降低硝態(tài)氮的淋溶損失。

3.2 接種根瘤菌對(duì)膠園土壤氮轉(zhuǎn)化相關(guān)酶活性的影響

土壤氮轉(zhuǎn)化相關(guān)酶活性可以反映氮素轉(zhuǎn)化與供給狀況，也是評(píng)價(jià)土壤肥力及生態(tài)環(huán)境質(zhì)量的重要指標(biāo)。硝酸還原酶、亞硝酸還原酶和羥胺還原酶活性是影響土壤中氮素存在形態(tài)、氮素利用率及含氮?dú)怏w（N2、N2O、NH3等）排放的重要因子之一［34-35］；而脲酶活性可反映土壤氮素的供應(yīng)程度［36］。土壤硝酸還原酶可催化硝酸鹽還原成亞硝酸鹽，土壤亞硝酸還原酶催化亞硝酸鹽轉(zhuǎn)化為N2和羥胺，土壤羥胺還原酶催化羥胺還原轉(zhuǎn)化為NH3［37］，土壤中NH3含量越高，可能產(chǎn)生的NH3揮發(fā)也越大。本試驗(yàn)中T50處理在0～20 cm土層硝酸還原酶和亞硝酸還原酶活性普遍最高，但羥胺還原酶活性普遍較低。說(shuō)明間作葛藤接種根瘤菌在低氮環(huán)境中會(huì)加強(qiáng)土壤中氮素的反硝化作用，增加反硝化產(chǎn)物N2與葛藤根瘤菌的反應(yīng)實(shí)現(xiàn)生物固氮，從而增加土壤中的銨態(tài)氮含量；同時(shí)，T50處理抑制土壤羥胺還原酶活性，可減少NH3產(chǎn)生，降低NH3揮發(fā)，促進(jìn)土壤氮的有效轉(zhuǎn)化，降低土壤環(huán)境污染，這與雍太文等的研究結(jié)果［38］一致。本試驗(yàn)相關(guān)性分析結(jié)果也表明，銨態(tài)氮和硝態(tài)氮含量與硝酸還原酶和亞硝酸還原酶活性呈積極影響，與羥胺還原酶活性呈消極影響。

T50處理主要提高0～20 cm土層的脲酶活性，并顯著降低30～40 cm土層的脲酶活性。土壤中的脲酶能將有機(jī)態(tài)氮轉(zhuǎn)化為作物可吸收利用的無(wú)機(jī)態(tài)氮，在0～20 cm土層中脲酶活性的升高可加快土壤中有機(jī)氮向無(wú)機(jī)氮的轉(zhuǎn)化速率，并提高土壤活性氮素水平。這是因?yàn)殚g作葛藤的根系主要分布在 0～20 cm 土層，通過(guò)接種根瘤菌和減施50%氮肥處理即可以增強(qiáng)共生固氮作用，加速有機(jī)化合物的分解，促進(jìn)葛藤根系分泌物和根瘤脫落物進(jìn)入土壤，為微生物提供充足的碳源，從而提高脲酶活性［39］。但T100和T75處理會(huì)降低土壤脲酶活性，表明在本試驗(yàn)中間作葛藤接種根瘤菌情況下不同施氮處理對(duì)土壤脲酶活性影響較大，只有在合理的施氮量下，根瘤菌的共生固氮作用才能發(fā)揮更大的作用，不合理的施氮量措施反而會(huì)抑制土壤脲酶活性。

與30～40 cm土層相比，T50處理對(duì)0～20 cm土層的硝酸還原酶、亞硝酸還原酶和脲酶活性的促進(jìn)作用較好。這是由于土壤養(yǎng)分具有表聚性，葛藤根系和根瘤菌主要分布在表層土壤，參與有機(jī)質(zhì)分解活動(dòng)的微生物也集中在土壤表層；隨著土層加深，土壤有機(jī)質(zhì)積累減少，土壤水熱、通氣條件差不利于微生物活動(dòng)和分解，從而抑制酶促反應(yīng)并降低酶活性。

3.3 不同處理在橡膠樹(shù)‖葛藤間作系統(tǒng)中的綜合效果

隸屬函數(shù)能夠綜合多個(gè)指標(biāo)對(duì)不同處理在橡膠樹(shù)‖葛藤間作系統(tǒng)中的實(shí)施效果進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)，在將實(shí)施效果量化的同時(shí)，能夠避免單一指標(biāo)評(píng)價(jià)的局限性。根據(jù)不同處理的隸屬函數(shù)平均值可知，橡膠樹(shù)間作葛藤均比單作橡膠樹(shù)實(shí)施效果好，且在橡膠樹(shù)間作葛藤模式下，接種根瘤菌處理的隸屬函數(shù)平均值均比不接種根瘤菌高。施氮量越少，其相應(yīng)的隸屬函數(shù)平均值越高，實(shí)施效果提高越明顯，并在T50處理下達(dá)到最佳效果。說(shuō)明在橡膠樹(shù)‖葛藤間作模式下，通過(guò)接種根瘤菌和減施氮肥的施肥措施能夠提高膠園土壤銨態(tài)氮和硝態(tài)氮含量及氮轉(zhuǎn)化相關(guān)酶活性，本試驗(yàn)接種根瘤菌配合減少50%的氮肥施用量對(duì)促進(jìn)膠園土壤氮素供應(yīng)和周轉(zhuǎn)的作用效果最好，但其作用機(jī)理有待進(jìn)一步研究，以期為膠園減肥增效提供新的思路和方法。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)在橡膠樹(shù)間作葛藤模式下，通過(guò)接種根瘤菌和減少50%氮肥施用量可有效提高0～20 cm土層的土壤無(wú)機(jī)氮含量及土壤硝酸還原酶、亞硝酸還原酶和脲酶活性，而降低羥胺還原酶活性。這可能有利于提高根瘤菌的共生固氮效率進(jìn)而增加土壤氮含量，同時(shí)減少硝態(tài)氮淋溶和NH3揮發(fā)，降低橡膠園面源的污染風(fēng)險(xiǎn)，從而促進(jìn)橡膠園綠色高效生產(chǎn)的可持續(xù)發(fā)展。

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