玉米是中國(guó)三大糧食作物之一,玉米芯富含的木聚糖約含37.5%多聚戊糖、34.3%纖維素,被廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、輕工等領(lǐng)域。目前,木聚糖的提取方法主要包括高溫蒸煮法、沉淀法、超聲波輔助法和堿法,在實(shí)際應(yīng)用生產(chǎn)中,堿法是最為經(jīng)濟(jì)的方法。本研究采用單因素法及正交試驗(yàn)法,優(yōu)化從玉米芯中提取木聚糖的堿法工藝,以期為清潔能源的可持續(xù)發(fā)展提供有效的數(shù)據(jù)支持。
1. 材料與儀器
實(shí)驗(yàn)材料為玉米芯,實(shí)驗(yàn)儀器及試劑如表1所示。
2. 試驗(yàn)與方法
2.1 標(biāo)準(zhǔn)木糖配制
將0.10g木糖用水溶解,定容至100mL備用。
2.2 測(cè)定木糖標(biāo)準(zhǔn)曲線
配制濃度分別為20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、90%、100%的標(biāo)準(zhǔn)木糖液,各取1mL至比色管中,再加DNS溶液3mL,沸水浴5min,以未加木糖的溶液作為對(duì)照,在500nm處測(cè)定吸光度。
2.3 提取玉米芯中木聚糖
將清潔、干燥的玉米芯粉碎、過篩、浸泡,在NaOH試劑中浸提,取上清液,離心得到木聚糖A沉淀。用3倍體積的95%酒精混合剩余上清液,得到木聚糖B沉淀。將2個(gè)沉淀混合,烘干得到粗品木聚糖。
2.4 木聚糖的測(cè)定
木聚糖中加入8%的H2S04溶液(100℃,2h),再加NaOH溶液調(diào)至pH為7.0,定容至100mL,然后從中取1mL用水定容至100mL,測(cè)定濾液的還原糖質(zhì)量。計(jì)算公式如下:
木聚糖質(zhì)量=還原糖質(zhì)量×木聚糖聚合系數(shù)0.9。
提取率(%)=木聚糖質(zhì)量m(g)/原料質(zhì)量M(g)。
2.5 單因素對(duì)玉米芯木聚糖提取的影響
2.5.1 堿液濃度對(duì)木聚糖提取率的影響。稱取10g玉米芯,放入試管1、2、3中,分別加入5%、10%、20%的NaOH溶液20mL,置于80℃恒溫水浴箱中浸提1h。
2.5.2 固液比對(duì)木聚糖提取率的影響。稱取10g玉米芯,放入試管1、2、3、4中,分別加入20%的NaOH溶液10、20、25、30mL,置于80℃恒溫水浴箱中浸提1h。
2.5.3 浸提溫度對(duì)木聚糖提取率的影響。稱取10g玉米芯,放入試管1、2、3、4中,再加入20%的NaOH溶液20mL,在70℃、80℃、90℃、100℃水浴中浸提1h。
2.5.4 提取時(shí)間對(duì)木聚糖提取率的影響。稱取10g玉米芯,放入試管1、2、3、4中,再加入20%的NaOH溶液20mL,置于80℃恒溫水浴箱中分別浸取1、2、3、4h。
2.6 正交試驗(yàn)
選取堿處理時(shí)間A、固液比B、堿液濃度C和提取溫度D作為考查因素,做4因素3水平正交試驗(yàn)以確定最佳提取工藝。
3. 結(jié)果與分析
3.1 木糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
木糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定結(jié)果如表2所示。以木糖濃度為橫坐標(biāo)、吸光度值為縱坐標(biāo),根據(jù)表2繪制木糖標(biāo)準(zhǔn)曲線,如圖1所示。由圖1可知,木糖濃度為0.2—0.9mg/mL時(shí),吸光度與其具有較好的線性關(guān)系。
圖1:木糖標(biāo)準(zhǔn)曲線
3.2 單因素對(duì)木聚糖提取率的影響
3.2.1 堿液濃度對(duì)木聚糖提取率的影響。將分別加有5%、10%、20%NaOH溶液20mL的玉米芯置于80℃恒溫水浴箱中浸提1h,由表3可知,木聚糖提取率與堿液濃度呈正相關(guān),當(dāng)堿液濃度為20%時(shí),提取率可達(dá)25.3%。
3.2.2 固液比對(duì)木聚糖提取率的影響。將分別加有20%NaOH溶液10、20、25、30mL的玉米芯置于80℃恒溫水浴箱中浸提1h,由表4可知,木聚糖提取率與固液比呈正相關(guān),當(dāng)固液比為1:20時(shí),木聚糖提取率可達(dá)26.5%;當(dāng)固液比為1:10時(shí),提取率僅為24.9%,原因可能是較小的固液比沒有讓足量的NaOH浸提玉米芯,導(dǎo)致提取率較低。若采用高于1:20的固液比,則會(huì)因?yàn)槌樘嵋浩鄬?dǎo)致成本增大,提取率也得不到有效增加,因此最佳且最經(jīng)濟(jì)的固液比為1:20。
3.2.3 浸提溫度對(duì)木聚糖提取率的影響。將加有20%NaOH溶液20mL的玉米芯分別置于70℃、80℃、90℃、100℃的恒溫水浴箱中浸提1h,由表5可知,木聚糖提取率與浸提溫度呈正相關(guān),但是過高的浸提溫度會(huì)使提取液的透光率降低,顏色加深,甚至?xí)到獠糠帜揪厶?,?dǎo)致浸提效率下降;當(dāng)浸提溫度偏低時(shí),又會(huì)導(dǎo)致浸提不充分。因此,實(shí)際應(yīng)用中最佳的浸提溫度為90℃。
3.2.4 提取時(shí)間對(duì)木聚糖提取率的影響。將加有20%NaOH溶液20mL的玉米芯置于80℃的恒溫水浴箱中分別浸取1、2、3和4h,由表6可知,當(dāng)浸提時(shí)間大于1h時(shí),木聚糖提取率與浸提時(shí)間呈負(fù)相關(guān)。
3.3 正交試驗(yàn)法確定最佳提取工藝
浸提時(shí)間、浸提溫度、固液比和堿液濃度均偏低時(shí)浸提不充分,偏高時(shí)會(huì)水解部分木聚糖,因此需要通過正交試驗(yàn)確定最佳的堿處理?xiàng)l件。以堿處理時(shí)間A、固液比B、堿液濃度C和提取溫度D為考查因素,作4因素3水平正交試驗(yàn),結(jié)果如表7所示。由表7可知,各因素對(duì)木聚糖提取的影響程度為C>B>A>D,最佳組合為A3B2C2D2。因該組合不在已做的9次試驗(yàn)中,故又對(duì)A3B2C2D2進(jìn)行驗(yàn)證,結(jié)果發(fā)現(xiàn)A3B2C2D2條件下測(cè)得的提取率為24.0%,高于試驗(yàn)中的A1B2C2D2,故最佳組合為A3B2C2D2。
綜上所述,利用玉米芯提取木聚糖的最佳工藝條件如下:玉米芯與NaOH溶液的最佳固液比為1:20,NaOH溶液的濃度為15%,提取時(shí)間為90min,浸提溫度為90℃。在此工藝參數(shù)下,玉米芯木聚糖的提取率為24.0%。
作者簡(jiǎn)介:馬瑜(1989—),女,漢族,山西左權(quán)人,中級(jí)工程師,大學(xué)本科,研究方向?yàn)轱嬃稀⑷槠贰?/p>