靶位
- 基于CRISPR/CasX介導(dǎo)的水稻基因組編輯技術(shù)的建立
切割結(jié)構(gòu)域即可在靶位點(diǎn)處產(chǎn)生DSBs［14］。另一方面，Cas12a可以靶向植物基因組中富含T的序列，彌補(bǔ)了Cas9只能識別富含G的序列的缺陷，進(jìn)一步擴(kuò)大了CRISPR/Cas系統(tǒng)的打靶范圍［15］。Cas12e（又稱CasX）是通過對地下水中的細(xì)菌進(jìn)行宏基因組分析而確定的，CasX具有兩個(gè)同源蛋白，來自Deltaproteobacteria的CasX（以下稱為DpbCasX）和來自Planctomycetes的CasX（以下稱為PlmCasX），它們具有
生物技術(shù)通報(bào) 2023年9期2023-10-25
- 利用CRISPR/Cas9 技術(shù)創(chuàng)建擬南芥AtDGK5基因的缺失表達(dá)突變體研究
并且該技術(shù)產(chǎn)生的靶位點(diǎn)突變可以穩(wěn)定遺傳給下一代，也避免了因傳代過多造成的插入片段丟失問題。因此CRISPR/Cas9 技術(shù)被越來越廣泛地應(yīng)用到各種突變體創(chuàng)制中［9］。本實(shí)驗(yàn)室前期獲得了多種T-DNA 插入不同AtDGK基因的突變體，并且借助雜交獲得了不同組合的多重突變體。檢測發(fā)現(xiàn)，AtDGK5基因的T-DNA插入突變體（SAIL_1212_E10）中，該基因仍有轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)，推測可能是由于該突變體的T-DNA插入到內(nèi)含子區(qū)域所致。本研究擬通過CRISPR
- 利用CRISPR/Cas9 技術(shù)定向編輯加工番茄 SlACS2
識別特定的基因組靶位點(diǎn),針對每一個(gè)突變位點(diǎn)需要構(gòu)建兩個(gè)相應(yīng)的核酸酶,操作繁瑣; CRISPR/Cas是利用更簡單的核苷酸互補(bǔ)配對方式識別特定的基因組靶位點(diǎn),比ZFN和TALEN編輯效率高,構(gòu)建更簡單。CRISPR/Cas9 系統(tǒng)的首篇報(bào)道發(fā)表于《科學(xué)》雜志上,研究發(fā)現(xiàn) CRISPR/Cas9 系統(tǒng)可以在體外切割雙鏈 DNA,實(shí)現(xiàn)了在活細(xì)胞中進(jìn)行基因編輯[12]。隨后因其操作較為簡單、效率高、應(yīng)用更為廣泛,相繼在甜橙[13-15]、葡萄[16-18]、獼猴桃
西北農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào) 2023年6期2023-06-26
- 整合宏基因組學(xué)分析生豬養(yǎng)殖糞污發(fā)酵過程中耐藥基因的動(dòng)態(tài)變化
c)、改變抗生素靶位點(diǎn)(Antibiotic target alteration)、替換抗生素靶位點(diǎn)(Antibiotic target replacement)?？股赝馀蓬愋突蚬灿?6個(gè),抗生素失活類型基因共有90個(gè),降低抗生素滲透性類型基因共有7個(gè),改變抗生素靶位點(diǎn)類型基因共有8個(gè),替換抗生素靶位點(diǎn)類型基因共有7個(gè)。這些類型的基因豐度在第1天最高,在第4天豐度迅速下降,然后豐度再次升高,實(shí)驗(yàn)組的各個(gè)類型耐藥基因和對照組降低抗生素滲透性類型基因、改變
西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào) 2023年3期2023-05-05
- 利用CRISPR/Cas9 技術(shù)靶向編輯青花菜BoZDS
因序列中尋找目標(biāo)靶位點(diǎn)，通過軟件評分和blast 搜索確定靶位點(diǎn)。將退火后的靶位點(diǎn)引物與AtU6-26-sgRNA-SK 質(zhì)粒連接，得到sgRNA cassette 質(zhì)粒，然后將酶切后pCAMBIA1300-pYAO : Cas9 質(zhì)粒與sgRNA cassette 進(jìn)行連接反應(yīng)，連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌，挑取鑒定正確的單克隆擴(kuò)大培養(yǎng)，提取質(zhì)粒，相關(guān)引物序列見表1。1.2.2 農(nóng)桿菌介導(dǎo)的青花菜遺傳轉(zhuǎn)化 青花菜遺傳轉(zhuǎn)化方法參照課題組已有的方法［12］，消毒后的
生物技術(shù)通報(bào) 2023年2期2023-03-07
- gRNA二級結(jié)構(gòu)對擬南芥HD2基因CRISPR/Cas9編輯率的影響
因素,這主要是對靶位點(diǎn)序列的設(shè)計(jì)。雖然研究者們設(shè)計(jì)了多款專門用于gRNA設(shè)計(jì)的在線軟件[14-16],這些軟件能夠篩選出評分較高的gRNA,為研究者們設(shè)計(jì)gRNA提供了一條途徑。但僅僅根據(jù)設(shè)計(jì)軟件,篩選使用評分最高的gRNA來構(gòu)建載體,后續(xù)的基因編輯率仍然得不到有效的保障[17]。目前研究發(fā)現(xiàn)gRNA序列上優(yōu)化的GC(Guanine-Cytosine)含量對基因的編輯率會產(chǎn)生一定的影響,高GC含量可使gRNA與基因組DNA的雜交趨于穩(wěn)定[18],而低GC含
復(fù)旦學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版） 2022年2期2023-01-09
- BnaTT2基因缺失黃籽甘藍(lán)型油菜材料的創(chuàng)制
aTT2基因敲除靶位點(diǎn)序列設(shè)計(jì) 利用CRISPR/Cas9 在線靶位點(diǎn)設(shè)計(jì)網(wǎng)站(CRISPR RGET Tool)、油菜數(shù)據(jù)庫(http://brassicadb.org/brad/index.php)以及NCBI提供的序列信息，對甘藍(lán)型油菜基因BnaTT2進(jìn)行序列比對，在不同拷貝的BnaTT2同源編碼區(qū)上尋找包含CRISPR/Cas9系統(tǒng)可識別的共同靶位點(diǎn)核苷酸序列，設(shè)計(jì)靶位點(diǎn)，合成靶位點(diǎn)序列用于基因編輯，靶位點(diǎn)引物序列為17-TT2-P1(5′-ATT
西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版） 2022年7期2022-07-12
- 陸地棉GhCRE1影響種子萌發(fā)初探
功能區(qū)均設(shè)計(jì)一個(gè)靶位點(diǎn)，以提高突變效率。利用軟件CRISPR-P設(shè)計(jì)擬南芥CRE1靶位點(diǎn)分別為：靶位點(diǎn)1：ATCCTCTCACAACTCATTAC位于5′UTR區(qū)，GC含量40%，選用AtU3d-LacZ作為啟動(dòng)子；靶位點(diǎn)2：GCTGCTGCGTTTGAAAGAAA位于外顯子區(qū)域，GC含量45%，選用 AtU6-1作為啟動(dòng)子。采用Overlapping PCR的方法分別將2個(gè)靶位點(diǎn)序列引入PCR正向及反向引物中，并引入依次排列的BsaⅠ酶切位點(diǎn)至引物5′端
華北農(nóng)學(xué)報(bào) 2022年3期2022-07-11
- 利用CRISPR/Cas9技術(shù)構(gòu)建斑馬魚Hand2基因敲除模型
and2基因的打靶位點(diǎn)設(shè)計(jì)通過生物信息學(xué)網(wǎng)站Ensembl（http://asia.ensembl.org/index.html）分析發(fā)現(xiàn)斑馬魚（Danio rerio）Hand2基因位于斑馬魚的1號染色體上，包含2個(gè)外顯子，起始密碼子ATG位于1號外顯子上，在起始密碼子后面的外顯子區(qū)域設(shè)計(jì)打靶位點(diǎn)可提高基因敲除的有效性。打靶位點(diǎn)的設(shè)計(jì)遵循了以下原則：打靶位點(diǎn)堿基長度在18～20 bp左右；前間隔序列鄰近基序（protospacer adjacent mo
激光生物學(xué)報(bào) 2022年2期2022-05-24
- 基于CRISPR/Cas9技術(shù)對水稻細(xì)胞質(zhì)分裂關(guān)鍵基因OsMAP65-3s的編輯
個(gè)基因設(shè)計(jì)特異性靶位點(diǎn)，構(gòu)建至同一個(gè)載體，用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的遺傳轉(zhuǎn)化獲得轉(zhuǎn)基因植株，測序分析靶位點(diǎn)序列，篩選編輯植株和突變體，旨在為探討OsMAP65-3基因的功能和水稻細(xì)胞分裂調(diào)控機(jī)制奠定基礎(chǔ)。1 材料與方法1.1 試驗(yàn)材料及田間管理大腸桿菌DH5α，感受態(tài)采用CaCl2法，參照《基因工程》[18]的方法制備。農(nóng)桿菌EHA105，感受態(tài)采用Milani等[19]的方法制備。植物材料為粳稻品種日本晴(Nipponbare)，轉(zhuǎn)基因材料均種于人工氣候室，培養(yǎng)條件
核農(nóng)學(xué)報(bào) 2022年4期2022-03-11
- 利用CRISPR/Cas9技術(shù)創(chuàng)制早熟甘藍(lán)型油菜材料
nFRI基因敲除靶位點(diǎn)序列設(shè)計(jì)利用CRISPR/Cas9靶位點(diǎn)在線設(shè)計(jì)網(wǎng)站（CRISPR DESINGER），結(jié)合 Brassicadatabase（http://brassicadb.org/brad/）和NCBI提供的序列信息，對甘藍(lán)油菜基因BnFLC和BnFRI分別進(jìn)行比對分析，分別設(shè)計(jì)FLC和FRI的靶位點(diǎn)。1.2.2 載體的構(gòu)建CRISPR/Cas9基因編輯載體pHSE401由中國農(nóng)業(yè)大學(xué)陳其軍教授提供，構(gòu)建方法詳見參考文獻(xiàn)[13]，油菜FLC和
- CRISPR/Cpf1單堿基編輯系統(tǒng)的構(gòu)建及應(yīng)用
酶，開發(fā)出能夠?qū)?span id="j5i0abt0b" class="hl">靶位點(diǎn)進(jìn)行精準(zhǔn)單堿基編輯的系統(tǒng)。該系統(tǒng)在不引起DNA雙鏈斷裂的情況下，實(shí)現(xiàn)胞嘧啶（cytosine，C）轉(zhuǎn)化胸腺嘧啶（thymine，T）/鳥嘌呤（guanine，G）轉(zhuǎn)化腺嘌呤（adenine，A）的替換，且通過不斷改進(jìn)可明顯提高單堿基編輯效率，減少插入、刪除（insertion and deletion，indel）和非預(yù)期突變[2?3]。該系統(tǒng)已成功在小麥（Triticum aesti?vum）[4]、水稻（Oryza sativa）
生物技術(shù)進(jìn)展 2021年6期2021-12-01
- 聲動(dòng)力靶位藥物傳輸聯(lián)合HRZES方案治療復(fù)治空洞型肺結(jié)核的療效研究
加[2]。聲動(dòng)力靶位藥物傳輸是疾病治療的新技術(shù)，其通過超聲波將體表藥物貼片的靶位聲敏藥物滲透至深部組織，從而達(dá)到增加藥物治療效果的目的[3]。基于此原理，有學(xué)者[4]認(rèn)為通過精確的病灶定位，聲動(dòng)力靶位藥物傳輸能夠經(jīng)皮透入抗結(jié)核藥物以促進(jìn)臨床療效。但目前國內(nèi)關(guān)于其用于復(fù)治空洞型肺結(jié)核的前瞻性報(bào)道還較為缺乏。因此本研究開展前瞻性對照試驗(yàn)，研究聲動(dòng)力靶位藥物傳輸聯(lián)合HRZES方案治療復(fù)治空洞型肺結(jié)核的臨床療效，現(xiàn)作報(bào)道。1 資料與方法1.1 一般資料 本研究納入
蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào) 2021年10期2021-11-08
- 斑馬魚Slc26A4基因敲除品系的構(gòu)建
.1 sgRNA靶位點(diǎn)設(shè)計(jì)首先在Ensembl網(wǎng)站上（http://www.ensembl.org/index.html）獲取目標(biāo)基因的完整序列，各個(gè)轉(zhuǎn)錄本以及內(nèi)外顯子等信息；找出所有緊鄰5‘-NGG-3’（PAM）的候選靶序列，靶序列一般大小為18～ 20bp。sgRNA引物序列F基本結(jié)構(gòu)：靶序列前加保護(hù)堿基（gcg）和T7啟動(dòng)子[11]（TAATACGACT‐CACTATA），靶序列后加sgRNA骨架序列上游序列（GTTTTAGAGGCTAGAAATA
中華耳科學(xué)雜志 2021年4期2021-09-01
- 利用單堿基編輯系統(tǒng)定點(diǎn)編輯哈薩克羊MSTN基因的研究
Cas9酶可以在靶位點(diǎn)造成DNA雙鏈斷裂(double-strand break, DSB)，然后利用細(xì)胞自身的2種修復(fù)機(jī)制——非同源末端連接(nonhomologous end joining, NHEJ)和同源性定向修復(fù)(homology directed repair, HDR)機(jī)制實(shí)現(xiàn)基因編輯。其中，NHEJ修復(fù)機(jī)制會引入堿基對插入和缺失(indels)[12]；而HDR修復(fù)機(jī)制結(jié)合外源模板可以實(shí)現(xiàn)基因組精確編輯，但HDR機(jī)制較為復(fù)雜，且對細(xì)胞周期
畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào) 2021年8期2021-08-23
- 斑馬魚myo7ab基因敲除品系的構(gòu)建
NA（gRNA）靶位點(diǎn)設(shè)計(jì)首先，在Ensembl網(wǎng)站（http://www.ensembl.org/index.html）上獲取目標(biāo)基因的完整基因組序列（ENSDARG00000044632）、各個(gè)轉(zhuǎn)錄本以及內(nèi)外顯子等信息；找出所有緊鄰5'-NGG-3'（protospacer adjacent motif，PAM）的候選靶序列，靶序列一般大小為18～20 bp。gRNA引物序列F基本結(jié)構(gòu)：靶序列前加保護(hù)堿基（gcg）和T7啟動(dòng)子（TAATACGACTCA
激光生物學(xué)報(bào) 2021年3期2021-07-07
- 運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元病證候要素分布及組合規(guī)律探析
”“血虛”，證候靶位“肝”“腎”。在證候要素提取中，對于有歧義之處，請教2～3名副主任以上醫(yī)師討論解決。1.6.3 統(tǒng)計(jì)方法 采用Excel建立數(shù)據(jù)庫，由雙人分別獨(dú)立進(jìn)行數(shù)據(jù)錄入，數(shù)據(jù)二次檢驗(yàn)，修正數(shù)據(jù)庫。用SPSS 25.0統(tǒng)計(jì)軟件，分析證候、證候要素的頻次、頻率及構(gòu)成比，采用系統(tǒng)聚類分析法(歐氏距離)，將文獻(xiàn)病例所得證候要素、證候靶位聚類分析，從而選出具有代表性的病位、病性作分析，以探索運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元病中醫(yī)證候要素的分布及組合規(guī)律。2 結(jié)果2.1 文獻(xiàn)的收
環(huán)球中醫(yī)藥 2020年12期2020-12-30
- 基因組編輯技術(shù)在植物中的應(yīng)用研究進(jìn)展
基因)特定位置(靶位點(diǎn))制造DNA雙鏈斷裂(Double strand break，DSB)，進(jìn)而利用生物體自身的同源重組(Homologous recombination，HR)或非同源末端連接(Non-homologous end joining，NHEJ)修復(fù)機(jī)制對DNA雙鏈進(jìn)行修復(fù)，實(shí)現(xiàn)基因組的定向編輯[1]。在基因組編輯技術(shù)出現(xiàn)前，對基因功能的研究主要通過自然突變、物理或化學(xué)誘變、T-DNA隨機(jī)插入等方式獲得突變體，通過對突變體的研究獲得突變基因
貴州農(nóng)業(yè)科學(xué) 2020年12期2020-12-18
- 利用CRISPR/Cas9技術(shù)對雞AMHR2基因進(jìn)行精確編輯
雞AMHR2基因靶位點(diǎn)的選擇 通過crispr.mit.edu:807網(wǎng)站對雞AMHR2基因的特異CDs區(qū)序列進(jìn)行CRISPR/Cas9靶位點(diǎn)預(yù)測，根據(jù)PAM和得分，選擇位于第二外顯子上相距14 bp、GC含量分別為80%和75%(sg2-1: CTTCAGGCTGCGGCGCGCGCTGG；sg2-4: GTGGTGCGACTCCACGCCGCCGG)的成對靶位點(diǎn)。1.2.2 雞AMHR2基因CRISPR/Cas9敲除載體的構(gòu)建 通過Annealing
家畜生態(tài)學(xué)報(bào) 2020年6期2020-07-02
- 利用CRISPR/Cas9敲除大麥靶基因
隔序列)，使其與靶位點(diǎn)互補(bǔ)，并為Cas 9加上核定位信號，可以在植物或其它真核基因組的特定位點(diǎn)引入DSB。sgRNA靶點(diǎn)特異的5′端前間隔序列只有20個(gè)核苷酸，不論什么靶位點(diǎn)，它的其余部分都是一樣的(圖1)。Cas 9/sgRNA復(fù)合體能夠查詢基因組序列，并在匹配處引入DSB。sgRNA功能的關(guān)鍵決定因素是同源基因組序列是否緊接NGG，其通常被稱為原間隔基序(Protospacer adjacent motif，PAM)。如果在基因組中發(fā)現(xiàn)23個(gè)堿基序列(
耕作與栽培 2020年2期2020-06-12
- 基于CRISPR/Cas9技術(shù)的煙草CPS2基因敲除及功能分析
gRNA）與基因靶位點(diǎn)序列結(jié)合，在Cas9 蛋白的作用下對靶DNA 分子進(jìn)行剪切，DNA 分子發(fā)生斷裂后會自動(dòng)進(jìn)行修復(fù)，在修復(fù)過程中可能會出現(xiàn)堿基的插入、缺失和替換，這可能會導(dǎo)致翻譯提前終止，進(jìn)而使原有的基因功能喪失［5-6］。CRISPR/Cas9 技術(shù)廣泛應(yīng)用于作物遺傳改良和品種培育［7-10］。Wang 等［11］敲除小麥中3 個(gè)TaMLO 同源白粉病易感基因，得到了對白粉病具有抗性的小麥；ZHOU 等［12］創(chuàng)建了水稻溫敏核雄性不育系；Shi 等［
煙草科技 2020年5期2020-06-06
- 斑馬魚miR-196a-1基因敲除品系的構(gòu)建
21]。目的基因靶位置序列的3’端有原間隔序列相鄰基序PAM(protospacer adjacent motifs),為5’-NGG-3’序列，這是Cas9蛋白的識別位點(diǎn)。最后，通過改變sgRNA序列，體外合成sgRNA，Cas9蛋白可以靶向切割目的基因，從而達(dá)到基因敲除的目的[22,23]。目前，miRNA調(diào)控生物發(fā)育、腫瘤發(fā)生和發(fā)展機(jī)制越來越受到人們的關(guān)注，但是，許多miRNA的功能仍然未知。為了研究miR-196a-1基因在斑馬魚腸道發(fā)育過程中的作
激光生物學(xué)報(bào) 2020年2期2020-05-28
- CRISPR/Cas9技術(shù)編輯OsRhoGDI2基因?qū)е滤景氚?/a>
hoGDI2編輯靶位點(diǎn)的選擇將(AY364312) 提交至NCBI (https://www.ncbi.nlm.nih.gov/) 進(jìn)行檢索，找到全基因序列，獲得外顯子信息。根據(jù)gRNA設(shè)計(jì)原則，在1號外顯子上設(shè)計(jì)2個(gè)gRNA靶位點(diǎn)，并將其與水稻基因組blast比對分析驗(yàn)證，確認(rèn)靶序列的特異性。1.6 中間載體的構(gòu)建通過P1/P2引物退火，制備gRNA1片段，反應(yīng)體系如下：P1/P2各5 μL，H2O 40 μL；反應(yīng)條件如下：95 ℃變性10 min、5
生物工程學(xué)報(bào) 2020年4期2020-05-07
- 淺談醫(yī)用超聲診斷儀超聲源的不確定度評定
調(diào)零。調(diào)節(jié)設(shè)備的靶位調(diào)節(jié)旋鈕，使靶位指零，即此時(shí)設(shè)備水平。將超聲儀器的界面凍結(jié)，隨后將腹部探頭浸入水中，再將界面凍結(jié)狀態(tài)解除，此時(shí)探頭輸出超聲波，靶位受力稍稍偏離零位，再次調(diào)節(jié)靶位調(diào)節(jié)旋鈕，再次歸零后顯示屏上所顯示的示值即為輸出功率，即本次的測量值，再將測量值除以有效面積，即為輸出聲強(qiáng)。3 數(shù)學(xué)模型I=PA（mW/cm2）式中：P——儀器示值，mW;A——探頭有效發(fā)射面積，cm2。若探頭為扇掃探頭，則A取1.6cm2。4 輸入量的標(biāo)準(zhǔn)不確定度評定輸入量的不
科技風(fēng) 2020年13期2020-05-03
- 胰腺癌細(xì)胞ezrin基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控區(qū)及其gRNA靶位點(diǎn)鑒定
錄調(diào)控區(qū)gRNA靶位點(diǎn)，檢測轉(zhuǎn)染攜帶gRNA序列的基因編輯重組質(zhì)粒對靶位點(diǎn)的切割作用以及對胰腺癌細(xì)胞增殖能力的影響，為進(jìn)一步研究胰腺癌細(xì)胞ezrin基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控機(jī)制奠定基礎(chǔ)。1 材料與方法1.1 質(zhì)粒、細(xì)胞及主要試劑胰腺癌Panc-1細(xì)胞購自中國科學(xué)院上海細(xì)胞庫；基因編輯骨架質(zhì)粒pSpCas9(BB)-2A-GFP(Addgene plasmid ID：48138，簡稱pX458)和pSpCas9(BB)-2A-Puro(Addgene plasmid
醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào) 2020年2期2020-03-27
- 招遠(yuǎn)金翅嶺金礦構(gòu)造疊加暈深部探礦成果驗(yàn)證分析
2）地質(zhì)特征。在靶位上方，9CK3、13CK8鉆孔在礦脈位置構(gòu)造存在，金品位最高達(dá)19.1g/t，礦脈真厚度1.35m～2.09m。（3）構(gòu)造疊加暈特征。靶位上方Au為強(qiáng)、內(nèi)、中、外帶異常分布，強(qiáng)、內(nèi)帶異常較連續(xù)；前緣暈元素：As為內(nèi)、中、外帶異常，Sb為中、外帶異，Hg外帶異常，B外帶異常；近礦暈元素：Ag為中、外帶異常，Cu為內(nèi)、中、外帶異常，Pb為內(nèi)、中、外帶異常，Zn為內(nèi)、中、外帶異常；尾暈元素：Mo外帶異常，Bi為外帶異常，Mn為外帶異常，Co為
世界有色金屬 2019年21期2020-01-09
- CRISPR/dCas9在細(xì)菌轉(zhuǎn)錄調(diào)控中的應(yīng)用及展望
SPRCas系統(tǒng)靶位點(diǎn)基因的序列，該序列是一段外源侵入至 CRISPR陣列的 DNA．crRNA主要通過結(jié)合 Cas蛋白和特異的 20nt左右的間隔序列對 DNA序列進(jìn)行特異的靶邊點(diǎn)識別，并實(shí)現(xiàn)對靶位點(diǎn) DNA的切割[2-3]．通過整合外源侵入的 DNA，CRISPR 能夠記錄下外源 DNA的具體序列，從而實(shí)現(xiàn)對外源 DNA特定序列的切割．基于不同 CRISPR免疫系統(tǒng)中crRNA和Cas蛋白的不同，CRISPR-Cas系統(tǒng)主要通過其特征基因分為三大類型：
天津科技大學(xué)學(xué)報(bào) 2019年2期2019-04-22
- 水稻膜聯(lián)蛋白基因OsAnn8干旱和低溫條件下表達(dá)模式以及CRISPR/Cas9定點(diǎn)編輯
，并成功地獲得了靶位點(diǎn)敲除的T0轉(zhuǎn)基因突變體植株。該研究為后續(xù)OsAnn8基因在干旱和低溫脅迫環(huán)境下的功能和作用機(jī)制研究奠定了重要的材料基礎(chǔ)。也證實(shí)了CRISPR/CAS9技術(shù)在水稻功能基因研究中應(yīng)用的高效和易操作的特點(diǎn)。1 材料和方法1.1 試驗(yàn)材料1.1.1 植物材料與處理 以水稻粳稻品種TP309作為轉(zhuǎn)基因受體和非生物脅迫處理試驗(yàn)材料。在江西省作物生長發(fā)育調(diào)控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室中用無菌水及濾紙發(fā)芽，然后移栽到規(guī)格19.5 cm×14.5 cm×5.5 cm(
華北農(nóng)學(xué)報(bào) 2019年1期2019-03-08
- 超聲電導(dǎo)靶位透入大黃至天樞穴促進(jìn)胃癌患者術(shù)后早期胃腸功能恢復(fù)的臨床護(hù)理研究
-7]。超聲電導(dǎo)靶位透藥治療技術(shù)是近年來興起的新的藥物治療技術(shù)，可綜合采用電致孔、超聲空化、離子導(dǎo)入等物理手段來實(shí)現(xiàn)定位、定量、定速透皮給藥[8]。本研究探討超聲電導(dǎo)靶位透藥治療對促進(jìn)胃癌患者術(shù)后胃腸功能恢復(fù)的效果，現(xiàn)報(bào)告如下。1 資料與方法1.1 一般資料選取2017年8月—2018年1月本院胃外科行胃癌根治術(shù)患者100例。納入標(biāo)準(zhǔn): ① 術(shù)前經(jīng)胃鏡及病理檢查確診為胃癌，經(jīng)胸、腹部CT等檢查未發(fā)現(xiàn)遠(yuǎn)處臟器及器官轉(zhuǎn)移; ② 無嚴(yán)重心、腦、肝、肺、腎等器官功
實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志 2019年2期2019-02-15
- 利用CRISPR/Cas9技術(shù)敲除斑馬魚核受體PXR基因初探*
切酶準(zhǔn)確識別特定靶位點(diǎn)進(jìn)行DNA雙鏈剪切[9]，利用細(xì)胞的非同源末端自我連接修復(fù)機(jī)制，斷裂處的基因片段在自我修復(fù)過程中可能會出現(xiàn)插入或缺失突變現(xiàn)象[10]，從而改變基因組原始結(jié)構(gòu)，達(dá)成基因編輯目的。本研究利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)，以模式生物斑馬魚為研究對象，建立魚類體內(nèi)和污染物代謝密切相關(guān)的核轉(zhuǎn)錄因子PXR基因靶向敲除系統(tǒng)，獲得完全缺失PXR基因的斑馬魚，為PXR基因的相關(guān)研究提供基礎(chǔ)研究材料。1 材料與方法野生型斑馬魚品系Tuebingen
- 利用CRISPR/Cas9系統(tǒng)定向編輯水稻SD1基因
SPR/Cas9靶位點(diǎn)選擇使用 CRISPR Primer Designer軟件[25]進(jìn)行CRISPR/Cas9靶位點(diǎn)選擇。然后通過水稻基因組BLAST分析，確保靶位點(diǎn)的特異性。1.6 CRISPR/Cas9表達(dá)載體的構(gòu)建根據(jù)靶位點(diǎn)的序列，合成兩條引物Oligo-F和Oligo-R，每條引物(10μmol/L)各取1μL，加入8μL退火緩沖液(TE+50 mmol/L NaCl），以0.1℃/s的速率從95℃降到16℃，獲得靶位點(diǎn)接頭。中間載體psgR-
中國水稻科學(xué) 2018年3期2018-05-25
- 利用rBE3和rBE4系統(tǒng)進(jìn)行水稻基因單堿基編輯的特異性和遺傳穩(wěn)定性分析
gRNA的潛在脫靶位點(diǎn)進(jìn)行預(yù)測，并對T0代材料中的各脫靶位點(diǎn)進(jìn)行PCR擴(kuò)增和Sanger測序檢測；同時(shí)對該兩個(gè)基因的突變體材料自交獲得的T1代植株的靶位點(diǎn)序列和外源T-DNA分離進(jìn)行檢測。結(jié)果顯示各T0代材料均未檢測到潛在脫靶位點(diǎn)發(fā)生單堿基編輯；此外，和含有相同的sgRNA位點(diǎn)，且兩個(gè)位點(diǎn)均能發(fā)生單堿基編輯；rBE3或rBE4系統(tǒng)介導(dǎo)產(chǎn)生的堿基編輯可穩(wěn)定遺傳至T1代，并在T1代可獲得無外源T-DNA的純合突變體。上述結(jié)果表明由rBE3或rBE4介導(dǎo)的堿基編
生物工程學(xué)報(bào) 2017年10期2017-11-21
- AtPHO2的CRISPR/Cas9靶向敲除及其在擬南芥中功能分析
22-23]，與靶位點(diǎn)特異性結(jié)合并引導(dǎo)Cas9 蛋白對靶位點(diǎn)的剪切。sgRNA 序列較短，便于設(shè)計(jì)和載體構(gòu)建，CRISPR/Cas9技術(shù)的這一特性，使其構(gòu)建簡便、易操作和高效率，也推動(dòng)了該技術(shù)的廣泛應(yīng)用[22-25]。本研究將利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)，靶向敲除AtPHO2 基因，獲得新的crispr-Atpho2 突變體，并分析基因表達(dá)和其對磷代謝的影響，為CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)在作物遺傳改良方面提供理論和技術(shù)依據(jù)。1 材料與方法
- 聲動(dòng)力靶位藥物傳輸輔助治療復(fù)治空洞型肺結(jié)核臨床觀察
0041)聲動(dòng)力靶位藥物傳輸輔助治療復(fù)治空洞型肺結(jié)核臨床觀察黨萍，王建梅，耿書軍，侯莉莉，陳葉紅，馬清艷，康冠楠(河北省胸科醫(yī)院，石家莊050041)目的 探討聲動(dòng)力靶位藥物傳輸輔助治療復(fù)治空洞型肺結(jié)核的臨床效果。方法 選取復(fù)治空洞型肺結(jié)核患者146例，隨機(jī)分為觀察組、對照組各73例。兩組均采用HRZE標(biāo)準(zhǔn)化療方案治療，觀察組在此基礎(chǔ)上采用聲動(dòng)力靶位藥物傳輸治療。比較兩組治療6、12個(gè)月痰菌轉(zhuǎn)陰率、病灶吸收有效率、空洞閉合有效率，以及治療12個(gè)月內(nèi)不良反應(yīng)
山東醫(yī)藥 2017年28期2017-09-03
- 聲動(dòng)力靶位藥物傳輸聯(lián)合全身化學(xué)治療老年肺結(jié)核安全性及療效分析*
0041)聲動(dòng)力靶位藥物傳輸聯(lián)合全身化學(xué)治療老年肺結(jié)核安全性及療效分析*黨 萍，康冠楠，侯莉莉，耿書軍，馬清艷，陳葉紅, 王建梅△河北省胸科醫(yī)院(石家莊050041)目的：探究并分析聲動(dòng)力靶位藥物傳輸聯(lián)合全身化學(xué)治療老年肺結(jié)核的安全性及臨床療效。方法：選取老年肺結(jié)核病人122例，將其隨機(jī)分成治療組和對照組兩組，每組各61例；治療組采用聲動(dòng)力靶位藥物傳輸聯(lián)合全身化學(xué)治療，對照組僅采用全身化學(xué)治療，兩組的全身化學(xué)治療方案相同。觀察兩組患者在治療前后的臨床癥狀及
陜西醫(yī)學(xué)雜志 2017年7期2017-07-18
- CRISPR/Cas9系統(tǒng)對斑馬魚fhl1a基因敲除有效性的研究
號外顯子處選取打靶位點(diǎn)，構(gòu)建sgRNA表達(dá)載體.將體外轉(zhuǎn)錄的sgRNA和Cas9 mRNA混合物分別顯微注射到斑馬魚單細(xì)胞期的受精卵中以期實(shí)現(xiàn)對目的靶基因fhl1a的敲除.隨后收集部分72 h胚胎進(jìn)行PCR檢測和產(chǎn)物直接測序，確定有無突變.為進(jìn)一步驗(yàn)證突變是否可穩(wěn)定遺傳，選擇具有敲除了的F0與野生型斑馬魚進(jìn)行外交，對獲得的F1進(jìn)行逐一剪尾，提取DNA進(jìn)行PCR和測序分析.結(jié)果顯示F1獲得了不同程度的插入、缺失等突變類型.研究結(jié)果證明所設(shè)計(jì)的fhl1a基因C
湖南師范大學(xué)自然科學(xué)學(xué)報(bào) 2017年3期2017-06-19
- 基于miRNA-靶位點(diǎn)配對的序列特征研究
基于miRNA-靶位點(diǎn)配對的序列特征研究滕少華1，夏飛迪1，張 巍1，劉冬寧1，王 洋2，鄒小勇2*(1.廣東工業(yè)大學(xué) 計(jì)算機(jī)學(xué)院，廣東 廣州 510006；2.中山大學(xué) 化學(xué)學(xué)院，廣東 廣州 510275)miRNA與其靶基因的作用機(jī)制十分復(fù)雜，因此，miRNA靶基因識別問題一直是miRNA研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)難題。該文基于CLASH數(shù)據(jù)集，提出了miRNA-靶位點(diǎn)配對序列特征，并使用隨機(jī)森林建模。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本模型的Acc，Sen，Spe，Pre以及Mcc
分析測試學(xué)報(bào) 2017年5期2017-06-07
- 文本挖掘在藥物靶位研究中的應(yīng)用
是尋找和篩選藥物靶位(drug target)。藥物靶位是指機(jī)體內(nèi)具有藥效功能并且能被藥物作用的生物大分子物質(zhì)，如某些蛋白質(zhì)和核酸等。文本挖掘是目前發(fā)現(xiàn)潛在藥物靶位的新興手段之一，目前大多數(shù)文章都是通過定性和舉例來闡述文本挖掘技術(shù)在藥物靶位領(lǐng)域的研究成果。本文通過構(gòu)建詞篇矩陣等數(shù)學(xué)模型，以聚類方式更加直觀和科學(xué)地定量闡述了自1999-2015年該領(lǐng)域的發(fā)展情況，希望對相關(guān)領(lǐng)域的研究人員選擇參考文獻(xiàn)和研究方向有所幫助。1 資料來源與方法首先對該領(lǐng)域高被引論文
中華醫(yī)學(xué)圖書情報(bào)雜志 2017年3期2017-03-21
- 遠(yuǎn)距離封閉靶道照明系統(tǒng)技術(shù)研究
面瞄準(zhǔn)點(diǎn)、槍位與靶位之間的環(huán)境區(qū)這4個(gè)重點(diǎn)部位或區(qū)域的參數(shù)合理的光線，這些參數(shù)主要包括照度、均勻度、色溫、顯色指數(shù)等，能最大可能的滿足自然光的優(yōu)點(diǎn)[1]，光線柔和、照度均勻、強(qiáng)度合適、無頻閃，又能摒棄自然光條件下觀瞄的一些缺點(diǎn)，諸如光線太強(qiáng)，射手感覺刺眼，機(jī)械瞄具準(zhǔn)星重影明顯，光學(xué)瞄具觀瞄目標(biāo)及目標(biāo)周圍環(huán)境過于清晰，射手呼吸微動(dòng)卻感覺槍體晃動(dòng)明顯，主觀感覺難以將光瞄十字始終套牢瞄準(zhǔn)目標(biāo)。2 封閉靶道照明系統(tǒng)設(shè)計(jì)分析2.1 封閉靶道射擊試驗(yàn)的視覺環(huán)境特性封閉
照明工程學(xué)報(bào) 2016年4期2016-12-02
- 利用CRISPR/Cas9技術(shù)敲除水稻Pi21基因的效率分析
i21基因的兩個(gè)靶位點(diǎn)(靶位1和靶位2)，構(gòu)建基因敲除載體，轉(zhuǎn)化水稻品種南粳9108。經(jīng)PCR鑒定，獲得了28株T0代陽性轉(zhuǎn)基因植株。對靶位點(diǎn)酶切檢測發(fā)現(xiàn)，靶位 1突變效率為78.57%，靶位 2突變效率為92.86%；靶位 1和靶位 2同時(shí)突變的效率為78.57%，突變效率較高。通過對靶位點(diǎn)進(jìn)行測序，發(fā)現(xiàn)靶位點(diǎn)突變類型較多，包括堿基缺失、堿基插入、堿基缺失后插入其他堿基和大片段DNA缺失等類型。對突變株系進(jìn)行氨基酸預(yù)測，發(fā)現(xiàn)大部分株系都存在移碼突變現(xiàn)象而
中國水稻科學(xué) 2016年5期2016-10-25
- 靶向REST基因TALEN質(zhì)粒的快速構(gòu)建與活性檢測
息設(shè)計(jì)TALEN靶位，使用單元組裝的方法快速構(gòu)建TALEN質(zhì)粒，在293T細(xì)胞中進(jìn)行活性檢測并計(jì)算突變效率。結(jié)果針對REST設(shè)計(jì)并成功構(gòu)建5個(gè)TALEN質(zhì)粒，組成6對TALEN并實(shí)現(xiàn)基因打靶，其中L1和R3組合的突變效率達(dá)到60.9%。結(jié)論成功獲得了靶向人REST基因的高效TALEN，為進(jìn)一步研究REST的基因功能及其在相關(guān)疾病中的作用奠定基礎(chǔ)。REST；類轉(zhuǎn)錄激活因子效應(yīng)物核酸酶；質(zhì)粒構(gòu)建；活性檢測RE1沉默性轉(zhuǎn)錄因子（RE 1-silencing tr
中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 2016年10期2016-10-24
- 基于Zigbee的新型激光模擬對抗訓(xùn)練系統(tǒng)設(shè)計(jì)
制臺、射擊單元和靶位單元的數(shù)據(jù)互聯(lián)互通?？傉究蓪?shí)時(shí)監(jiān)控訓(xùn)練態(tài)勢、自動(dòng)識別與評估雙方毀傷情況、實(shí)時(shí)顯示戰(zhàn)場態(tài)勢,為檢驗(yàn)訓(xùn)練效果提供了重要科學(xué)手段。Zigbee；激光；STM32；模擬對抗1 引 言傳統(tǒng)的對抗射擊訓(xùn)練系統(tǒng)不能真槍實(shí)彈地對抗,很難真實(shí)反映火力交戰(zhàn)過程和雙方戰(zhàn)損情況,勝負(fù)往往取決于導(dǎo)調(diào)人員的主觀評判,以致于實(shí)戰(zhàn)效果、導(dǎo)調(diào)控制、裁決評估這3個(gè)關(guān)鍵問題無法有效解決,對抗結(jié)果難以令人信服。本文結(jié)合傳統(tǒng)激光模擬對抗訓(xùn)練系統(tǒng)和激光打靶系統(tǒng)的特點(diǎn),設(shè)計(jì)了一種新
激光與紅外 2015年6期2015-11-24
- RamR突變協(xié)同靶位基因突變對沙門氏菌耐藥性影響的研究
RamR突變協(xié)同靶位基因突變對沙門氏菌耐藥性影響的研究付曉平 李嘉彬 蔣紅霞(廣東科貿(mào)職業(yè)學(xué)院,廣東廣州 510430)從實(shí)驗(yàn)室保存的沙門菌中篩選出33株對環(huán)丙沙星呈現(xiàn)不同敏感程度的分離株,采用PCR方法檢測喹諾酮類作用靶位基因突變和外排泵調(diào)控基因ramA的負(fù)調(diào)控蛋白編碼基因ramR的突變。結(jié)果表明,33株沙門菌中,凡是高水平耐藥菌和環(huán)丙沙星耐藥菌株都發(fā)生GyrA和ParC的多位點(diǎn)突變,突變主要在gyrA和parC基因的QRDR,即GyrA發(fā)生83和87位
獸醫(yī)導(dǎo)刊 2015年24期2015-08-01
- miR-15b在內(nèi)皮細(xì)胞的功能及其與血管相關(guān)性疾病的關(guān)系
是，其部分成員的靶位涵蓋了Dicer[14]和Ago[15]，從而構(gòu)成了對整個(gè)miRNA生成和作用系統(tǒng)的負(fù)反饋抑制。miR-15/107組群通過對其靶mRNA的干擾，影響細(xì)胞的分裂、能量代謝、血管生成等功能，進(jìn)而參與到腫瘤、退行性變等多種人類疾病中。1 miR-15b對細(xì)胞行為學(xué)的影響及其機(jī)制miR-15b最先由Lagos-Quintana等[16]在小鼠組織中檢測出來，隨后經(jīng)Michael等[17]證實(shí)也存在于人類組織。hsa-miR-15b基因位于染色
遺傳 2015年2期2015-02-12
- GFAP是一種新型1型糖尿病的預(yù)測和治療靶位蛋白
尿病的預(yù)測和治療靶位蛋白龐正達(dá)1，4，Hironori NAKAGAMI2，Hiroshi KORIYAMA2，Masayoshi HIGUCHI1，Ryuichi MORISHITA3 (1Department of Geriatric Medicine and Nephrology，2Department of Health Development and Medicine， 3Department of Clinical Gene Therapy，O
中國病理生理雜志 2015年10期2015-01-26
- CRISPR/Cas基因組靶向編輯技術(shù)綜述
5′端區(qū)域能夠與靶位點(diǎn)互補(bǔ)配對，而其3′端能夠與tracrRNA（trans-activating crRNA）及Cas9蛋白形成復(fù)合物，從而引導(dǎo)Cas9蛋白結(jié)合于靶位點(diǎn)進(jìn)行特異性地切割。CRISPR/ Cas系統(tǒng)與其他外源核酸防御系統(tǒng)（如限制修飾系統(tǒng)）最重要的區(qū)別在于：CRISPR/Cas系統(tǒng)具有記憶性，細(xì)菌會記憶首次入侵外源核酸的信息，在其再次入侵時(shí)，特異性的識別并切割這些外源核酸酶使其降解，保護(hù)自身遺傳物質(zhì)的完整準(zhǔn)確[1]。特異的Cas蛋白會識別外源
中國醫(yī)藥導(dǎo)報(bào) 2014年22期2014-09-26
- 人工核酸酶用于基因組定點(diǎn)編輯的研究進(jìn)展
構(gòu)建EN，進(jìn)而在靶位切斷基因組DNA，形成雙鏈斷裂(double-strand break，DSB);其次，DNA 損傷激活DNA 修復(fù)通路，啟動(dòng)自我修復(fù)。修復(fù)通常由一種或兩種途徑完成:切斷的DNA 末端進(jìn)行易錯(cuò)的非同源末端連接(non-homologous end joining，NHEJ)，或利用DNA 模板進(jìn)行同源重組(homologous recombination，HR)。NHEJ 修復(fù)能夠產(chǎn)生較小的插入或缺失，使基因發(fā)生突變或完全敲除;而以引入
基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床 2013年12期2013-02-19
- 抗菌藥物新靶位
綜述·抗菌藥物新靶位陳盈盈，張玉彬，顧覺奮近年來，由于過度使用抗生素，特別是濫用抗生素，病原菌日益廣泛的耐藥性已成為藥物治療中越來越常見的問題[1]。為了克服細(xì)菌的耐藥性，特別是多重耐藥性問題，人們需要運(yùn)用新的思路去發(fā)掘新的抗生素，因此，探索新型抗菌機(jī)制已成為目前的迫切需要。本文綜述了近幾年發(fā)現(xiàn)的抗菌藥物的新靶位，分別從作用于細(xì)菌（真菌）細(xì)胞壁、細(xì)胞膜、RNA 聚合酶、胞內(nèi)代謝及調(diào)控等 4 方面來談抗菌藥物的新作用靶位。1 細(xì)胞壁肽聚糖（peptidogl
中國醫(yī)藥生物技術(shù) 2012年4期2012-04-13
- 靶位體液更新療法治療骨結(jié)核
慶 400035靶位體液更新療法治療骨結(jié)核呂東堯 王貽青重慶貽青中醫(yī)醫(yī)院，四川重慶 400035目的 分析液源性破壞對骨結(jié)核的影響，評價(jià)靶位體液更新療法治療骨結(jié)核的臨床療效。方法 回顧性分析94例骨結(jié)核患者的一般資料，分析其治療效果。結(jié)果 隨訪94病人，其中89例臨床癥狀消失，血沉均恢復(fù)正常，竇道完全閉合，骨質(zhì)修復(fù)良好。結(jié)論 液源性破壞使患部組織不可避免的進(jìn)入了一個(gè)惡性循環(huán)中，加之細(xì)菌耐藥，手術(shù)的創(chuàng)傷、瘢痕、竇道等更給本病的治療增加了難度。筆者對骨結(jié)核論治
中外醫(yī)療 2012年21期2012-01-16
- p53靶位基因Wig-1——腫瘤與干細(xì)胞新的調(diào)控因子
為轉(zhuǎn)錄因子調(diào)節(jié)其靶位基因的表達(dá)，因此深入研究p53靶位基因的功能對完全闡明p53的功能是至關(guān)重要的。Wig-1(wild-type p53-induced gene 1)是p53基因的靶位基因之一，野生型p53可以激活Wig-1誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，研究發(fā)現(xiàn)Wig-1作為p53信號通路下游分子具有重要功能，闡明Wig-1的功能對于全面理解p53信號通路具有重要意義。1 Wig-1蛋白的結(jié)構(gòu)和功能特征Wig-1，也叫 PAG608 或ZMAT3，是最早作為 p53的
醫(yī)學(xué)綜述 2011年21期2011-12-09
- 格斗專項(xiàng)身體素質(zhì)及輔助訓(xùn)練手段
提高身體協(xié)調(diào)性的靶位練習(xí)計(jì)劃。（2）制定能夠提高完整的進(jìn)攻性擊打與提高反擊打能力的練習(xí)計(jì)劃。（3）根據(jù)實(shí)戰(zhàn)要求，制定相應(yīng)的組合動(dòng)作的靶位程序。（4）制定能夠提高與培養(yǎng)正確擊打節(jié)奏的練習(xí)計(jì)劃，如單擊、連擊、動(dòng)作性擊打以及組合擊打。制定正確的手靶練習(xí)計(jì)劃，有利于運(yùn)動(dòng)員鞏固擊打技術(shù)，并能夠在實(shí)距中得到應(yīng)用與發(fā)揮，使所有的擊打更加熟練與完善。拳擊運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練中的手靶練習(xí)是一項(xiàng)重要的練習(xí)手段，它可以提高擊打準(zhǔn)確性，出拳速度，反應(yīng)速度和維持身體重心平衡的能力。手靶分固定手
運(yùn)動(dòng) 2011年12期2011-08-15
- 多靶位FISH技術(shù)在膀胱癌診治中的應(yīng)用進(jìn)展
研究表明［3］多靶位熒光原位雜交(FISH)技術(shù)對于膀胱癌具有高度的敏感性和特異性，可以用于早期診斷膀胱腫瘤及其預(yù)后評估?，F(xiàn)將多靶位FISH在膀胱癌診治中的應(yīng)用綜述如下。1 FISH技術(shù)的原理及特點(diǎn)FISH是一種非放射性分子細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)，其基本原理是通過標(biāo)記的DNA探針與細(xì)胞核內(nèi)的DNA靶序列雜交，獲得細(xì)胞內(nèi)多條染色體(或染色體片段)或多種基因狀態(tài)的信息，用已知的熒光素標(biāo)記單鏈核酸為探針，按照堿基互補(bǔ)的原則，與待檢材料中未知的單鏈核酸進(jìn)行特異性結(jié)合，形成
山東醫(yī)藥 2011年46期2011-04-13
- 下肢深靜脈血栓形成的證候要素研究
虛；常見證候要素靶位為脾，其中急性期的基本證候要素為濕、熱，非急性期常見證候要素為血瘀、濕和脾陽虛。結(jié)論：下肢深靜脈血栓形成的病機(jī)變化是以血瘀為基礎(chǔ)，受多因素影響、虛實(shí)錯(cuò)雜的復(fù)雜過程。證候研究中，簡化成證候要素的形式具有更強(qiáng)的可操作性。深靜脈血栓形成；中醫(yī)；證候要素深靜脈血栓形成（deep venous thrombosis，DVT）是嚴(yán)重威脅人類健康的常見周圍血管疾病，多發(fā)于下肢。在中醫(yī)學(xué)屬于“股腫”、“瘀血流注”等范疇。中醫(yī)辨證治療是DVT的重要治療方
中國中西醫(yī)結(jié)合外科雜志 2010年4期2010-08-09
- 阿德福韋酯聯(lián)合干擾素α-2b治療慢性乙型肝炎療效觀察
藥物有不同的作用靶位，通過不同的作用靶位，可以抑制HBV復(fù)制和表達(dá)，干擾素的作用靶位是在RNA水平，既可抑制HBV-DNA復(fù)制，也可抑制病毒蛋白表達(dá)。而核苷類似物(阿德福韋酯)的作用靶位是抑制HBV-DNA多聚酶，主要使HBVDNA的復(fù)制受到抑制。阿德福韋酯可使HBV的復(fù)制持續(xù)得到抑制，從而使體內(nèi)DNA庫耗竭，并通過增強(qiáng)機(jī)體以清除，進(jìn)而達(dá)到抗病毒療效［5，6］。本研究我們利用阿德福韋酯和干擾索α-2b兩種藥物作用不同的靶位，同時(shí)抑制病毒復(fù)制及抑制病毒蛋白表
山東醫(yī)藥 2010年31期2010-05-23
- 兩次踏進(jìn)同一條河流的人
了最后一槍，2號靶位的埃蒙斯像往常一樣最后一個(gè)擊發(fā)。他只要得到不低于7.1環(huán)的成績就能奪冠，但最后一聲槍響后，正當(dāng)他舉起雙手準(zhǔn)備歡呼的時(shí)候，壞消息傳來，他居然打錯(cuò)了靶，2號靶位的他卻把子彈射向了3號靶位。在美國人出現(xiàn)脫靶這種超級失誤后，金牌屬于中國隊(duì)的賈占波。2008年8月17日，北京射擊館迎來奧運(yùn)會射擊比賽的最后一天，在男子50米步槍三姿決賽中，美國選手埃蒙斯在前九槍取得巨大領(lǐng)先的情況下(領(lǐng)先第二名3.3環(huán))，最后一個(gè)射擊的他只要打出6.7環(huán)就能穩(wěn)獲冠軍
意林 2008年19期2008-05-14
- 跆拳道技術(shù)訓(xùn)練手段
在前斜上方。整個(gè)靶位在人體前方(圖3)。橫踢分中段和上段兩個(gè)高度，中段在腹胸之間，上段即為頭的高度。踢擊時(shí)用腳背擊打靶心位置。(3)劈踢。靶位在持靶人的體側(cè)，握靶柄的前端，靶身和地面平行，靶面微向斜上方(圖4)。另一種握法是靶柄指向正上方，靶前邊緣在下方，靶面與地面垂直(圖5)。劈踢時(shí)靶位與頭同高，用腳掌擊打靶心位置，使腳靶發(fā)出清脆聲響。(4)側(cè)踢和推踢。側(cè)踢和推踢練習(xí)時(shí)的握靶方法相同，都可用單手靶和雙手靶進(jìn)行練習(xí)。握靶柄的中間，靶柄、靶前邊緣與水平面垂直
精武 1999年12期1999-06-13