易傳輝　陳曉鳴　史軍義　周成理

摘要為了進一步了解枯葉蛺蝶滯育機理，利用比色法，測定了非滯育成蟲和越冬成蟲不同發(fā)育階段蛋白質(zhì)含量。結(jié)果表明，非滯育成蟲蛋白質(zhì)含量在277.809 7~324.193 0mg/g之間，整個非滯育成蟲期間，蛋白質(zhì)含量呈下降趨勢，差異明顯；越冬期間，成蟲的蛋白質(zhì)含量在144.429 0~300.993 3mg/g之間，含量從1月下旬至2月下旬有較大幅度上升，其余時期差異不大。蛋白質(zhì)在枯葉蛺蝶不同發(fā)育階段具有不同的代謝特征。

關(guān)鍵詞枯葉蛺蝶；蛋白質(zhì)含量；滯育；成蟲；越冬

中圖分類號 Q969.439.2 文獻標識碼A文章編號 1007-5739（2009）04-0214-01

Danks認為，滯育是昆蟲機體從直接發(fā)育進程中轉(zhuǎn)入一種深層次陳代謝路線中斷的發(fā)育暫停階段，它不僅由直接的環(huán)境因素所控制，事實上滯育發(fā)生在不利因素到來之前。滯育期間，昆蟲體內(nèi)水分與海藻糖、脂肪、蛋白質(zhì)、氨基酸等化學(xué)成分含量發(fā)生了明顯變化，并伴隨滯育關(guān)聯(lián)特異物質(zhì)產(chǎn)生，滯育期間生理生化變化已在許多昆蟲中進行了研究 [1-5]。在蝴蝶滯育生化方面研究相對較少，主要研究集中在脂肪含量、酶和激素等方面[6]?？萑~蛺蝶（Kallima inachus Doubleday）屬于鱗翅目（Lepidoptera）蛺蝶科（Nymphalidae）昆蟲，主要分布于陜西、四川、云南、江西、浙江等省，國外主要分布于日本、印度和東南亞等國。對枯葉蛺蝶的研究報道較少，僅見一些零星記載，缺乏全面系統(tǒng)的研究報道?？萑~蛺蝶1年發(fā)生2~3代，以成蟲越冬，成蟲主要發(fā)生期在5~9月。有學(xué)者研究了光周期對枯葉蛺蝶幼蟲生長發(fā)育的影響等[7-10]。蛋白質(zhì)是生命的物質(zhì)基礎(chǔ)，與各種生命活動息息相關(guān)，其含量的變化直接影響昆蟲的各種新陳代謝活動，通過對非滯育和滯育解除后成蟲蛋白質(zhì)含量變化的了解，有利于全面了解枯葉蛺蝶的滯育機理。目前未見有關(guān)枯葉蛺蝶非滯成蟲和越冬成蟲蛋白質(zhì)含量變化比較研究報道。

1材料與方法

1.1材料

枯葉蛺蝶非滯育成蟲來源于資源昆蟲研究所實驗室人工養(yǎng)殖，滯育成蟲來源于四川峨眉人工養(yǎng)殖的同一批成蟲，羽化時間相近。

1.2方法

待測樣品的準備參照張韻梅的方法[11]，并略作改進。取成蟲2只，去足翅，加入10%三氯乙酸溶液10mL和少許石英砂，充分研磨，將研磨后的液體移入離心管，在4℃下貯藏4h后5 000rpm離心5min，棄上清液，再各加入10%三氯乙酸10mL重復(fù)提取1次，棄清液。離心后沉淀加入10% NaOH溶液10mL，在37℃下水解12h后，4 000rpm離心15min，取上清液1mL，稀釋定容至100mL。樣品測定參照吳如丹“溶液中蛋白質(zhì)濃度的測定方法”[12]，采用280nm和260 nm吸收差值法。每個樣品重復(fù)2次。

2結(jié)果與分析

非滯育蛹、滯育蛹和滯育蛹羽化成蟲初期蛋白質(zhì)含量見圖1，分析表明，不同發(fā)育階段蛋白質(zhì)含量差異顯著（P<0.05）。非滯育成蟲蛋白質(zhì)含量相對較高，羽化初期，蛋白質(zhì)含量為324.193 0mg/g，成蟲后期為277.809 7mg/g，在整個非滯育成蟲期間，蛋白質(zhì)含量呈下降趨勢，差異明顯。在整個越冬期間，成蟲的蛋白質(zhì)含量在144.429 0~300.993 3mg/g之間，含量在10月下旬至11月下旬相對穩(wěn)定，雖有所增加，但差異不明顯；11月下旬至12月下旬含量下降，差異明顯；12月下旬至次年2月下旬則持續(xù)上升，特別是1月下旬至2月下旬上升幅度較大，2月下旬含量為12月下旬含量的2倍；2月下旬后含量下降，至3月上旬含量僅為168.939 0 mg/g，約為2月下旬的56%。越冬絕大部分時間蛋白質(zhì)含量明顯低于非滯育成蟲，僅在2月下旬蛋白質(zhì)含量與非滯育成蟲相近，表明枯葉蛺蝶成蟲可能在2月下旬左右滯育解除。非滯育成蟲和越冬成蟲蛋白質(zhì)含量有明顯差異，說明蛋白質(zhì)代謝在滯育期間有著與非滯育期間不同的代謝特征。

3小結(jié)與討論

非滯育成蟲蛋白質(zhì)含量在277.809 7~324.193 0mg/g之間，整個非滯育成蟲期間，蛋白質(zhì)含量呈下降趨勢，差異明顯；越冬期間，成蟲的蛋白質(zhì)含量在144.429 0~300.993 3mg/g之間，含量在1月下旬至2月下旬有較大幅度上升，其余時期差異不大。越冬期間絕大部分時期蛋白質(zhì)含量明顯低于非滯育成蟲，僅在2月下旬蛋白質(zhì)含量與非滯育成蟲相近，表明越冬期間蛋白質(zhì)代謝水平較低，這從整個越冬期間RNA含量明顯低于非滯育成蟲可得到證實[13]。

4致謝

實驗材料由峨眉山胡芳女士提供，峨眉山氣象資料由成都高原氣象研究所李躍清博士提供，在此表示衷心感謝！

5參考文獻

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