羅曉松,許福文

(1.廣東省揭陽(yáng)市動(dòng)物防疫監(jiān)督所,廣東揭陽(yáng)522010;2.廣東省揭西縣畜牧局,廣東揭西515400)

真菌毒素是真菌產(chǎn)生的有毒代謝產(chǎn)物。真菌毒素中毒是動(dòng)物采食或誤食被真菌寄生并產(chǎn)生真菌毒素的飼料所引起的中毒病。飼料霉變后,可因污染菌的不同而產(chǎn)生多種真菌毒素,畜禽食入后即可發(fā)病。筆者曾遇一起雛雞死亡率達(dá)48.3%的病例。根據(jù)發(fā)病情況、臨床癥狀和剖檢病變,結(jié)合實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn),綜合診斷為雛雞真菌毒素中毒。采取相應(yīng)措施后,疾病得以控制。

1 發(fā)病情況

2008年8月16日,廣東省揭陽(yáng)市某肉雞場(chǎng)購(gòu)進(jìn)1日齡嶺南黃雛雞1 000只,運(yùn)送到場(chǎng)后存活991只。遂用自配飼料地面散養(yǎng),并于7日齡、15日齡分別接種新城疫、禽流感疫苗。養(yǎng)至9月7日,雞群飲食欲正常,生長(zhǎng)發(fā)育良好。9月8日,該場(chǎng)從揭陽(yáng)市東山區(qū)某飼料銷(xiāo)售店購(gòu)買(mǎi)一批雛雞飼料,次日飼喂。喂料第4天上午,發(fā)現(xiàn)雞群異常,表現(xiàn)食欲不振,羽毛松亂,低頭縮頸。病初零星死亡,隨后死亡日見(jiàn)增多,病情亦愈加嚴(yán)重,5 d內(nèi)死亡479只,且發(fā)育好、體格壯的多呈急性死亡,體格弱的死亡相對(duì)較少。該場(chǎng)曾用諾氟沙星、環(huán)丙沙星、土霉素、卡那霉素等治療,均無(wú)療效。

2 臨床癥狀

急性者僅見(jiàn)精神委頓,食欲廢絕,發(fā)病當(dāng)天或次日痙攣而死。稍緩者病初精神不振,羽毛松亂,食欲減退,飲欲增加,相互啄食,行走無(wú)力,步態(tài)不穩(wěn),雙翅下垂,低頭縮頸;繼而精神沉郁,食欲廢絕,有的跛行,叫聲嘶啞,頭頸下垂,閉眼嗜眠,衰弱貧血,冠髯淡染,共濟(jì)失調(diào),腹瀉,糞便帶有黏液或呈綠白稀水狀,嚴(yán)重者排出血色稀糞;隨后兩腿癱瘓,臥伏不起,頸肌痙攣,逐漸消瘦,有的出現(xiàn)神經(jīng)癥狀,衰竭而死,死時(shí)角弓反張。

3 剖檢病變

以全身性出血為特征。稍緩者營(yíng)養(yǎng)不良,十分消瘦,胸肌呈淡紅色。嚴(yán)重者皮下出血,有黃色膠凍樣滲出物,胸腹部、大腿內(nèi)側(cè)肌肉彌漫出血;口腔潰瘍,嗉囊發(fā)炎且有假膜,腺胃與肌胃交界處潰瘍,肌胃角質(zhì)膜增厚、易剝離,角質(zhì)膜下出血性潰瘍;氣管、喉頭、肺臟點(diǎn)狀出血,心包、腹腔有多量黃色液體,心臟水腫、晶亮,脂肪消失,心肌條紋狀出血;肝臟腫大,呈土黃色、質(zhì)地脆弱,表面有散在的灰白壞死點(diǎn)或出血斑點(diǎn),有的肝表面有一層白色滲出物,膽囊腫大,囊腔內(nèi)充滿(mǎn)暗綠粘稠膽汁;脾臟淺黃稍腫,被膜下針尖狀出血,腎臟蒼白腫大、質(zhì)地脆弱,胰腺萎縮,點(diǎn)狀出血;腸黏膜彌漫性出血,小腸尤為明顯,腸黏膜脫落、壞死,腸內(nèi)容物呈紅糖色。

4 實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)

4.1 細(xì)菌檢驗(yàn) 無(wú)菌采取病死雞心血涂片,肝臟、脾臟觸片,經(jīng)革蘭染色、瑞氏染色鏡檢,未檢出致病菌;無(wú)菌采取心血、肝臟、脾臟分別接種于營(yíng)養(yǎng)肉湯、營(yíng)養(yǎng)瓊脂、鮮血瓊脂培養(yǎng)基,于37℃恒溫培養(yǎng)24 h,未見(jiàn)細(xì)菌生長(zhǎng)。4.2 真菌檢驗(yàn)

4.2.1 飼料肉眼檢查 飼料松軟潮濕,鼻聞?dòng)忻刮?且有許多高粱米大的霉團(tuán),其橫斷面呈棕褐色。4.2.2 真菌分離鑒定 取霉變飼料5 g,加無(wú)菌生理鹽水至50 mL,充分振搖混合,制成1∶10懸液,取0.1 mL接種于卡氏培養(yǎng)基,于28℃恒溫培養(yǎng)48 h,見(jiàn)有黃色菌絲狀平坦菌落和白色絨毛狀的菌絲型菌落生長(zhǎng);培養(yǎng)至72 h,菌落形態(tài)更為明顯。鏡檢黃色菌落,見(jiàn)分生孢子梗頂部膨大,孢子頭頂囊呈球拍形或頭球形,頂囊上二列小梗,小梗呈疏松放射狀,小梗上有許多串珠狀排列的卵圓形分生孢子,孢子區(qū)呈桔黃色;將黃色菌落接種于加有0.2%蒸餾水和1 g大米的試管內(nèi),于28℃恒溫培養(yǎng)3 d,取出米粒置于波長(zhǎng)365 nm的紫外光燈下觀察,米粒發(fā)出藍(lán)色熒光,表明黃色菌落為產(chǎn)毒菌株,經(jīng)鑒定為黃曲霉。鏡檢白色菌落,見(jiàn)大分生孢子為無(wú)色細(xì)長(zhǎng)的鐮刀狀,每個(gè)大分生孢子由5條橫紋分成6個(gè)室,經(jīng)鑒定為禾谷鐮刀菌。4.3 真菌毒素檢驗(yàn)

4.3.1 飼料肉眼檢查 取霉變飼料2 kg,分批放在白色搪瓷盤(pán)內(nèi)攤成薄層,直接置于波長(zhǎng)365 nm的紫外光燈下觀察,飼料顆粒發(fā)出藍(lán)色熒光,表明霉變飼料中含有黃曲霉B族毒素。

4.3.2 真菌毒素檢測(cè) 取霉變飼料50 g,搗碎后放入三角燒瓶中,加入乙醚100 mL,在室溫下浸提72 h,過(guò)濾后40℃水浴蒸去乙醚,即得油狀物。取油狀物3滴于試管內(nèi),加入8%氫氧化鉀5 mL,酒精燈上加溫振蕩5 min,使成為色澤一致的乳劑,然后沿管壁徐徐加入乙醚2 mL振蕩,乙醚與乳劑接觸面即刻出現(xiàn)褐色環(huán)輪,表明霉變飼料中含有鐮刀菌毒素。

經(jīng)綜合判定,診斷為雛雞真菌毒素中毒。

5 防治措施

立即清除料槽內(nèi)殘余飼料,用0.05%硫酸銅徹底清洗料槽、水槽;立即停喂霉變飼料,更換新鮮優(yōu)質(zhì)飼料,加喂白菜葉、紅薯葉等青綠飼料;徹底清除所有糞便,集中用2%NaOH消毒處理;病死尸體用2%NaOH浸泡20 min后深埋;徹底清掃雞舍,更換墊料,并用1∶300百毒殺噴霧消毒,1次/d,連用3 d;加強(qiáng)通風(fēng)透氣,增加飼料中多維素含量,每千克飼料加入制霉菌素100萬(wàn)IU混飼,連用7 d;每升飲水加入葡萄糖100 g、維生素C 1 g混飲,連用5 d;病情較重的28只患雞,每只口服制霉菌素3萬(wàn)IU、維生素C 50 mg,2次/d,連用3 d。采取上述措施后,除中毒嚴(yán)重的7只雛雞次日死亡外,其余雛雞大多于第3天精神、食欲基本恢復(fù)正常。10 d后回訪,整個(gè)雛雞群完全康復(fù),長(zhǎng)勢(shì)良好。

6 小結(jié)與討論

6.1 黃曲霉、鐮刀菌同屬中溫型微生物,其最適宜生長(zhǎng)溫度為 20℃～30℃,最適宜生長(zhǎng)相對(duì)濕度為80%～90%。我國(guó)南方地區(qū)5～9月份的各月平均氣溫均在20℃以上,平均相對(duì)濕度在80%以上,黃曲霉、鐮刀菌在這種環(huán)境條件下生長(zhǎng)繁殖最為旺盛。當(dāng)玉米、麥類(lèi)、稻谷等飼料原料水分含量高于17%時(shí),飼料極易霉變。所以,高溫高濕季節(jié)應(yīng)嚴(yán)把飼料采購(gòu)關(guān),嚴(yán)禁霉變飼料入庫(kù);嚴(yán)控飼料儲(chǔ)存環(huán)境的溫度、濕度;注意通風(fēng),防止雨淋、潮濕,嚴(yán)防飼料霉變。這對(duì)防止雛雞真菌毒素中毒至關(guān)重要。

6.2 預(yù)防真菌毒素中毒的根本措施是嚴(yán)禁使用霉變飼料飼喂畜禽。黃曲霉、鐮刀菌同屬產(chǎn)毒真菌,雛雞對(duì)黃曲霉毒素、鐮刀菌毒素較為敏感,一旦采食其污染的飼料,就會(huì)引起中毒。因此,在雛雞飼養(yǎng)管理過(guò)程中,切忌飼喂霉變飼料。如若確定或疑似霉變飼料中毒,應(yīng)立即停喂霉變飼料,更換新鮮優(yōu)質(zhì)飼料,加喂青綠飼料,對(duì)癥治療,降低損失。