張振國(guó),秦曉慶,趙樹(shù)臣,侯振中

(東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院,黑龍江哈爾濱150030)

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物的選擇和分組 在黑龍江省某奶牛場(chǎng)選取患臨床型乳房炎的奶牛25頭,主要表現(xiàn)為：患病乳區(qū)奶汁異常(出現(xiàn)絮片、凝塊或呈水樣),乳房有不同程度的紅、腫、熱、痛癥狀,奶產(chǎn)量下降,但無(wú)明顯的全身癥狀。分成兩組,第一組為中藥組 15頭,共33個(gè)患病乳區(qū);第二組為西藥對(duì)照組10頭,共18個(gè)患病乳區(qū)。

1.2 藥品與設(shè)備 中藥乳房灌注劑由東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院產(chǎn)科教研室提供,其主要成分為蒲公英、金銀花等;頭孢唑啉鈉由哈藥集團(tuán)制藥總廠(chǎng)生產(chǎn);各種試劑盒購(gòu)自南京建成有限責(zé)任公司;723型分光光度計(jì)由山東高密彩虹分析儀器有限公司制造。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 給藥方式 中藥組：待榨完奶后,每乳區(qū)灌注1 g/mL的中藥液40mL,1次/d,連用4 d。西藥組：待榨完奶后,每乳區(qū)灌注1 g頭孢唑啉鈉,1次/d,連用 4 d。

1.3.2 乳樣的采集 每次用藥前及最后1次用藥24 h后,首先按常規(guī)進(jìn)行消毒,每個(gè)乳頭擠棄頭2把奶后,無(wú)菌采樣于15 mL滅菌離心管內(nèi),加蓋密封,做好標(biāo)記,迅速送檢。第1次給藥前采樣的時(shí)間記為 T0;第1次給藥后24 h采樣時(shí)間記為T(mén)1;第2次給藥后24 h采樣時(shí)間記為T(mén)2;第3次給藥后24 h采樣時(shí)間記為T(mén)3;第4次給藥后24 h采樣時(shí)間為記T4。

1.3.3 乳清中SOD、MDA、NO和T-AOC含量的測(cè)定

1.3.3.1 乳清制備方法[1]將奶樣3 000 r/m in離心5 min,除去乳脂,然后于16 000 r/min離心10 min,去除沉淀,保留上清,4℃保存,待測(cè)。

1.3.3.2 乳清中SOD、MDA、NO和 T-AOC含量的測(cè)定 嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3.4 療效判定標(biāo)準(zhǔn)[2-3]痊愈：用藥3～5 d后,乳房紅、腫、熱、痛消失,乳汁肉眼觀(guān)察無(wú)異常變化,產(chǎn)奶量恢復(fù)正常。有效：用藥3～5 d后,乳房紅、腫、熱、痛等癥狀明顯減輕,乳房腫塊明顯減少,乳汁性狀基本正常,產(chǎn)奶量仍沒(méi)恢復(fù)。無(wú)效：用藥3～5 d后,乳房紅、腫、熱、痛癥狀無(wú)明顯減輕,乳汁肉眼觀(guān)察有異常變化。

2 結(jié)果

2.1 療效統(tǒng)計(jì)結(jié)果 見(jiàn)表1。

表1 療效統(tǒng)計(jì)

中藥組和西藥組均在用藥4 d后對(duì)奶牛乳區(qū)進(jìn)行療效統(tǒng)計(jì),用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析,中藥組治療效果與西藥組治療效果差異顯著(P＜0.05)。

2.2 乳清中SOD、MDA、NO和 T-AOC含量測(cè)定結(jié)果

2.2.1 乳清中SOD含量測(cè)定結(jié)果 見(jiàn)表2、圖1。

由表2和圖1顯示,中藥組在第1、2、3次給藥后24 h時(shí)乳清中SOD的含量均較給藥前顯著升高(P＜0.05),第4次給藥后24 h時(shí)乳清中SOD的含量較給藥前極顯著升高(P＜0.01);西藥組在第4次給藥后24 h時(shí)乳清中SOD的含量較給藥前顯著升高(P＜0.05)。

表2 用藥前后乳清中SOD的含量(±SD) (U/mg)

表2 用藥前后乳清中SOD的含量(±SD) (U/mg)

a代表差異極顯著(P＜0.01);b代表差異顯著(P＜0.05),下同

組別 T0 T 1 T2 T 3 T4中藥組西藥組103.73±15.04 111.36±11.52 128.82±16.74b 115.43±13.10 126.83±10.09b 126.06±14.11 124.04±23.40b 124.12±20.27 141.37±16.09a 132.62±15.25b

2.2.2 乳清中MDA含量測(cè)定結(jié)果 見(jiàn)表3、圖2。

由表3和圖2顯示,中藥組在第3次和第4次給藥后24 h時(shí)乳清中MDA的含量均較給藥前顯著降低(P＜0.05);西藥組用藥前后乳清中MDA的含量沒(méi)有隨給藥次數(shù)及時(shí)間的變化發(fā)生顯著變化。

表3 用藥前后乳清中MDA的含量(±SD) (nmol/mg)

表3 用藥前后乳清中MDA的含量(±SD) (nmol/mg)

組別 T0 T 1 T2 T 3 T4中藥組西藥組3.59±0.57 3.33±0.83 3.35±0.82 3.46±0.68 3.07±0.52 3.25±0.42 2.44±0.76b 3.30±0.72 2.28±0.87b 3.12±0.77

2.2.3 乳清中NO含量測(cè)定結(jié)果 見(jiàn)表4、圖3。

表4 用藥前后乳清中NO的含量(±SD) (nmo l/mg)

表4 用藥前后乳清中NO的含量(±SD) (nmo l/mg)

組別 T0 T 1 T2 T 3 T4中藥組西藥組62.40±48.40 73.50±39.22 21.53±8.60 69.87±23.21 19.82±32.08 70.41±21.72 9.75±4.83b 55.98±10.45 14.62±9.50 58.65±14.45

由表4和圖3顯示,中藥組在第3次給藥后24 h時(shí)乳清中NO含量較給藥前顯著降低(P＜0.05),總的趨勢(shì)是降低;西藥組用藥前后乳清中NO的含量沒(méi)有隨給藥次數(shù)及時(shí)間的變化發(fā)生顯著變化。

2.2.4 乳清中 T-AOC含量測(cè)定結(jié)果 見(jiàn)表5、圖4。

由表 5和圖4顯示,中藥組在第3次給藥后24 h時(shí)乳清中 T-AOC的含量有顯著性的升高(P＜0.05);在第4次給藥后24h時(shí)乳清中T-AOC的含量又恢復(fù)正常;西藥組在第3次給藥后24 h時(shí)乳清中T-AOC的含量沒(méi)有隨給藥次數(shù)及時(shí)間的變化發(fā)生顯著變化。

表5 用藥前后乳清中T-AOC的含量(±SD) (U/mL)

表5 用藥前后乳清中T-AOC的含量(±SD) (U/mL)

組別 T0 T 1 T2 T 3 T4中藥組西藥組4.38±2.88 5.16±1.98 5.16±3.35 4.84±1.22 6.12±4.19 6.65±2.32 8.51±1.77b 6.98±2.86 6.72±1.43 6.46±1.67

3 分析與討論

3.1 中獸醫(yī)認(rèn)為,乳房炎即乳癰,是疼、濕、氣、血郁結(jié)不散,化而為炎。應(yīng)以清熱解毒、抗菌消炎、通經(jīng)活血、活絡(luò)通乳為治療原則[4-5]。該中藥方劑中的蒲公英、魚(yú)腥草、金銀花、夏枯草具有清熱解毒、抗菌、消炎、消腫散結(jié)之功;當(dāng)歸、川芎、王不留行有活血散瘀、理氣散結(jié)、活絡(luò)下乳、提高機(jī)體免疫力之效。本試驗(yàn)中中藥組對(duì)臨床型乳房炎的有效率和治愈率分別為100.00%和90.91%,西藥組的有效率和治愈率分別為72.22%和66.67%,中藥組效果明顯高于西藥組,且中草藥與西藥相比具有低毒、低殘留、不易產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點(diǎn)[6]。本試驗(yàn)中西藥的效果不如中藥,可能與臨床上濫用抗生素,產(chǎn)生很多耐藥菌株,致使該牛場(chǎng)乳房炎致病菌對(duì)頭孢唑啉鈉產(chǎn)生耐藥性有關(guān)。

3.2 人醫(yī)報(bào)道,測(cè)定 SOD、MDA、和 T-AOC是判斷機(jī)體抗過(guò)氧化能力的重要指標(biāo),測(cè)定NO是判斷組織與細(xì)胞受損傷的重要指標(biāo)[7],對(duì)了解機(jī)體抗氧化狀態(tài)及組織細(xì)胞損傷情況有著非常重要的意義。SOD是專(zhuān)一催化超氧化物陰離子自由基歧化反應(yīng)的酶,具有保護(hù)機(jī)體細(xì)胞免受自由基損傷、抗炎、抗腫瘤及抗衰老等作用。MDA是機(jī)體內(nèi)發(fā)生脂質(zhì)過(guò)氧化作用產(chǎn)生的脂質(zhì)過(guò)氧化物,測(cè)試MDA的量常?？煞从硻C(jī)體內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化的程度,間接的反映出細(xì)胞損傷的程度。致炎因子可以引起誘生型一氧化氮合酶活性升高,生成大量NO,過(guò)量的NO可引起一系列的病理生理反應(yīng)[8-10]。本試驗(yàn)中乳房灌注中藥后乳清中SOD和T-AOC的含量較給藥前顯著升高(P＜0.05),而 MDA的含量顯著降低(P＜0.05),表明機(jī)體內(nèi)抗氧化能力的升高,清除自由基的能力增強(qiáng),NO的含量顯著降低(P＜0.05),表明機(jī)體致炎因子減少、炎癥減輕,這可能和中草藥進(jìn)入機(jī)體后的綜合調(diào)理有關(guān),使乳腺細(xì)胞得到修復(fù)、機(jī)體免疫力增強(qiáng)等,這與臨床治療效果也有高度的一致性。而西藥組用藥只有乳清中SOD含量較給藥前顯著升高(P＜0.05),其他指標(biāo)變化均不顯著,這表明在本試驗(yàn)中頭孢唑啉鈉對(duì)清除機(jī)體內(nèi)自由基、修復(fù)乳腺細(xì)胞等能力比中草藥差。

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