GC -MS 法檢測(cè)包裝材料中的三聚氰酸殘留

董穎超 高木珍 李 俊 李軍國(guó)

三聚氰胺在一般情況下較穩(wěn)定,但在強(qiáng)酸、強(qiáng)堿條件下能發(fā)生水解，氨基逐步被羥基取代，生成三聚氰酸二酰胺（ammeline）、三聚氰酸一酰胺（ammelide）和三聚氰酸（cyanuric acid）。美國(guó)環(huán)?？偸穑║S EPA）認(rèn)為這4種物質(zhì)具有同等的毒性效應(yīng)，將這4種物質(zhì)統(tǒng)稱為三聚氰胺相關(guān)物質(zhì)（簡(jiǎn)稱MARCs），并對(duì)它們進(jìn)行總體毒理學(xué)評(píng)價(jià)。研究人員試驗(yàn)了大鼠單獨(dú)攝入三聚氰胺、三聚氰酸二酰胺、三聚氰酸一酰胺或三聚氰酸以及這4種化合物的混合物。三聚氰酸二酰胺或三聚氰酸一酰胺單獨(dú)使用均未對(duì)腎產(chǎn)生任何作用，但混合物則產(chǎn)生了明顯的腎損傷。Roberto報(bào)道，在某些檢出三聚氰胺陽性的食品中，也能檢出不同含量的三聚氰胺衍生物。歐洲食品安全機(jī)構(gòu)公布了臨時(shí)聲明，并提出三聚氰胺及其類似物（三聚氰酸、三聚氰酸一酰胺和三聚氰酸二酰胺）總量的每日耐受攝入量為每千克體重0.5 mg。

飼料安全是動(dòng)物性食品安全的源頭，只有飼料安全了才能有效徹底的排除三聚氰胺及其衍生物對(duì)動(dòng)物性食品安全帶來的隱患。三聚氰酸及三聚氰胺等可以通過遷移的方式進(jìn)入到食品或飼料中，因此也有必要監(jiān)控產(chǎn)品或原料包裝材料的三聚氰酸的殘留。目前尚無用于包裝材料中三聚氰酸殘留的檢測(cè)方法。

1 試驗(yàn)部分

1.1 儀器和試劑

氣相色譜7890-質(zhì)譜聯(lián)用儀5975，Agilent公司；色譜柱 DB-5MS，30 m×0.25 mm×0.25 μm；三聚氰酸（>99%）購(gòu)自Aldrich-Sigma公司；甲醇，色譜純，購(gòu)自Fisher；硅烷化試劑：Sylon BFT（99%，N,O-雙三甲基硅基三氟乙酰胺（BSTFA）+1%三甲基氯硅烷（TMCS））購(gòu)自Supelco公司。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 樣品處理

稱取0.5 g樣品于15 ml離心管中，加入5 ml甲醇，超聲10 min，4000 r/min離心10 min，將甲醇提取液用0.45 μm過濾頭過濾，取40 μl提取液至樣品瓶中，70℃烘箱中揮干，約 15 min，加入 50 μl吡啶和 50 μl硅烷化試劑，渦旋混合均勻，70℃烘箱下反應(yīng)30 min，上機(jī)測(cè)定。

1.2.2 GC-MS測(cè)定條件

載氣為99.99%的高純氦氣；進(jìn)樣口溫度250℃，不分流進(jìn)樣，恒流模式，流速 1 ml/min；上樣量 1 μl；程序溫度：75℃（1 min），15℃/min升至300℃，保持10 min。電子轟擊（EI）離子源，電離能量70 eV，四級(jí)桿溫度150℃，傳輸線溫度280℃，溶劑延遲時(shí)間4 min，全掃描確定定量及定性離子，采用SIM定量。

2 結(jié)果和討論

2.1 定量及定性離子的確定

配制一定濃度的三聚氰酸的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，先對(duì)其進(jìn)行全掃描，根據(jù)全掃描的結(jié)果，確定目標(biāo)化合物衍生物的監(jiān)測(cè)離子為345.2、330.1、188.1 m/z，定量離子為 345.2 m/z，見圖 1、圖 2、圖 3。

2.2 檢測(cè)限及定量限的確定

配制三聚氰酸系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，按所建立的方法進(jìn)行處理及測(cè)定，以目標(biāo)化合物定量離子的峰面積Y對(duì)目標(biāo)化合物的質(zhì)量濃度進(jìn)行線性回歸，得三聚氰酸的線性范圍，相關(guān)系數(shù)；線性方程：Y=-28064.672+620432.087X，R2=0.9927，結(jié)果表明，在0.05～1.0 mg/kg的范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（見圖4）。

2.3 方法的檢測(cè)限

以S/N=3為檢測(cè)限（LOD）的確定依據(jù)，三聚氰酸的檢測(cè)限為0.01 mg/kg，以S/N=10為定量限（LOQ）的確定依據(jù)，三聚氰酸的定量限為0.05 mg/kg。

2.4 回收率和精密度

為了驗(yàn)證方法的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性，選取飼料原料及產(chǎn)品的包裝材料進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，經(jīng)過試驗(yàn)驗(yàn)證加標(biāo)的樣品為未檢出化合物的本底樣品，進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，同一濃度做6次平行試驗(yàn)，回收率及精密度結(jié)果見表1，樣品加標(biāo)后總離子流圖見圖5。

圖4 三聚氰酸衍生物峰面積-三聚氰酸濃度工作曲線

表1 包裝材料中三聚氰酸的回收率及精密度

圖5 實(shí)際樣品總離子流圖

2.5 樣品測(cè)定

運(yùn)用本文中所建立方法對(duì)40個(gè)飼料產(chǎn)品包裝袋進(jìn)行了檢測(cè)，樣品中均未檢出三聚氰酸。

3 結(jié)論

本文建立的氣相色譜-質(zhì)譜測(cè)定包裝材料中三聚氰酸的方法，具有前處理簡(jiǎn)單，重復(fù)性好等特點(diǎn)。由于在本方法中沒有引入混合型陽離子固相萃取柱，即通過乙腈-水溶液提取后，無需凈化，過膜后直接衍生，能夠跟三聚氰胺同時(shí)測(cè)定，提高了檢測(cè)的效率，節(jié)省了分析時(shí)間。在試驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)在部分樣品中還出現(xiàn)了3個(gè)峰，有可能是三聚氰胺、三聚氰酸一酰胺、三聚氰酸二酰胺3種化合物，對(duì)于它們的確證工作在進(jìn)一步進(jìn)行中。

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