王 雷 王 超 趙延棟

（1.山東中醫(yī)藥大學(xué)第二附屬醫(yī)院藥劑科，山東 濟(jì)南 250001；2.山東海洲醫(yī)藥有限公司，山東 濟(jì)南 250031）

1 對(duì)雷公藤甲素的藥理作用研究

1.1 雷公藤甲素的抗炎作用

目前認(rèn)為類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中關(guān)節(jié)軟骨和骨組織的損害主要是因?yàn)榛ぜ?xì)胞的活化和增生引起的，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者的發(fā)病與細(xì)胞凋亡過(guò)程異常密切相關(guān)，滑膜細(xì)胞過(guò)度增生是源于滑膜細(xì)胞凋亡的相對(duì)不足而引起的，而雷公藤甲素在低濃度下即可降低其活性作用，抑制滑膜細(xì)胞的增生，并且誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[1]。邵雪婷等[2]通過(guò)對(duì)人類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞體外培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)的分析結(jié)果表明，雷公藤甲素可很明顯的抑制TNF刺激引起的類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞環(huán)氧化酶和誘導(dǎo)型一氧化氮合酶的表達(dá)及其誘導(dǎo)產(chǎn)物前列腺素E2(PGE2)等物質(zhì)的生成，抑制作用與雷公藤甲素濃度呈正相關(guān)關(guān)系。

1.2 雷公藤甲素對(duì)血管生成的抑制作用

低濃度的雷公藤甲素就可以很明顯抑制EC的增殖，隨其濃度的增加抑制作用更加顯著，這顯示雷公藤甲素具有較強(qiáng)的抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖的活性。這與以前的研究結(jié)果是相同的，但其具體機(jī)制還不明確，有關(guān)雷公藤甲素對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移活性的影響國(guó)內(nèi)外研究的卻非常少。通過(guò)研究我們發(fā)現(xiàn)，在體外培養(yǎng)的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞具有較強(qiáng)的遷移活性，低濃度的雷公藤甲素就可明顯抑制細(xì)胞的遷移，且呈藥物濃度依賴趨勢(shì)，臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞經(jīng)雷公藤甲素作用后幾乎喪失了遷移能力。雞胚尿囊膜血管非常豐富，其是研究血管生成的理想模型，雷公藤甲素可使雞胚尿囊膜的血管管腔變細(xì)、數(shù)目減少，尤其是新生小血管數(shù)量減少更為明顯，由此更加明確了雷公藤甲素對(duì)血管生成有較強(qiáng)的抑制作用。

1.3 雷公藤甲素對(duì)細(xì)胞因子作用

雷公藤甲素抑制免疫細(xì)胞NF-KB活力是其降低IL-2等多種炎癥因子的生成、抑制免疫細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡等多種免疫抑制效應(yīng)的分子機(jī)制之一。俞瑜等[3]研究表明雷公藤甲素能同時(shí)抑制小鼠T細(xì)胞早期活化標(biāo)志CD69、CD25及細(xì)胞因子vmRNA的表達(dá)，提示這可能是其免疫抑制的機(jī)制之一核因子-KB(NF-KB)作為重要的核轉(zhuǎn)錄因子，可與多種基因的啟動(dòng)子或增強(qiáng)子特定區(qū)域結(jié)合進(jìn)而廣泛參與多種基因的表達(dá)調(diào)控，其中包括多種與免疫炎癥反應(yīng)密切相關(guān)的細(xì)胞因子和黏附分子；此外免疫細(xì)胞內(nèi)的NF-KB活性改變對(duì)細(xì)胞的增殖、活化和凋亡均有重要意義，進(jìn)而直接影響整個(gè)機(jī)體的免疫狀態(tài)。在此基礎(chǔ)上，劉浩等[4]對(duì)免疫抑制作用分子機(jī)制的進(jìn)一步研究表明，雷公藤甲素可上調(diào)Jurkat細(xì)胞中抑制蛋白(IKB)mRNA的表達(dá)水平，導(dǎo)致胞內(nèi)IKB 增多從而抑NF-KB活力。

1.4 雷公藤甲素誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的研究

1.4.1 雷公藤甲素對(duì)腫瘤細(xì)胞的作用自從Kupchan等[5]首次發(fā)現(xiàn)雷公藤甲素的抗腫瘤活性以來(lái)，人們對(duì)雷公藤甲素治療癌癥作了大量的研究。據(jù)報(bào)道：雷公藤甲素的劑量為200～250 ug/kg，可延長(zhǎng)L615小鼠白血病的存活期[6]。Shamon等[7]以載有人胸癌細(xì)胞UISO-CA-的無(wú)胸腺小鼠進(jìn)行雷公藤甲素抗癌實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)雷公藤甲素的劑量小于250 ug/kg時(shí)不能抑制癌細(xì)胞的增長(zhǎng)，但其劑量增加10倍時(shí)，在3 d內(nèi)有50%的小鼠死亡，然后降低其劑量到125 mg/kg時(shí)發(fā)現(xiàn)它有很好的抗癌活性。Tengchaisri等[8]探討了公藤甲素雷對(duì)亞洲大頰鼠類肝癌的影響，發(fā)現(xiàn)治療組的肝癌重量?jī)H僅是對(duì)照組的20%～25%，這說(shuō)明公藤甲素雷可明顯抑制肝癌生長(zhǎng)及對(duì)癌癥有治療作用，并且預(yù)測(cè)公藤甲素雷是將來(lái)通過(guò)化療治療肝癌的一種很有發(fā)展前途的天然藥物。雷公藤甲素還能夠直接誘導(dǎo)多種腫瘤細(xì)胞凋亡。雷公藤甲素可以通過(guò)刺激p53和bax蛋白表達(dá)并且增強(qiáng)caspases(半胱天冬蛋白酶)活性而誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞凋亡，雷公藤甲素能夠誘導(dǎo)人膽管癌細(xì)胞凋亡和骨髓瘤細(xì)胞的凋亡[9]雷公藤甲素還能夠誘導(dǎo)慢性骨髓性白血病細(xì)胞K562細(xì)胞凋亡，其機(jī)制可能是雷公藤甲素下調(diào)bcr-abl基因表達(dá)引起的。

1.4.2 雷公藤甲素對(duì)淋巴細(xì)胞的作用雷公藤甲素能誘導(dǎo)活化的CD4+、CD8+T細(xì)胞凋亡，雷公藤甲素經(jīng)過(guò)處理后發(fā)現(xiàn)對(duì)人外周血CD4+和CD8+T細(xì)胞凋亡率比對(duì)照組顯著增加，但其作用無(wú)特異性[10]。雷公藤甲素誘導(dǎo)T細(xì)胞凋亡的作用與細(xì)胞活化的程度密切相關(guān)，對(duì)已活化的人外周血T細(xì)胞，TP可使大量T細(xì)胞呈細(xì)胞凋亡樣變化，但未發(fā)現(xiàn)其能使處于靜止?fàn)顟B(tài)的T細(xì)胞出現(xiàn)細(xì)胞凋亡[11]。深入研究發(fā)現(xiàn)，雷公藤甲素只能造成S+G2/M期細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞凋亡，卻不能導(dǎo)致G0/G1期細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞凋亡[12]。

1.4.3 雷公藤甲素對(duì)樹(shù)突細(xì)胞的作用通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)10 ug/L的TP能夠誘導(dǎo)小鼠骨髓中樹(shù)突細(xì)胞的前體細(xì)胞凋亡；在1～100 ug/L濃度范圍能夠誘導(dǎo)骨髓源性的未成熟的樹(shù)突細(xì)胞凋亡;而對(duì)于成熟的樹(shù)突細(xì)胞10 g/L的雷公藤甲素作用24 h后同樣能夠誘導(dǎo)其凋亡，并且成熟的樹(shù)突細(xì)胞比未成熟的樹(shù)突細(xì)胞對(duì)雷公藤甲素誘導(dǎo)凋亡的效應(yīng)更為敏感。

1.4.4 雷公藤甲素對(duì)其他細(xì)胞的作用雷公藤甲素能夠在極低的濃度(0.01～1 um)誘導(dǎo)滑膜成纖維細(xì)胞凋亡，同時(shí)也發(fā)現(xiàn)雷公藤甲素能夠誘導(dǎo)Caspase-3激活[13]。雷公藤甲素也能夠通過(guò)誘導(dǎo)前單核胞(U937)凋亡；另外還發(fā)現(xiàn)不同致凋亡濃度雷公藤甲素作用U937細(xì)胞后bcl-2和Bax蛋白的表達(dá)并未改變，但是增高bcl-2的表達(dá)卻能夠抑制TP誘導(dǎo)的凋亡，說(shuō)明雷公藤甲素誘導(dǎo)前單核細(xì)胞凋亡的效應(yīng)可能與bcl-2和Bax蛋白無(wú)關(guān)[14]。還有研究發(fā)現(xiàn)雷公藤甲素可抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)其凋亡，可能與Fas的表達(dá)有關(guān)。

2 展望

總之，隨著對(duì)雷公藤甲素藥理毒理的探討研究及其機(jī)理被逐漸的認(rèn)識(shí)，以具有多種生物活性的雷公藤內(nèi)酯醇為原料，在充分保留其抗腫瘤、抗炎和免疫抑制等活性作用成分的基礎(chǔ)上合成多種適合臨床應(yīng)用的藥物，為臨床有效治療各種疾病提供了新的思路和方法。

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