張金娟 仝 鐵 張貴林 貴陽醫(yī)學(xué)院機能實驗室(貴陽 550004)

腫瘤是嚴(yán)重威脅人類健康的一類疾病。目前對腫瘤的主要治療手段是手術(shù)、放療和化療,放化療雖然在一定程度上可控制腫瘤的生長,延長部分患者的生命,但其又存在毒副作用大、降低患者生活質(zhì)量、削弱患者抗病能力和信心等弊端。故尋找降低化療藥物的用量同時又保存其有效的抗腫瘤作用便成為一種值得探討的方法。中藥抗腫瘤具有毒副作用低,不易產(chǎn)生耐藥性和能保護(hù)患者抗病能力的特點,近年來為人們所關(guān)注。我們曾報道蒲薏顆粒的抗癌作用和對化療藥物的增效作用[1、2、3],本研究旨在探討蒲薏顆粒與化療藥物聯(lián)合用藥后可能的減毒作用,為腫瘤患者多提供一種有益的用藥選擇。

1 試驗材料 蒲薏顆粒貴州渝生制藥有限公司批號:20030306;肝癌 H22瘤株華西醫(yī)科大學(xué)腫瘤研究所;5-氟尿嘧啶(5-Fu)上海旭東海普藥業(yè)有限公司,批號:030405;電子分析天平梅特勒托利多儀器(上海)有限公司;DJ系列潔凈動物飼養(yǎng)柜蘇杭實驗動物科技發(fā)展公司、蘇杭凈化設(shè)備廠;KM小鼠,雌雄兼用,體重 18～22g;貴陽醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供,動物合格證號:SCXK(黔)2002-0001。

2 試驗方法[4,5]在無菌條件下取生長 8d的小鼠移植型肝癌 H22腹水,顯微鏡下計數(shù),用生理鹽水稀釋調(diào)整瘤細(xì)胞數(shù)為 2×107/mL的細(xì)胞懸液。于小鼠右腋皮下接種細(xì)胞懸液 0.2mL/只,造成荷瘤動物模型。接種 24h后稱重,將荷瘤小鼠按體重隨機分為 6組:荷瘤對照組(生理鹽水 10mL/kg)、5-Fu高劑量組(15mg/kg)、5-Fu低劑量組(5mg/kg)、蒲薏顆粒高劑量加 5-Fu組 (18g/kg+ 5mg/kg)、蒲薏顆粒中劑量加 5-Fu組(9g/kg+ 5mg/kg)和蒲薏顆粒低劑量加 5-Fu組(4.5g/kg+5mg/kg),每組 10只 ,另再取 10只正常小鼠作為正常對照組(生理鹽水 10mL/kg)。各組動物分別按各自藥物和劑量灌胃(ig)給藥,每日 1次,連續(xù) 10d。停藥次日稱重后,摘眼球取血作外周血象檢查 ,脫頸椎處死動物,取胸腺和脾臟并稱重,按下式計算胸腺指數(shù)及脾指數(shù)。剝離小鼠右股骨,提取骨髓,計數(shù)有核細(xì)胞。試驗重復(fù) 3次(每次試驗選同一性別動物)。胸腺(脾)指數(shù)=胸腺(脾)重量(mg)/小鼠體重(g)

3 結(jié)果 3.1 一般情況及體重變化 5-Fu組小鼠在給藥后 6d起,出現(xiàn)被毛蓬松、漸失光澤,活動和飲食減少,體重增長明顯抑制,與正常對照組和荷瘤動物組比較差異顯著(P＜0.05,P＜0.01);蒲薏顆粒和 5-Fu聯(lián)合用藥 ,除個別小鼠活動減少和有飲食降低等現(xiàn)象外,其余小鼠活動情況、毛色等均正常,體重增長,與 5-Fu組比較有顯著性差異(P＜0.05),見表 1～表3。

3.2 對脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)的影響 各試驗組小鼠的脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)與正常對照組比較均明顯下降,尤以 5-Fu單純化療組降低最為明顯。聯(lián)合用藥后小鼠的脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)與 5-Fu組比較均有不同程度改善 ,差異顯著(P＜0.05,P＜0.01);與荷瘤對照組比較無顯著性差異(P＞0.05)。提示蒲薏顆粒具有對抗化療藥物所致免疫器官萎縮,使小鼠脾臟和胸腺指數(shù)升高。試驗結(jié)果見表 1～表 3。

3.3 對外周血象的影響荷瘤對照組小鼠血小板數(shù)、白細(xì)胞、血紅蛋白明顯低于正常對照組(P＜0.05),荷瘤小鼠給予高、低劑量的 5-Fu后,血小板和白細(xì)胞計數(shù)、血紅蛋白均顯著降低,與荷瘤對照組比較有顯著性差異(P＜0.05,P＜0.01);聯(lián)合用藥后 PY+5-FU高、中劑量的上述指標(biāo)有不同程度改善,與 5-Fu組比較差異顯著(P＜0.05,P＜0.01);提示蒲薏顆粒對 5-Fu所致荷瘤小鼠血小板、白細(xì)胞和血紅蛋白降低有顯著的對抗作用。試驗結(jié)果見表 4～表 6。

3.4 對骨髓有核細(xì)胞計數(shù)的影響 5-Fu高、低劑量組小鼠的骨髓有核細(xì)胞計數(shù)顯著降低,與荷瘤對照組比較有顯著性差異(P＜0.01),聯(lián)合用藥后骨髓有核細(xì)胞計數(shù)較荷瘤對照組明顯降低,但較 5-Fu組顯著升高。與荷瘤對照組比較 PY+5-FU中、低劑量組有顯著性差異(P＜0.05,P＜0.01),與 5-Fu組比較 PY+5-FU高、中劑量組有顯著性差異(P＜0.05,P＜0.01),提示蒲薏顆粒具有對抗化療藥物所致骨髓有核細(xì)胞計數(shù)降低的作用。試驗結(jié)果見表 4～表 6。

表1 對荷瘤小鼠體重及胸脾指數(shù)的影響(第一次試驗結(jié)果,♂)

表2 對荷瘤小鼠體重及胸脾指數(shù)的影響(第二次試驗結(jié)果,♂)

表3 對荷瘤小鼠體重及胸脾指數(shù)的影響(第三次試驗結(jié)果,♀)

表4 對荷瘤小鼠血象及骨髓有核細(xì)胞數(shù)的影響(第一次試驗結(jié)果)

表5 對荷瘤小鼠血象及骨髓有核細(xì)胞數(shù)的影響(第二次試驗結(jié)果)

表6 對荷瘤小鼠血象及骨髓有核細(xì)胞數(shù)的影響(第三次試驗結(jié)果)

4 小 結(jié) 蒲薏顆粒由蒲公英、薏苡仁、何首烏、靈芝、三棱等 5味藥組成,是一經(jīng)驗方,臨床應(yīng)用 50余年。本研究觀察蒲薏顆粒與 5-Fu聯(lián)合應(yīng)用對肝癌 H22荷瘤小鼠一般情況、體重、胸脾指數(shù)、外周血象及骨髓有核細(xì)胞數(shù)的影響,并與單用 5-Fu作比較,探討蒲薏顆粒對化療藥物 5-Fu的減毒作用,為蒲薏顆粒的臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。試驗結(jié)果表明:蒲薏顆粒與 5-Fu聯(lián)合應(yīng)用可改善 5-Fu引起的小鼠行為活動減少、體重下降等毒性反應(yīng) ,可對抗 5-Fu所致免疫器官萎縮 ,使小鼠脾臟和胸腺指數(shù)升高,并可對抗 5-Fu所致荷瘤小鼠血小板、白細(xì)胞、血紅蛋白及骨髓有核細(xì)胞的降低,提示蒲薏顆粒具有降低化療藥物的毒性、增強免疫功能作用。蒲薏顆粒對腫瘤細(xì)胞和有一定的細(xì)胞毒作用;對環(huán)磷酰胺和 5-氟尿嘧啶的抗腫瘤作用有明顯的協(xié)同作用,具有增效減毒、扶正祛邪作用;臨床用于腫瘤病人的輔助治療應(yīng)具有積極的臨床意義。

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