孟靜 王銳

（1山東省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗研究院，濟南250100）（2泰山醫(yī)學院化工學院，泰安271016）

·食品分析·

牛奶中一株產(chǎn)酸克雷伯菌的檢出

孟靜1*王銳2

（1山東省產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗研究院，濟南250100）（2泰山醫(yī)學院化工學院，泰安271016）

在市場銷售的乳制品中檢出一株產(chǎn)酸克雷伯菌，經(jīng)試驗該菌對青霉素有抗性。在已報道的產(chǎn)酸克雷伯菌中，大部分是在醫(yī)院的臨床病例，成品液態(tài)奶中檢出該菌尚屬首次。這一菌株的檢出給乳制品中內(nèi)酰胺酶的檢測帶來新的問題。

乳制品；產(chǎn)酸克雷伯菌；β-內(nèi)酰胺酶

AbstractKlebsiella oxytoca were detected in diary products,and are resistant to penicillin.In the reported of Klebsiella example,the majority are clinical cases in the hospital,this is the first time that the bacteria was detected in liquid milk product.This brought new problems in the detection ofenzymes in diary.

KeywordsDairyproducts；klebsiella oxytoca；betalactamase

克雷伯菌屬是革蘭氏陰性桿菌，無芽胞、有莢膜，為機會致病菌，包括很多種，如肺炎克雷伯桿菌，產(chǎn)酸克雷伯菌，植物生克雷伯菌和土生克雷伯菌。克雷伯菌為呼吸道常居菌群，在人及動物腸道中亦常見，其中產(chǎn)酸克雷伯菌已被確認為病原菌，由該菌引起腹瀉的報導甚少。目前對產(chǎn)酸克雷伯菌的研究主要集中于對抗生素的抗性研究上，我們在對市售牛奶進行檢測的過程中，分離到了1株產(chǎn)酸克雷伯菌。

1 材料和方法

1.1 材料來源

液態(tài)奶均為市場隨機購買，總計61個樣品，其中包括酸牛乳11個，巴氏滅菌乳30個，高溫滅菌乳10個，奶粉10個。

1.2 培養(yǎng)基及試劑

營養(yǎng)肉湯增菌液、腸桿菌增菌肉湯、營養(yǎng)瓊脂平板及青霉素藥敏紙片，購自北京陸橋技術(shù)有限責任公司；生化鑒定使用VITEK2C。

1.3 方法

稱取液態(tài)奶25 g至在營養(yǎng)肉湯中，振蕩混勻后36℃增菌18 h，無菌取1 mL轉(zhuǎn)接于腸桿菌增菌肉湯中36℃18 h培養(yǎng)，用接種環(huán)分離劃線于營養(yǎng)瓊脂平板，倒置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24 h。進行菌落形態(tài)和細胞形態(tài)觀察。

2 結(jié)果和討論

2.1 VITEK2C全自動致病菌鑒定儀對菌株的鑒定

將菌株在平板上純化后，經(jīng)革蘭氏染色確定為G-桿菌，確定使用GN鑒定卡。經(jīng)營養(yǎng)瓊脂37℃，24 h富集后，用一次性接種環(huán)刮取菌苔，研磨于滅菌質(zhì)量分數(shù)0.85%的生理鹽水中，使菌液的OD為0.5左右，于VITEK 2C全自動致病菌鑒定儀上鑒定，觀察56個生化反應(yīng)，儀器數(shù)據(jù)庫自動對結(jié)果進行分析，給出結(jié)果。共分離菌株21株，其中在巴氏滅菌乳中檢出一例產(chǎn)酸克雷伯菌。

可見回收率在90.4%～109.5%之間，說明方法準確度較高。

表4 回收率測定結(jié)果

3 結(jié)論

實驗表明，在上述實驗條件下，用火焰原子吸收分光光度法測定大豆豆渣中鎂的含量，所用方法簡便、快速，準確，為進一步開發(fā)利用豆渣資源提供了依據(jù)。

［1］ANNERMARIE WAGNER，JOHAN M.D.SILVESTRE，M. J.et al.Copper，iron and zinc determinations in human milk usingFAAS with microwave digestion［J］.Food Chemistry，2000，68（1）：95-99.

［2］LAURENT NOEL，MICHAEL CARL，CHRISTELLE VASTEL，et al.Determination of sodium，potassium，calcium and magnesium content in milk products by FAAS［J］. International DairyJournal，2008，18（9）：899-904.

［3］黃曉東.火焰原子吸收法測定大豆渣中鐵銅錳鋅［J］.糧油食品科技，2004，12（3）：40-41.

［4］毛紅，馬騰蛟.火焰原子吸收法測定食品中鎂分析方法的改進［J］.中國食品衛(wèi)生雜志，2001，13（1）：23-25.

［5］黃曉東，顏玉瓊.火焰原子吸收分光光度法測定大豆豆渣中鋅的含量［J］.山西食品工業(yè)，2003（3）：36-38.

The detection ofklebsiella oxytoca in the milk products

MENGJing1*WANGRui21（Shandongsupervision and inspection institute for product quality，Jinan 250100，China）
2(School ofchemistryand chemical engineering，taishan medical university，Taian 271016，China)

*孟靜，女，1979年出生，2006年畢業(yè)于山東大學，微生物專業(yè)，工程師。

2010-07-15