甘草鋅顆粒溶出度測定方法的研究

甘草鋅顆粒收載于《衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)》新藥轉(zhuǎn)正標(biāo)準(zhǔn)第九冊，為補(bǔ)鋅、抗?jié)兯?，該品種為混懸顆粒，中國藥典規(guī)定混懸顆粒應(yīng)進(jìn)行溶出度檢查，但多年來該品種執(zhí)行標(biāo)準(zhǔn)一直比較簡單，沒有溶出度檢查項目，不能有效地控制藥品的內(nèi)在質(zhì)量。為此，我們對該品種溶出度測定方法進(jìn)行了研究。

1 儀器與試藥

ZRS-8型智能溶出儀（天津市天大天發(fā)科技有限公司）；島津LC-20A高效溶相色譜儀；SPD-M20A紫外檢測器，甘草酸單銨對照品（中國藥品生物制品檢定所）；甲醇為色譜純，其余試劑均為分析純，甘草鋅顆粒（由江蘇瑞年前進(jìn)制藥有限公司生產(chǎn)）。

2 方法與結(jié)果

附圖 累積溶出百分率——時間曲線

2.1 色譜條件 色譜柱phenomenex（250×60mm 5micron）；流動相；甲醇—0.2mol/l醋酸銨溶液—冰醋酸（67：33：1）；流速0.1mol·min-1；柱溫40℃；檢測波長為250nm。理論板數(shù)按甘草酸單銨峰計算應(yīng)不低于2000。

2.2 線性關(guān)系 精密稱取甘草酸單銨對照品50mg，精密稱定，置50ml量瓶中，用流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，再分別精密吸取1.0、2.0、3.0、5.0、10.0、20.0μl，置25ml量瓶中，用流動相稀釋至刻度，搖勻。分別精密吸取各對照品溶液20μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，測定其峰面積積分值，以進(jìn)樣濃度（μg）為橫坐標(biāo)，峰面積積分值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為：y=100506.8x+24，r=0.9991，結(jié)果進(jìn)樣量在0.803～16.064μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.3 溶出度測定條件選擇 由于甘草鋅顆粒含量非常小，為保證測得的靈敏度和準(zhǔn)確度，我們根據(jù)儀器靈敏度及標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍，選用小杯法。在250ml溶煤中投入1包（每包含甘草鋅1.5g，相當(dāng)于鋅3.6mg～4.35mg，甘草酸25.2mg）進(jìn)樣量為20μl ?？紤]到甘草鋅及甘草酸的溶解，并參考國家藥品標(biāo)準(zhǔn)中甘草鋅膠囊的溶出度測定，選擇0.25%十二烷基硫酸鈉溶液為溶劑。分別選擇不同轉(zhuǎn)速30、60、75r.min-1進(jìn)行試驗(yàn)，結(jié)果表明60r.min-1溶出結(jié)果較好，故轉(zhuǎn)速確定為60r.min-1。

2.4 溶出度測定

2.4.1 溶出曲線的繪制，取已測定含量的甘草鋅顆粒1包，照2.3項條件測定溶出度，分別于10、20、30、45、60min時定點(diǎn)取樣2ml（同時立即補(bǔ)充溶劑2ml）過濾，濾液即為供試品溶液。進(jìn)樣20μl按2.2項下方法測定待供試品在各時間的累積溶出百分率（n=6）分別為41.2%、55.6%、63.8%、76.9%、77.3%。結(jié)果表明45分鐘內(nèi)溶出效果較好，見附圖。

2.4.2 加樣回收率試驗(yàn) 精密稱取甘草酸單銨對照品約10mg，加流動相溶解并稀釋成約5μg·ml-1作為儲備液，精密吸取已測含量的同一溶出液6份，每份各5.0ml，分別精密加入對照儲備液3.0、3.0、5.0、5.0、10.0、20.0ml，依法進(jìn)行回收率試驗(yàn)。6次測定結(jié)果平均回收率為99.65%，RSD為0.71% 。

2.4.3 精密度試驗(yàn) 取線性試驗(yàn)項下對照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣6次，計算峰面積積分值RSD=0.39%。

2.4.4 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取1份供試品按上述色譜條件，每隔1h進(jìn)樣1次，共考察8h，結(jié)果表明溶液在6h之內(nèi)，峰面積基本不變。

2.4.5 空白干擾實(shí)驗(yàn) 按供試品的處方配制空白輔料，照供試品相同方法處理、測定，結(jié)果表明輔料對主成分的測定無干擾。

2.4.6 溶出度測定結(jié)果 取市售甘草鋅顆粒3批，照2.4.1項下的方法操作，經(jīng)45min時，取樣過濾，作為供試品溶液。另取甘草酸單銨對照品約7mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加入流動相稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。將供試品溶液及對照品溶液分別選樣，記錄色譜圖，結(jié)果3批樣品溶出度分別為：77.3%、76.9%和77.5%。

3 討論

本品經(jīng)方法學(xué)選擇，確定為藥典附錄第三法，即小杯法。經(jīng)線性、穩(wěn)定性、回收率實(shí)驗(yàn)，確定方法可行，符合靈敏度要求，由于甘草鋅在水中的溶解性較差，故建議溶出度限度定為標(biāo)示量的65%。增加溶出度檢查可有效地控制該制劑的內(nèi)在質(zhì)量。