王 捷劉宗河

毛冬青分散片制備工藝研究

王 捷1劉宗河2

正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)選毛冬青總黃酮提取工藝和毛冬青分散片制劑工藝處方，所得分散片的分散均勻度符合《中國(guó)藥典》2010年版分散片標(biāo)準(zhǔn)，溶出度明顯優(yōu)于普通糖衣片。本文毛冬青分散片制備工藝簡(jiǎn)便易行，穩(wěn)定可靠。

毛冬青分散片；毛冬青總黃酮；正交實(shí)驗(yàn)；制備工藝

毛冬青radix ilicis pubescentis.為冬青科植物，別名毛棟子等，藥用部位為其干燥根，為我國(guó)南方省區(qū)民間常用藥?！稄V西中草藥》記載：“毛冬青根清熱解毒、消腫止痛、利小便。治刀槍打傷、肺熱喘咳、外感風(fēng)熱、防流腦”。功能涼血、活血、通脈、消炎解毒，國(guó)內(nèi)外學(xué)者重視研究。廣西醫(yī)科大學(xué)制藥廠毛冬青糖衣片（每片含總黃酮0.1g，國(guó)藥字Z45021018），心血管疾病藥，有擴(kuò)張血管及抗菌消炎作用，主治血栓閉塞性脈管炎、冠狀動(dòng)脈硬化性心臟病、血栓閉塞性脈管炎、中心性視網(wǎng)膜炎。長(zhǎng)期臨床應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)，每次4～5片，藥量較大，老幼齡、吞咽困難者難接受，且有效成分溶出慢，生物利用度低。毛冬青分散片由毛冬青單味組成，由毛冬青糖衣片改劑型而得，綜合片劑和液體制劑優(yōu)點(diǎn)，克服二者不足，適合老幼齡、吞咽困難者，崩解、溶出加快，生物利用度提高，對(duì)提高療效、擴(kuò)大臨床應(yīng)用很有意義。本文用正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)選毛冬青藥材醇提取工藝和制劑工藝處方，并考察干膏毛冬青總黃酮含量、分散均勻度和溶出度。

1 儀器和試藥

1.1 儀器

UV-2100雙光束紫外分光光度計(jì)：北京瑞利分析儀器公司；FW100高速粉碎機(jī)：青州市精誠(chéng)機(jī)械公司；JC30324A電熱箱：上海嘉程儀器廠；BP211D電子天平：Sartorius，0.01mg，德國(guó)；ZDY-8壓片機(jī)：上海遠(yuǎn)東制藥機(jī)械廠；ZB21C智能崩解儀：天津大學(xué)精密儀器廠；ZRS-8G智能溶出儀：天大天發(fā)科技公司。

1.2 試藥

蘆丁對(duì)照品：中國(guó)藥品生物制品檢定所，98.7%；毛冬青藥材：南寧藥材站，廣西醫(yī)科大學(xué)制藥廠鑒定為正品；交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮（PPVP）：上海其福青材料科技公司；低取代羥丙基纖維素（L-HPC）：湖州展望藥業(yè)公司；微晶纖維素（MCC）：湖州展望藥業(yè)公司；羧甲基淀粉鈉（CMS-Na）：武漢祥和精細(xì)化工公司；其他試劑分析純。

2 方法和結(jié)果

2.1 毛冬青分散片制法

毛冬青藥材適宜條件下提取，提取液合并，過(guò)濾，濾液回收乙醇后濃縮至稠膏，干燥成干膏（總黃酮30%），粉碎，過(guò)80目篩，備用；處方量PPVP、MCC過(guò)80目篩，混勻，與干膏粉混勻，5%淀粉漿為粘合劑，35目篩制粒，干燥，35目篩整粒，干顆粒加入處方量L-HPC、甜菊素、硬脂酸鎂混勻，壓片（調(diào)節(jié)壓力控制片硬度6～7kg）。

2.2 提取工藝優(yōu)選

單因素法考察提取方法、提取溶媒、提取次數(shù)、藥材溶媒比例、提取控制溫度、提取所用時(shí)間等因素對(duì)含量的影響，正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化提取工藝。

2.2.1 提取方法

提取黃酮類(lèi)化合物一般使用超聲震蕩法、回流法兩種，前者能耗低、省時(shí)、特別適合小規(guī)模小批量實(shí)驗(yàn)室研究等優(yōu)點(diǎn)，但大多數(shù)植物提取率低于回流法，未普及規(guī)模生產(chǎn)。回流、超聲及索氏提取三法提取，毛冬青總黃酮含量分別為1.3%、0.99%、0.43%，故用回流法。

2.2.2 提取溶媒

黃酮類(lèi)化合物易溶解在甲醇、乙醇、丙酮等極性較大的有機(jī)溶劑。以甲醇、醋酸乙酯、無(wú)水乙醇、65%乙醇、40%乙醇、純化水回流提取，毛冬青總黃酮含量分別為0.16%、0.27%、0.23%、0.96%、1.03%、0.82%，故用40%乙醇溶液作提取溶媒。

2.2.3 提取控制溫度

考察不同提取溫度對(duì)毛冬青總黃酮含量的影響，結(jié)果顯示出溫度適度升高則毛冬青總黃酮在乙醇的溶解度隨之增大，同時(shí)溫度適度升高，提取溶液稠度下降，溶質(zhì)成分?jǐn)U散系數(shù)加大，浸提速度加快，提取效率提高，但提取控制溫度過(guò)高容易促進(jìn)黃酮成分發(fā)生氧化反應(yīng)，超過(guò)70℃時(shí)毛冬青總黃酮含量反而下降，因此提取控制溫度宜選定60℃。

2.2.4 藥材溶媒比例

考察不同提取藥媒比對(duì)毛冬青總黃酮含量的影響。結(jié)果顯示出藥媒比1:20時(shí)最好，故選此比例。

2.2.5 提取所用時(shí)間

考察不同提取所用時(shí)間和毛冬青總黃酮含量的關(guān)系，結(jié)果顯示最初毛冬青總黃酮含量隨提取所用時(shí)間延長(zhǎng)而提高，60min后提高減緩，考慮聯(lián)系實(shí)際條件下生產(chǎn)應(yīng)用中生產(chǎn)過(guò)程周期縮短和生產(chǎn)投入成本降低的要求，故選擇60min。

2.2.6 提取次數(shù)

考察不同提取次數(shù)對(duì)毛冬青總黃酮含量的影響，結(jié)果顯示出提取3次后已提取出毛冬青總黃酮含量的85%～90%，故用3次。

2.2.7 正交實(shí)驗(yàn)

根據(jù)單因素考察結(jié)果，選取提取控制溫度、提取所用時(shí)間、藥媒比、提取次數(shù)為4個(gè)主要因素，L9（34）正交實(shí)驗(yàn)確定最佳提取條件。因素水平見(jiàn)表1，正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2，方差分析結(jié)果見(jiàn)表3。從表3可知，提取次數(shù)（D）對(duì)毛冬青總黃酮含量影響最大，提取溫度（A）的影響次之；再次提取時(shí)間（B）；而料液比（C）對(duì)毛冬青總黃酮提取的影響不大，最佳提取方案：A2B2C2D3。

表1 因素水平表

表2 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表3 方差分析

2.3 毛冬青總黃酮含測(cè)

2.3.1 蘆丁對(duì)照品溶液

精密稱(chēng)定無(wú)水蘆丁對(duì)照品10mg，用40%乙醇溶解和稀釋定容于50mL容量瓶，搖勻，便得濃度為0.2mg/mL的無(wú)水蘆丁對(duì)照品溶液。

2.3.2 供試品溶液

精密稱(chēng)取毛冬青50g，在不同條件下提取后，濾過(guò)，濾液濃縮至一定量，用其提取溶劑定容于50mL量瓶，搖勻，即得。

2.3.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線

精密吸取蘆丁對(duì)照品溶液0.1、0.5、1、2、3、4、5mL，分別置10mL量瓶中，加5%NaNO2溶液0.3mL，搖勻，6min后加10%Al（NO3）3溶液0.3mL，充分搖勻，6min后加4%NaOH溶液4mL，充分搖勻，靜置10min，用40%乙醇稀釋定容，同法制備其空白對(duì)照，510nm處測(cè)其吸光度，以濃度C（mg/mL）為縱坐標(biāo)（X），以吸光度A為橫坐標(biāo)（Y），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得回歸方程:A=0.5C+0.0057，r=0.9999。結(jié)果顯示:在2～100mg/mL范圍內(nèi)，濃度與吸光度間呈現(xiàn)良好線性關(guān)系。

2.3.4 加樣回收率

精密稱(chēng)取毛冬青0.25、3.5、7.5g ，分別精密加入“2.3.1”項(xiàng)蘆丁對(duì)照品溶液0.5、5、10mL，按“2.3.2”項(xiàng)制備低、中、高3組濃度提取液（n=3），測(cè)得回收率分別為100.2%、99.7%、101.2%，RSD分別為1.6%、0.8%、1.4%。

2.3.5 樣品中毛冬青總黃酮含測(cè)

精密量取樣品供試品溶液1mL，按“2.3.3”項(xiàng)測(cè)定，計(jì)算毛冬青總黃酮含量。

2.4 提取工藝驗(yàn)證

按A2B2C2D3，即在提取控制溫度60℃、40%乙醇溶液作提取溶媒、提取60min、藥媒比1:20、提取3次的最佳條件下重復(fù)性實(shí)驗(yàn)3批。檢測(cè)3批提取物，毛冬青總黃酮含量分別是1.73%、1.82%和1.75%，RSD分別為1.1%、0.9%和1.2%，即所選提取工藝穩(wěn)定可行。

2.5 處方優(yōu)化

預(yù)試驗(yàn)顯示分散片制劑中，崩解劑品種和使用量、粘合劑濃度、填充劑使用量對(duì)崩解時(shí)間影響較大[1]，故分別單因素實(shí)驗(yàn)，用正交實(shí)驗(yàn)處方優(yōu)化。

2.5.1 崩解劑

常用PVPP、L-HPC、CMS-Na等[2,3]。按崩解劑∶干膏為1∶2，填充劑MCC實(shí)驗(yàn)，記下崩解時(shí)間，見(jiàn)表4。

表4 崩解劑品種選用

結(jié)果：PVPP崩解時(shí)間最短，L-HPC次之，CMS-Na崩解時(shí)間不符合《中國(guó)藥典》2010版＜3min要求。但PVPP價(jià)格較高，崩解劑聯(lián)合應(yīng)用效果更佳[4]。內(nèi)加法從片芯內(nèi)部崩解，崩解后微粒細(xì)，生物利用度比外加法高；外加法從片微粒間開(kāi)始崩解，崩解較內(nèi)加法快，但崩解后微粒較內(nèi)加法粗，分散均勻度稍差。再考察崩解劑聯(lián)合應(yīng)用。

2.5.2 聯(lián)合應(yīng)用

按崩解劑∶干膏為1∶2，填充劑MCC實(shí)驗(yàn)，考察PVPP與L-HPC按不同比例混合的崩解時(shí)間，見(jiàn)表5。

表5 崩解劑聯(lián)合應(yīng)用

PVPP∶L-HPC的比例為1∶1時(shí)，崩解時(shí)間符合《中國(guó)藥典》2010版要求，且成本低廉。故明確聯(lián)合崩解劑PVPP∶L-HPC（1∶1）。2.5.3 正交實(shí)驗(yàn)

影響分散片崩解因素還有崩解劑不同加入方法，分外加法和內(nèi)加法。考察崩解劑不同加入方法。在預(yù)試驗(yàn)基礎(chǔ)上，L9（34）正交實(shí)驗(yàn)，考察因素:崩解劑不同加入方法、填充劑使用量、粘合劑濃度，見(jiàn)表6～8。

表6 因素水平表

表7 正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表8 方差分析

結(jié)果：崩解時(shí)間短為宜，由表6～表8，因素A影響最顯著，取A3；因素B影響較顯著，取B3；因素C影響不顯著，取C1，故最佳方案A3B3C2，即PVPP∶L-HPC比例為2∶1，填充劑50%，10%淀粉漿。

2.6 分散均勻度

按優(yōu)選出最佳提取方案A2B2C2D3和最佳制劑方案A3B3C2，即藥材用40%乙醇溶液在60℃提60min，藥媒比（1:20），提3次，提取液合并，過(guò)濾，濾液回收乙醇后濃縮至稠膏，干燥成干膏（總黃酮30%），粉碎，過(guò)80目篩，備用；處方量PPVP、50%MCC過(guò)80目篩，充分混勻，與干膏粉混勻，10%淀粉漿為粘合劑，35目篩制粒，干燥，35目篩整粒，干顆粒加入L-HPC（相當(dāng)于1/2PPVP處方量）、1.5%甜菊素、0.5%硬脂酸鎂混勻，壓片（壓力控制硬度6～7kg），制分散片3批。質(zhì)量評(píng)價(jià)主要考察所制分散片的分散均勻度。分別取兩片，置于100mL（20±1）℃純化水中，震搖，3min內(nèi)全部崩解，混懸液完全通過(guò)2號(hào)篩，符合《中國(guó)藥典》2010版分散片標(biāo)準(zhǔn)。

2.7 溶出度比較

按“2.6項(xiàng)”得分散片3批，經(jīng)溶出度實(shí)驗(yàn)，3批樣品在20min時(shí)累及溶出量均達(dá)90%以上，3批溶出數(shù)據(jù)平均值與3批普通片比較，見(jiàn)表9。

表9 溶出度實(shí)驗(yàn)結(jié)果比較（%）

從表9毛冬青分散片體外溶出釋藥優(yōu)于普通糖衣片。

3 討 論

分散片制備關(guān)鍵在崩解劑，本文對(duì)毛冬青分散片制備處方優(yōu)化，考察所得分散片的主要質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)即分散均勻度，崩解時(shí)限＜3min，全部通過(guò)2號(hào)篩。曾用95%乙醇溶液制粒，但顆粒含粉末較多，顆粒得率95.8%；后用10%淀粉漿做粘合劑，軟材成型良好，顆粒得率98.2%，粗細(xì)均勻，粉末較少，可壓性較強(qiáng)。

[1] 方曉玲,楊敏,穆尼拉等.幾種新型輔料在速釋片劑中的應(yīng)用[J].中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志,2000,31 (6) : 257.

[2] 陳燕軍,臧琛,趙小妹等.幾種常用填充劑與崩解劑在中藥分散片應(yīng)用中的性能比較[J].中國(guó)中藥雜志,2002,27 (8): 580-583.

[3] 吳培源,段韻,朱祖馳.中藥分散片的處方設(shè)計(jì)與優(yōu)選試驗(yàn)[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào),2008,5(2): 44-45.

[4] 白慧東,蔣玉鳳,曹麗蒙等.幾種分散片崩解劑的性能與應(yīng)用現(xiàn)狀[J].新疆醫(yī)學(xué),2007,37(1):162-164.

R282.710.2

B

1671-8194（2010）34-0235-03

1 廣西醫(yī)科大學(xué)制藥廠（530021）

2 廣西醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院（530021）