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      Coulter LH750全自動血細胞分析儀的性能評價

      2010-11-02 06:40:46許永志謝志雄朱小東
      實驗與檢驗醫(yī)學(xué) 2010年4期
      關(guān)鍵詞:稀釋液血細胞精密度

      許永志,謝志雄,朱小東

      (解放軍第175醫(yī)院 廈門大學(xué)附屬東南醫(yī)院檢驗科,福建 漳州 363000)

      Coulter LH750全自動血細胞分析儀的性能評價

      許永志,謝志雄,朱小東

      (解放軍第175醫(yī)院 廈門大學(xué)附屬東南醫(yī)院檢驗科,福建 漳州 363000)

      Coulter LH750;全自動血液分析儀;性能評價

      Coulter LH750是美國貝克曼庫爾特公司推出的全自動五分類血細胞分析儀,它可對血液的多種細胞組分(包括白細胞的五種組分)進行定量分析[1]。其中紅細胞和血小板采用電阻抗檢測,血紅蛋白采用HiCN法檢測,白細胞則采用VCS結(jié)合細胞化學(xué)染色技術(shù),經(jīng)專用的WBC/DIFF檢測通道(流動室)進行測定。我們以ISCH[2]和NCCLS[3-5]制定的評價方案為標準,對該儀器的全血細胞計數(shù)(complete blood count,CBC)和白細胞分類(differential count,DC)進行性能評價[6]?,F(xiàn)將結(jié)果報告如下。

      1 材料與方法

      1.1 儀器與試劑

      1.1.1 儀器 美國Beckman-Coulter公司。

      1.1.2 試劑 美國Beckman-Coulter公司原裝配套試劑,包括稀釋液、分類試劑包、溶血劑及清洗液。

      1.1.3 質(zhì)控品 美國Beckman-Coulter公司原裝配套5C質(zhì)控品。

      1.1.4 Olympus顯微鏡由日本奧林巴斯光學(xué)工業(yè)株式會社生產(chǎn)。

      1.1.5 其他手工測定血液細胞方法所用試劑,均為市售AR級試劑。

      1.2 標本采集 采自健康體檢者,部分為本院住院病人標本,靜脈血(以EDTA-K3抗凝)。所有檢測均于采樣后2h內(nèi)完成。

      1.3 方法

      1.3.1 全血細胞計數(shù) CBC、DC、PLT、Hb自動分析按照儀器操作說明書進行,在室內(nèi)質(zhì)控在控的情況下進行測定。

      1.3.2 主要性能評價試驗 按照ICSH、NCCLS和CLIA’88提供的評價標準進行,包括精密度、線性、攜帶污染率、準確度、DC與人工分類結(jié)果比較的評估。

      1.3.3 參考方法 白細胞手工分類由3位有經(jīng)驗的工作人員采用雙盲法對同一標本分類600個WBC,結(jié)果取平均值。

      1.3.4 所有結(jié)果均經(jīng)Microsoft Excel 2003軟件進行數(shù)據(jù)分析。

      2 結(jié)果

      2.1 精密度 測定結(jié)果表明:Coulter LH750全自動血液分析儀對血液各細胞組分的測定具有很高的精密度,測定所得的變異系數(shù)(CV%)均低于預(yù)期要求。詳見表1、表2。

      表1 Coulter LH750批內(nèi)精密度測定結(jié)果

      2.2 線性 取一份高值血細胞抗凝血樣本離心除去部分血漿,WBC、RBC、HGB、 和 PLT 值分別為 195.5×109/L、9.585×1012/L、297.5g/L和3299×109/L,以此樣本為100%。用稀釋液對血樣按 90%、80%、40%、20%、10%、2.50%、0%進行稀釋,然后從低到高以LH750測定各稀釋樣本,并經(jīng)計算所得與各稀釋度預(yù)期值項比較。由于血小板的濃度過高,因此對于第二低值進行再稀釋,然后測定各稀釋度的樣本,測定結(jié)果與各稀釋度的預(yù)示值作線性回歸分析。詳見表3。

      2.3 攜帶污染率 取正常人全血,約4ml,混勻后分裝兩管;取三個干凈的試管,每管中加入大約2ml的稀釋液。將五個試管按前兩管為全血,后三管為稀釋液裝入同一試管架;將試管架放入樣本裝載區(qū),儀器將自動進行檢測。測定結(jié)束后儀器將自動計算出攜帶污染率,攜帶污染率(CV%)=[(D1-D3)/(B2-D3)]×100,D1表示第一管稀釋液結(jié)果,D3表示第三管稀釋液結(jié)果,B2表示第二管全血結(jié)果,結(jié)果見表4。

      2.5 準確度 通過2010年度第一次福建省臨檢中心室間質(zhì)評回報結(jié)果,所有項目數(shù)值均在允許范圍內(nèi),且偏倚均小于我科質(zhì)量目標預(yù)期值(<1/2 CLIA’88)詳見表5。

      2.6 與手工分類結(jié)果比較 取78份住院患者的抗凝血在LH750儀器上測定,每份樣本重復(fù)測2次取均值。同時每份血推3張符合質(zhì)控要求的血片,染色后由3位有經(jīng)驗的技師在體尾交界處進行白細胞分類,分為中性粒細胞、淋巴細胞、單核細胞、嗜酸性粒細胞和嗜堿性粒細胞五部分,每張血片油鏡分類計數(shù)200個白細胞,共計800個白細胞取均值,再與LH750儀器的白細胞分類值進行比較。以LH750儀器白細胞分類值為X軸、顯微鏡白細胞分類值為Y軸,其中45例非白血病標本兩種方法的對比結(jié)果詳見表6。

      表2 Coulter LH750批間精密度測定結(jié)果

      表3 不同稀釋度預(yù)測值與實測值的相關(guān)性

      表4 各參數(shù)攜帶污染率測定值及結(jié)果

      表5 2010年度第一次福建省臨檢中心血細胞分析室間質(zhì)評結(jié)果

      結(jié)果表明 LH750對N、L、E的分類結(jié)果較好,M次之,B的分類效果則尚可。

      2.7 對幼稚細胞篩選的評估 對于33例有幼稚細胞的白血病標本,儀器均有一個和/或多個報警提示及散點圖顯示異常。對這些33份標本進行手工鏡檢幼稚細胞,并與LH750進行比較,相見表7。

      表6 LH750與顯微鏡人工分類結(jié)果比較(n=45)

      表7 LH750與手工鏡檢幼稚細胞比較

      據(jù)此得出LH750對幼稚細胞篩選的有關(guān)預(yù)示值為:檢出靈敏度93.3%;檢出特異性88.9%;陽性預(yù)示值87.5%;陰性預(yù)示值94.1%。

      3 討論

      通過對LH750全自動血細胞分析儀的性能評價發(fā)現(xiàn),該儀器對全血細胞計數(shù)線性良好,攜帶污染率非常低,CBC各參數(shù)精密度高,各參數(shù)指標均符合本科室制定的質(zhì)量目標標準。

      比較DC與顯微鏡鏡檢結(jié)果,我們發(fā)現(xiàn)其中M和B的分類結(jié)果稍有偏差,分析其原因,可能與全血細胞中這類細胞的數(shù)量少,在制片的同時于血片上分布不均從而造成手工分類的偏差;也有可能進行鏡檢分類操作者分析技術(shù)不夠完善等。同時,對幼稚細胞的篩選結(jié)果表明,LH750對異常細胞的檢出能力很強,有利于大量常規(guī)標本的過篩,而對分類提示異常的標本,仍需手工鏡檢分類。但由于本次統(tǒng)計白細胞分類計數(shù)標本數(shù)量較少,儀器白細胞分類報警的真陽性率、假陽性率等指標有待于今后增加白細胞分類的標本數(shù)量再進一步分析。

      總之,通過對Coulter LH750血細胞分析儀的性能評價,結(jié)果顯示該儀器測定速度快、檢測參數(shù)多、精密度、準確度高,與已知性能的血細胞分析儀相關(guān)性好,是一種性能優(yōu)良的全血細胞分析儀,能夠滿足臨床血液常規(guī)與大批量常規(guī)標本的檢驗需要。

      [1]Coulter LH750 Operator Manuals.Beckman-Coulter Co,Ltd,USA.

      [2]International Council for Standardization in Hematology.Guidelines for the evaluation of blood cell analyzer including those used for differential leukocyte and reticulocyte counting and cell i/larker application.Prepared by the ICSH expert panel on cytometry[J].Clin LabHemat,1994,16:157.

      [3]National Committee for Clinical Laboratory Standards.Leukocyte Differential Counting NCCLS Approved Standard H20-A2 [S].Villanova PA,1992.

      [4]National Committee for Clinical Laboratory Standards.Procedures and devices for the coUecfion of diagnostic blood spedmens by skin puncture;Approved standard fourth edition[S].NCC1S document H4 A4(ISBN 1 56238-382-5),1999.

      [5]余立江,等.NCCLS文件EP5T推薦的評價儀器精密度性能方法的應(yīng)用[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗雜志,1992(3):172-174.

      [6]叢玉隆,王淑娟.今日臨床檢驗醫(yī)學(xué)[M].北京:中國科學(xué)技術(shù)出版社,1997.

      R446.11+1

      B

      1674-1129(2010)04-0399-02

      10.3969/j.issn.1674-1129.2010.04.036

      南京軍區(qū)醫(yī)藥衛(wèi)生科研基金課題(08MA076)

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