浙江大學(xué)飼料科學(xué)研究所 占秀安

北京挑戰(zhàn)農(nóng)業(yè)科技有限公司 郄彥昭

浙江欣欣飼料股份有限公司 周金偉 顧林英

蛋白質(zhì)資源短缺已成為我國畜牧業(yè)發(fā)展的“瓶頸”。 雙低菜粕是雙低油菜榨油后的副產(chǎn)物，粗蛋白質(zhì)含量為38%～40%，氨基酸組成較為合理。而且，我國有豐富的菜粕資源，開發(fā)利用雙低菜粕作為新的飼料蛋白源，對促進(jìn)畜牧業(yè)的發(fā)展有重要意義。King等（2001）報道，在生長肥育豬（24～97 kg）飼糧中分別添加 0%、10%、20%、30%的雙低菜粕，其生長性能、胴體品質(zhì)和甲狀腺重量組間無顯著差異。張立偉和王建軍（2002）報道，當(dāng)在飼料中添加雙低菜粕比例過高時，生長肥育豬的生長性能會降低。唐鐵軍等（2006）研究表明，添加復(fù)合酶制劑可改善雙低菜粕中的抗?fàn)I養(yǎng)因子對肥育豬生長性能和飼料利用有不利影響。本研究將主要分析雙低菜粕及復(fù)合酶對肥育豬生長性能、血清免疫和抗氧化指標(biāo)、甲狀腺激素水平和鈣、磷、尿素氮等指標(biāo)的影響，探討其主要機(jī)理，旨在為養(yǎng)豬生產(chǎn)中雙低菜粕的廣泛應(yīng)用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 日糧組成 肥育豬試驗飼糧分別參照NRC（1998）豬的營養(yǎng)需要配制成顆粒飼料。試驗日糧組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 試驗飼糧組成及營養(yǎng)水平

1.2 試驗設(shè)計與飼養(yǎng)管理 選擇健康杜×長×大三元雜交肥育豬各36頭，按飼養(yǎng)試驗要求各分為3組，每組3個重復(fù)，每重復(fù)4頭，公母各半。對照組飼喂玉米-豆粕型日糧；試驗1組（雙低菜粕組）在對照組日糧的基礎(chǔ)上，用13%雙低菜粕替代部分豆粕；試驗2組（雙低菜粕+酶組）在試驗1組日糧的基礎(chǔ)上添加0.03%專用酶制劑（纖維素酶10000 IU/g；木聚糖酶6000 IU/g；甘露聚糖酶5000 IU/g；蛋白酶 12000 IU/g）。 預(yù)試期各 7 d，正試期51 d。常規(guī)飼養(yǎng)管理，自由采食和飲水。

1.3 血清采集與保存 試驗結(jié)束后，用10 mL人用促凝管于肥育豬耳靜脈采血10 mL，離心，析出血清后吸取血清，分裝于1.5 mL的eppendorf管中，于-70℃低溫冰箱中保存待測。

1.4 血清指標(biāo)測定

1.4.1 甲狀腺激素 甲狀腺激素 T3、T4、FT3、FT4水平測定按南京建成生物工程研究所提供試劑盒說明書操作，檢測儀器為i2000型全自動化學(xué)發(fā)光儀（美國雅培公司）。

1.4.2 免疫球蛋白和補(bǔ)體含量 免疫球蛋白G、A、M和補(bǔ)體C3、C4含量用全自動生化分析儀按上海復(fù)星長征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司提供的試劑盒測定。

1.4.3 抗氧化指標(biāo) 總抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）活力及丙二醛（MDA）的濃度試劑配制和操作步驟均按照南京生物工程研究所提供的試劑盒說明書進(jìn)行操作。

1.4.4 常規(guī)生化指標(biāo) 鈣（Ca）、磷（P）、血清尿素氮（BUN）的含量均按照南京建成生物工程研究所提供的試劑盒進(jìn)行測定，試劑配制和操作步驟按說明書進(jìn)行。

1.5 數(shù)據(jù)處理 試驗數(shù)據(jù)用Excel進(jìn)行計算處理，采用SPSS 10.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計分析。結(jié)果用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（X±SD）表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 對肥育豬生長性能的影響 表2表明，不同處理日糧對肥育豬的生長性能和飼料利用無顯著影響（P＞0.05）。相對而言，雙低菜粕組較玉米-豆粕組具有降低肥育豬日增重而提高飼料轉(zhuǎn)化率的趨勢，但在添加復(fù)合酶制劑后均產(chǎn)生了一定程度的改善作用（P＞0.05）。

表2 不同處理日糧對肥育豬生長性能和飼料利用的影響

2.2 對肥育豬血清甲狀腺激素的影響 由表3可見，與玉米-豆粕組比，雙低菜粕組肥育豬血清甲狀腺激素水平無顯著差異，但FT4/FT3和TT4/TT3呈升高趨勢（P＞0.05）；雙低菜粕+復(fù)合酶組呈現(xiàn)相同趨勢（P＞0.05）。與雙低菜粕組比，雙低菜粕+復(fù)合酶組 TT3、TT4、FT4升高，TT4/TT3下降，但均無顯著差異（P＞0.05）。

表3 不同處理日糧對肥育豬血清甲狀腺激素水平的影響

2.3 對肥育豬免疫指標(biāo)的影響 表4表明，雙低菜粕組與玉米-豆粕組相比，血清IgA、IgG、IgM、補(bǔ)體 C3和 C4含量分別降低了 15.87%（P＜0.01）、12.40%（P ＜ 0.01）、10.34%（P ＜ 0.05）、20.55%（P ＜0.01）和 17.78%（P ＜0.01）。 但與雙低菜粕組比，添加酶制劑組使肥育豬血清IgA、IgG、IgM、補(bǔ)體C3和C4含量分別提高了37.74%（P ＜ 0.01）、27.43%（P ＜ 0.01）、28.85%（P ＜0.01）、41.38%（P ＜ 0.01）和 32.43%（P ＜ 0.01）。

表4 不同處理日糧對肥育豬血清免疫指標(biāo)的影響

2.4 對肥育豬抗氧化指標(biāo)的影響 表5表明，不同處理日糧對肥育豬血清抗氧化指標(biāo)無顯著影響（P＞0.05），但與玉米-豆粕組相比，雙低菜粕組具有降低血清T-AOC水平、SOD和GSH-Px活力，升高M(jìn)DA含量的趨勢（P＞0.05）；添加酶制劑后，呈現(xiàn)了一定程度的改善效果（P＞0.05）。

表5 不同處理日糧對肥育豬血清抗氧化指標(biāo)的影響

2.5 對肥育豬血清常規(guī)生化指標(biāo)的影響 表6表明，不同處理日糧對生長肥育豬血清Ca、P、BUN含量均無顯著影響。但與玉米-豆粕組相比，雙低菜粕組使生長肥育豬血清Ca、P含量有所下降（P＞0.05），添加酶制劑后有提高血清Ca、P含量，降低BUN含量的趨勢（P＞0.05）。

表6 不同處理日糧對肥育豬血清常規(guī)生化指標(biāo)的影響

3 討論

3.1 不同處理日糧對肥育豬生長性能的影響雖然雙低菜粕中芥酸和硫甙含量降低了，但其中粗纖維、植酸、硫甙等抗?fàn)I養(yǎng)因子依然存在，這就影響了雙低菜粕飼糧的適口性，降低了肥育豬采食量，肥育豬增重減少，從而降低其生長性能。隨著豬體重的增加，其對雙低菜粕的適應(yīng)性增強(qiáng)，耐受力提高，添加比例也隨之提高。彭健等（1999）報道，雙低菜粕在生長育肥豬前、后期等氮替代50%豆粕，保證賴氨酸水平時，可獲得與豆粕相似的生長效果，而且還可獲得較好的經(jīng)濟(jì)效益；用可消化氨基酸配合日糧時，不僅可準(zhǔn)確地估測豬對日糧中氨基酸的需要量，還可進(jìn)一步提高雙低菜粕的利用價值。本試驗結(jié)果表明，日糧中添加13%的雙低菜粕，肥育豬生長性能未受到顯著影響，說明此替代比例可行。

雙低菜粕相對普通菜粕，雖然芥酸、硫甙含量明顯降低了，但仍然含有大量的非淀粉多糖（NSP）和植酸等抗?fàn)I養(yǎng)因子。NSP降低了雙低菜粕的有效能（Bell和 Keith，1993）。 大量研究證實，在雙低菜粕日糧中添加以NSP酶為主的酶制劑是改善動物生產(chǎn)性能的有效途徑之一（唐鐵軍等，2006；Bedford等，1995）。植酸酶在日糧中的作用效果已得到廣泛認(rèn)同。此外，唐鐵軍等（2006）證實，木聚糖酶對飼喂含雙低菜粕日糧的動物生長性能也可以起到積極作用。本試驗在適當(dāng)比例雙低菜粕日糧中，添加了纖維素酶、木聚糖酶、甘露聚糖酶、植酸酶等組成的復(fù)合酶制劑，肥育豬的增重和飼料利用有改善趨勢。

3.2 不同處理日糧對肥育豬甲狀腺功能的影響甲狀腺是體內(nèi)最重要的內(nèi)分泌腺之一，主要為T3和T4。甲狀腺激素調(diào)控許多基因的表達(dá)、影響酶或蛋白質(zhì)的合成，從而影響動物機(jī)體許多重要的生理生化代謝過程?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)100多種酶系統(tǒng)受甲狀腺激素的影響，其對機(jī)體的作用廣泛而強(qiáng)烈，影響到機(jī)體組織分化、能量和物質(zhì)代謝，并涉及多種系統(tǒng)和器官的功能。雙低菜粕中的抗?fàn)I養(yǎng)因子唑烷硫酮（OZT）具有很強(qiáng)的抗甲狀腺作用，通常被人們看為經(jīng)典的致甲狀腺腫因子（Goitrin）。它具有類似硫脲的抗甲狀腺作用，能抑制甲狀腺過氧化物酶（TPO）活性從而影響甲狀腺內(nèi)碘的有機(jī)化過程及碘化酪氨酸的偶聯(lián)過程，阻礙甲狀腺素T4的合成，引起腺垂體促甲狀腺素TSH分泌增加，導(dǎo)致甲狀腺腫大；抑制活性碘原子的形成或使活性碘原子還原，阻礙T3和T4的生物合成，這種作用不能通過補(bǔ)碘來加以拮抗。

豬飼喂菜粕含量高的日糧時，若每日每頭攝入的硫甙超過300 mg，就會出現(xiàn)甲狀腺腫大（金邦荃和朱清於，1994）。包承玉和徐福南（1995）研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)菜粕中的唑烷硫酮、異硫氰酸鹽含量大于2500 mg/kg時，會明顯導(dǎo)致甲狀腺上皮細(xì)胞增生，腺泡擴(kuò)張，被膜出血或充血，傷害肝、腎細(xì)胞，使細(xì)胞產(chǎn)生變性，組織出現(xiàn)淤血等癥狀。本次試驗在肥育豬日糧中以13%的雙低菜粕代替部分豆粕，結(jié)果顯示，此比例雙低菜粕中的抗?fàn)I養(yǎng)因子對甲狀腺激素的分泌有一定影響，但不顯著。

3.3 不同處理日糧對肥育豬免疫功能的影響

可消化蛋白是雙低菜粕有效能的來源。高纖維含量、植酸、OZT和異硫氰酯（ITC）等抗?fàn)I養(yǎng)物質(zhì)的存在，降低了蛋白質(zhì)和氨基酸有效性，從而降低了有效能值，影響了畜禽的蛋白質(zhì)和能量營養(yǎng)狀況。蛋白質(zhì)和能量營養(yǎng)狀況與動物機(jī)體的免疫功能密切相關(guān)。蛋白質(zhì)和能量營養(yǎng)不良，將造成免疫功能下降。此外，日糧纖維含量高導(dǎo)致后腸中已消化而未被吸收的養(yǎng)分增多，可能為入侵的病原菌提供營養(yǎng)，從而導(dǎo)致腹瀉的發(fā)生。關(guān)于日糧中添加復(fù)合酶制劑對免疫功能影響的研究報道還不多。

本研究中，雙低菜粕使肥育豬血清免疫球蛋白含量，補(bǔ)體水平下降，但是添加酶制劑后，血清免疫球蛋白含量及補(bǔ)體水平有顯著的改善效果。作用機(jī)制可能是添加復(fù)合酶制劑，降低了雙低菜粕中NSP及植酸等抗?fàn)I養(yǎng)因子對蛋白質(zhì)及氨基酸利用效率的抑制作用，提高了飼糧的有效能值。即通過改善豬飼糧蛋白質(zhì)和能量的營養(yǎng)狀況，提高了其免疫球蛋白含量及補(bǔ)體水平，改善了肥育豬的免疫功能。

3.4 不同處理日糧對肥育豬抗氧化功能的影響雙低菜粕中的抗?fàn)I養(yǎng)因子可引起甲狀腺等器官輕微毒害作用；造成消化道黏膜損傷，引起腹瀉，損害腎臟、肝臟，導(dǎo)致機(jī)體紊亂、生長受阻等?？寡趸笜?biāo)可反映機(jī)體的防御能力。總抗氧化能力（TAOC）是用于衡量機(jī)體抗氧化系統(tǒng)功能的綜合指標(biāo)。谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）和超氧化物歧化酶（SOD）是體內(nèi)的抗氧化酶，發(fā)揮清除體內(nèi)自由基和脂質(zhì)過氧化物的作用，丙二醛（MDA）含量可反映機(jī)體脂質(zhì)過氧化的程度。本研究表明，13%雙低菜粕對肥育豬血清抗氧化指標(biāo)均未造成顯著的影響，即此比例雙低菜粕中的抗?fàn)I養(yǎng)因子及毒性成分對肥育豬抗氧化及機(jī)體防御能力雖有降低趨勢，但未造成顯著的不良影響。

3.5 不同處理日糧對肥育豬血清鈣、磷、尿素氮含量的影響 磷是動物機(jī)體必需的常量礦物質(zhì)元素之一，對動物骨骼系統(tǒng)的發(fā)育及維持有著非常重要的作用。菜粕中總磷含量雖然很高，但植酸磷占總磷的比例也大，因而其磷利用率也有限。植酸酶可以將植酸磷（六磷酸肌醇）降解為肌醇和無機(jī)磷，使其中有機(jī)磷及鈣離子釋放出來，從而提高畜禽對飼糧中鈣、磷的利用率。因而在植酸磷含量高的餅粕類飼料中添加植酸酶，可使植酸磷的釋放程度顯著提高，改善磷的利用率。研究報道，日糧中添加植酸酶可以提高磷的吸收（Jongboled等，1992），并使糞中磷的排泄量減少50%左右（Lei等，1993；Cromwell，1993）。 植酸酶不僅能提高磷的利用率，還能提高鈣的利用率。Schoner等（1994）以肉雞為研究對象，向肉仔雞添加植酸酶以后，鈣的存留率得到改善，以體增重和趾骨灰分為評價指標(biāo)，得出500 U/kg的植酸酶相當(dāng)于0.46 g鈣。本研究結(jié)果表明，13%的雙低菜粕對肥育豬血清Ca、P未造成明顯影響。添加酶制劑后，肥育豬血清Ca、P含量上升，說明通過植酸酶處理后菜粕的總磷表觀消化率獲得改善，提高了Ca、P消化率。

BUN是體內(nèi)氨的主要代謝產(chǎn)物，其濃度可以較準(zhǔn)確地反映動物體內(nèi)蛋白質(zhì)和氮基酸之間的平衡狀況。氨基酸平衡良好時，BUN濃度降低（管武太和李德發(fā)，1994），氮在體內(nèi)沉積增加，飼料中蛋白質(zhì)利用率提高（Heitzman 和 Chen，1977，1974）。另外，BUN主要通過血流經(jīng)腎小球濾過后隨尿液排出體外，BUN升高可說明腎功能可能出現(xiàn)異常。本試驗結(jié)果表明，13%的雙低菜粕對肥育豬血清BUN含量未造成明顯影響。添加酶制劑后，與雙低菜粕組相比，肥育豬血清BUN含量有下降趨勢，說明加酶可改善機(jī)體蛋白和氨基酸的平衡及促進(jìn)體蛋白的合成，對肥育豬的腎臟功能有一定的程度的改善作用。

4 結(jié)論

在肥育豬飼糧中使用13%雙低菜粕，替以配方中11%豆粕，不影響豬的甲狀腺激素分泌及機(jī)體抗氧化功能，獲得了基本一致的生長性能和飼料利用效果。添加專用酶制劑具有一定的正面作用，并顯著改善了13%雙低菜粕對肥育豬免疫功能的不利影響。

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