鄭之琬,肖 榕,吳柏青,宋 卿,李全雷,姚銀竹,鄭小波
(1.西南大學(xué)榮昌校區(qū)動(dòng)物醫(yī)學(xué)系,重慶 榮昌 402460;2.西南大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院,重慶 北碚 400716)
根據(jù)世界各地獸醫(yī)的觀察,超重寵物數(shù)量越來(lái)越多,肥胖也越來(lái)越困擾著寵物業(yè)的發(fā)展。大約50%[1]的寵物犬被認(rèn)為超重或肥胖。人醫(yī)上,最常見(jiàn)的減肥手術(shù)是胃減容術(shù)[2]。其中畢羅(Billroth)氏手術(shù)最為有效。人的胃是豎直懸掛在膈肌下方,對(duì)于犬來(lái)說(shuō),它們不能直立行走,所以犬的胃在腹腔內(nèi)的懸掛方式與人不同。如果采用人醫(yī)上的減容手術(shù),對(duì)肥胖動(dòng)物的減肥是不適當(dāng)?shù)模瑫r(shí)也可能傷害到其他組織器官。所以本試驗(yàn)根據(jù)犬的生理解剖特點(diǎn),對(duì)傳統(tǒng)畢羅(Billroth)氏手術(shù)方法進(jìn)行改造,并比較兩種手術(shù)方式對(duì)犬胃腸炎發(fā)病率、胃排空時(shí)間、肥胖相關(guān)因子以及體重的變化情況,來(lái)確定改良手術(shù)是否適用于犬的手術(shù)減肥。
1.1 試驗(yàn)材料 選擇6~7月齡的重慶地方雜交犬20只,雌雄不拘,健康無(wú)病,體重3~4kg。犬腫瘤壞死因子測(cè)定試劑盒、犬瘦素試劑盒(上海史瑞可生物技術(shù)有限公司)。
1.2 犬胃部分切除和對(duì)照模型的建立
1.2.1 改良胃部分切除模型 在劍狀軟骨后方與臍部間腹中線切開(kāi)皮膚,分離皮下組織,暴露腹白線。切開(kāi)腹白線和腹膜,打開(kāi)腹腔。牽引出胃,在胃體上確定全胃中1/3的切除部位,結(jié)扎切除部位內(nèi)網(wǎng)膜上的所有血管以及胃網(wǎng)膜右動(dòng)脈、靜脈。結(jié)扎方法:采用雙線結(jié)扎法,在同一根血管的兩端用不可吸收縫線做貫穿結(jié)扎,在胃小彎處,結(jié)扎肝動(dòng)脈的部分分支。結(jié)扎完血管,用浸有溫生理鹽水的紗布對(duì)胃體進(jìn)行圍創(chuàng)。然后剪斷與胃體連接的大網(wǎng)膜及血管。在所確定的切除部位兩端夾持腸鉗,防止胃酸以及腸內(nèi)容物的流出。沿腸鉗方向在切除部位內(nèi)做一個(gè)環(huán)形切除。用溫生理鹽水沖洗切口,對(duì)兩部分殘胃進(jìn)行吻合。吻合時(shí)先采用胃全層連續(xù)縫合,再進(jìn)行內(nèi)翻縫合。吻合完畢,將胃整復(fù)回腹腔。最后縫合腹膜、肌肉以及皮膚。
1.2.2 畢I氏胃切開(kāi)模型[3]。
1.3 試驗(yàn)項(xiàng)目
1.3.1 不同時(shí)相點(diǎn)觀察犬胃排空 在術(shù)前1d,術(shù)后8、10、15、30d對(duì)犬灌服鋇餐20mL,X線機(jī)觀察,發(fā)現(xiàn)鋇餐開(kāi)始進(jìn)入腸道時(shí),進(jìn)行X線片跟蹤拍攝,發(fā)現(xiàn)鋇餐全部離開(kāi)胃時(shí)再次進(jìn)行X線片拍攝,得出犬胃排空時(shí)間。
1.3.2 手術(shù)前后血清瘦素(Leptin)和腫瘤壞死因子(TNF-α)含量的測(cè)定 在術(shù)前1d,術(shù)后1、3、5、8、10、15、30d對(duì)犬抽血,分離血清,檢測(cè)血清Leptin和TNF-α含量。具體方法見(jiàn)試劑盒。
1.3.3 犬胃腸炎判斷 犬胃腸炎術(shù)后出現(xiàn)嘔吐,嘔吐物成黃綠色,常呈蹭坐姿式并發(fā)腹瀉。術(shù)前1d,術(shù)后1、3、5、8、10、15、30d稱(chēng)量體重。
1.4 數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)方法 采用AdobePhotoshop 7.0.1和Excel軟件對(duì)所有數(shù)據(jù)和圖象進(jìn)行處理和統(tǒng)計(jì)分析,各時(shí)間點(diǎn)間采用配對(duì)資料t檢驗(yàn)。
2.1 手術(shù)方法對(duì)比 傳統(tǒng)胃畢羅(Billroth)氏手術(shù)方法的切除部位位于胃下段1/3到幽門(mén)口的部位,通常情況下將胃的幽門(mén)口一起切除,再將殘胃和十二指腸進(jìn)行吻合(圖1A)[4],而改良的胃部分切除方法在傳統(tǒng)胃畢羅(Billroth)氏手術(shù)方法的基礎(chǔ)上將切除部位上移到胃中段(圖1B,原創(chuàng))。
圖1 兩種手術(shù)方法的對(duì)比
2.2 犬胃腸炎發(fā)生情況 改良胃部分切除術(shù)組(試驗(yàn)組)在術(shù)后恢復(fù)期3條犬出現(xiàn)了胃腸炎癥狀,而畢羅Ⅰ氏手術(shù)組(對(duì)照組),術(shù)后6條犬出現(xiàn)了同樣癥狀,表現(xiàn)為嘔吐、水樣腹瀉、嚴(yán)重脫水等癥狀(圖2)。
2.3 犬胃排空時(shí)間變化 通過(guò)犬胃消化道鋇餐造影可知(圖3),畢羅Ⅰ氏手術(shù)后犬胃排空時(shí)間在2.5~3h之間,而改良胃部分切除術(shù)后犬胃排空時(shí)間縮短到2h以?xún)?nèi),試驗(yàn)組排空時(shí)間比對(duì)照組快(表1),差異顯著(P<0.05)。
圖2 犬術(shù)后胃腸炎發(fā)病情況
表1 胃排空時(shí)間變化
2.4 犬血清瘦素水平變化情況 試驗(yàn)組和對(duì)照組術(shù)后1~15dLeptin水平與術(shù)前相比,呈現(xiàn)一個(gè)下降的趨勢(shì),而后開(kāi)始回升(圖4)。組間比較,兩組犬血清Leptin水平在各時(shí)間點(diǎn)差異不顯著(P>0.05)。
2.5 犬腫瘤壞死因子-α(Canine TNF-α)水平變化情況 試驗(yàn)組和對(duì)照組術(shù)后第3天TNF-α含量有最大上升峰,以后逐漸恢復(fù)到術(shù)前水平。組間比較差異不顯著(P>0.05)。
2.6 術(shù)后犬體重變化 試驗(yàn)組和對(duì)照組犬術(shù)后體重呈下降趨勢(shì),30d后仍未恢復(fù)到術(shù)前水平(圖6),組間比較差異不顯著(P>0.05)。
3.1 兩種胃手術(shù)方法比較 減肥手術(shù)起源于20世紀(jì)50年代,其中最經(jīng)典的手術(shù)是胃畢羅(Billroth)氏手術(shù)方法。但該手術(shù)方法在術(shù)后有嚴(yán)重的后遺癥,由于幽門(mén)口被破壞,幽門(mén)口正常的收縮功能也被破壞,導(dǎo)致過(guò)量膽汁直接進(jìn)入胃體,出現(xiàn)了膽汁反流,而膽汁反流最終會(huì)影響胃吻合口的愈合,并發(fā)胃腸炎[5]。手術(shù)損傷迷走神經(jīng),影響了胃腸道正常的運(yùn)動(dòng)功能,導(dǎo)致胃癱[6]。改良犬胃部分切除法是在胃體上作環(huán)形切除,這樣可以較好的對(duì)殘胃進(jìn)行吻合,從生理結(jié)構(gòu)上來(lái)看,改良手術(shù)切除的部位,有一定分泌胃酸的功能,同時(shí)該手術(shù)不傷及胃幽門(mén)口以及迷走神經(jīng),所以膽汁反流輕微。結(jié)果術(shù)后對(duì)照組出現(xiàn)6例胃腸炎病例,而試驗(yàn)組僅出現(xiàn)3例胃腸炎病例。
圖3 犬胃鋇餐造影記錄
圖4 犬血清瘦素變化情況
圖5 犬血清TNF-α值變化情況
圖6 手術(shù)前后犬體重變化
3.2 兩種手術(shù)方式對(duì)犬排空機(jī)能的影響 犬胃正常的排空時(shí)間為3~5h,主要由兩個(gè)部分共同作用完成。首先,近段胃(胃底和近端胃體)作為一整體呈持續(xù)的緊張性收縮,具有接納食物和調(diào)節(jié)胃內(nèi)壓的作用;遠(yuǎn)段胃(遠(yuǎn)端胃體、胃竇和幽門(mén))胃蠕動(dòng)收縮,有推進(jìn)、攪拌和碾磨食物的功能[7]。液體排空主要受胃、十二指腸腔內(nèi)壓力差控制,其中胃內(nèi)壓起主要作用[8]。Strunz等[9]報(bào)道,當(dāng)胃近段功能正常的情況下,液體在胃內(nèi)的排空速度隨胃內(nèi)壓增高而加快。Wilbur等[10]報(bào)道,狗胃底切除后的胃內(nèi)壓隨胃容量增大不斷上升,同時(shí)液體排空加快。固相食物的排空主要受遠(yuǎn)段胃控制[11]。試驗(yàn)結(jié)果表明,對(duì)照組犬術(shù)后胃排空時(shí)間縮短,該結(jié)論與Bühner等研究結(jié)果相一致[12]。試驗(yàn)組胃排空時(shí)間比對(duì)照組排空時(shí)間更短是胃內(nèi)壓上升所致,也可能是試驗(yàn)組切除胃的中部,近端胃的緊張性收縮將食物直接從胃近端壓到幽門(mén)的結(jié)果。
3.3 術(shù)后血清瘦素、腫瘤壞死因子以及體重的變化情況 瘦素(Leptin)是1994年鑒定的由肥胖基因(ob基因)編碼的產(chǎn)物,其功能主要是抑制食欲和調(diào)節(jié)機(jī)體能量代謝[13]。瘦素是白色脂肪組織分泌的一種多肽激素,Denis等[14]發(fā)現(xiàn)空腹血瘦素水平與脂肪百分含量有很強(qiáng)的相關(guān)性。試驗(yàn)組和對(duì)照組術(shù)后1~15dLeptin水平與術(shù)前相比,呈現(xiàn)一個(gè)下降的趨勢(shì),而后開(kāi)始回升,30d后仍未達(dá)到術(shù)前水平,說(shuō)明犬在手術(shù)康復(fù)之后,體脂并沒(méi)有得到恢復(fù),可能是手術(shù)本身限制了營(yíng)養(yǎng)的吸收,影響了脂肪的形成,從而減少了瘦素的分泌。組間Leptin水平變化不大,提示兩種手術(shù)本身對(duì)體脂的影響沒(méi)有差異。
腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factorα,TNF-α)是一個(gè)肥胖相關(guān)蛋白,對(duì)脂肪代謝具有重要調(diào)節(jié)作用。它通過(guò)抑制進(jìn)食、增加機(jī)體產(chǎn)熱量;促進(jìn)脂肪分解、抑制脂肪合成[15]。Kern等[16]發(fā)現(xiàn)脂肪細(xì)胞TNF-α隨體重下降而減少。試驗(yàn)組和對(duì)照組術(shù)后第3天TNF-α含量有最大上升峰,以后逐漸下降,30d仍未恢復(fù)到術(shù)前水平。表明TNF-α作為一種炎性因子在術(shù)后升高是一種正?,F(xiàn)象。手術(shù)康復(fù)之后,該因子含量有一個(gè)下降趨勢(shì),30d仍未恢復(fù)到術(shù)前水平,提示手術(shù)對(duì)機(jī)體脂肪增加有抑制作用。
體重是反應(yīng)犬科動(dòng)物肥胖與否最直觀的標(biāo)準(zhǔn)。本試驗(yàn)中,選用4~5月齡的幼犬,正處在生長(zhǎng)發(fā)育期,體重應(yīng)該明顯上升,但術(shù)后30d仍未恢復(fù)到術(shù)前水平。提示本手術(shù)通過(guò)加快胃內(nèi)容物的排空等因素間接影響了動(dòng)物對(duì)食物的消化和吸收,從而抑制了犬的體重增加。
兩種手術(shù)方法在體重改變以及肥胖細(xì)胞因子的水平改變方面差異不顯著,但是改良的手術(shù)方法相比傳統(tǒng)的畢羅Ⅰ氏胃部分切除法,對(duì)機(jī)體的傷害更小,適合犬等小動(dòng)物的手術(shù)減肥。
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