康貴民

（泉州市皮膚病防治院檢驗科，福建 泉州 362000）

三種不同方法在分析尿液紅細(xì)胞的比較應(yīng)用

康貴民

（泉州市皮膚病防治院檢驗科，福建 泉州 362000）

目的探討不同方法檢測尿液中紅細(xì)胞的準(zhǔn)確性。方法留取1000份門診患者的隨機(jī)尿進(jìn)行分析，應(yīng)用干化學(xué)法和尿沉渣分析儀結(jié)合顯微鏡檢查。結(jié)果顯微鏡檢查陽性率為30.8%，陰性率為69.2%；尿沉渣分析儀檢測RBC的陽性率為34.4%，陰性率為65.6%，假陽性率為8.13%，兩種方法的陽性符合率為94.8%，陰性相符率為92.5%。干化學(xué)法檢查陽性率為32.4%，陰性率為67.6%，假陽性率為3.47%，兩種方法的陽性符合率為97.4%，陰性相符率為96.5%。結(jié)論尿流式沉渣分析儀與干化學(xué)方法對檢測RBC的敏感度和特異度均較高，但在工作中如果出現(xiàn)尿沉渣分析儀與尿干化學(xué)分析儀檢測結(jié)果不相符時，作為實驗人員，應(yīng)該能找出問題存在的原因，并經(jīng)過顯微鏡檢查分析判斷出假陰性和假陽性。

尿沉渣分析；尿液干化學(xué)法；鏡檢法；紅細(xì)胞；尿液檢測

目前應(yīng)用于臨床尿液分析的尿干化學(xué)法、尿流式沉渣分析法及尿顯微鏡鏡檢法均有利弊：尿干化學(xué)分析法盡管快速、簡便，但由于其方法學(xué)上的局限，假陽性及假陰性率均較高。尿沉渣分析儀具有快速、高效、重復(fù)性好等特點，能較為準(zhǔn)確提供有形成分的定量數(shù)據(jù)，并可提供尿紅細(xì)胞的形態(tài)特征，鑒別血尿的來源，但由于尿液中有形成分的大小、內(nèi)容物等并非始終均勻一致，各種病理情況、滲透壓改變等均可導(dǎo)致有形成分產(chǎn)生變化，從而導(dǎo)致各信號參數(shù)產(chǎn)生變化或重疊，因此尿流式沉渣分析儀在臨床可作為技術(shù)一致可比性強(qiáng)的篩選方法加以應(yīng)用。尿沉渣鏡檢是尿有形成分檢查的主要確診方法，但操作技術(shù)要求高、費時,受工作人員主觀差異影響較大,重復(fù)性差，可用作尿有形成分確證及形態(tài)學(xué)描述。為此，我們通過以上三種方法，檢測尿液中的紅細(xì)胞，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 標(biāo)本采集 收集2011年5～9月份門診就診的患者留取的隨機(jī)尿1000份，用一次性塑料試管準(zhǔn)確收集10ml新鮮尿液。

1.2 儀器與試劑 URIT-500B尿干化學(xué)分析儀及配套試紙條，UF-500全自動尿沉渣分析儀及配套試劑，日本奧林巴斯光學(xué)顯微鏡。

1.3 方法 每日上機(jī)前均用質(zhì)控品進(jìn)行監(jiān)控，UF-500尿流式沉渣分析，干化學(xué)分析儀，均嚴(yán)格按照說明書操作。

尿沉渣顯微鏡鏡檢，離心尿沉渣涂片試驗：取新鮮尿液10ml于刻度離心管中，采用水平式離心機(jī)，有效離心速率1500轉(zhuǎn)/分鐘，相對離心力400，離心5min，棄去上清液留沉淀0.2ml。為與尿液分析儀取得一致條件，尿鏡檢亦采用混勻尿，輕搖離心管，使尿沉渣有形成分充分混勻，吸取20μl滴于玻片，涂成約18mm×18mm面積鏡檢，先低倍（10×10）、后高倍（10×40）觀察，詳細(xì)記錄。

1.4 判斷標(biāo)準(zhǔn) UF-500結(jié)果部分參考值范圍參照叢玉隆等[1]研究設(shè)置，紅細(xì)胞：男0～12個／L、女0～24個／L；白細(xì)胞：男0～12個／L、女0～26個／L。顯微鏡法：紅細(xì)胞：0～3個／HP為陰性，白細(xì)胞：0～5個／HP為陰性。超出以上范圍視為陽性。

1.5 統(tǒng)計學(xué)處理 采用配對χ2檢驗。

2 結(jié)果

2.1 顯微鏡檢查與UF-500尿液流式沉渣分析法的對比 顯微鏡檢查陽性率為30.8%，陰性率為69.2%；UF-500尿液流式沉渣分析儀檢測紅細(xì)胞的陽性率為34.4%，陰性率為65.6%，假陽性率為8.13%，兩種方法的陽性符合率為94.8%，陰性相符率為92.5%。資料用配對χ2檢驗進(jìn)行分析顯示，UF-500與顯微鏡檢測紅細(xì)胞結(jié)果的差異有統(tǒng)計學(xué)意義（陽性率對比，χ2=3.06，P＜0.05；陰性率對比，χ2=3.11，P＜0.05）。

2.2 顯微鏡檢查與干化學(xué)法的對比 顯微鏡檢測紅細(xì)胞的陽性率為30.8%，陰性率為69.2%；干化學(xué)法檢查陽性率為32.4%，陰性率為67.6%，假陽性率為3.47%。兩種方法的陽性符合率為97.4%，陰性相符率為96.5%。資料用配對χ2檢驗進(jìn)行分析顯示，干化學(xué)檢測與顯微鏡檢測紅細(xì)胞結(jié)果的差異有統(tǒng)計學(xué)意義（陽性率對比，χ2=2.37，P＜0.05；陰性率對比，χ2=2.18，P＜0.05）。

3 討論

儀器法檢測尿紅細(xì)胞的假陽性率高于干化學(xué)法和顯微鏡法，而干化學(xué)法的陰性相符率高，可以作為大批量尿液檢查的過篩實驗，縮短檢測時間，減少標(biāo)本放置時間過長引起的污染、計數(shù)誤差等問題。

UF-500尿流式沉渣分析儀采用流式細(xì)胞及電阻抗原理，通過檢測經(jīng)熒光染色后的尿沉渣中單個細(xì)胞的熒光強(qiáng)度和熒光波幅度、激光散射強(qiáng)度和散射波幅度及電阻抗的大小來識別尿中細(xì)胞、管型、結(jié)晶等各種有形成分。

UF-500尿流式沉渣分析儀具有快速、高效、重復(fù)性好等特點，能較為準(zhǔn)確提供有形成分的定量數(shù)據(jù)；但是，尿液中有形成分十分復(fù)雜，尤其是在各種病理情況下，會有許多影響因素造成技術(shù)結(jié)果的誤差。檢驗人員應(yīng)該了解哪些因素會造成紅細(xì)胞計數(shù)的誤差：

UF-500尿液分析儀檢測結(jié)果陽性而干化法陰性時，應(yīng)考慮如下原因：1）尿中含有大量草酸鈣、非晶型鹽、細(xì)菌、真菌等，這些物質(zhì)的熒光參數(shù)與紅細(xì)胞有重疊，對熒光染料幾乎不著色且大小形態(tài)不均，所以其熒光強(qiáng)度很低，其中以結(jié)晶的干擾最為常見。草酸鈣結(jié)晶是尿中常見結(jié)晶之一，它不溶于乙酸。UF-500尿流式沉渣分析儀通過在稀釋液中加入螯合劑經(jīng)35℃加溫處理，消除結(jié)晶，而草酸鈣不能被除去，由于草酸鈣與紅細(xì)胞大小相似，熒光強(qiáng)度低，所以UF-500尿流式沉渣分析儀不能將草酸鈣結(jié)晶與紅細(xì)胞區(qū)分[2]。2）細(xì)菌為RNA或DNA構(gòu)成，但UF-500尿流式沉渣分析儀的染料菲啶對膜滲透性低，所以染色后其熒光強(qiáng)度低，前向散射光強(qiáng)度也低（但比紅細(xì)胞稍強(qiáng)），所以當(dāng)尿中細(xì)菌超過一定量聚焦時，易將細(xì)菌誤認(rèn)為紅細(xì)胞[3]。3）某些藥物如卡托普利、羅丁緩解片及大量維生素C及其他具有較強(qiáng)還原性的物質(zhì)存在于尿中。4）尿中出現(xiàn)RBC為小紅細(xì)胞時，形態(tài)完整不易破碎。

UF-500尿液分析儀檢測結(jié)果陰性而干化法陽性時，可能的原因：1）尿中紅細(xì)胞形態(tài)被破壞，釋放出血紅蛋白。2）肌紅蛋白尿。因為試紙條對肌紅蛋白和血紅蛋白有同樣的靈敏度，可以催化分解過氧化物，使四甲基聯(lián)苯胺氧化呈色。3）尿液中含有強(qiáng)氧化劑、對熱不穩(wěn)定酶和大量細(xì)菌。

UF-500尿液分析儀和尿干化學(xué)分析儀檢查紅細(xì)胞各有其優(yōu)缺點，干化學(xué)法雖然操作簡便、省時省力，但經(jīng)常會出現(xiàn)假陰性和假陽性。UF-500尿液分析儀雖然可以實現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)化操作且精確度較高，但對個別項目如結(jié)晶、紅細(xì)胞、真菌等的識別仍容易混淆。若兩種方法聯(lián)合使用就可以優(yōu)勢互補(bǔ)，降低漏檢率。在工作中如果出現(xiàn)UF-500尿液分析儀與尿干化學(xué)分析儀檢測結(jié)果不相符時，作為實驗人員，應(yīng)該具體情況具體分析，找出問題存在的原因，并以顯微鏡檢查為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行具體情況的分析，才能確保檢驗質(zhì)量。

[1]叢玉隆，馬駿龍，李云蓮.尿沉渣測定四種方法參考值范圍調(diào)查[J].中華醫(yī)學(xué)檢驗雜志，1997，20（4）：229-230.

[2]陳桂桂.全自動尿沉渣分析儀與尿沉渣顯微鏡檢查的聯(lián)合應(yīng)用[J].醫(yī)藥論壇雜志，2007，28（5）：98.

[3]李一龍.UF-100尿沉渣儀紅細(xì)胞測定質(zhì)量探討及對策[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床，2009，47（31）：89.

R446.12;R446.11+3

A

1008-4118（2011）04-0026-02

10.3969/j.issn.1008-4118.2011.04.10

2011-10-05